褪黑素通过PI3K/AKT通路减轻缺氧缺血性脑损伤新生大鼠大脑皮层神经细胞自噬的研究

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作者 刘晨萌 高啸天 +6 位作者 张海默 毕惠宁 梁晨 蒋景英 肖培伦 余小河 王晓莉 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期631-638,共8页

目的 观察褪黑素(melatonin,Mel)对缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)新生大鼠大脑皮层神经细胞自噬的影响,并从PI3K/AKT信号通路探讨其机制,为Mel的临床应用提供依据。方法 将7日龄Sprague-Dawley新生大鼠随机分... 目的 观察褪黑素(melatonin,Mel)对缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)新生大鼠大脑皮层神经细胞自噬的影响,并从PI3K/AKT信号通路探讨其机制,为Mel的临床应用提供依据。方法 将7日龄Sprague-Dawley新生大鼠随机分为假手术组、HIBD组及Mel组(各组n=9)。采用经典RiceVannucci法构建新生大鼠HIBD模型。采用苏木精-伊红和尼氏染色法观察新生大鼠大脑皮层神经细胞形态;免疫荧光染色和Western blot法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3 (microtubule-associated protein 1 light chain3,LC3)及Beclin-1蛋白表达水平;免疫组化和Western blot法检测磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(phosphorylated phosphoinositide 3-kinase,p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B (phosphorylated protein kinase B,p-AKT)蛋白表达水平;通过Pearson相关性分析探讨Mel组与HIBD组自噬与PI3K通路的相关性。结果 建模后24h,假手术组新生大鼠大脑皮层神经细胞大小形态正常、排列规则,HIBD组神经细胞胞体肿胀、排列不规则,Mel组神经细胞排列较规整、形态相对正常。假手术组尼氏小体形态规整,HIBD组尼氏小体形态异常,Mel组尼氏小体形态尚规整。HIBD组LC3及Beclin-1平均荧光强度较假手术组增加,Mel组较HIBD组减少(P<0.05)。HIBD组p-PI3K^(+)、pAKT^(+)细胞数较假手术组减少,Mel组较HIBD组增加(P<0.05)。HIBD组LC3、Beclin-1蛋白表达水平较假手术组增加,p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平较假手术组减少(P<0.05);Mel组LC3、Beclin-1蛋白表达水平较HIBD组减少,p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平较HIBD组增加(P<0.05)。相关性分析显示,Mel组与HIBD组损伤侧大脑皮层LC3、Beclin-1蛋白平均荧光强度差值与p-PI3K^(+)、p-AKT^(+)细胞数差值均呈负相关(P<0.05)。结论 Mel可抑制HIBD新生大鼠大脑皮层神经细胞过度自噬,从而减轻HIBD,其机制与PI3K/AKT通路相关。 展开更多

关键词 缺氧缺血性脑损伤 自噬 大脑皮层 PI3K/AKT通路 新生大鼠

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高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠内源性神经干细胞和髓鞘的保护作用 被引量：38

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作者 余小河 杨于嘉 +7 位作者 王霞 王庆红 谢珉 祁伯祥 刘沉涛 王晓莉 贾延劼 钟乐 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2006年第1期33-37,共5页

目的以前的研究已经证实高压氧(HBO)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)有保护作用,但其确切机制尚不清楚。该研究从HBO对内源性神经干细胞(NSCs)和髓鞘的影响来探讨HBO保护作用的机制。方法7日龄SpragueDawley新生大鼠随机分为4组:正常... 目的以前的研究已经证实高压氧(HBO)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)有保护作用,但其确切机制尚不清楚。该研究从HBO对内源性神经干细胞(NSCs)和髓鞘的影响来探讨HBO保护作用的机制。方法7日龄SpragueDawley新生大鼠随机分为4组:正常对照组、HIBD组、高压空气治疗组(HBA)和高压氧治疗组(HBO)。HBA组和HBO组于缺氧缺血后1h内分别行HBA和HBO处理,每日1次连续7d。BrdU免疫组化检测在体内源性神经干细胞(NSCs)。Westernblot测定nestin的表达。髓鞘碱性蛋白(MBP)免疫组化检测髓鞘损伤。结果HIBD后3周,HIBD组缺血侧的室管膜下(SVZ)区和海马齿状回(DG)BrdU阳性细胞数目明显少于正常对照组(均P<0.01),HBO组SVZ区BrdU阳性细胞增多不明显,但DG区BrdU阳性细胞明显增多,与HIBD组比较差异有显著性意义(P<0.05)。HIBD组nestin表达较正常对照组下降,HBO组表达增加,HBA组增加不明显。HIBD后1周,HIBD组MBP免疫组化损伤评分增加,HBO组与HBA组损伤评分均有减轻,HBO组与HIBD组比较差异有显著性(P<0.01),但与HBA组比较差异无显著性(P>0.05)。结论HBO可减少新生大鼠HIBD后内源性NSCs的死亡和减轻髓鞘损伤,这可能是HBO的保护作用机制之一。 展开更多

关键词 缺氧缺血性脑损伤 高压氧 髓鞘 新生大鼠 内源性神经干细胞 保护作用

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喘息婴幼儿外周血气道炎症相关介质水平的研究 被引量：14

