期刊文献+
共找到11篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
青鳉nup 58的表达及其在性别分化中的潜在作用 被引量:1
1
作者 李雅园 王光幸 +2 位作者 李新闻 郭振华 关桂君 《广西师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第1期168-179,共12页
核孔复合体是物质穿梭核膜的通道。核孔蛋白能影响核质和胞质间的物质交换,而核质运输具有调控生殖细胞进入雌性或雄性分化途径的能力。性腺体细胞衍生因子(gonadal soma-derived factor,gsdf)能调控青鳉Oryzias latipes雄性生殖细胞,... 核孔复合体是物质穿梭核膜的通道。核孔蛋白能影响核质和胞质间的物质交换,而核质运输具有调控生殖细胞进入雌性或雄性分化途径的能力。性腺体细胞衍生因子(gonadal soma-derived factor,gsdf)能调控青鳉Oryzias latipes雄性生殖细胞,并在有丝分裂最后一轮之前开启或关闭配子发生中起关键作用。通过RT-qPCR实验发现nup 58(nucleoporin 58)在野生型青鳉精巢中的表达高于卵巢。对青鳉性腺转录组数据分析发现,nup 58在gsdf敲除后精巢中的表达会显著升高。免疫荧光实验结果显示,nup 58在配子发生不同阶段的所有生殖细胞中都有表达。我们的研究显示Nup58作为一种核孔蛋白,受gsdf信号的调控,并与雄性生殖细胞的增殖密切相关。由Nup58核孔蛋白协调的核质运输在生殖细胞性别分化中的作用和动态变化值得进一步探讨。 展开更多
关键词 青鳉 性腺 性别分化 转录组
下载PDF
青鳉gsdf调控Igf2bp2/Igf2bp3-m6A阅读器在雌雄生殖细胞的差异表达
2
作者 王光幸 郭振华 +3 位作者 杨继辉 李雅园 李新闻 关桂君 《广西师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第2期183-191,共9页
青鳉gsdf敲除导致生殖细胞异常增殖,产生XY巨大精巢或XY巨大卵巢。正常精巢、卵巢及gsdf缺失型XY巨大精巢或巨大卵巢的mRNA转录组比对分析和qPCR验证结果显示,igf2bp2表达可能受gsdf信号调控。脊椎动物igf2bp2的分子结构高度进化保守,ig... 青鳉gsdf敲除导致生殖细胞异常增殖,产生XY巨大精巢或XY巨大卵巢。正常精巢、卵巢及gsdf缺失型XY巨大精巢或巨大卵巢的mRNA转录组比对分析和qPCR验证结果显示,igf2bp2表达可能受gsdf信号调控。脊椎动物igf2bp2的分子结构高度进化保守,igf2bp2 mRNA在胚胎发育各时期均有表达,在成体精巢表达量最高,提示igf2bp2可能在早期胚胎发育、性别分化及精子生成发育中起重要作用。免疫荧光检测显示XY精巢的抗Igf2bp2免疫反应信号强于XX卵巢、gsdf缺失型XY精巢和XY卵巢。不同于gsdf缺失激活igf2bp3的表达,gsdf缺失反而减弱igf2bp2表达。Gsdf对igf2bp2和igf2bp3的正负调控影响其介导的m6A甲基腺苷修饰,以及其靶向的mRNA转录后修饰和翻译,这一分子调控机制可能在脊椎动物性别分化和精子生成过程中普遍存在。 展开更多
关键词 青鳉 生殖细胞 性别分化 调控 转录生长因子-β
下载PDF
用模式生物青鳉概观硬骨鱼性别决定及性分化研究进展 被引量:10
3
作者 亢逸 关桂君 洪云汉 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期441-454,共14页
鱼类性别决定和性分化呈多元性,既有雌雄同体也有雌雄异体。性腺的雌雄性分化过程受遗传和环境因素(如温度、光照、激素和p H值等)影响,具有可逆可塑性。随着生物技术和基因组学的迅速发展,近年来脊椎动物性别决定和性分化的研究有了重... 鱼类性别决定和性分化呈多元性,既有雌雄同体也有雌雄异体。性腺的雌雄性分化过程受遗传和环境因素(如温度、光照、激素和p H值等)影响,具有可逆可塑性。随着生物技术和基因组学的迅速发展,近年来脊椎动物性别决定和性分化的研究有了重大进展和显著突破。本文通过聚焦青鳉及其他硬骨鱼纲保守存在的dmrt1、gsdf、amh等雄性因子,探讨硬骨鱼普遍存在的雌雄性别可塑可逆信号通路,并介绍了新的基因组编辑和性控育种技术,为单性选育等水产养殖技术的研发提供参考。 展开更多
