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猪圆环病毒2型ORF1部分位点突变对病毒复制能力的影响 被引量：1
1
作者 李荷然 肖琦 +3 位作者 温立斌 朱雪蛟 芮荣 何孔旺 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第1期71-76,共6页
猪圆环病毒2型(PCV2)可引起断奶仔猪多系统衰竭综合征,导致仔猪逐渐消瘦。PCV2 ORF1表达的Rep蛋白及其剪切体Rep′是PCV2复制所需的重要蛋白。为了研究PCV2 ORF1部分位点对PCV2复制能力的影响,本试验通过构建PCV2 ORF1区域点突变双拷贝... 猪圆环病毒2型(PCV2)可引起断奶仔猪多系统衰竭综合征,导致仔猪逐渐消瘦。PCV2 ORF1表达的Rep蛋白及其剪切体Rep′是PCV2复制所需的重要蛋白。为了研究PCV2 ORF1部分位点对PCV2复制能力的影响,本试验通过构建PCV2 ORF1区域点突变双拷贝感染性克隆质粒,在无PCV2污染的PK-15细胞中进行病毒拯救,使用荧光定量PCR检测不同位点突变病毒培养不同代次上清液的Ct值。结果:将PCV2 Rep的17 aa、19 aa、20 aa和21 aa突变为丙氨酸后病毒无法成功拯救,2 aa突变后严重影响病毒的复制能力,3 aa、5 aa和18 aa突变后病毒的复制能力增强且细胞病毒载量高于PCV2原毒株,推测17 aa、19 aa、20 aa和21 aa是影响PCV2复制的关键作用位点。本研究结果为未来PCV2复制相关研究提供了试验依据。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 REP蛋白 病毒复制
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藏猪猪链球菌的分离鉴定及其致病性和药物敏感性分析
2
作者 赵霞玲 肖琦 +9 位作者 钱雯娴 倪艳秀 祝昊丹 周俊明 汪伟 温立斌 温东旭 严明帅 牛家强 何孔旺 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第1期122-133,共12页
为了解西藏林芝市藏猪猪链球菌感染情况、分离株生物学特性及其耐药情况。本研究针对来自西藏林芝市312份健康藏猪的样品进行了猪链球菌的分离鉴定、血清型分型、毒力因子检测、生化鉴定、致病性试验、药敏试验。结果显示,在312份样品... 为了解西藏林芝市藏猪猪链球菌感染情况、分离株生物学特性及其耐药情况。本研究针对来自西藏林芝市312份健康藏猪的样品进行了猪链球菌的分离鉴定、血清型分型、毒力因子检测、生化鉴定、致病性试验、药敏试验。结果显示,在312份样品中检出71份猪链球菌阳性(22.76%),检测出22种血清型。细菌分离培养得到4株革兰氏阳性菌,分离菌的菌落形态、菌体形态与链球菌相符;根据生化试验及PCR鉴定结果判定4株分离菌均为猪链球菌;PCR血清型分型结果显示,其中1株为16型(Ss16 LZ1)、1株为30型(Ss30 LZ1)、2株为31型(Ss31 LZ1、Ss31 LZ2);毒力基因检测结果,Ss16 LZ1、Ss30 LZ1表现为sly^(–)epf^(–)mrp^(–)orf2^(–)fbps^(+),Ss31 LZ1、Ss31 LZ2表现为sly^(–)epf^(+)mrp^(–)orf2^(–)fbps^(+);致病力试验显示,Ss16 LZ1、Ss31 LZ1对小鼠致病,LD_(50)分别为2.0×10^(10)CFU/mL、1.4×10^(8)CFU/mL;Ss30 LZ1、Ss31 LZ2攻毒小鼠后未出现死亡;病理切片表明4株分离菌均能引起小鼠内脏组织发生病变;药敏试验结果显示,4株菌均对糖肽类、酰胺醇类、喹诺酮类药物中介或敏感。以上结果为西藏林芝市藏猪猪链球菌病防控提供了科学根据。 展开更多
关键词 藏猪 分离鉴定 血清型 致病性 药敏试验
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猪链球菌荚膜多糖抗血清的制备及在血清分型中的应用