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作者 余小河 何苗 +2 位作者 郑湘榕 王霞 旷健 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期861-867,共7页

目的通过检测喘息婴幼儿外周血相关炎症介质水平,从辅助性T细胞(Th)1/Th2失衡及气道炎症两个方面探讨婴幼儿喘息发生的可能机制。方法选取急性喘息发作婴幼儿50例为喘息组,25例健康婴幼儿为健康对照组。喘息组患儿依据喘息发生次数分为... 目的通过检测喘息婴幼儿外周血相关炎症介质水平,从辅助性T细胞(Th)1/Th2失衡及气道炎症两个方面探讨婴幼儿喘息发生的可能机制。方法选取急性喘息发作婴幼儿50例为喘息组,25例健康婴幼儿为健康对照组。喘息组患儿依据喘息发生次数分为首次喘息组(首发组)25例和反复喘息组(反复组,发作次数≥2次)25例;根据是否存在哮喘发生的高危因素分为有高危因素组22例和无高危因素组28例;根据病原学检测结果分为病原学阳性组23例和病原学阴性组27例。检测各组外周血Th1细胞因子白介素(IL)-2,Th2细胞因子IL-4、IL-5、IL-13、转化生长因子-β1(TGF-β1),以及总IgE(TIgE)水平。喘息组患儿同时送检外周血嗜酸性粒细胞(EOS)计数,并采集标本进行呼吸道病原学检测。结果喘息组外周血IL-4、IL-5、IL-13、TGF-β1及TIgE水平较健康对照组均明显升高(P<0.05);外周血IL-2、IL-4、IL-5、IL-13、TGF-β1及TIgE水平在首发组与反复组,有哮喘高危因素组与无哮喘高危因素组,以及病原学阳性组与病原学阴性组之间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。相关性分析表明喘息组外周血EOS计数与IL-4水平呈正相关(P<0.01);IL-4水平与IL-5、IL-13水平呈正相关(P<0.01);IL-5水平与IL-13水平呈正相关(P<0.01);IL-2水平与TGF-β1水平呈正相关(P<0.05)。结论喘息婴幼儿存在Th1/Th2失衡,表现为Th2优势表达;IL-4、IL-5、IL-13、TGF-β1及IgE共同参与了婴幼儿喘息性疾病的发病过程。喘息婴幼儿存在气道炎症,与喘息发作次数、是否存在哮喘高危因素及病原学检测是否阳性无关。 展开更多

关键词 喘息 炎症因子 总IGE 婴幼儿

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高压氧治疗对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用(英文) 被引量：10

4

作者 余小河 杨于嘉 +1 位作者 王霞 钟乐 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2004年第6期466-469,共4页

目的　探讨高压氧 (HBO)治疗对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)的保护作用。方法　 7日龄Sprague Dawley(SD)新生大鼠随机分为 4组 (n =10 ) :正常对照组 ,HIBD组 ,高压空气治疗组 (HBA)和高压氧治疗组 (HBO)。HBA组和HBO组于缺氧缺血... 目的　探讨高压氧 (HBO)治疗对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)的保护作用。方法　 7日龄Sprague Dawley(SD)新生大鼠随机分为 4组 (n =10 ) :正常对照组 ,HIBD组 ,高压空气治疗组 (HBA)和高压氧治疗组 (HBO)。HBA组和HBO组于缺氧缺血后分别行HBA和HBO治疗 [2个绝对压 (ATA) ,1h],每日 1次连续 7d。至 30日龄开始对各组动物进行放射形迷宫测试以及感觉运动功能检测。行为学试验验结束后 (日龄 35天 ) ,采用尼氏染色检测海马CA1区锥体细胞密度。结果　HIBD组大鼠的学习、记忆和感觉运动功能受损严重 ,HBO组行为学损伤明显改善 ,而HBA组改善不明显。HIBD组和HBA组左脑CA1区锥体细胞密度低于HBO和对照组(P <0 .0 1)。结论　HBO治疗能够减少新生大鼠缺氧缺血后脑损伤 ,促进学习记忆功能和感觉运动功能的改善。 展开更多

关键词 缺氧缺血 脑 高压氧 行为 大鼠 新生

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高压氧对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后在体神经干细胞的影响 被引量：9

5

作者 余小河 杨于嘉 +1 位作者 钟乐 王霞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期960-963,共4页

