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乙型链球菌抗癌剂研究及使用现状 被引量:2
1
作者 全家妩 李斯勤 《医药导报》 CAS 1996年第4期182-185,共4页
以OK-432为例对乙型链球菌抗癌剂的制备、药理学研究、抗肿瘤机制、临床使用情况及其不良反应等作了简要的综述。
关键词 乙型链球菌 OK-432 肿瘤 临床应用
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几种呼吸道合胞病毒检测方法的比较 被引量:4
2
作者 陈晓琦 徐葛林 全家妩 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期292-293,300,共3页
目的比较不同从临床样本中快速、敏感特异的检测呼吸道合胞病毒(RSV)的方法,以便早期诊断RSV感染。方法应用不同方法对45例急性下呼吸道感染患儿鼻咽分泌物RSV进行检测,包括病毒分离、直接涂片间接免疫荧光法(IFA)、快速细胞培养法、双... 目的比较不同从临床样本中快速、敏感特异的检测呼吸道合胞病毒(RSV)的方法,以便早期诊断RSV感染。方法应用不同方法对45例急性下呼吸道感染患儿鼻咽分泌物RSV进行检测,包括病毒分离、直接涂片间接免疫荧光法(IFA)、快速细胞培养法、双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)及链亲和素-生物素法(LSAB)。结果鼻咽分泌物45例中,病毒分离阳性12例(26.7%),直接涂片间接免疫荧光法检测出阳性14例(31.1%),快速细胞培养法阳性20例(44.4%)。双抗体夹心ELISA及LSAB法均仅检出4例阳性,阳性率均为8.9%。结论将直接涂片间接免疫荧光法与快速细胞培养法同时应用于RSV感染的早期诊断,既能及时提供检测结果,又能提高诊断的敏感性,是最适合于RSV感染早期诊断的方法。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 感染 早期诊断 间接免疫荧光法 酶联免疫吸附试验
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人TRAIL细胞外段基因在大肠杆菌中的表达及其包涵体的复性 被引量:3
3
作者 田生和 全家妩 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期114-116,共3页
目的 在大肠杆菌中表达人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞外段 (sTRAIL)基因 ,并研究其包涵体的复性。方法 应用RT- PCR法从正常人外周血单核细胞中获得sTRAIL的编码基因 ,将其克隆到原核表达载体pBV2 2 0 ,于大肠杆菌DH5α中通过... 目的 在大肠杆菌中表达人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞外段 (sTRAIL)基因 ,并研究其包涵体的复性。方法 应用RT- PCR法从正常人外周血单核细胞中获得sTRAIL的编码基因 ,将其克隆到原核表达载体pBV2 2 0 ,于大肠杆菌DH5α中通过温控诱导表达 ;将包涵体进行变性和复性处理后 ,采用离子交换层析纯化表达产物 ,并经Dotblot及MTT试验鉴定。结果 通过温度诱导 ,目的基因主要以包涵体形式高效表达 ,包涵体蛋白经梯度透析法复性可获得具有抗肿瘤活性的重组人sTRAIL。结论 已获得大量纯化重组人sTRAIL ,为开发新型抗肿瘤制剂奠定基础。 展开更多
关键词 TRAIL 包涵体 复性 高效表达 细胞外 目的基因 大肠杆菌 诱导表达 纯化 离子交换层析
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呼吸道合胞病毒单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:2
4
作者 陈晓琦 徐葛林 +1 位作者 王继麟 全家妩 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1015-1018,共4页