3
作者 胡群 肖琦 +2 位作者 温立斌 彭大新 何孔旺 《江苏农业科学》 北大核心 2023年第13期189-196,共8页
为获得猪链球菌荚膜多糖及其抗血清,采用高压破碎法、乙醇分级沉淀法、酶解法以及Sevage法提取纯化了猪链球菌2、3、7、9型荚膜多糖,采用己二酸二酰肼(ADH)间桥法将荚膜多糖与牛血清蛋白(BSA)偶联,将其制备成油乳疫苗免疫BALB/c纯系雌... 为获得猪链球菌荚膜多糖及其抗血清,采用高压破碎法、乙醇分级沉淀法、酶解法以及Sevage法提取纯化了猪链球菌2、3、7、9型荚膜多糖,采用己二酸二酰肼(ADH)间桥法将荚膜多糖与牛血清蛋白(BSA)偶联,将其制备成油乳疫苗免疫BALB/c纯系雌性小鼠制备抗血清,同时制备了猪链球菌2、3、7、9型全菌灭活苗抗血清进行了间接ELISA试验及玻片试验检测。试验结果显示,制备了高纯度的荚膜多糖,对荚膜多糖-牛血清白蛋白偶联物分析,荚膜多糖偶联蛋白后的分子量变大,荚膜多糖与牛血清白蛋白偶联比为1∶1,免疫小鼠表现出较高的免疫原性。而将单独的4种荚膜多糖以及荚膜多糖与牛血清白蛋白(牛血清白蛋白)混合作为比较也免疫小鼠不能激活免疫系统产生IgG抗体,不具有免疫原性。荚膜多糖结合蛋白抗血清与全菌灭活苗抗血清同时进行交叉ELISA以及玻片凝集试验,结果表明这4型荚膜多糖结合蛋白抗血清不与其他型菌株发生反应,具有型特异性,而全菌灭活苗抗血清与其他型菌株会发生一定程度的交叉反应。此研究结果为猪链球菌亚单位疫苗的研制以及猪链球菌分型试剂的制备提供了试验依据。 展开更多
关键词 猪链球菌 荚膜多糖 抗血清 间接ELISA 玻片凝集试验
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多重荧光定量PCR检测猪圆环病毒2a、2b和2d基因型方法的建立与应用
4
作者 钱雯娴 肖琦 +3 位作者 赵霞玲 温立斌 索朗斯珠 何孔旺 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第4期74-81,共8页
为建立一种检测猪圆环病毒2型多重实时荧光定量PCR方法,可对3种基因型PCV2a、PCV2b、PCV2d检出并分型。针对3种基因型ORF2基因,在保守序列设计通用引物并分别设计特异Taq Man探针,3条探针分别标记NED、JOE和FAM荧光报告基团,建立多重实... 为建立一种检测猪圆环病毒2型多重实时荧光定量PCR方法,可对3种基因型PCV2a、PCV2b、PCV2d检出并分型。针对3种基因型ORF2基因,在保守序列设计通用引物并分别设计特异Taq Man探针,3条探针分别标记NED、JOE和FAM荧光报告基团,建立多重实时荧光定量PCR反应体系,检测其灵敏性、重复性和特异性。经条件优化多重荧光定量PCR的反应体系为30μL,各型探针加样为0.6μL,退火温度为60℃;最低检测值为PCV2a 100 copies/μL、PCV2b 57 copies/μL和PCV2d 100 copies/μL,而且该方法对猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等其他6种猪源主要病毒核酸检测均为阴性,具有良好的特异性;组内和组间的检测变异系数均小于等于3.6%;通过检测218份阳性样本,结果表明该方法能快速检测猪圆环病毒2型三种主要流行型并同时分型,为PCV2快速分型的诊断提供新方法。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 多重荧光定量PCR 检测 基因型
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PCR方法检测2型猪链球菌2种毒力因子 被引量：30
5
作者 何孔旺 陆承平 +2 位作者 倪艳秀 王继春 姚火春 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 2002年第3期1-4,共4页