目的:新生鼠的神经生发区-室管膜下区(SVZ)和海马齿状回(DG)聚集了多种不同发育阶段神经干细胞(NSCs),它们可分化产生新的神经元和胶质细胞。本研究探讨缺氧缺血性脑损伤(HIBD)对脑生发区NSCs的损伤及高压氧(HBO)对此损伤的影响。从在体... 目的:新生鼠的神经生发区-室管膜下区(SVZ)和海马齿状回(DG)聚集了多种不同发育阶段神经干细胞(NSCs),它们可分化产生新的神经元和胶质细胞。本研究探讨缺氧缺血性脑损伤(HIBD)对脑生发区NSCs的损伤及高压氧(HBO)对此损伤的影响。从在体NSCs探讨HBO对新生大鼠HIBD的保护作用机制。方法:新生7 d龄SD大鼠随机分为4组:①正常对照组(CON,n=16);②HIBD模型组(HIBD,n=16);③高压空气组(HBA,n=16);④HBO治疗组(n=16)。Rice法复制HIBD模型,并予HBA或HBO治疗,每天1次共7 d。BrdU免疫组化显示在体NSCs。并取损伤侧脑SVZ区组织,体外NSCs培养并进行神经干细胞球计数。结果:HIBD组生发区在体BrdU阳性细胞和体外培养的神经干细胞球数目明显少于对照组。HBO组SVZ区的BrdU阳性细胞增多;体外培养的神经干细胞球增多。HBA组增加不明显。结论:新生大鼠HIBD后生发区NSCs减少,HBO治疗可以减轻HIBD后NSCs的死亡。HBA治疗无明显作用。 展开更多

关键词 高压氧 神经干细胞 大鼠 新生大鼠 缺氧缺血性脑损伤

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抑制因子κB与神经细胞凋亡

6

作者 余小河 杨于嘉 《国外医学（儿科学分册）》 2002年第5期263-265,共3页

核因子（NF）-κB是一种广泛存在的核转录因子,它参与多种基因的转录调控,与细胞凋亡等生理病理过程关系密切。抑制因子κB（IκK）作为NF-κB的抑制子,在NF-κB活化的途径中起着最关键的分子开关作用,IκB家族包括IκBa、IκBβ、IκB... 核因子（NF）-κB是一种广泛存在的核转录因子,它参与多种基因的转录调控,与细胞凋亡等生理病理过程关系密切。抑制因子κB（IκK）作为NF-κB的抑制子,在NF-κB活化的途径中起着最关键的分子开关作用,IκB家族包括IκBa、IκBβ、IκBε、IκBγ（p105）Bcl-3和IκBδ（p100）。各种刺激下神经元和胶质细胞中NF-κB的活化及靶基因转录不同,对细胞凋亡影响不同;神经元和胶质细胞IκBs代谢动力学也存在差异,选择性地针对IκBs亚型或其上游IκB激酶可能达到调控神经细胞凋亡的目的。 展开更多

关键词 抑制因子kB 神经细胞 代谢动力学 基因转录 细胞凋亡

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高压氧促HIBD新生大鼠内源性神经干细胞增殖过程中Wnt-3蛋白的变化 被引量：28

7

作者 王晓莉 杨于嘉 +4 位作者 王庆红 谢岷 余小河 刘沉涛 王霞 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2007年第3期241-246,共6页

目的近年来的研究已经证实高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)能够促进缺氧缺血性脑损伤(Hy-poxic ischemic brain damage,HIBD)新生大鼠内源性神经干细胞(Neuralstem cells,NSCs)的增殖,并且发现Wnt信号途径参与神经干细胞的增殖,故本课题... 目的近年来的研究已经证实高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)能够促进缺氧缺血性脑损伤(Hy-poxic ischemic brain damage,HIBD)新生大鼠内源性神经干细胞(Neuralstem cells,NSCs)的增殖,并且发现Wnt信号途径参与神经干细胞的增殖,故本课题将探讨HBO对HIBD新生大鼠脑内源性NSCs增殖分化过程中Wnt-3蛋白的变化的影响及其它们之间的相关性。方法7日龄Sprague-Dawley新生大鼠随机分为正常对照组(CON),缺氧缺血性脑损伤组(HIBD)及高压氧组(HBO)。采用经典的Rice法制成HIBD模型,HBO组在HIBD后3h内进行HBO治疗(压力为2个绝对大气压,稳压1h,每日1次,连续7d)。采用BrdU/nestin,Wnt-3/nestin免疫荧光双标法,检测HIBD后6h,24h,3d,7d,14d,缺血侧侧脑室室管膜下区(subventricular zone,SVZ)增殖的NSCs及Wnt-3蛋白的动态变化,激光共聚焦显微镜(LSM510,Zeiss)分析细胞内nestin蛋白与Wnt-3蛋白的荧光强度,统计学分析二者相关性。Western blotting法检测缺血侧大脑半球nestin、Wnt-3总蛋白的动态变化。结果SVZ区BrdU+nestin+细胞于HBO治疗后3h开始增加,7d达最高水平,显著高于CON组与HIBD组(P<0.01),14d时BrdU+nestin+细胞数开始下降,但仍多于CON和HIBD两组(P<0.05);NSCs细胞膜表面Wnt-3蛋白于HBO治疗后3h开始增加,3d时达最高水平,并维持较高水平至14d时开始下降;直线回归分析示细胞内Wnt-3蛋白与nestin蛋白呈直线相关(r=0.893,P<0.05);Western blotting分析示缺血侧大脑半球Wnt-3蛋白于HBO后3d,7d一直维持较高水平,显著高于其他各时间点(P<0.05),至14d时表达开始下降;nestin总蛋白水平于HBO治疗后21h开始增加(P<0.05),7d达最高水平,后下降。结论高压氧可以促进HIBD新生大鼠内源性NSCs的增殖,其机制与Wnt信号活化有关。[中国当代儿科杂志,2007,9(3):241-246] 展开更多

