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大肠杆菌混菌劳动分工发酵生产氨基葡萄糖 被引量:2
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作者 赵可欣 耿自豪 +4 位作者 伊进行 卓明洋 张春月 孙文超 马倩 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第19期60-66,共7页
氨基葡萄糖是一种重要的功能单糖,具有广阔的市场需求。目前,氨基葡萄糖主要的工业化生产方式为酸水解虾壳蟹壳,但该方法会造成环境污染等问题,而单一微生物发酵法生产氨基葡萄糖因受到中间代谢产物的影响导致目标产物无法大量积累。该... 氨基葡萄糖是一种重要的功能单糖,具有广阔的市场需求。目前,氨基葡萄糖主要的工业化生产方式为酸水解虾壳蟹壳,但该方法会造成环境污染等问题,而单一微生物发酵法生产氨基葡萄糖因受到中间代谢产物的影响导致目标产物无法大量积累。该研究通过构建混菌发酵体系,将氨基葡萄糖的合成分为N-乙酰氨基葡萄糖的高效合成与脱乙酰化2个步骤,实现了混菌发酵过程中的劳动分工。分别强化内源性和外源性的脱乙酰酶基因,进一步优化菌种比例和发酵条件,提高N-乙酰氨基葡萄糖在胞内的转化率。所获得混菌体系摇瓶发酵24 h产生11.21 g/L氨基葡萄糖,较初始对照体系提高了约3.1倍。该策略可以为其他因合成酶受代谢产物抑制而无法大量积累的产物合成提供借鉴。 展开更多
关键词 大肠杆菌 氨基葡萄糖 混菌发酵 劳动分工
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大肠杆菌中吡咯喹啉醌合成途径的构建 被引量:1
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作者 杨蒙雅 张春月 +4 位作者 伊进行 王怡明 卓明洋 马倩 谢希贤 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期75-85,共11页
目前吡咯喹啉醌(Pyrroloquinoline quinone,PQQ)在大肠杆菌中的异源合成主要以质粒为表达载体进行,但是质粒载体难以进行合成途径多基因表达的系统优化,并且容易造成发酵不稳定。作者以大肠杆菌为底盘生物,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术... 目前吡咯喹啉醌(Pyrroloquinoline quinone,PQQ)在大肠杆菌中的异源合成主要以质粒为表达载体进行,但是质粒载体难以进行合成途径多基因表达的系统优化,并且容易造成发酵不稳定。作者以大肠杆菌为底盘生物,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,在基因组水平系统优化PQQ的合成。将来源于Gluconobacter oxydans 621H的操纵子pqqABCDE引入底盘大肠杆菌,并进一步通过优化合成途径基因表达强度,敲除大肠杆菌自身抑制基因及强化PQQ的胞内需求与胞外转运等,获得了一株能够高效合成PQQ的工程菌,摇瓶发酵72 h时产量达到86.3 mg/L。以大肠杆菌为底盘构建PQQ高效合成途径的工作能够为后续以其他底盘生物生产PQQ及相关代谢产物提供借鉴。 展开更多
关键词 大肠杆菌 吡咯喹啉醌 基因编辑 CRISPR/Cas9
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