根据 2型猪链球菌毒力因子溶菌酶释放蛋白 (MRP)与细胞外蛋白因子 (EF)基因 (mrp与 epf)序列 ,分别设计、合成一对引物 ,建立聚合酶链反应 (PCR)方法。该方法扩增出 2型菌株的 mrp大小为 885 bp,epf为 62 6bp,而对马链球菌兽疫亚种 (C... 根据 2型猪链球菌毒力因子溶菌酶释放蛋白 (MRP)与细胞外蛋白因子 (EF)基因 (mrp与 epf)序列 ,分别设计、合成一对引物 ,建立聚合酶链反应 (PCR)方法。该方法扩增出 2型菌株的 mrp大小为 885 bp,epf为 62 6bp,而对马链球菌兽疫亚种 (C群 )、猪丹毒杆菌、猪肺疫巴氏杆菌、猪肺炎霉形体等 PCR均未扩增出任何条带。用 Xba 和 H ae 分别酶切 PCR扩增产物 ,均获得与预计一致的酶切图谱 ,PCR扩增产物测序结果显示 :其基因序列分别与 Gen Bank上公布的mrp全基因第 5 0 0～ 1 3 1 5位碱基及 epf全基因第 2 441～ 3 0 2 8碱基对一致。PCR检测的敏感度可达 1 0 0个细菌。用建立的 PCR对从病猪体内分离的菌株进行检测 ,检测的 1 5株 2型分离株中有 1 3株 mrp与 epf均为阳性 ,为典型的高毒力表现型菌株 (mrp+ epf+ ) ,1株为 mrp+ epf- ,1株为 mrp- epf- 。 展开更多
关键词 PCR方法 猪 链球菌 毒力因子 聚合酶链反应
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猪传染性胃肠炎病毒弱毒株STC_3细胞培养特性及致病性研究 被引量：23
6
作者 何孔旺 林继煌 +4 位作者 还红华 倪艳秀 钱永清 何家惠 侯继波 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2001年第8期8-9,共2页
从美国引进的猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV)弱毒株STC3 在ST、PK15及猪肾原代细胞上均能增殖 ,并产生明显的致细胞病变作用 (CPE) ,其中以ST细胞上的CPE最为迅速、明显 ,于接毒后 2 0— 2 4hCPE即可达 90 %— 10 0 % ,而在PK15及猪肾原代... 从美国引进的猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV)弱毒株STC3 在ST、PK15及猪肾原代细胞上均能增殖 ,并产生明显的致细胞病变作用 (CPE) ,其中以ST细胞上的CPE最为迅速、明显 ,于接毒后 2 0— 2 4hCPE即可达 90 %— 10 0 % ,而在PK15及猪肾原代细胞上CPE形成较迟一些 ,在 42— 48h可达 80 %— 90 %。STC3 在ST、PK15及猪肾原代细胞上的TCID50分别为 10 -7.67/mL、10 -5.63 /mL和 10 -5.90 /mL。用较大剂量STC3 细胞毒经口接种被剥夺初乳的初生仔猪 ,仅表现为一过性的腹泻而不引起死亡 ,对 3日龄人工哺乳的仔猪则已完全丧失了致病力 ,但荧光抗体检查结果显示病毒在小肠粘膜上皮细胞中仍有增殖。由此可见 ,STC3 可能是 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 弱毒株 细胞培养 致病性
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牛轮状病毒性腹泻的研究 被引量：10
7
作者 何孔旺 林继煌 +2 位作者 江杰元 沈江萍 黄宝顺 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期224-227,共4页
从安徽、河南两地黄牛犊腹泻粪样中分离出了３株能在ＭＡ－１０４细胞上稳定繁殖、继代的轮状病毒（标号为ＢＲＶ００７、ＢＲＶ０１４及ＨＮ－７）。中和试验表明，该３株黄牛分离毒与北京奶牛毒ＢＲＶ６５５５及国外参考毒株ＮＣＤＶ... 从安徽、河南两地黄牛犊腹泻粪样中分离出了３株能在ＭＡ－１０４细胞上稳定繁殖、继代的轮状病毒（标号为ＢＲＶ００７、ＢＲＶ０１４及ＨＮ－７）。中和试验表明，该３株黄牛分离毒与北京奶牛毒ＢＲＶ６５５５及国外参考毒株ＮＣＤＶ之间抗原性无差异，同属轮状病毒血清６型（或牛轮状病毒血清１型），在亚组抗原特异性上均为第Ⅰ亚组。用ＢＲＶ０１４高代次（５０代以上）细胞培养物（ＴＣＩＤ５０＝１０－６．５）于孕母牛产前３个月和１个月经肌肉免疫注射２次，可明显提高母牛初乳中的轮状病毒抗体，在产后２０ｄ，抗体滴度仍能维持在１∶６４；临床观察，免疫母牛所产犊牛的腹泻发生率较对照组降低８３．８％。 展开更多