关键词 高压氧 缺氧缺血性脑损伤 神经干细胞 Wnt-3 新生大鼠

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不同时间窗高压氧治疗对HIBD新生大鼠脑白质损伤的影响 被引量：16

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作者 王晓莉 杨于嘉 +4 位作者 王庆红 余小河 谢岷 刘沉涛 王霞 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2007年第4期308-312,共5页

目的研究发现早期高压氧(HBO)治疗可以减轻缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠的脑白质损伤。但延迟开始治疗的时间是否也有同样的作用尚不清楚。该文探讨不同时间窗HBO治疗对HIBD新生大鼠脑白质损伤的影响,从而探讨HBO治疗HIBD的时间窗。... 目的研究发现早期高压氧(HBO)治疗可以减轻缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠的脑白质损伤。但延迟开始治疗的时间是否也有同样的作用尚不清楚。该文探讨不同时间窗HBO治疗对HIBD新生大鼠脑白质损伤的影响,从而探讨HBO治疗HIBD的时间窗。方法采用Rice法制成HIBD模型,分别于HIBD后3,6,12,24,72h开始给予HBO治疗,每日1次,连续7d。HIBD后14天(生后21天)开始采用盲法进行T迷宫试验、放射性迷宫测试、足错误测试行为学测试;测试完毕,用髓鞘碱性蛋白(MBP)免疫组化法检测胼胝体与纹状体区髓鞘蛋白。结果HIBD后3,6,12hHBO治疗各组T迷宫测试、放射性迷宫试验和足错误测试的测试结果均优于HIBD模型组(P<0.05)。HIBD后24,72hHBO治疗组行为学测试结果与HIBD模型组比较,差异无显著性意义。HIBD后3,6,12hHBO治疗各组大脑皮层胼胝体与纹状体区域MBP吸光度显著高于HIBD模型组,差异有显著性意义(P<0.05),而HIBD后24,72hHBO治疗组与HIBD模型组相比差异无显著性。结论HIBD后12h内HBO治疗可以显著改善脑白质损伤,HIBD后24h治疗则疗效不显著。 展开更多

关键词 高压氧 缺氧缺血性脑损伤 脑白质损伤 时间窗 新生大鼠

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先天性高胰岛素血症 被引量：18

9

作者 岳少杰 王铭杰 +2 位作者 王庆红 余小河 杨于嘉 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2006年第5期391-394,共4页

报道1例先天性持续性高胰岛素性低血糖症患儿的临床诊治情况。患儿，男，孕36周，因“胎儿宫内窘迫”剖宫产出生，出生体重4200g，生后即表现为反复低血糖，加用糖皮质激素治疗后患儿的血糖仍一直波动于1．2～2．8mmol／L之间，需静脉输... 报道1例先天性持续性高胰岛素性低血糖症患儿的临床诊治情况。患儿，男，孕36周，因“胎儿宫内窘迫”剖宫产出生，出生体重4200g，生后即表现为反复低血糖，加用糖皮质激素治疗后患儿的血糖仍一直波动于1．2～2．8mmol／L之间，需静脉输注10％葡萄糖溶液，糖速为10～17mg／（kg·min），才能维持血糖的稳定。生后30d测定血胰岛素浓度为24．13U／L，同份标本的血糖为1．5mmol／L，血浆胰岛素（U／L）／血浆葡萄糖（mg／dL）比值为0．89，表明体内存在器质性胰岛素不适当分泌过多，诊断为先天性高胰岛素血症。 展开更多

关键词 先天性高胰岛素血症 低血糖 持续性 婴儿 新生

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影响INSURE技术治疗早产儿呼吸窘迫综合征 疗效因素的临床分析 被引量：19

10

作者 王彦蕊 王铭杰 +4 位作者 余小河 曹传顶 霍惠仪 廖正嫦 岳少杰 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期621-626,共6页

目的探讨影响以INSURE技术治疗早产儿呼吸窘迫综合征(NRDS)效果的相关因素。方法回顾性分析2009年1月至2012年12月新生儿重症监护病房中309例以INSURE技术治疗的NRDS患儿的临床资料。结果 309例NRDS患儿中治愈出院302例,总治愈率97.7%;2... 目的探讨影响以INSURE技术治疗早产儿呼吸窘迫综合征(NRDS)效果的相关因素。方法回顾性分析2009年1月至2012年12月新生儿重症监护病房中309例以INSURE技术治疗的NRDS患儿的临床资料。结果 309例NRDS患儿中治愈出院302例,总治愈率97.7%;21例(6.8%)在72 h内需要再次气管插管予机械通气;不同出生胎龄患儿的再插管通气率差异有统计学意义(P<0.01),其中≤28周患儿的再插管率较高。根据是否需要再插管通气分为成功组和失败组,与成功组比较,失败组胎龄≤28周、出生体质量<1 000 g、病情严重患儿较多,应用肺表面活性物质(PS)剂量和PS重复使用率较高,需要氧气支持比例高,病死率高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 INSURE技术可有效用于临床治疗NRDS患儿,胎龄小、出生体质量低、病情严重是导致INSURE技术失败的重要原因。 展开更多

