不同硒源对西方蜜蜂蜂王抗氧化、免疫指标及抗氧化、繁殖相关基因表达的影响 被引量：1

1

作者 史文凯 郭冬生 +4 位作者 李震 黎力之 张海波 关玮琨 邹垂彬 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期1139-1148,共10页

本试验旨探究育王期间添加不同硒源(亚硒酸钠、纳米石墨硒和纳米碳粉硒)对西方蜜蜂蜂王抗氧化、免疫指标及抗氧化、繁殖相关基因表达的影响。控制西方蜜蜂蜂王产卵后,幼虫孵化至24 h后移虫育王,将120只蜂王随机分为4组,每组30只王台。... 本试验旨探究育王期间添加不同硒源(亚硒酸钠、纳米石墨硒和纳米碳粉硒)对西方蜜蜂蜂王抗氧化、免疫指标及抗氧化、繁殖相关基因表达的影响。控制西方蜜蜂蜂王产卵后,幼虫孵化至24 h后移虫育王,将120只蜂王随机分为4组,每组30只王台。亚硒酸钠组(SSe组)、纳米石墨硒组(GSSe组)和纳米碳粉硒组(TSSe组)分别添加等量3种不同硒源(硒浓度均为3.2 mg/L),在2、3和4日龄的同一时段,从蜂群中取出3组育王框,分别在王台中人工添加5μL亚硒酸钠溶液、纳米石墨硒溶液和纳米碳粉硒溶液;对照组在王台中人工添加5μL双蒸水。待4组蜂王出房后取全虫测定抗氧化和免疫指标,解剖卵巢测定抗氧化和繁殖相关基因的相对表达量。结果表明:1)各组之间蜂王体重、翅长、体长、胸长和胸宽无显著差异(P>0.05)。2)SSe组的蜂王总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性显著高于其余3组(P<0.05),TSSe组的蜂王总抗氧化能力(T-AOC)显著高于其余3组(P<0.05),SSe组和GSSe组的蜂王酚氧化酶(PO)活性显著高于CON组(P<0.05)。3)SSe组、GSSe组和TSSe组的蜂王卵巢UDP-葡萄糖醛酸基转移酶2A3、UDP-葡萄糖醛酸基转移酶2B18和全反式视黄醇脱氢酶基因相对表达量均显著高于CON组(P<0.05)。4)SSe组的蜂王卵巢苯丙氨酸-4氢化酶基因相对表达量显著高于CON组(P<0.05),TSSe组的蜂王卵巢法尼基二磷酸磷酸酶基因相对表达量显著高于CON组(P<0.05),SSe组、GSSe组和TSSe组的蜂王卵巢法尼苏酸甲酯环氧化物酶基因相对表达量均显著高于CON组(P<0.05)。综上所述,不同硒源可提升蜂王体内抗氧化酶活性及其相关基因的相对表达量,促进蜂王的卵巢发育,提升繁殖能力,并对免疫能力具有一定的促进作用。 展开更多

关键词 硒源 西方蜜蜂 蜂王培育 抗氧化

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大肠杆菌肠毒素基因多重PCR检测方法的建立 被引量：9

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作者 孟相秋 袁超文 +6 位作者 刘文鑫 关玮琨 杜元策 李丹丹 赵姝静 唐杰 师东方 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期6-10,共5页

目的建立一种快速检测大肠杆菌耐热肠毒素(heat-stable enterotoxin,STa,STb)和不耐热肠毒素(heat-labile enterotoxin,LT-Ⅰ,LT-Ⅱ)基因的多重PCR方法。方法参照文献合成四对可扩增产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,... 目的建立一种快速检测大肠杆菌耐热肠毒素(heat-stable enterotoxin,STa,STb)和不耐热肠毒素(heat-labile enterotoxin,LT-Ⅰ,LT-Ⅱ)基因的多重PCR方法。方法参照文献合成四对可扩增产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)耐热肠毒素基因(estA、estB)和不耐热肠毒素基因(elt-Ⅰ、elt-Ⅱ)的特异性引物,通过反应条件的优化,敏感性、特异性试验和临床样品检测,建立检测大肠杆菌肠毒素的多重PCR方法。结果用所建立的多重PCR方法可特异性扩增出estA(229bp)、estB(480bp)、elt-Ⅰ(605bp)和elt-Ⅱ(300bp)基因片段,最低检出量分别为2.55×101 CFU/μL、2×101 CFU/μL、2×101 CFU/μL和2.47×103 CFU/μL。从22株大肠杆菌分离株中检测到estA基因(2/22),elt-Ⅱ基因(3/22),未检测到estB和elt-Ⅰ基因,检测结果与常规PCR检测结果一致。结论建立了检测大肠杆菌肠毒素基因(estA、estB、elt-Ⅰ和elt-Ⅱ)的多重PCR方法,该方法具有良好的特异性和敏感性,能够满足对细菌培养物的检测要求。 展开更多