关键词 青鳉 性别决定 性分化
下载PDF
斑马鱼Tg(Crystal-pro-gsdf-2A-egfp)质粒的构建及验证
4
作者 郭安宁 关桂君 +2 位作者 王映 孙凯庆 陈良标 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期683-689,共7页
为研究性腺体衍生因子基因(gsdf)在斑马鱼Danio rerio精巢发育过程中相关分子调控机制模型,提取了斑马鱼精巢总RNA,逆转录合成c DNA,并以其为模板,用RT-PCR法扩增得到gsdf基因,构建了以小鼠gamma-crystalin启动子启动的斑马鱼gsdf基因... 为研究性腺体衍生因子基因(gsdf)在斑马鱼Danio rerio精巢发育过程中相关分子调控机制模型,提取了斑马鱼精巢总RNA,逆转录合成c DNA,并以其为模板,用RT-PCR法扩增得到gsdf基因,构建了以小鼠gamma-crystalin启动子启动的斑马鱼gsdf基因与增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)融合的荧光素酶报告质粒Tg (Crystal-pro-gsdf-2A-egfp),采用显微注射技术注射该质粒至1细胞期的斑马鱼受精胚胎中。结果表明:在荧光显微镜下观察到19尾能在眼部晶状体中特异表达绿色荧光蛋白基因(gfp)的F0代斑马鱼,将表达了绿色荧光蛋白基因的斑马鱼同野生型(WT)非转基因斑马鱼杂交,最终获得能特异表达绿色荧光蛋白基因的F2代,且gsdf基因能在斑马鱼眼部晶状体中特异表达并稳定遗传。研究表明,在斑马鱼上建立的Tg (Crystal-pro-gsdf-2A-egfp)转基因品系,为研究和观察斑马鱼精巢发育的分子调控机制提供了新的方法。 展开更多
关键词 转基因斑马鱼 性腺体衍生因子基因(gsdf) 精巢发育
下载PDF
42Sp50/eEF1a在正常和gsdf缺失型青鳉性腺中的表达差异
5
作者 武小雯 张新亭 +3 位作者 常宇阳 汪丝雨 陈良标 关桂君 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期49-53,81,共6页
青鳉(Oryzias latipes)性腺体细胞衍生因子gsdf敲除可导致XY雌性化,但Gsdf的生物学作用和靶基因仍不清楚。用Label Free蛋白组学结合MS质谱分析,定量比对正常的XX卵巢、XY精巢及gsdf缺失XY卵巢中的蛋白质表达谱,发现真核翻译延伸因子1(e... 青鳉(Oryzias latipes)性腺体细胞衍生因子gsdf敲除可导致XY雌性化,但Gsdf的生物学作用和靶基因仍不清楚。用Label Free蛋白组学结合MS质谱分析,定量比对正常的XX卵巢、XY精巢及gsdf缺失XY卵巢中的蛋白质表达谱,发现真核翻译延伸因子1(eEF1)的卵巢异构型42Sp50的表达量,在gsdf缺失卵巢中显著升高。通过实时定量PCR扩增,定量分析了42Sp50在正常XX gsdf^(+/+)卵巢、XX和XY型gsdf^(-/-)卵巢中的表达。用抗人EEF1A抗体的免疫荧光技术,鉴定了青鳉eEF1a和/或42Sp50在生殖细胞性分化及性成熟期,gsdf缺失卵巢同正常卵巢对照组的细胞内表达变化,验证了蛋白组学发现的在gsdf^(-/-)卵巢中有大量卵细胞高表达42Sp50。青鳉eEF1a和42Sp50氨基酸序列高度同源,但在氨基酰基结合囊和核糖体结合部位有显著差异,为此推测Gsdf信号可能直接或间接地影响XY生殖细胞表达42Sp50和雌性分化。同时建立了双色细胞荧光免疫技术用于鉴别青鳉XX型和gsdf缺失的XY型卵细胞,为研究脊椎动物配子发生的分子机制提供了新线索。 展开更多
关键词 性腺体细胞衍生因子 真核翻译延伸因子1 42Sp50基因 卵巢发育 青鳉
下载PDF
青鳉脑型芳香化酶 cyp19b 基因的敲除和鉴定