关键词 INSURE技术 新生儿呼吸窘迫综合征 早产儿

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新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后的远期行为学测试 被引量：18

11

作者 钟乐 王霞 +1 位作者 余小河 杨于嘉 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2005年第3期245-248,共4页

目的目前对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型的研究多采用病理学和生化指标,而缺乏功能评价手段。该研究对新生大鼠HIBD后的行为学改变及其测定方法进行探讨,为新生大鼠HIBD的研究提供功能评价的方法。方法24只7日龄新生SD大鼠随机分... 目的目前对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型的研究多采用病理学和生化指标,而缺乏功能评价手段。该研究对新生大鼠HIBD后的行为学改变及其测定方法进行探讨,为新生大鼠HIBD的研究提供功能评价的方法。方法24只7日龄新生SD大鼠随机分为对照组(n=12)和HIBD组(n=12),HIBD组大鼠予以缺氧缺血,对照组大鼠仅予以假手术。生后3周,两组大鼠予以T迷宫测试及感觉运动测试对学习记忆、空间能力和感觉运动功能进行评估。然后处死两组大鼠,取脑组织切片行尼氏染色,计数海马DG区和皮层区单位面积神经元的数目,并对行为学和组织学的结果进行相关分析。结果在行为测试中,HIBD组大鼠的成绩显著低于正常鼠。在T迷宫测试中,两组在第3,4d的正确率有显著差异(P=0.049,P<0.001),HIBD组的正确率(68.3%±26.2%,66.7%±15.6%)显著低于对照组(86.7%±15.6%,98.3%±5.7%)。在感觉运动测试中,与正常鼠比较,HIBD鼠在足错误和肢体放置测试中表现出左右运动的不对称(均P<0.001),姿势反射也显示出了运动功能异常(P=0.032)。缺氧缺血导致了神经元损伤,使海马DG区(39.7±5.9vs50.9±4.1,P<0.001)和皮层单位面积内神经元(12.7±3.3vs18.2±3.3,P<0.001)数目显著减少。但行为学测试结果与组织学改变无相关性。结论新生鼠缺氧缺血会造成远期学习记忆,空间能力和感觉运动功能障碍,T迷宫测试和三项感觉运动测试可以作为大鼠HIBD模型的评价指标。 展开更多

关键词 缺氧缺血 脑 行为学 大鼠 新生

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神经干细胞移植对HIBD新生大鼠学习记忆的影响 被引量：10

12

作者 王霞 杨于嘉 +2 位作者 余小河 钟乐 贾延劼 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1491-1494,共4页

目的:探讨脑内移植胚鼠神经干细胞(NSCs)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后学习记忆的影响。方法:分离孕龄14d的Sprague-Dawley(SD)大鼠胚胎前脑皮质,采用无血清悬浮培养的方法获得细胞克隆;7d龄新生大鼠随机分为假手术组(n=10)、HIBD... 目的:探讨脑内移植胚鼠神经干细胞(NSCs)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后学习记忆的影响。方法:分离孕龄14d的Sprague-Dawley(SD)大鼠胚胎前脑皮质,采用无血清悬浮培养的方法获得细胞克隆;7d龄新生大鼠随机分为假手术组(n=10)、HIBD组(n=11)和移植组(n=13),后两组结扎左侧颈总动脉联合8%氧吸入制作HIBD模型,损伤后3d利用立体定位仪分别在左侧海马区植入培养基作为对照或BrdU标记的NSCs,观察植入4周后大鼠学习记忆功能的恢复情况。计数海马CA1区正常神经元,间接免疫荧光法观察移植细胞在脑内的存活、迁移情况。结果:在放射形迷宫测试中,移植组较对照组表现出明显的改善,觅水时间缩短(61·40s±24·83svs89·32s±31·52s),错误次数(2·65±0·57vs3·78±0·41)及重复次数明显减少(0·32±0·43vs0·81±0·47)(P<0·05)。BrdU间接免疫荧光显示移植后4周,在脑内可见存活的NSCs在海马内广泛分布;尼氏染色显示移植可明显减少海马CA1区的细胞丢失。结论:脑内移植胚鼠NSCs对HIBD新生大鼠的学习记忆恢复有良好的促进作用。 展开更多

关键词 干细胞移植 记忆障碍 缺氧缺血 脑 大鼠

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神经干细胞移植对缺氧缺血新生大鼠感觉运动机能的影响 被引量：9