关键词 牛病 轮状病毒 腹泻 黄牛
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猪链球菌2型的分子流行病学研究 被引量：60
8
作者 何孔旺 倪艳秀 +5 位作者 王继春 何家惠 王伟峰 杨瑛 陆承平 林继煌 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第5期45-47,共3页
目的　了解猪链球菌 2型高发地区 (疫区 )与少发地区 (非疫区 )猪群的带菌率及其毒力因子MRP与EF的分布情况 ,探讨猪链球菌 2型的发生及其流行规律。方法　分别从不同地区采集正常屠宰猪或活体采集成年猪扁桃体 ,经接种马丁汤培养基增... 目的　了解猪链球菌 2型高发地区 (疫区 )与少发地区 (非疫区 )猪群的带菌率及其毒力因子MRP与EF的分布情况 ,探讨猪链球菌 2型的发生及其流行规律。方法　分别从不同地区采集正常屠宰猪或活体采集成年猪扁桃体 ,经接种马丁汤培养基增菌培养后 ,用PCR方法进行 2型猪链球菌的检测 ,同时检测各 2型菌的主要毒力因子溶菌酶释放蛋白 (MRP)与细胞外蛋白因子 (EF)基因 (mrp和epf)。 结果　除少数猪群外正常猪群中猪链球菌 2型的带菌率普遍较高 ,为 31 6 %～77% ,平均为 4 0 9% ,且疫区 (39% )与非疫区 (42 % )差异不明显。但毒力因子mrp和epf的阳性率疫区与非疫区存在明显差异 ,非疫区的 2型菌株除极少数表现为mrp+ epf-(5 % )或mrp-epf+ (5 % )外 ,绝大多数 (90 % )都表现为对猪无毒力的mrp-epf-表现型 ,无一株表现为mrp+ epf+ ;来自疫区的所有 16株 2型菌株均为对猪有强毒力的mrp+ epf+ 表现型。结论　正常猪群中 2型猪链球菌的带菌率与猪群是否暴发流行该病可能并无直接关系 ,但疫区猪群mrp+ epf+ 表现型菌株检出比率较高 ,提示携带mrp+ epf+ 展开更多
关键词 猪链球菌2型 MRP epf PCR 流行病学
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牛猪轮状病毒血清分型及其抗原性比较 被引量：3
9
作者 何孔旺 林继煌 +3 位作者 丁再棣 何家惠 江杰元 侯继波 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第4期332-336,共5页
利用双向交叉中和试验对我国4株牛和4株猪轮状病毒做了血清分型,并比较了它们与国外参考毒株牛NCDV、猪OSU、猴SA-11和人Wa株轮状病毒之间的抗原相关性。结果,我国3株黄牛轮状病毒(HN-7、BRV007和BRV014),1株奶牛轮状状病毒(BRV6555)与... 利用双向交叉中和试验对我国4株牛和4株猪轮状病毒做了血清分型,并比较了它们与国外参考毒株牛NCDV、猪OSU、猴SA-11和人Wa株轮状病毒之间的抗原相关性。结果,我国3株黄牛轮状病毒(HN-7、BRV007和BRV014),1株奶牛轮状状病毒(BRV6555)与牛参考毒株NCDV抗原性无差异,同属轮状病毒血清6型(牛轮状病毒血清1型或NCDV型)。4株猪轮状病毒则可分为两个型,溧99能被OSU抗血清高滴度中和,故划归轮状病毒血清5型(猪轮状病毒血清1型);而宁71、南86、和江150等3个毒株与溧99抗原性有明显差异,且与OSU抗血清无反应性,故暂列为猪轮状病毒血清2型。全部牛猪轮状病毒与猴SA-11、人Wa之间无抗原交叉。 展开更多
关键词 轮状病毒 血清型 中和试验
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用反向间接血凝试验快速检测轮状病毒抗原和抗体 被引量：5