6
作者 常宇阳 武小雯 +1 位作者 郭海燕 关桂君 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期63-67,共5页
芳香化酶是调节雄激素向雌激素合成转换的关键酶。脑型芳香化酶(cyp19b)的表达在成鱼青鳉的脑中呈现显著雌雄性差异,在性腺中微弱表达且无明显性别差异。为探讨cyp19b基因的生理功能,采用CRISPR/Cas9系统靶向敲除cyp19b基因。在青鳉cyp... 芳香化酶是调节雄激素向雌激素合成转换的关键酶。脑型芳香化酶(cyp19b)的表达在成鱼青鳉的脑中呈现显著雌雄性差异,在性腺中微弱表达且无明显性别差异。为探讨cyp19b基因的生理功能,采用CRISPR/Cas9系统靶向敲除cyp19b基因。在青鳉cyp19b基因的第2和第4外显子上分别设计一个靶位点,通过显微注射gRNA和Cas9蛋白到一细胞期的受精卵进行cyp19b双靶点基因敲除。研究结果表明:成功获得两种可遗传的cyp19b突变等位基因型种鱼,并通过杂合子交配、基因组PCR及DNA测序分析,选育得到两种cyp19b敲除突变型纯合子品系。表型观察分析显示,两种突变型纯合子品系均无明显雌雄性偏差,胚胎均可以正常发育,成鱼均可以正常生殖,提示cyp19b基因的缺失可能不直接影响性腺的雌雄性分化。cyp19b基因如何影响性腺分化和发育,有待进一步深入探讨。 展开更多
关键词 青鳉 cyp19b基因 基因敲除 CRISPR/Cas9
下载PDF
青鳉gsdf调控cyp19b介导的脑垂体性腺轴性别分化 被引量:1
7
作者 亢逸 徐疏梅 +2 位作者 张颖庆 陈良标 关桂君 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期4491-4499,共9页
芳香化酶是雄激素转化为雌激素重要的限速酶,在硬骨鱼中有卵巢型(Cyp19a)和脑型芳香化酶(Cyp19b)两种。cyp19a敲除的XX性腺能产生初级卵母细胞,证明生殖细胞早期雌性分化不受cyp19a影响,而cyp19b在性腺分化及发育成熟过程中的生理作用... 芳香化酶是雄激素转化为雌激素重要的限速酶,在硬骨鱼中有卵巢型(Cyp19a)和脑型芳香化酶(Cyp19b)两种。cyp19a敲除的XX性腺能产生初级卵母细胞,证明生殖细胞早期雌性分化不受cyp19a影响,而cyp19b在性腺分化及发育成熟过程中的生理作用尚不清楚。利用免疫组化和实时荧光定量的方法,发现cyp19b在垂体和性腺中都有表达,且伴随着发育,其表达量的差异主要集中在垂体上。雌性垂体的Cyp19b蛋白质水平明显高于雄性垂体,而性腺中的mRNA表达无明显性差。垂体促黄体生成素Lh分泌细胞数量也在性成熟期的雌性中高于雄性。然而gsdf缺失突变体雌性垂体中Cyp19b和Lh表达量均下降,表明gsdf信号可能影响了Cyp19b和Lh的表达,该结果为TGF-β调节垂体性腺轴的发育提供了新的见解。定量PCR结果显示,成熟期正常精巢的lhr(Luteinizing hormone receptor)表达量高于正常XX卵巢和gsdf敲除的XY卵巢。gsdf过表达的XX精巢中cyp9b和lhr的转录水平均明显上升。以上结果揭示gsdf信号可能直接或间接调控cyp19b和lhr在性腺-垂体轴中的表达,进而影响雄激素转化雌激素的合成。gsdf敲除型青鳉,为深入探索性腺-垂体轴cyp19b和lh调控卵细胞的发生发育分子机制,提供了好的研究平台。 展开更多
关键词 cyp19b gsdf 性激素 垂体- 性腺轴 LH
原文传递
青鳉gsdf下游因子zc4h2在脑-性腺中的表达分析 被引量:3
8
作者 郭海燕 李茜 关桂君 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期720-730,共11页