13

作者 王霞 杨于嘉 +2 位作者 余小河 钟乐 贾延劼 《中国行为医学科学》 CSCD 2005年第7期596-598,共3页

目的研究神经干细胞(NSCs)移植对改善新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后感觉运动障碍的作用。方法7d龄新生SD大鼠,随机分为假手术组,HIBD组和脑内移植组,后两组HIBD损伤后3d分别在左侧感觉运动皮质区植入BrdU标记的NSCs或培养基作为对照... 目的研究神经干细胞(NSCs)移植对改善新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后感觉运动障碍的作用。方法7d龄新生SD大鼠,随机分为假手术组,HIBD组和脑内移植组,后两组HIBD损伤后3d分别在左侧感觉运动皮质区植入BrdU标记的NSCs或培养基作为对照,观察植入4周后大鼠感觉运动功能的变化和移植细胞在脑内的存活和分化情况。结果与HIBD组比较,移植组在T迷宫和四项感觉运动功能测试中,表现出明显的改善。在T迷宫中,自发改变率[(69.23±13.34)%vs(45.00±27.27)%](P<0.05)上升;在握持牵引试验中,握持时间明显延长[(49.15±13.39)svs(27.20±15.18)s](P<0.05);在肢体放置和足错误试验中的不对称性消失,姿势反射也明显改善(P<0.05)。BrdU间接免疫荧光显示移植后4周,在脑内可见存活的NSCs分布于移植点附近;BrdU和NF-200免疫荧光双标显示移植后4周NSCs可部分分化为神经元表达NF-200。结论脑内移植NSCs对HIBD新生大鼠的感觉运动机能和行为的恢复有良好的促进作用。 展开更多

关键词 缺氧缺血新生大鼠 运动机能 神经干细胞移植 缺氧缺血性脑损伤 HIBD NSCs 新生SD大鼠 BRDU标记 感觉运动功能 间接免疫荧光 脑内移植 运动障碍 移植细胞 功能测试 牵引试验 不对称性 姿势反射 荧光双标 移植后 培养基 皮质区

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高压氧促进缺氧缺血性脑损伤新生大鼠内源性神经干细胞增殖的时间窗研究 被引量：7

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作者 王晓莉 杨于嘉 +3 位作者 余小河 谢岷 王霞 刘沉涛 《医学研究生学报》 CAS 2007年第10期1022-1025,I0001,共5页

目的:探讨高压氧(HBO)治疗是否可以促进缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠内源性神经干细胞(NSC)的增殖及HBO治疗HIBD的时间窗。方法:采用Rice法制成HIBD模型,分别于HIBD后第3、6、12、24和72h开始给予HBO治疗,1次/d,连续7 d。HIBD后10 d,... 目的:探讨高压氧(HBO)治疗是否可以促进缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠内源性神经干细胞(NSC)的增殖及HBO治疗HIBD的时间窗。方法:采用Rice法制成HIBD模型,分别于HIBD后第3、6、12、24和72h开始给予HBO治疗,1次/d,连续7 d。HIBD后10 d,BrdU/Nestin免疫荧光双标法检测不同时间窗HBO治疗对内源性NSC的影响,Western blot法检测Nestin蛋白的表达;HIBD后28 d尼氏染色法检测海马CA1区锥体细胞密度。结果:HIBD后3、6、12和24 h给予HBO治疗,侧脑室室管膜下(SVZ)区BrdU+Nestin+细胞显著增加(P<0.05),损伤侧大脑Nestin蛋白表达显著高于HIBD组(P<0.05);尼氏染色结果显示HIBD后3、6、和12h给予HBO治疗,海马CA1区神经元丢失较HIBD组显著减少(P<0.05)。结论:HBO治疗可以促进HIBD新生大鼠内源性NSC的增殖,治疗时间窗拓宽至HIBD后24 h可促进NSC增殖,HIBD后72 h进行HBO治疗则疗效不显著。 展开更多

关键词 高压氧 缺氧缺血脑损伤 时间窗 内源性神经干细胞 新生大鼠

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黄芩苷对Neuro2A细胞氧糖剥夺的保护作用 被引量：5

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作者 王霞 张璧涛 +3 位作者 钟乐 余小河 杨于嘉 陈光建 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1260-1262,共3页

目的观察黄芩苷对体外培养小鼠神经母细胞瘤Neuro2A细胞株氧糖剥夺所致损伤的保护作用。方法利用体外培养的Neuro2A细胞,通过去除培养液中的糖和氧气来模拟脑缺血缺氧,用不同浓度的黄芩苷作用于Neuro2A细胞,应用Annexin V-FITC/PI染色,... 目的观察黄芩苷对体外培养小鼠神经母细胞瘤Neuro2A细胞株氧糖剥夺所致损伤的保护作用。方法利用体外培养的Neuro2A细胞,通过去除培养液中的糖和氧气来模拟脑缺血缺氧,用不同浓度的黄芩苷作用于Neuro2A细胞,应用Annexin V-FITC/PI染色,流式细胞术检测细胞凋亡,应用四唑盐(MTT)法检测细胞的活性。结果黄芩苷在6.25,12.5,25μmol.L-1的浓度范围之内,可对缺血缺氧Neuro2A细胞起到保护作用,主要是减少细胞早期凋亡。结论在一定浓度范围之内黄芩苷可保护缺血缺氧Neuro2A细胞,提示对缺血性脑损伤有保护作用,值得进一步研究。 展开更多

关键词 Neuro2A细胞 缺血 缺氧 黄芩苷

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地塞米松预处理对新生大鼠缺氧缺血后脑内NF-κB活性及神经细胞凋亡的影响(英文) 被引量：4

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作者 彭涛 汪薇 +2 位作者 余小河 王霞 杨于嘉 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2004年第4期251-255,F004,共6页

