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小反刍兽疫磁微粒化学发光抗体检测方法的建立
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作者 任雪建 李秀梅 +3 位作者 李亚静 杨晓帆 刘近 吕园园 《畜牧兽医科技信息》 2023年第11期56-59,共4页
小反刍兽疫(Peste des petits ruminants,PPR)是由副黏病毒科麻疹病毒属的小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus,PPRV)引起的一种山羊和绵羊的急性、烈性、致死性、高度接触性传染病。目前小反刍兽疫抗体检测方法主要有胶... 小反刍兽疫(Peste des petits ruminants,PPR)是由副黏病毒科麻疹病毒属的小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus,PPRV)引起的一种山羊和绵羊的急性、烈性、致死性、高度接触性传染病。目前小反刍兽疫抗体检测方法主要有胶体金试纸条、酶联免疫ELISA、板式化学发光。本试验利用小反刍兽疫病毒N蛋白和单克隆抗体,建立了小反刍兽疫磁微粒化学发光抗体检测方法,将整个反应过程缩短至15 min。为大批量临床检测小反刍兽疫病毒抗体提供了一种高效便捷的方法。 展开更多
关键词 磁微粒化学发光 吖啶酯 小反刍兽疫
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A型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法的建立 被引量:6
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作者 孙雨 宋晓晖 +7 位作者 王睿男 李秀梅 肖颖 任雪建 李晓霞 魏巍 杨林 王传彬 《动物医学进展》 北大核心 2020年第8期29-36,共8页
为建立动物血清中的A型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法,通过获得的A型口蹄疫病毒VP1融合蛋白与相关单克隆抗体建立了A型口蹄疫病毒抗体竞争化学发光检测试剂盒。该方法能够特异性的定量检测猪、牛、羊血清中的A型口蹄疫病毒VP... 为建立动物血清中的A型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法,通过获得的A型口蹄疫病毒VP1融合蛋白与相关单克隆抗体建立了A型口蹄疫病毒抗体竞争化学发光检测试剂盒。该方法能够特异性的定量检测猪、牛、羊血清中的A型口蹄疫病毒VP1蛋白抗体,敏感性高,特异性强,对其他相关的偶蹄类动物病原无交叉反应,批内变异系数小于10%,批间变异系数小于15%,具有良好的重复性。对该方法的特异性指标和敏感性指标进行了验证,同国产的A型口蹄疫抗体检测试剂盒进行了比较,阳性样品符合率为92.63%,阴性样品符合率为93.98%,总符合率为93.17%。建立的A型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法,特异性高,敏感性强,操作简单、快速,具有较高的应用推广价值。 展开更多
关键词 A型口蹄疫病毒 化学发光 免疫分析 检测方法
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O型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法的建立 被引量:4
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作者 孙雨 宋晓晖 +7 位作者 肖颖 王睿男 李秀梅 任雪建 李雪刚 魏巍 杨林 王传彬 《中国草食动物科学》 CAS 2020年第3期47-52,共6页
为建立动物血清中O型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法,通过获得的O型口蹄疫病毒VP1融合蛋白与相关单克隆抗体,制备了O型口蹄疫病毒抗体竞争化学发光检测试剂盒。结果表明:该方法能够定量检测猪、牛、羊血清中的O型口蹄疫病毒VP... 为建立动物血清中O型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法,通过获得的O型口蹄疫病毒VP1融合蛋白与相关单克隆抗体,制备了O型口蹄疫病毒抗体竞争化学发光检测试剂盒。结果表明:该方法能够定量检测猪、牛、羊血清中的O型口蹄疫病毒VP1蛋白抗体,与其他偶蹄类动物病原无交叉反应,具有良好的重复性;对该方法的特异性指标、敏感性指标进行了验证,同国产O型口蹄疫抗体检测试剂盒进行了比较,阳性样品符合率92.62%,阴性样品符合率92.14%,总符合率92.45%;重复性试验组内与组间变异系数分别低于10%和15%。综上,该研究建立的O型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法特异性高、敏感性强,操作简单、快速,具有较高的应用推广价值。 展开更多