10
作者 何孔旺 吴纪棠 +1 位作者 林继煌 江杰元 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第1期68-71,共4页
用兔抗牛轮状病毒(NCDV株)IgG致敏绵羊红细胞进行反向间接血凝(RIHA)试验,直接检测105份犊牛腹泻粪样中的轮状病毒,查出阳性39份,阳性检出率为37.1％,与电镜检查,核酸PAGE和ELISA相比较,符合率分别为83.3％,91.7％和98.1％。同时还建立... 用兔抗牛轮状病毒(NCDV株)IgG致敏绵羊红细胞进行反向间接血凝(RIHA)试验,直接检测105份犊牛腹泻粪样中的轮状病毒,查出阳性39份,阳性检出率为37.1％,与电镜检查,核酸PAGE和ELISA相比较,符合率分别为83.3％,91.7％和98.1％。同时还建立了用反向间接血凝抑制(RIHI)试验检测人和动物血清轮状病毒抗体的方法。两法特异性好,简便快速,易于推广。 展开更多
关键词 轮状病毒 反向间接血凝 血凝试验
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河南部分地区犊黄牛轮状病毒的分离培养及其血凝特性的研究 被引量：5
11
作者 何孔旺 林继煌 +2 位作者 江杰元 沈江萍 黄宝顺 《畜牧与兽医》 北大核心 1989年第2期64-65,共2页
轮状病毒(RV)是河南省部分地区犊黄牛腹泻的主要病原之一,但迄今的报道多限于粪便中RV抗原的检出和病毒颗粒的电镜观察。有关病毒的分离培养未见报道。1987年10月在河南省白马兽医站采集腹泻犊牛粪样10份,对其中RV阳性的4份粪样进行了... 轮状病毒(RV)是河南省部分地区犊黄牛腹泻的主要病原之一,但迄今的报道多限于粪便中RV抗原的检出和病毒颗粒的电镜观察。有关病毒的分离培养未见报道。1987年10月在河南省白马兽医站采集腹泻犊牛粪样10份,对其中RV阳性的4份粪样进行了病毒分离培养,获得了一株能致MA—104细胞病变、特性稳定的犊黄牛RV。鉴定了它的血凝谱并初步探讨了它与牛国际参考毒株NCDV及其它两个毒株的抗原相关性。 展开更多
关键词 牛 轮状病毒 血凝性 犊黄牛
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猪链球菌2型的致病特性与毒力因子 被引量：49
12
作者 何孔旺 陆承平 《中国兽医科技》 CSCD 2000年第9期17-20,共4页
介绍了猪链球菌 2型对猪、人、其他动物及实验动物的致病特性 ;概述了猪链球菌溶菌酶释放蛋白 (MRP)、细胞外蛋白因子 (EF)、溶血素、荚膜多糖、44kb蛋白和IgG结合蛋白及纤毛、粘着素等毒力因子的研究概况。
关键词 猪链球菌 致病特性 毒力因子 2型
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南京部分牧场牛兔隐孢子虫感染研究初报 被引量：2
13
作者 何孔旺 林继煌 +3 位作者 江杰元 沈江萍 黄宝顺 戈建军 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 1990年第6期54-55,共2页
用改良抗酸染色法检查南京地区部分奶牛场和兔场的牛、兔粪样。共发现3例隐孢子虫卵阳性牛,2例阳性兔。牛、兔群的隐孢子虫感染率分别为3.2％(3/94)和1.8％(2/113)。其中成年牛感染率为2.0％(1/50)、犊牛4.5％(2/44),而腹泻犊牛的感染率... 用改良抗酸染色法检查南京地区部分奶牛场和兔场的牛、兔粪样。共发现3例隐孢子虫卵阳性牛,2例阳性兔。牛、兔群的隐孢子虫感染率分别为3.2％(3/94)和1.8％(2/113)。其中成年牛感染率为2.0％(1/50)、犊牛4.5％(2/44),而腹泻犊牛的感染率达16.7％(1/6)。同时在6例腹泻犊牛粪样中查出2例感染了轮状病毒。未发现隐孢子虫和轮状病毒混合感染病例。 展开更多
关键词 牛 兔 隐孢子虫 感染
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我国动物轮状病毒研究概况 被引量：7