目的　探讨地塞米松预处理对新生大鼠缺氧缺血后脑内NF κB活性及神经细胞凋亡的影响。方法　 4 2只新生大鼠随机分为 5组 ,即正常对照组 (n =8) ,假手术组 (n =8) ,缺氧缺血组 (HIBD ,n =8) ,地塞米松治疗组 (DEX ,n =9)及地塞米松预... 目的　探讨地塞米松预处理对新生大鼠缺氧缺血后脑内NF κB活性及神经细胞凋亡的影响。方法　 4 2只新生大鼠随机分为 5组 ,即正常对照组 (n =8) ,假手术组 (n =8) ,缺氧缺血组 (HIBD ,n =8) ,地塞米松治疗组 (DEX ,n =9)及地塞米松预处理组 (P DEX ,n =9)。于缺氧缺血 (HI)后 72h取脑 ,以Western印迹法检测脑组织中NF κB抑制蛋白IκBα表达 ,TUNEL法检测细胞凋亡 ,免疫组织化学法检测NF κB亚基p6 5核移位情况 ,免疫荧光双标法检测P6 5核移位与细胞凋亡共表达。结果　与正常对照组和假手术组比较 ,HIBD组及DEX组 p6 5阳性细胞及TUNEL阳性细胞数明显增加 (P <0 .0 1) ,IκBα蛋白表达明显减少 (P <0 .0 1)。P DEX组也可见p6 5阳性细胞及TUNEL阳性细胞表达 ,但较HIBD组及DEX组明显减少 (P <0 .0 1) ,而IκBα蛋白表达明显增多 (P<0 .0 1)。直线回归分析显示 ,在HIBD组中NF κB的活化与缺氧缺血后神经细胞凋亡密切相关 (r =0 .775 ,P <0 .0 1)。结论　NF κB的活化与缺氧缺血后神经细胞凋亡密切相关。DEX预处理对缺氧缺血性脑损伤的保护作用可能与抑制NF κB的活化 ,减少细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 核因子-κB 凋亡 缺氧缺血 脑 地塞米松 大鼠 新生

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新生儿重症监护病房一起肺炎克雷伯杆菌医院感染暴发临床分析 被引量：5

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作者 王铭杰 余小河 +7 位作者 李文 曹传顶 吴安华 廖正嫦 周美娟 姜玲 高红梅 岳少杰 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期850-854,共5页

目的：探讨新生儿医院感染暴发的临床特点、原因以及预防和控制措施。方法回顾性分析新生儿重症监护病房（NICU）发生的一起肺炎克雷伯杆菌肺炎医院感染暴发事件。结果2010年9月3日至2010年10月3日期间， NICU连续发现12例痰培养肺炎克... 目的：探讨新生儿医院感染暴发的临床特点、原因以及预防和控制措施。方法回顾性分析新生儿重症监护病房（NICU）发生的一起肺炎克雷伯杆菌肺炎医院感染暴发事件。结果2010年9月3日至2010年10月3日期间， NICU连续发现12例痰培养肺炎克雷伯杆菌阳性患儿，最终7例确定医院感染。患儿胎龄（28.5±2.6）周（25-32周），出生体质量（941.4±309.8）g（620-1540 g），发生医院感染时的住院时间为（31.7±12.8）d （11-45 d）。总医院感染发生率2.41%，早产儿医院感染发生率为5.79%。胎龄〈28周的极早早产儿医院感染发生率达到50.00%，超低出生体质量儿医院感染发生率为42.86%。所有痰培养结果均显示为多重耐药肺炎克雷伯杆菌，对青霉素类及三代头孢菌素类抗生素耐药率达到75%-100%，碳青酶烯类耐药率达到58.3%，哌拉西林/他唑巴坦耐药性最低为25.0%。所有患儿均治愈出院，无死亡病例。结论胎龄〈28周的极早早产儿及超低出生体质量新生儿是NICU医院感染暴发的高危人群。引起医院感染暴发的肺炎克雷伯杆菌耐药性已经突变至耐碳青霉烯类，需引起高度重视。规范的医疗行为是有效的医院感染防控措施，可以显著降低NICU早产儿医院感染率及死亡率。 展开更多

关键词 医院感染 暴发 肺炎克雷伯杆菌 新生儿重症监护病房

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骨髓基质细胞促进神经干细胞增殖分化 被引量：6

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作者 钟乐 杨于嘉 +1 位作者 余小河 王霞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期1417-1420,共4页

目的:探讨骨髓基质细胞(BMSCs)对神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响。方法:在体外比较NSCs在单独培养和在BMSCs条件培养液中培养下的分化和增殖情况。结果:应用BMSCs条件培养液培养NSCs,分化的神经元比例较显著高于NSCs单独培养(41.1%... 目的:探讨骨髓基质细胞(BMSCs)对神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响。方法:在体外比较NSCs在单独培养和在BMSCs条件培养液中培养下的分化和增殖情况。结果:应用BMSCs条件培养液培养NSCs,分化的神经元比例较显著高于NSCs单独培养(41.1%±3.2%vs23.3%±16.5%,P<0.05),而分化的星形胶质细胞所占比例显著降低(33.8%±4.9%vs65.0%±10.4%,P<0.01),同时增殖细胞所占比例也显著增高(74.7%±4.7%vs51.4%±12.3%,P<0.01)。结论:BMSCs对NSCs有促进其增殖和向神经元分化的作用。NSCs与BMSCs联合移植可能会增强NSCs移植的抗脑损伤作用。 展开更多