关键词 产肠毒素大肠杆菌 耐热肠毒素 不耐热肠毒素 多重PCR

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稳定表达犬瘟热病毒细胞受体SLAM的BHK-21/SLAM细胞系的建立 被引量：5

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作者 朱颖 刘文鑫 +6 位作者 赵姝静 李丹丹 冯瑜菲 关玮琨 何丽丽 江馗语 师东方 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期440-443,共4页

为建立稳定表达犬瘟热病毒(CDV)受体,即信号淋巴细胞激活因子(SLAM)的BHK-21细胞系,本研究将重组表达质粒pDisplay-SLAM转染于BHK-21细胞,通过G418压力筛选并结合有限稀释法、免疫荧光、RT-PCR和western blot筛选出稳定表达SLAM的阳性细... 为建立稳定表达犬瘟热病毒(CDV)受体,即信号淋巴细胞激活因子(SLAM)的BHK-21细胞系,本研究将重组表达质粒pDisplay-SLAM转染于BHK-21细胞,通过G418压力筛选并结合有限稀释法、免疫荧光、RT-PCR和western blot筛选出稳定表达SLAM的阳性细胞(BHK-21/SLAM)。病毒感染试验结果显示,CDV在BHK-21细胞中无细胞病变(CPE)产生,而感染BHK-21/SLAM细胞12 h后即可出现CPE;BHK-21/SLAM细胞培养物上清液中的CDV核酸含量于24 h达到最高值(107.9拷贝/μL),明显高于对照组BHK-21细胞培养物上清液中的核酸含量(106.28拷贝/μL)。研究结果表明,与BHK-21细胞相比较,CDV在BHK-21/SLAM细胞中的病毒核酸含量更高,并能够产生明显的CPE。该细胞系的建立在CDV的分离、生物学特性研究和疫苗毒生产等方面具有良好应用前景。 展开更多

关键词 犬瘟热病毒 信号淋巴细胞激活因子 BHK-21细胞系 BHK-21 SLAM细胞系

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牛源产Ⅱ型不耐热肠毒素大肠杆菌的分离鉴定及重组毒素制备 被引量：5

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作者 袁超文 刘文鑫 +5 位作者 关玮琨 孟相秋 唐杰 李星月 赵志腾 师东方 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1336-1341,共6页

产Ⅱ型不耐热肠毒素(LT-Ⅱ)大肠杆菌是一类能引起严重腹泻的人畜共患肠道致病菌。为了解LT-Ⅱ在牛源腹泻性大肠杆菌中的流行情况,本研究对2010-2012年间分离的138株大肠杆菌进行了LT-Ⅱ毒素基因的检测,对分离到的10株LT-Ⅱ阳性大肠杆菌... 产Ⅱ型不耐热肠毒素(LT-Ⅱ)大肠杆菌是一类能引起严重腹泻的人畜共患肠道致病菌。为了解LT-Ⅱ在牛源腹泻性大肠杆菌中的流行情况,本研究对2010-2012年间分离的138株大肠杆菌进行了LT-Ⅱ毒素基因的检测,对分离到的10株LT-Ⅱ阳性大肠杆菌进行了测序及分析。进一步将LT-Ⅱcl毒素基因双顺反子的ORF克隆入pET30a表达载体、转化Rossatta感受态并诱导表达重组LT-Ⅱcl毒素,经Y-1小鼠肾上腺皮质细胞对重组毒素进行了初步的毒性验证。结果显示,所分离的10株LT-Ⅱ阳性大肠杆菌中,有8株表达LT-Ⅱcl毒素,1株表达LT-Ⅱc4毒素,1株表达LT-Ⅱc6毒素。SDS-PAGE和Western Blot结果表明成功地制备出LT-Ⅱcl重组毒素,该重组毒素可以使Y-1小鼠肾上腺皮质细胞发生明显的病变,其细胞最小致死量为17.8 pg。本研究为中国国内首次分离到牛源产LT-Ⅱ型不耐热肠毒素大肠杆菌,为深入研究LT-Ⅱ毒素奠定了基础。 展开更多