硬骨鱼青鳉(Oryzias latipes)性腺体细胞衍生因子(gonadal soma-derived factor,Gsdf)是转化因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)超家族成员之一,对启动生殖细胞进入雄性分化很重要,但其下游调控机制尚不明确。本研究利用转... 硬骨鱼青鳉(Oryzias latipes)性腺体细胞衍生因子(gonadal soma-derived factor,Gsdf)是转化因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)超家族成员之一,对启动生殖细胞进入雄性分化很重要,但其下游调控机制尚不明确。本研究利用转录组学方法对正常的和Gsdf信号缺失的青鳉性腺RNA转录组表达谱进行比较分析,发现zc4h2(zinc finger C4H2-type containing)在人工合成锌指核酸酶基因编辑法靶向敲除gsdf的纯合子XY型卵巢中的表达量明显高于正常野生型XX型卵巢中的(q<0.05且|FoldChange|>2);RT-qPCR进一步验证了这一显著差异表达的结果。人ZC4H2是X染色体连锁的Wieacker-Wolff综合征致病因子之一。ZC4H2通过结合SMAD3蛋白,进而调控BMP/SMADS信号介导的神经干细胞发育。本研究发现青鳉zc4h2在多个组织中均有表达,且在脑和性腺中的表达呈现雄性高于雌性的性差特征。zc4h2 mRNA表达量在gsdf敲除XY型卵巢中显著高于正常XX型卵巢中的;zc4h2的3′端非翻译区域(3′untranslated region,3′UTR)产物在gsdf敲除型卵巢中高于正常XX型卵巢中的,提示zc4h2的转录表达可能参与性腺和脑的雄性分化和发育过程,而其转录产物的稳定性可能受Gsdf-Smad3信号通路影响。Gsdf-ZC4H2-Smad3因子的氨基酸序列和分子功能结构域在不同物种间高度保守,其介导的脑和性腺性分化的分子调控机制可能具有普遍性,为研究脊椎动物生殖干细胞及神经干细胞性分化和发育的分子机制提供了一个新线索。 展开更多
关键词 zc4h2 性分化 青鳉
原文传递
青鳉(Oryzias latipes)smad3的克隆与表达分析 被引量:2
9
作者 徐疏梅 张颖庆 关桂君 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期599-606,共8页
鱼类性染色体的原始性导致性别决定基因的多样性。高等动物中的单个基因,在鱼类中因为基因组复制而产生多个同源基因,呈遗传多样性。TGF-β家族在硬骨鱼性别决定和性别分化的过程中发挥关键作用。smad3是性腺体细胞衍生因子(gsdf)的下... 鱼类性染色体的原始性导致性别决定基因的多样性。高等动物中的单个基因,在鱼类中因为基因组复制而产生多个同源基因,呈遗传多样性。TGF-β家族在硬骨鱼性别决定和性别分化的过程中发挥关键作用。smad3是性腺体细胞衍生因子(gsdf)的下游基因,可将TGF-β信号从细胞表面传递至细胞核。本研究从青鳉精巢和卵巢组织cDNA中克隆了smad3a、smad3b基因的CDS全长序列。蛋白序列的同源性比对和系统发生分析显示,smad3在高等脊椎动物中只有一种,而在鱼类却有两种。RT和定量PCR分析结果显示,smad3在多组织中普遍表达,在精巢中表达高于卵巢。青鳉smad3a和smad3b的表达同性腺分化紧密关联,提示其在性腺雌雄性分化和发育中可能具有重要作用。 展开更多
关键词 性别分化 SMAD3 青鳉
原文传递
青鳉tsn的克隆与表达分析 被引量:1
10
作者 汪丝雨 郭海燕 +3 位作者 李茜 廖敏 李雅园 关桂君 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期11-18,共8页
有性繁殖的性别决定机制虽具有多样性,但其生殖细胞都经过几轮有丝分裂和增殖后进入减数分裂,最终产生雌性或雄性配子。尽管有丝分裂过程中的生殖细胞在形态上没有雌雄差异,然而,未分化的生殖细胞在有丝分裂过程中如何获得雌雄性别特征... 有性繁殖的性别决定机制虽具有多样性,但其生殖细胞都经过几轮有丝分裂和增殖后进入减数分裂,最终产生雌性或雄性配子。尽管有丝分裂过程中的生殖细胞在形态上没有雌雄差异,然而,未分化的生殖细胞在有丝分裂过程中如何获得雌雄性别特征尚不清楚。