目的:观察电针(EA)治疗兔膝骨关节炎(KOA)模型关节软骨中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、Smad1表达的变化,探讨电针治疗KOA的作用机制。方法:制作兔膝关节炎模型,将建模成功的新西兰兔纳入模型对照组;正常组和模型组行常规饲养,不行治疗;电...目的:观察电针(EA)治疗兔膝骨关节炎(KOA)模型关节软骨中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、Smad1表达的变化,探讨电针治疗KOA的作用机制。方法:制作兔膝关节炎模型,将建模成功的新西兰兔纳入模型对照组;正常组和模型组行常规饲养,不行治疗;电针组行电针治疗20d。实验结束后,分别观察各组兔行为学评分、右膝关节宽度、软骨大体形态及组织学评分、软骨BMP-2、Smad1免疫组化及实时荧光定量PCR的变化。结果:电针组与模型组在行为学评分、软骨大体形态及组织学评分(Mankin评分)方面差异均无显著性(P>0.05),电针组兔右膝关节宽度小于模型组(P<0.05)。各组BMP-2免疫组化结果无显著差异,电针组较模型组Smad1蛋白质表达降低。模型组和模型对照组BMP-2 m RNA表达水平较正常组上调,差异无显著性意义(P>0.05),模型组Smad1m RNA表达水平较模型对照组和正常组均显著上调(P<0.05),电针组BMP-2及Smad1 m RNA表达水平较模型对照组和模型组均显著下调(P<0.05)。结论:电针可能通过下调早期兔膝骨关节炎软骨BMP-2/Smad1的表达抑制骨赘形成,延缓膝骨关节炎的病理进程。展开更多
目的利用环状RNA(circular RNA,circRNA)分子表达NY-ESO-1抗原表位,并利用一种新型类脂材料C1制备circRNA肿瘤疫苗,初步评价其在细胞内的转染效率和对T细胞的激活情况。方法体外转录合成表达增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescen...目的利用环状RNA(circular RNA,circRNA)分子表达NY-ESO-1抗原表位,并利用一种新型类脂材料C1制备circRNA肿瘤疫苗,初步评价其在细胞内的转染效率和对T细胞的激活情况。方法体外转录合成表达增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)和NY-ESO-1抗原表位的mRNA和circRNA,并转染COS7细胞,体外检测目的蛋白的表达情况。利用C1材料和商用转染试剂TransIT-mRNA作为mRNANY-ESO-1和circRNANY-ESO-1的递送系统制备疫苗,比较其转染效率。结果mRNAEGFP、circRNAEGFP体外转染COS7细胞24 h后,荧光显微镜下可见明显的EGFP表达。mRNANY-ESO-1、circRNANY-ESO-1转染COS7-A*02:01细胞后可以刺激靶向NY-ESO-1/HLA-A2的T细胞受体工程化T细胞(T cell receptor-engineered T cells,TCR-T)分泌细胞因子IFN-γ。circRNANY-ESO-1能够更持久地表达目的抗原并刺激靶细胞释放IFN-γ,在体外对细胞株共培养的条件下,C1材料的递送效果较商用转染试剂好。结论相较于线性mRNA,circRNA转染COS7-A*02:01细胞后能够更有效、更持久地激活T细胞,未来可能是一种更适合用于临床治疗肿瘤的分子。类脂材料C1能够有效递送线性mRNA分子和circRNA分子。本研究为circRNA肿瘤疫苗的研究提供了新思路。展开更多
文摘目的:观察电针(EA)治疗兔膝骨关节炎(KOA)模型关节软骨中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、Smad1表达的变化,探讨电针治疗KOA的作用机制。方法:制作兔膝关节炎模型,将建模成功的新西兰兔纳入模型对照组;正常组和模型组行常规饲养,不行治疗;电针组行电针治疗20d。实验结束后,分别观察各组兔行为学评分、右膝关节宽度、软骨大体形态及组织学评分、软骨BMP-2、Smad1免疫组化及实时荧光定量PCR的变化。结果:电针组与模型组在行为学评分、软骨大体形态及组织学评分(Mankin评分)方面差异均无显著性(P>0.05),电针组兔右膝关节宽度小于模型组(P<0.05)。各组BMP-2免疫组化结果无显著差异,电针组较模型组Smad1蛋白质表达降低。模型组和模型对照组BMP-2 m RNA表达水平较正常组上调,差异无显著性意义(P>0.05),模型组Smad1m RNA表达水平较模型对照组和正常组均显著上调(P<0.05),电针组BMP-2及Smad1 m RNA表达水平较模型对照组和模型组均显著下调(P<0.05)。结论:电针可能通过下调早期兔膝骨关节炎软骨BMP-2/Smad1的表达抑制骨赘形成,延缓膝骨关节炎的病理进程。
文摘目的利用环状RNA(circular RNA,circRNA)分子表达NY-ESO-1抗原表位,并利用一种新型类脂材料C1制备circRNA肿瘤疫苗,初步评价其在细胞内的转染效率和对T细胞的激活情况。方法体外转录合成表达增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)和NY-ESO-1抗原表位的mRNA和circRNA,并转染COS7细胞,体外检测目的蛋白的表达情况。利用C1材料和商用转染试剂TransIT-mRNA作为mRNANY-ESO-1和circRNANY-ESO-1的递送系统制备疫苗,比较其转染效率。结果mRNAEGFP、circRNAEGFP体外转染COS7细胞24 h后,荧光显微镜下可见明显的EGFP表达。mRNANY-ESO-1、circRNANY-ESO-1转染COS7-A*02:01细胞后可以刺激靶向NY-ESO-1/HLA-A2的T细胞受体工程化T细胞(T cell receptor-engineered T cells,TCR-T)分泌细胞因子IFN-γ。circRNANY-ESO-1能够更持久地表达目的抗原并刺激靶细胞释放IFN-γ,在体外对细胞株共培养的条件下,C1材料的递送效果较商用转染试剂好。结论相较于线性mRNA,circRNA转染COS7-A*02:01细胞后能够更有效、更持久地激活T细胞,未来可能是一种更适合用于临床治疗肿瘤的分子。类脂材料C1能够有效递送线性mRNA分子和circRNA分子。本研究为circRNA肿瘤疫苗的研究提供了新思路。