目的:建立能稳定分泌抗呼吸道合胞病毒(RSV-long株,国际标准株)单克隆抗体的杂交瘤细胞株。方法:杂交瘤技术制备单抗,鉴定各项特性。结果:培育出稳定分泌抗RSV蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞5株。杂交瘤细胞株染色体数目在89~104条之间... 目的:建立能稳定分泌抗呼吸道合胞病毒(RSV-long株,国际标准株)单克隆抗体的杂交瘤细胞株。方法:杂交瘤技术制备单抗,鉴定各项特性。结果:培育出稳定分泌抗RSV蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞5株。杂交瘤细胞株染色体数目在89~104条之间,其分泌的抗体分别属于鼠IgG1、IgG2a、IgG2b亚类,各种腹水单抗的荧光效价在1∶4000~1∶16000之间。一种单抗识别RSV基质蛋白(M),两种单抗识别RSV融合蛋白(F),另两种单抗识别RSV核衣壳蛋白(N)。单抗中和效价最高达1∶64。相加指数证实5种单抗识别不相关的抗原表位。用硫氰酸铵洗脱法比较了五种单抗相对亲和力的大小,依次为:1#>2#>4#>3#>5#。所有杂交瘤细胞株,经连续3个月培养及冻存半年后复苏,细胞生长良好,检测上清,其分泌抗体效价稳定。结论:已获得抗呼吸道合胞病毒的单克隆抗体,为RSV感染的早期诊断及进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 单克隆抗体 杂炎瘤细胞株
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反义c-myc基因质粒对鼠脑胶质瘤细胞C6生长的影响 被引量:2
5
作者 朱俊铭 全家妩 陈伟 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2000年第1期6-8,共3页
目的探讨反义c-myc基因质粒对鼠脑胶质瘤细胞C6增殖及凋亡的作用。方法将可在真核细 胞表达大鼠反义 c-myc基因的质粒 pCEP4ASCMR以脂质体 FuGENE6为介导,转染到大鼠脑恶性胶质瘤细胞 C6株 中,经MT... 目的探讨反义c-myc基因质粒对鼠脑胶质瘤细胞C6增殖及凋亡的作用。方法将可在真核细 胞表达大鼠反义 c-myc基因的质粒 pCEP4ASCMR以脂质体 FuGENE6为介导,转染到大鼠脑恶性胶质瘤细胞 C6株 中,经MTT检测,软琼脂集落生长,吖啶橙染色,琼脂糖电泳等方法分析实验结果。结果反义c-myc基因质粒 DNA具有抑制瘤细胞增殖的作用,并能引起瘤细胞凋亡;脂质体FuGENE6有助于提高质粒DNA的转染效率。结论 反义c-myc基因质粒可抑制c-myc基因的过度表达,促使肿瘤细胞凋亡,达到治疗脑神经胶质细胞瘤的目的。 展开更多
关键词 反义C-MYC 脑胶质瘤 脂质体 凋亡
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维持液中小牛血清浓度对LDH法检测NK活性的影响 被引量:4
6
作者 汪翠玲 全家妩 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期190-193,共4页
本文对含不同浓度小牛血清(FCS)维持液中靶细胞的自然释放、最大释放及效应细胞释放进行检测,结果表明:效应细胞自然释放随FCS浓度增加而增加显著,当FCS为20%时,其释放接近甚至超过最大释放;FCS低于5%时,其释... 本文对含不同浓度小牛血清(FCS)维持液中靶细胞的自然释放、最大释放及效应细胞释放进行检测,结果表明:效应细胞自然释放随FCS浓度增加而增加显著,当FCS为20%时,其释放接近甚至超过最大释放;FCS低于5%时,其释放趋于稳定。由结果看,无FCS时,各项释放最稳定,但经相关性试验检测,无FCS维持液检测结果与含FCS的维持液检测结果不相关。 展开更多
关键词 靶细胞 效应细胞 LDH 细胞毒试验 自然杀伤细胞
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人肺癌细胞转染野生型P^(53)基因对生长的影响 被引量:3
7
作者 赖祥进 吴克 全家妩 《广西医科大学学报》 CAS 2000年第2期200-202,共3页