青鳉(Oryzias latipes)正常XX卵巢、正常XY精巢以及性腺体细胞衍生因子(gonadal soma-derived factor,gsdf)缺失型(gsdf^(-/-))卵巢的蛋白质组学质谱比对分析结果显示,gsdf^(-/-)XY卵巢中Tsn(Translin)蛋白产物显著高于gsdf^(-/-)XX卵巢,提示Tsn蛋白表达可能受dmy(DM-domain on Y chromosome,又名dmrt1bY)及下游Gsdf雄性信号调控。从青鳉性腺组织的cDNA中克隆了tsn基因的ORF(Open Reading Frame)片段。氨基酸序列的同源性比对分析及系统发育树评估显示,Tsn在脊椎动物物种间具有进化保守性,青鳉和斑马鱼(Danio rerio)的Tsn氨基酸序列高度同源。反转录PCR和实时荧光定量PCR检测结果显示,tsn的mRNA在野生型青鳉多个组织中广泛表达,其中在精巢中的表达量显著高于卵巢。免疫荧光检测发现,gsdf^(-/-)XY卵巢中抗青鳉Tsn抗体阳性反应的囊性生殖细胞异常增多,同蛋白组学分析得到的gsdf^(-/-)XY卵巢中Tsn蛋白表达量高于gsdf^(-/-)XX卵巢的结果相一致。在青鳉性腺分化发育过程中,Gsdf信号可能抑制Tsn阳性的雄性囊性生殖细胞增殖,当该信号被破坏后,这种抑制作用消失,导致Tsn阳性生殖细胞在gsdf^(-/-)XY卵巢中大量积累。青鳉Tsn阳性生殖细胞的囊性增殖,是青鳉有丝分裂期生殖细胞雄性分化的特征之一,为脊椎动物有丝分裂期生殖细胞的雌雄性别鉴定提供了线索。 展开更多
关键词 gsdf tsn 生殖细胞 性别分化 卵巢 青鳉
原文传递
青鳉gsdf调控ddx6介导的卵子发生的潜在机制
11
作者 李茜 王光幸 +1 位作者 李新闻 关桂君 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期2099-2110,共12页
性腺体细胞衍生因子(gonadal soma-derived factor,gsdf)是青鳉(Oryzias latipes)雄性性别分化启动的开关因子之一,敲除gsdf将导致生殖细胞过度增殖以及XY雄鱼性逆转为雌鱼。本研究通过蛋白质组学对比分析青鳉野生型XX卵巢与gsdf缺失型X... 性腺体细胞衍生因子(gonadal soma-derived factor,gsdf)是青鳉(Oryzias latipes)雄性性别分化启动的开关因子之一,敲除gsdf将导致生殖细胞过度增殖以及XY雄鱼性逆转为雌鱼。本研究通过蛋白质组学对比分析青鳉野生型XX卵巢与gsdf缺失型XY卵巢,发现有60个差异表达蛋白(differentially expressed proteins,DEPs)上调,158个DEPs下调。GO(Gene ontology)功能富集到细胞间桥、脂质转运等细胞连接结构和能量代谢通路,KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes)富集到RNA降解等关键信号通路,并发现DEAD-box解旋酶6(DEAD-box helicase 6,DDX6)蛋白表达量在gsdf敲除卵巢中显著升高,其mRNA的表达在转录组学分析中呈现相同增加趋势。各物种DDX6的分子结构具有高度同源性和进化保守性,RT-qPCR显示母源性ddx6 mRNA的表达随着青鳉胚胎的发育而减弱,在成体精巢与卵巢组织中均呈现高表达的特征,说明DDX6在配子发生和性腺分化发育过程中发挥重要作用。根据蛋白互作网络与组学分析结果,推测gsdf通过调控RNA降解(含有ddx6、lsm1等基因)途径抑制生殖细胞增殖,影响P-bodies(Cytoplasmic processing bodies)的组装,从而阻断了生殖细胞雌性分化。而卵黄原蛋白在gsdf缺失卵巢中的表达异常降低,这与敲除后卵母细胞大量停止在卵黄发生前的初级卵母细胞阶段的现象一致,说明gsdf可能通过DDX6介导参与初级卵泡发生和卵母细胞的发育过程。本实验研究结果为脊椎动物生殖细胞性别分化初期的分子机制研究提供了新的见解。 展开更多
关键词 蛋白质组学 gsdf ddx6 性别分化 青鳉
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部