关键词 骨髓基质细胞 神经干细胞 细胞增殖 细胞分化

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姜黄素诱导HSP70及对大鼠感染性脑水肿保护作用的研究 被引量：4

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作者 黄榕 罗芳 +1 位作者 余小河 杨于嘉 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2003年第2期109-112,共4页

目的 研究姜黄素预处理诱导HSP 70表达的量效和时效关系及对感染性脑水肿的保护作用。方法①量效及时效关系的研究:SD大鼠随机分为空白对照组、二甲亚砜(DMSO)组、热休克(HS)组和姜黄素(CUR)组;再根据姜黄素的剂量(mg/kg)分为80 mg,40 m... 目的 研究姜黄素预处理诱导HSP 70表达的量效和时效关系及对感染性脑水肿的保护作用。方法①量效及时效关系的研究:SD大鼠随机分为空白对照组、二甲亚砜(DMSO)组、热休克(HS)组和姜黄素(CUR)组;再根据姜黄素的剂量(mg/kg)分为80 mg,40 mg,20 mg及10 mg组。根据观察时间分为0,2,4,6,12,16,24 h及48 h组。Western印迹分析检测脑组织HSP70。②脑水肿保护作用研究:SD大鼠随机分为生理盐水对照组(NS)、感染性脑水肿组(PB)、二甲亚砜组、热休克预处理组和姜黄素预处理组。制备感染性脑水肿模型,用干湿法测定脑含水量;原子光谱吸收法测定脑组织钠、钾含量。结果正常情况下,脑组织有一定量HSP70的表达,DMSO,CUR 20 mg和CUR 10 mg组HSP70表达无明显增多;HS,CUR 40 mg及CUR 80 mg组HSP70明显增加,以CUR 40 mg组明显,差异有显著性(P<0.01)。HSP70在注射姜黄素后2 h开始表达,16 h达高峰,24～48 h处于稳定状态。HS组、CUR组的脑含水量和脑组织钠离子含量与PB组比较有明显降低,差异有显著性(P<0.01)。结论姜黄素可诱导大鼠脑组织HSP70的产生,有剂量及时间依赖关系。姜黄素预处理对大鼠感染性脑水肿有保护作用。 展开更多

关键词 姜黄素 HSP70 感染性脑水肿 保护作用 时效 量效

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腺病毒介导VEGF165基因转移对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用 被引量：4

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作者 张珊珊 郑湘榕 +4 位作者 杨于嘉 钟乐 王霞 谢岷 余小河 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2008年第6期737-742,共6页

目的研究腺病毒介导的血管内皮生长因子(VEGF)165基因转移对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的神经保护作用。方法采用细菌内同源重组技术构建Ad-VEGF腺病毒重组载体。7日龄Sprague-Dawley大鼠随机分成4组,假手术组(n=20)、HIBD组(n=25... 目的研究腺病毒介导的血管内皮生长因子(VEGF)165基因转移对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的神经保护作用。方法采用细菌内同源重组技术构建Ad-VEGF腺病毒重组载体。7日龄Sprague-Dawley大鼠随机分成4组,假手术组(n=20)、HIBD组(n=25)、病毒缓冲液移植组(Buffer组,n=20),Ad-VEGF移植组(Ad-VEGF组,n=25)。使用Rice法制成HIBD模型,Ad-VEGF移植组和Buffer组在HIBD后3d于大鼠左侧感觉运动皮层区分别立体定位注射2 μL重组体腺病毒悬液或病毒缓冲液;移植后7d采用RT-PCR法检测鼠脑VEGF165 mRNA的表达;采用原位缺口末端标记法(TUNEL法)检测鼠脑皮质神经元凋亡情况;采用免疫组织化学法分别检测VEGF蛋白表达及CD34表达计数大脑皮质微血管密度;30日龄时采用放射型迷宫觅水试验进行行为学测试,35日龄采用苏木精-伊红染色观察鼠脑组织病理学。结果Ad-VEGF组VEGF165基因表达较HIBD组及Buffer组明显增高(P<0.05);Ad-VEGF组脑细胞凋亡数目较HIBD组及Buffer组减少(P<0.05);Ad-VEGF组平均大脑皮质微血管数及VEGF蛋白表达较HIBD组及Buffer组明显增多(P<0.05);Ad-VEGF组行为学测试成绩较HIBD组及Buffer组改善(P<0.05);Ad-VEGF组鼠脑皮层神经元变性坏死较HIBD组及Buffer组减轻。结论腺病毒载体介导的VEGF165基因转移可增加新生鼠脑组织VEGF165 mRNA及VEGF蛋白的表达,减少脑细胞凋亡、增加新生脑血管形成,减轻缺氧缺血性脑损伤,改善远期学习记忆功能。 展开更多

关键词 缺氧缺血性脑损伤 血管内皮生长因子 基因转移 新生大鼠

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