关键词 O型口蹄疫病毒 化学发光 免疫分析 检测方法
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原核载体表达的小反刍兽疫病毒N蛋白的保存期与相关抗原性、特异性研究 被引量:1
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作者 孙雨 宋晓晖 +7 位作者 肖颖 李秀梅 王睿男 吕园园 蒋菲 李晓霞 任雪建 王传彬 《中国草食动物科学》 CAS 2020年第1期27-32,共6页
为明确使用原核表达载体pET-32a表达纯化的小反刍兽疫病毒核衣壳蛋白(N)的最佳保存期,检测其相关抗原性与特异性,通过优化N抗原序列的密码子和蛋白表达纯化条件,在大肠杆菌表达系统中成功获得了3批次高效表达的小反刍兽疫病毒可溶性重组... 为明确使用原核表达载体pET-32a表达纯化的小反刍兽疫病毒核衣壳蛋白(N)的最佳保存期,检测其相关抗原性与特异性,通过优化N抗原序列的密码子和蛋白表达纯化条件,在大肠杆菌表达系统中成功获得了3批次高效表达的小反刍兽疫病毒可溶性重组N蛋白。将3批次小反刍兽疫病毒N蛋白放置2~8℃保存,分别于1、2、3、6、9、12、15个月检验蛋白性状、蛋白浓度、纯度、抗原性和特异性等指标。经分析,各个时期蛋白的抗原浓度、抗原性、特异性等要素均符合标准,N蛋白保存15个月后,依然具有较强的检测抗原性与特异性。该研究结果为今后以小反刍兽疫N蛋白为基础建立相应的抗原捕获ELISA方法以及双抗原夹心ELISA抗体检测方法奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 原核载体 小反刍兽疫病毒 N蛋白 保存期 抗原性 特异性
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小反刍兽疫病毒间接化学发光抗体检测方法的建立与优化 被引量:3
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作者 任雪建 李秀梅 +4 位作者 杨晓帆 李亚静 杨志 耿玉静 吕园园 《现代畜牧科技》 2019年第10期1-5,共5页
构建了原核表达质粒pET-28a-N,经原核表达纯化获得小反刍兽疫病毒N蛋白。将纯化的小反刍兽疫病毒N蛋白与对应的酶标二抗配对,通过对各个反应条件的优化建立了间接化学发光抗体检测方法。通过对血清样本的检测,对该方法的敏感性、特异性... 构建了原核表达质粒pET-28a-N,经原核表达纯化获得小反刍兽疫病毒N蛋白。将纯化的小反刍兽疫病毒N蛋白与对应的酶标二抗配对,通过对各个反应条件的优化建立了间接化学发光抗体检测方法。通过对血清样本的检测,对该方法的敏感性、特异性、重复性、符合率进行了评价。试验结果显示:N蛋白最适包被浓度为0.5μg/mL,最适包被条件为4℃24 h;酶标二抗最适工作浓度为1∶2000。特异性试验证明,该方法与羊常见病毒的抗体阳性血清没有交叉反应。通过检测大量小反刍兽疫病毒抗体阴、阳型血清,确定了科学的判定标准。 展开更多
关键词 原核表达 最适条件 临界值
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猪伪狂犬病病毒gB化学发光抗体检测方法的建立
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作者 任雪建 刘明瑞 +3 位作者 耿玉静 杨志 李秀梅 吴彬 《河南畜牧兽医(综合版)》 2019年第8期10-13,共4页
以不同浓度的猪伪狂犬病病毒gB重组蛋白作为包被抗原,通过方阵滴定,确定抗原最佳包被浓度、酶标抗体最适工作浓度等条件,建立最佳的抗体检测方法。最佳条件的选择有效提高了试剂盒的敏感性和特异性,降低了ELISA试验中的非特异性反应,使... 以不同浓度的猪伪狂犬病病毒gB重组蛋白作为包被抗原,通过方阵滴定,确定抗原最佳包被浓度、酶标抗体最适工作浓度等条件,建立最佳的抗体检测方法。最佳条件的选择有效提高了试剂盒的敏感性和特异性,降低了ELISA试验中的非特异性反应,使得结果判定更准确、更明显、更直观。 展开更多
关键词 抗原包被浓度 最佳稀释度 最佳反应条件