研究转染野生型 P5 3基因对人肺癌细胞的生长影响作用。方法 :将带有野生型 P5 3基因的 p CEP4质粒 ,通过 L ipo-fectin转染肺癌细胞 ,用四甲基偶氮唑 (MTT)法观察细胞的生长情况。结果 :转染野生型 P5 3 基因 ,可使肺腺癌、肺鳞癌和小... 研究转染野生型 P5 3基因对人肺癌细胞的生长影响作用。方法 :将带有野生型 P5 3基因的 p CEP4质粒 ,通过 L ipo-fectin转染肺癌细胞 ,用四甲基偶氮唑 (MTT)法观察细胞的生长情况。结果 :转染野生型 P5 3 基因 ,可使肺腺癌、肺鳞癌和小细胞肺癌细胞的生长明显受到抑制。结论 :野生型 P5 3基因有效抑制肺癌细胞的生长 ,可作为肺癌基因治疗的一种手段。 展开更多
关键词 肺肿瘤 野生型P53基因 基因转染 细胞凋亡
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武汉地区呼吸道合胞病毒分离株的G蛋白基因遗传特征 被引量:1
8
作者 陈晓琦 徐葛林 全家妩 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第6期460-462,470,共4页
目的分析武汉地区人呼吸道合胞病毒(RSV)分离株的G蛋白基因的遗传特征。方法使用不同的特异性引物,对武汉地区2006年分离的9株RSV进行G基因3′末端第2个高变区的序列测定,并进行基因分型和基因亲缘关系分析。结果分离的9株RSV中,33.3%(3... 目的分析武汉地区人呼吸道合胞病毒(RSV)分离株的G蛋白基因的遗传特征。方法使用不同的特异性引物,对武汉地区2006年分离的9株RSV进行G基因3′末端第2个高变区的序列测定,并进行基因分型和基因亲缘关系分析。结果分离的9株RSV中,33.3%(3/9)为A亚型,属GA2基因型;66.7%(6/9)为B亚型,其中1株属于BA基因型,5株属于GB8基因型。9株RSVG蛋白与原型株核苷酸同源性为84.5%~99.0%,且与原型株相比,在205~230位氨基酸中有5~8个位点氨基酸变异,还存在糖基化位点的改变。结论2006年初在武汉地区存在着由不同RSV株引起的传播链,A、B亚型共循环,B亚型是优势流行亚型;9株RSVG蛋白与原型比较,存在明显的差异。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 G蛋白 遗传特征 基因型
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NDV CN株对几种人肿瘤细胞的杀伤作用及其机理的分析 被引量:2
9
作者 徐葛林 解付磊 +1 位作者 全家妩 全宁 《中国病毒学》 CSCD 2003年第3期227-231,共5页
本文研究了NDV-CN株对5株不同的人肿瘤细胞的体外杀伤作用。结果表明5株肿瘤细胞对NDV-CN敏感,于感染早期出现细胞收缩变圆,失去贴壁性,感染第5天时细胞存活率低于10%。其中尤以HEP3B细胞最敏感。但NDV-CN株对人二倍体细胞2BS有弱杀伤... 本文研究了NDV-CN株对5株不同的人肿瘤细胞的体外杀伤作用。结果表明5株肿瘤细胞对NDV-CN敏感,于感染早期出现细胞收缩变圆,失去贴壁性,感染第5天时细胞存活率低于10%。其中尤以HEP3B细胞最敏感。但NDV-CN株对人二倍体细胞2BS有弱杀伤性。病毒感染早期可检测到感染细胞中有病毒核酸的复制、感染细胞表面有病毒蛋白的表达,胞浆内有病毒粒子存在。NDV-CN株主要诱导HEP3B及T24细胞产生凋亡,主要诱导Hep2、Hela及A549细胞产生坏死。 展开更多
关键词 NDV CN株 肿瘤细胞 杀伤作用 杀伤机理 新城疫病毒
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快速细胞培养法在呼吸道合胞病毒感染早期诊断中的应用 被引量:1
10
作者 陈晓琦 徐葛林 全家妩 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期289-291,共3页