14
作者 何孔旺 何家惠 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 1994年第4期61-63,共3页
我国动物轮状病毒研究概况何孔旺，何家惠（江苏省农科院牧医所南京２１００１４）一、流行病学自１９８２年我国首次分离到水牛轮状病毒后，已相继发现猪、犬、羊、奶牛、黄牛、牦牛、兔以及鸡轮状病毒。据对华东地区牛、猪血清中轮状... 我国动物轮状病毒研究概况何孔旺，何家惠（江苏省农科院牧医所南京２１００１４）一、流行病学自１９８２年我国首次分离到水牛轮状病毒后，已相继发现猪、犬、羊、奶牛、黄牛、牦牛、兔以及鸡轮状病毒。据对华东地区牛、猪血清中轮状病毒抗体的调查，奶牛、黄牛和猪群的... 展开更多
关键词 动物 轮状病毒 病毒研究
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轮状病毒血清分型研究进展 被引量：1
15
作者 何孔旺 吴纪棠 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1990年第6期52-54,共3页
轮状病毒(RV)是婴幼儿和多种新生幼龄动物急性胃肠炎的主要病原之一。迄今,已先后从人、牛、猪、马、羊、兔、鹿、狗、鼠、猴、猫、鸡、火鸡、鸭、鹦鹉等分离到RV。Pedley等健议将所有RV分为A～F6个抗原组。A组RV即最早发现的、具有共... 轮状病毒(RV)是婴幼儿和多种新生幼龄动物急性胃肠炎的主要病原之一。迄今,已先后从人、牛、猪、马、羊、兔、鹿、狗、鼠、猴、猫、鸡、火鸡、鸭、鹦鹉等分离到RV。Pedley等健议将所有RV分为A～F6个抗原组。A组RV即最早发现的、具有共同组抗原的、引起人和动物腹泻的RV,亦即典型RV。 展开更多
关键词 轮状病毒 血清分型 胃肠炎
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猪链球菌病疫苗研究进展 被引量：2
16
作者 何孔旺 周俊明 《兽医导刊》 2009年第8期22-23,共2页
猪链球菌病是由多种猪源链球菌所引起的猪的多种病症的总称。其病原包括C群马链球菌兽疫亚种（简称C群菌）、猪链球菌（主要有致病性较强的猪链球菌2型（简称SS2）、猪链球菌9型（简称SS9））以及D群和E群链球菌等。临床表现为急性死亡... 猪链球菌病是由多种猪源链球菌所引起的猪的多种病症的总称。其病原包括C群马链球菌兽疫亚种（简称C群菌）、猪链球菌（主要有致病性较强的猪链球菌2型（简称SS2）、猪链球菌9型（简称SS9））以及D群和E群链球菌等。临床表现为急性死亡、急性败血症、脑膜炎、关节炎、心内膜炎、多发性浆膜炎、肺炎、母猪流产以及化脓性淋巴结炎、颊部或颈部脓肿等。近年来，猪链球菌病在我国呈现不断上升的趋势，不仅可以直接致病，而且是猪病混合感染和（或）继发感染的常见病原， 展开更多
关键词 猪链球菌病 马链球菌兽疫亚种 疫苗 猪链球菌2型 多发性浆膜炎 猪源链球菌 急性败血症 急性死亡
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我国牛猪轮状病毒部分分离株的亚组鉴定
17
作者 何孔旺 林继煌 +2 位作者 江杰元 胡秀芳 沈江萍 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 1995年第6期54-55,共2页
利用轮状病毒亚组特异性单克隆抗体进行捕捉法ＥＬＩＳＡ，对我国４株牛轮状病毒分离株和４株猪轮状病毒江苏分离株进行了亚组抗原特异性鉴定。结果证实，所有被测试的牛、猪轮状病毒国内分离株，在亚组抗原特异性上均属第Ｉ亚组，未发... 利用轮状病毒亚组特异性单克隆抗体进行捕捉法ＥＬＩＳＡ，对我国４株牛轮状病毒分离株和４株猪轮状病毒江苏分离株进行了亚组抗原特异性鉴定。结果证实，所有被测试的牛、猪轮状病毒国内分离株，在亚组抗原特异性上均属第Ｉ亚组，未发现有属于第Ⅱ亚组的毒株。 展开更多
关键词 牛病 猪病 轮状病毒 分离株 亚组鉴定
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快速ELISA技术检测轮状病毒抗原试验报告