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猪蓝耳病、副猪嗜血杆菌病和链球菌病混合感染的诊治体会
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作者 吴彬 耿玉静 +1 位作者 任雪建 李秀梅 《河南畜牧兽医(综合版)》 2018年第9期45-46,共2页
副猪嗜血杆菌病和猪链球菌病近年来多发,从临床上和蓝耳病毒病关系密切。副猪嗜血杆菌和链球菌属条件性致病菌,在自然界和猪群中广泛分布,且常常定植于健康猪的上呼吸道。当3—12周龄的仔猪断奶后失去母源抗体保护、转群及混群产生... 副猪嗜血杆菌病和猪链球菌病近年来多发,从临床上和蓝耳病毒病关系密切。副猪嗜血杆菌和链球菌属条件性致病菌,在自然界和猪群中广泛分布,且常常定植于健康猪的上呼吸道。当3—12周龄的仔猪断奶后失去母源抗体保护、转群及混群产生应激反应或其他疾病导致免疫力下降时,可爆发流行。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌病 猪链球菌病 猪蓝耳病 混合感染 诊治 免疫力下降 链球菌属 上呼吸道
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IBR病毒抗体竞争ELISA检测方法的建立
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作者 刘近 任雪建 +1 位作者 杨转 姬杰菲 《畜禽业》 2021年第8期15-16,共2页
试验建立了IBR病毒抗体竞争ELISA检测方法,并进行了验证。经试验研究,封闭液用1.5%Casein酪蛋白、包被液用0.02M的PB溶液、包被浓度为1/1000,酶标单抗浓度为1/1000,酶稀释液为小反刍酶稀时,该IBR病毒抗体竞争ELISA检测方法的灵敏度和稳... 试验建立了IBR病毒抗体竞争ELISA检测方法,并进行了验证。经试验研究,封闭液用1.5%Casein酪蛋白、包被液用0.02M的PB溶液、包被浓度为1/1000,酶标单抗浓度为1/1000,酶稀释液为小反刍酶稀时,该IBR病毒抗体竞争ELISA检测方法的灵敏度和稳定性最佳,此时的板内变异系数为7.7%,板间变异系数为9.41%,均低于10%,且热稳定性良好。试验建立的竞争ELISA抗体检测方法具有良好的稳定性、特异性和灵敏度,可用于IBR病毒抗体的检测。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎 gD蛋白重组蛋白 竞争ELISA
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两种样品稀释液对口蹄疫O型抗体ELSIA检测结果的影响研究
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作者 耿玉静 吕园园 +3 位作者 杨志 李秀梅 任雪建 吴彬 《河南畜牧兽医(综合版)》 2019年第4期10-11,共2页
以样品稀释液1和样品稀释液2分别对55份血清进行稀释,按照竞争ELSIA方法进行检验,比较两种稀释液对检测结果的影响。结果用样品稀释液2稀释的血清检测结果明显较稳定,偏差缩小,有利于提高试剂盒检测结果的准确性。
关键词 样品稀释液 竞争ELISA 准确性
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活性氧对植物自噬调控的研究进展 被引量:12
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作者 景红娟 周广舟 +2 位作者 谭晓荣 平康康 任雪建 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期534-542,共9页
自噬是一种在真核生物中高度保守的降解细胞组分的生物过程,在饥饿、衰老和病菌感染等过程中起关键作用。而活性氧是有氧生物在正常或胁迫条件下产生的一种代谢副产物,在植物的生长发育、胁迫适应和程序性细胞死亡过程中起重要作用。最... 自噬是一种在真核生物中高度保守的降解细胞组分的生物过程,在饥饿、衰老和病菌感染等过程中起关键作用。而活性氧是有氧生物在正常或胁迫条件下产生的一种代谢副产物,在植物的生长发育、胁迫适应和程序性细胞死亡过程中起重要作用。最新研究结果表明,当植物受到病菌感染产生超敏反应时活性氧和自噬在程序性细胞死亡、生长发育和胁迫适应过程中起重要调控作用。因此,该文结合最新的研究进展,从活性氧的种类及特点、自噬的分子基础以及活性氧在植物自噬中的作用等方面,探讨了活性氧与植物自噬之间的信号转导关系。 展开更多
关键词 植物自噬 程序性细胞死亡 活性氧