目的建立检测呼吸道合胞病毒(RSV)的快速细胞培养法,并应用于呼吸道合胞病毒感染的早期诊断。方法采用自制的抗RSV的单克隆抗体,经快速细胞培养法和直接涂片法检测165份急性下呼吸道感染的婴幼儿鼻咽分泌物及咽拭子中RSV,并与病毒分离... 目的建立检测呼吸道合胞病毒(RSV)的快速细胞培养法,并应用于呼吸道合胞病毒感染的早期诊断。方法采用自制的抗RSV的单克隆抗体,经快速细胞培养法和直接涂片法检测165份急性下呼吸道感染的婴幼儿鼻咽分泌物及咽拭子中RSV,并与病毒分离培养比较,再将自制试剂盒与进口呼吸道病毒荧光检测试剂盒检测结果进行比较,探讨其临床实用性。结果57份咽拭标本中,1份快速细胞培养法及直接涂片法检测均为阳性,阳性率1.8%,未分离到病毒。108份鼻咽分泌物中,快速细胞培养法检出21份阳性,阳性率19.4%。直接涂片法检测出14份阳性,阳性率13%,病毒分离培养法检出阳性12份,阳性率11%。快速细胞培养法与其他两种方法相比,阳性检出率差异有显著意义。自制试剂盒与进口试剂盒检出40份鼻咽分泌物标本,阳性率均为35%。结论将直接涂片法与快速细胞培养法同时应用于RSV感染的早期诊断,既能及时提供检测结果,又能提高诊断的敏感性,是对RSV感染进行早期诊断的实用方法。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 早期诊断 快速细胞培养
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BSA系统ELISA检测前列腺特异抗原方法的建立 被引量:3
11
作者 张继成 黄俊 +1 位作者 全家妩 张兴德 《上海医学检验杂志》 2000年第6期366-366,共1页
关键词 前列腺特异抗原 生物素-链霉亲和素系统 前列腺癌 诊断 ELISA
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人白细胞介素-18突变体的虚拟筛选及其活性
12
作者 杨京生 喻刚 +1 位作者 胡勇 全家妩 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第8期641-646,共6页
目的筛选合适的人白细胞介素-18(hIL-18)突变体,并检测其活性。方法运用分子模建工具,模建出IL-18受体及IL-18/IL-18R复合物的分子结构,分别虚拟突变IL-18的4个半胱氨酸为另外19种氨基酸,以野生型IL-18为模板进行同源模建,建立其三维结... 目的筛选合适的人白细胞介素-18(hIL-18)突变体,并检测其活性。方法运用分子模建工具,模建出IL-18受体及IL-18/IL-18R复合物的分子结构,分别虚拟突变IL-18的4个半胱氨酸为另外19种氨基酸,以野生型IL-18为模板进行同源模建,建立其三维结构模型,计算其IL-18/IL-18R复合物三维结构及分子间作用能变化情况,筛选几种突变方案。运用分子生物学技术构建突变体,表达纯化后进行活性检测。结果根据理论预测情况,筛选了12株突变体。突变的质粒经双酶切及测序鉴定,证明构建正确。突变体蛋白以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的30%,纯化后纯度大于90%。纯化的C38Glu、C127Ser等几株突变体在低浓度时,活性轻微上升,与理论预测结果基本相同。结论已成功构建了多株IL-18的突变体,运用生物信息学方法进行先期筛选有助于加快IL-18的突变研究。 展开更多
关键词 人白细胞介素-18 突变体 筛选 活性
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细菌内同源重组构建人p21^(WAF1)基因重组腺病毒
13
作者 邹昌勇 杨京生 +1 位作者 全家妩 田生和 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第4期336-339,共4页
目的构建人p21WAF1基因重组腺病毒载体,并在293细胞中包装制备重组腺病毒。方法将人p21WAF1基因亚克隆连接到腺病毒转移质粒pshuttle-cmv,得到阳性重组转移质粒psh-p21。先将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1转化BJ5183菌,筛选得到AdBJ5183菌,再... 目的构建人p21WAF1基因重组腺病毒载体,并在293细胞中包装制备重组腺病毒。方法将人p21WAF1基因亚克隆连接到腺病毒转移质粒pshuttle-cmv,得到阳性重组转移质粒psh-p21。