18
作者 何孔旺 江杰元 +4 位作者 林继煌 沈江萍 李保同 唐文杰 杨毓华 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 1989年第5期35-36,共2页
轮状病毒(RV)是引起婴幼儿和多种幼龄动物腹泻的主要病原之一。RV病的诊断主要依赖于粪便中病毒粒子或抗原成分的检出。通常的方法有电镜或免疫电镜、ELISA及核酸SDS-PAGE等,这些方法有的比较繁琐,需要昂贵的设备,有的需要较长的时间,... 轮状病毒(RV)是引起婴幼儿和多种幼龄动物腹泻的主要病原之一。RV病的诊断主要依赖于粪便中病毒粒子或抗原成分的检出。通常的方法有电镜或免疫电镜、ELISA及核酸SDS-PAGE等,这些方法有的比较繁琐,需要昂贵的设备,有的需要较长的时间,不能适应临床快速诊断的要求。为此,我们建立了一种快速双抗体夹心ELISA技术,能在40分钟内检出粪便中的轮状病毒,获得较为满意的结果。 展开更多
关键词 轮状病毒 抗原 检测 ELIS技术
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华东地区牛群轮状病毒感染的抗体流行病学调查 被引量：1
19
作者 何孔旺 林继煌 +1 位作者 吴纪棠 江杰元 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第3期49-50,共2页
用反向间接血凝抑制(RIHI)试验对我国华东部分地区牛群中的轮状病毒感染情况及地理分布进行了血清抗体流行病学调查,同时初步观察了乳牛产后初乳中轮状病毒奶抗体的消长规律。 材料与方法 一、待测样品 (一)血清:奶牛血清728份分别采自... 用反向间接血凝抑制(RIHI)试验对我国华东部分地区牛群中的轮状病毒感染情况及地理分布进行了血清抗体流行病学调查,同时初步观察了乳牛产后初乳中轮状病毒奶抗体的消长规律。 材料与方法 一、待测样品 (一)血清:奶牛血清728份分别采自江苏、山东、浙江、福建、江西等有关市县奶牛场。黄牛血清294份分别采自安徽、福建及江西等省农民家养或集体饲养的黄牛群。 展开更多
关键词 牛 轮状病毒 抗体 流行病学 调查
全文增补中
兔出血症病毒衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达及对家兔的免疫保护效果 被引量：26
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作者 王芳 胡波 +5 位作者 任雪枫 范志宇 杨龙圣 徐为中 张则斌 何孔旺 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1382-1387,共6页
用RT—PCR方法扩增兔出血症病毒（RHDV）衣壳蛋白VP60基因，通过克隆、转化得到重组穿梭载体Bacmid—VP60，用此质粒转染Sf9昆虫细胞，得到重组病毒rAcV—Bac—VP60，经RT—PCR、IFA、SDS-PAGE、Western blotting、HA和HI鉴定，结果显... 用RT—PCR方法扩增兔出血症病毒（RHDV）衣壳蛋白VP60基因，通过克隆、转化得到重组穿梭载体Bacmid—VP60，用此质粒转染Sf9昆虫细胞，得到重组病毒rAcV—Bac—VP60，经RT—PCR、IFA、SDS-PAGE、Western blotting、HA和HI鉴定，结果显示重组VP60蛋白在Sf9昆虫细胞中得到表达。在不加任何佐剂的情况下，用表达的蛋白免疫3月龄非RHD免疫兔，结果显示，免疫后21天，兔体内可产生抗RHDV抗体，抗体血凝抑制效价为2^6～2^7，该抗体可以抵抗血凝效价为2^10致死剂量RHDV强毒的攻击，本研究为兔病毒性出血症基因工程疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 兔出血症病毒 衣壳蛋白 杆状病毒表达系统 重组杆状病毒 表达 免疫
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