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禽白血病病毒抗原化学发光免疫分析检测方法的建立 被引量:4
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作者 孙雨 王睿男 +7 位作者 肖颖 李秀梅 宋晓晖 任雪建 马英 魏巍 杨林 王传彬 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期812-819,共8页
为建立家禽样本中的禽白血病病毒抗原化学发光免疫分析检测方法,本研究通过获得的禽白血病病毒P27融合蛋白与相关单克隆抗体建立了家禽样本中的禽白血病病毒抗原化学发光检测试剂盒。该方法能够特异性地定量检测家禽样本中的禽白血病病... 为建立家禽样本中的禽白血病病毒抗原化学发光免疫分析检测方法,本研究通过获得的禽白血病病毒P27融合蛋白与相关单克隆抗体建立了家禽样本中的禽白血病病毒抗原化学发光检测试剂盒。该方法能够特异性地定量检测家禽样本中的禽白血病病毒抗原,敏感性高,特异性强,对其他相关的禽类病原无交叉反应。对该方法的特异性指标、敏感性指标进行了验证,同进口的禽白血病病毒抗原ELISA检测试剂盒进行了比较,结果显示,阳性样品符合率为92.63%,阴性样品符合率为93.17%,总符合率为93.98%。重复性试验的组内与组间变异系数均小于10%,具有良好的重复性。上述结果表明,本研究建立的禽白血病病毒抗原化学发光免疫分析检测方法特异性高、敏感性强,操作简单、快速,具有较高的应用推广价值。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 P27抗原 化学发光 免疫分析 检测方法
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小反刍兽疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法的建立 被引量:3
12
作者 孙雨 宋晓晖 +7 位作者 肖颖 王睿男 李秀梅 任雪建 李雪刚 魏巍 杨林 王传彬 《畜牧与兽医》 北大核心 2020年第10期109-114,共6页
为了建立动物血清中的小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)抗体化学发光免疫分析检测方法,采用PPRV N融合蛋白与相应单克隆抗体对化学发光抗体检测方法进行了研究。结果显示:建立的检测方法能够特异性地定量检测羊... 为了建立动物血清中的小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)抗体化学发光免疫分析检测方法,采用PPRV N融合蛋白与相应单克隆抗体对化学发光抗体检测方法进行了研究。结果显示:建立的检测方法能够特异性地定量检测羊血清中的PPRV N蛋白抗体,敏感性高,特异性强,对其他相关的动物病原无交叉反应,组内与组间变异系数分别低于10%和15%,具有良好的重复性;对该方法的特异性指标、敏感性指标进行了验证,与法国IDVET公司的PPRV抗体检测试剂盒进行比较,阳性样品符合率为95.02%,阴性样品符合率为82.08%,总符合率为90.33%。结果表明:建立的PPRV抗体化学发光免疫分析检测方法,特异性高、敏感性强,操作简单、快速,具有较高的应用推广价值。 展开更多
关键词 小反刍兽疫病毒 化学发光 免疫分析 检测方法
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诊断试剂在动物疫病监测与防控中的应用策略
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作者 杨晓帆 刘明瑞 任雪建 《中文科技期刊数据库(全文版)自然科学》 2024年第3期0001-0004,共4页
动物疫病是畜牧业面临的严重威胁,不仅危害动物健康,还对农业经济和食品安全构成重大风险。诊断试剂在动物疫病监测与防控中扮演着至关重要的角色。本文通过对当前动物疫病监测现状和防控挑战的分析,探讨了诊断试剂在提高监测效率、加... 动物疫病是畜牧业面临的严重威胁,不仅危害动物健康,还对农业经济和食品安全构成重大风险。诊断试剂在动物疫病监测与防控中扮演着至关重要的角色。本文通过对当前动物疫病监测现状和防控挑战的分析,探讨了诊断试剂在提高监测效率、加强防控措施、降低疫情风险等方面的应用策略,并从生物科技公司的角度出发,强调开发定制化解决方案的重要性,旨在为生物公司的诊断试剂开发提供理论支持。 展开更多
关键词 诊断试剂 动物疫病 监测
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