先将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1转化BJ5183菌,筛选得到AdBJ5183菌,再将PmeⅠ线性化的psh-p21转化AdBJ5183菌,经细菌内同源重组法构建重组腺病毒质粒pAdp21。经PacⅠ和BstXⅠ酶切及PCR鉴定,将正确的重组腺病毒质粒pAdp21转染293细胞包装病毒,用RT-PCR和PCR鉴定重组腺病毒及其稳定性。结果所构建的重组腺病毒质粒pAdp21,经PCR鉴定,可扩增出约500bp的片段,与预期大小相符。转染293细胞可包装成p21WAF1基因重组腺病毒,经电镜观察,具有典型的腺病毒特征。结论已成功地构建了重组腺病毒质粒pAdp21,并制备出重组腺病毒rAdp21。 展开更多
关键词 腺病毒 同源重组 P21^WAF1基因
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三种转染试剂对人脑胶质瘤细胞U251的作用
14
作者 陈伟 朱俊铭 全家妩 《医药导报》 CAS 2001年第10期611-612,共2页
目的 :研究转染试剂Lipofectin、DOTAP和FuGENE 6介导反义c myc基因转染人脑胶质瘤细胞U2 5 1的作用。方法 :将可在真核细胞表达人反义c myc基因的质粒pCED4ASCMH分别与转染试剂Lipofectin、DOTAP和FuGENE6结合 ,转染到人脑胶质瘤细胞U2... 目的 :研究转染试剂Lipofectin、DOTAP和FuGENE 6介导反义c myc基因转染人脑胶质瘤细胞U2 5 1的作用。方法 :将可在真核细胞表达人反义c myc基因的质粒pCED4ASCMH分别与转染试剂Lipofectin、DOTAP和FuGENE6结合 ,转染到人脑胶质瘤细胞U2 5 1中 ,转染的第 2 4,48,72和 96小时用MTT比色法检测细胞活性并进行比较。结果 :转染实验组较对照组细胞活性均降低 30 %~ 40 %。结论 :三种转染试剂介导反义c myc基因质粒DNA转染U2 5 1细胞具有抑制细胞增殖、降低细胞活性。 展开更多
关键词 转染试剂 反义C-MYC 脑胶质瘤 DNA 细胞凋亡 U251
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间歇投料控制pH在康赛宁链球菌发酵中的应用
15
作者 陈伟 解傅磊 +1 位作者 苏晋萍 全家妩 《医药导报》 CAS 1996年第5期283-285,共3页
康赛宁是一种用于肿瘤治疗的生物免疫调节剂,在培养10、14h时分别加入新鲜高pH的培养基,调节pH至6.5左右。此法可提高培养物的产量,且在试生产期间证明,对其活性有所提高。
关键词 康赛宁 链球菌 酸碱度
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抑癌基因CT—GalNAcT转染对结肠癌细胞COLO26的影响
16
作者 朱俊铭 全家妩 +2 位作者 村松知成 北中千史 口野嘉幸 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期151-154,共4页
【摘 要】目的 了解抑癌基因 CT-CalNAcT(N-acetylgalactosamine Transferase)对小鼠结肠癌细胞 COLO26的作用。方法 将抑癌基因 CT-GalNAcT序列构建到带有报道基因 FLAG的质粒上,重组质粒 pFLA-G-GalN-AcTDNA在阳离子脂质体Ef... 【摘 要】目的 了解抑癌基因 CT-CalNAcT(N-acetylgalactosamine Transferase)对小鼠结肠癌细胞 COLO26的作用。方法 将抑癌基因 CT-GalNAcT序列构建到带有报道基因 FLAG的质粒上,重组质粒 pFLA-G-GalN-AcTDNA在阳离子脂质体Effectene介导下转染,并分别与绿色荧光蛋白基因质粒pcDNA3EGEP和潮霉素抗性基因质粒pCEP4转染结肠癌细胞COLO26,观察瘤细胞的生长状况。裂解细胞提取蛋白进行 Western blotting。结果 瘤细胞变圆,粘附性下降,细胞生长受到抑制,死亡细胞增多。与 pcDNA3EGEP、pCEP4共转染及 Western blotting确定 CT-CalNAcT已经转染到COLO26细胞内。结论 抑癌基因CT-GalNAcT对结肠癌细胞具有生长抑制作用。 展开更多
