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鸡产蛋下降综合征病毒间接免疫荧光检测方法的建立及应用
1
作者
孔冬妮
王嘉
+9 位作者
邓永
翟天舒
刘丹
黄小洁
薛琪
候力丹
吴华伟
薛青红
李俊平
毛娅卿
《动物医学进展》
北大核心
2024年第1期44-51,共8页
为建立检测鸡产蛋下降综合征病毒(EDSV)的间接免疫荧光方法,并对该检测方法的各个步骤进行优化,以鸡产蛋下降综合征病毒多抗血清和FITC标记的兔抗鸡IgG为组合,对一抗和二抗的最适工作浓度和孵育时间进行了优化,对IFA方法进行了敏感性、...
为建立检测鸡产蛋下降综合征病毒(EDSV)的间接免疫荧光方法,并对该检测方法的各个步骤进行优化,以鸡产蛋下降综合征病毒多抗血清和FITC标记的兔抗鸡IgG为组合,对一抗和二抗的最适工作浓度和孵育时间进行了优化,对IFA方法进行了敏感性、特异性和重复性试验。结果表明,检测接种EDSV的96孔细胞培养板时,多抗血清的最适工作浓度为1∶320,孵育时间为45 min;FITC标记的兔抗鸡IgG的最适工作浓度为1∶200,孵育时间为30 min;病毒敏感性试验表明,该方法可以检测到10-2 TCID 50/mL的病毒;多抗血清敏感度试验表明,当多抗血清稀释到1∶1280时仍可见较明显的特异性荧光;特异性试验表明,该方法只针对EDSV,而不与禽副流感病毒4型、鸡新城疫病毒等其他病原反应;批内重复性试验和批间重复性试验结果表明,该方法具有较好的重复性和可靠性。结果表明,建立的间接免疫荧光方法具有较高的灵敏度和较好的稳定性,可为我国禽源性生物材料EDSV的检测提供技术支持,有巨大的市场需求。
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关键词
鸡产蛋下降综合征病毒
多抗血清
间接免疫荧光
优化
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职称材料
题名
鸡产蛋下降综合征病毒间接免疫荧光检测方法的建立及应用
1
作者
孔冬妮
王嘉
邓永
翟天舒
刘丹
黄小洁
薛琪
候力丹
吴华伟
薛青红
李俊平
毛娅卿
机构
中国兽医药品监察所
出处
《动物医学进展》
北大核心
2024年第1期44-51,共8页
基金
中国兽医药品监察所公益项目(GY202105)。
文摘
为建立检测鸡产蛋下降综合征病毒(EDSV)的间接免疫荧光方法,并对该检测方法的各个步骤进行优化,以鸡产蛋下降综合征病毒多抗血清和FITC标记的兔抗鸡IgG为组合,对一抗和二抗的最适工作浓度和孵育时间进行了优化,对IFA方法进行了敏感性、特异性和重复性试验。结果表明,检测接种EDSV的96孔细胞培养板时,多抗血清的最适工作浓度为1∶320,孵育时间为45 min;FITC标记的兔抗鸡IgG的最适工作浓度为1∶200,孵育时间为30 min;病毒敏感性试验表明,该方法可以检测到10-2 TCID 50/mL的病毒;多抗血清敏感度试验表明,当多抗血清稀释到1∶1280时仍可见较明显的特异性荧光;特异性试验表明,该方法只针对EDSV,而不与禽副流感病毒4型、鸡新城疫病毒等其他病原反应;批内重复性试验和批间重复性试验结果表明,该方法具有较好的重复性和可靠性。结果表明,建立的间接免疫荧光方法具有较高的灵敏度和较好的稳定性,可为我国禽源性生物材料EDSV的检测提供技术支持,有巨大的市场需求。
关键词
鸡产蛋下降综合征病毒
多抗血清
间接免疫荧光
优化
Keywords
EDSV
polyclonal antiserum
indirect IFA
optimization
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
S858.31 [农业科学—临床兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸡产蛋下降综合征病毒间接免疫荧光检测方法的建立及应用
孔冬妮
王嘉
邓永
翟天舒
刘丹
黄小洁
薛琪
候力丹
吴华伟
薛青红
李俊平
毛娅卿
《动物医学进展》
北大核心
2024
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