关键词 抑癌基因 CT-GalNAcT 转染 结肠癌细胞
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IL-2单克隆抗体夹心BAS-ELISA测定法的建立及应用
17
作者 邵超鹏 全家妩 《同济医科大学学报》 CSCD 1997年第3期235-236,共2页
关键词 白细胞介素2 单克隆抗体 BAS-ELISA
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免疫调节剂:脂磷壁酸
18
作者 杨志勇 全家妩 《国外医学(预防.诊断.治疗用生物制品分册)》 CAS 1993年第3期107-110,共4页
本文介绍了近年来发现的一类新的具有免疫增强功能的细菌体成份:脂磷壁酸。对其免疫生物学活性、抗肿瘤特性及其机理等进行了较详细的讨论。
关键词 免疫调节剂 脂磷壁酸
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人类小细胞肺癌细胞转染野生型p53基因发生的凋亡 被引量:2
19
作者 吴克 全家妩 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1999年第2期65-68,共4页
为了探索p5 3抑癌基因在临床应用中的潜在价值 ,以带有突变型p5 3基因的人类小细胞肺癌细胞株 (LTEP P)为研究对象 ,开发了一种新型的基因转染方法。将构建有野生型p5 3基因cDNA的质粒与阳离子脂质体和转铁蛋白结合成三元复合物 ,再用于... 为了探索p5 3抑癌基因在临床应用中的潜在价值 ,以带有突变型p5 3基因的人类小细胞肺癌细胞株 (LTEP P)为研究对象 ,开发了一种新型的基因转染方法。将构建有野生型p5 3基因cDNA的质粒与阳离子脂质体和转铁蛋白结合成三元复合物 ,再用于LIEP P细胞的基因转染。通过显微观察、吖啶橙荧光染色、琼脂糖凝胶电泳和切口末端标记试验 ,证实细胞发生了凋亡。表明在体外实验中 ,该三元复合物可有效地转染肿瘤细胞 ,而野生型p5 3基因能够诱导肿瘤细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 P53基因 基因转染 癌细胞凋亡
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p53基因质粒联合反义c-myc基因质粒治疗人膀胱癌作用机理的研究 被引量:2
20
作者 刘缘 丁洪波 全家妩 《江苏预防医学》 CAS 2015年第3期7-11,共5页
目的探索p53基因质粒联合反义c-myc基因质粒治疗人膀胱癌的作用机理。方法将可在真核细胞表达P53蛋白的质粒pCEP4p53和表达反义c-myc基因的质粒pCEP4ASCMH,以转染剂FuGENE6为介导,同时转染到人膀胱癌T24细胞中,经DNA测序、PCR-异双聚体P... 目的探索p53基因质粒联合反义c-myc基因质粒治疗人膀胱癌的作用机理。方法将可在真核细胞表达P53蛋白的质粒pCEP4p53和表达反义c-myc基因的质粒pCEP4ASCMH,以转染剂FuGENE6为介导,同时转染到人膀胱癌T24细胞中,经DNA测序、PCR-异双聚体PAGE电泳、Southern印迹杂交、蛋白质印迹法、ELISA、Caspase-3活性检测等方法分析实验结果。结果 DNA测序结果表明,转染所用的p53基因和反义c-myc基因的序列与文献报道一致,没有突变或失活等异常;PCR-异双聚体PAGE电泳证明T24细胞的p53基因发生了点突变;Southern印迹杂交实验确证p53基因和反义c-myc基因经FuGENE6介导转入靶细胞;蛋白质印迹法方法检测野生型p53基因在靶细胞内表达P53蛋白;ELISA方法检测瘤细胞内c-myc基因表达产物的含量水平下降;Caspase-3活性检测结果表明其活性增加,表现为典型的凋亡特征。结论 p53基因质粒联合反义c-myc基因质粒转染人T24膀胱癌细胞能诱导典型的凋亡,为膀胱癌的基因治疗提供了新途径。 展开更多
关键词 P53基因 反义C-MYC 膀胱癌细胞 凋亡 CASPASE-3
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