关键词 大肠杆菌Ⅱ型不耐热肠毒素 重组毒素 细胞毒性

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东北地区仔猪腹泻大肠杆菌EAST1基因调查 被引量：5

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作者 唐杰 袁超文 +9 位作者 刘文鑫 孟相秋 关玮琨 李星月 赵志腾 王时 葛建松 郭德民 江松泽 师东方 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第1期8-11,共4页

大肠杆菌肠聚集性热稳定肠毒素Ⅰ(EAST1)是近年来备受关注的一种肠毒素。为进一步了解EAST1毒力基因在东北地区仔猪腹泻大肠杆菌中的存在情况,以及EAST1毒力基因与其他毒力基因的存在关系进行研究,试验于2010—2013年从东北地区38个规... 大肠杆菌肠聚集性热稳定肠毒素Ⅰ(EAST1)是近年来备受关注的一种肠毒素。为进一步了解EAST1毒力基因在东北地区仔猪腹泻大肠杆菌中的存在情况,以及EAST1毒力基因与其他毒力基因的存在关系进行研究,试验于2010—2013年从东北地区38个规模化猪场共采集断奶仔猪腹泻粪便样品290份,经染色镜检和生化试验鉴定出362株大肠杆菌,应用PCR检测方法对STa、STb、LTa、LTb、paa、AIDA-I、afa E、irp2和EAST1等毒力基因进行检测。结果表明:有286株大肠杆菌携带毒力基因,其中89株(占31.12%)携带EAST1毒力基因,只含有EAST1毒力基因的有49株(占17.13%),同时携带其他毒力基因的有40株(占13.99%)。EAST1毒力基因可以协同F1菌毛、paa基因频繁交叉出现在同一致病菌中,但这些毒力基因编码的毒素之间是否存在协同致病关系尚需进一步研究。 展开更多

关键词 大肠杆菌仔猪 腹泻 EAST1毒力基因 黏附因子

原文传递

牛磺鹅去氧胆酸对动物免疫的调控作用及其营养调控研究进展 被引量：3

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作者 蒙红 张海波 +5 位作者 幸清凤 郭冬生 关玮琨 黎力之 金恒 陈继发 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期50-56,共7页

牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)作为胆汁酸(BA)活性物质之一,其可通过激活G蛋白偶联受体5(TGR5)/糖皮质激素受体(GR)相关通路降低促炎因子和增加抗炎因子表达量,发挥抗炎作用。TCDCA在肠道菌群作用下解离为鹅去氧胆酸后与法尼醇X受体(FXR)结合,... 牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)作为胆汁酸(BA)活性物质之一,其可通过激活G蛋白偶联受体5(TGR5)/糖皮质激素受体(GR)相关通路降低促炎因子和增加抗炎因子表达量,发挥抗炎作用。TCDCA在肠道菌群作用下解离为鹅去氧胆酸后与法尼醇X受体(FXR)结合,负反馈调节BA合成,减少胆汁淤积,减轻炎症。此外,运用营养手段调控肠肝轴TCDCA含量将改善动物的糖脂代谢、热应激、肝损伤及生长水平。因此,本文重点综述TCDCA作用于TGR5、GR和FXR相关通路对动物免疫的调节机制及其营养调控研究进展,为TCDCA预防和治疗动物疾病提供参考。 展开更多

关键词 牛磺鹅去氧胆酸 G蛋白偶联受体5 糖皮质激素受体 法尼醇X受体 动物免疫

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重组大肠杆菌肠毒素蛋白LTA_(192)-STa_(13)的表达及其诱导小鼠体液免疫的研究 被引量：1

7

作者 杜元策 沙木哈吾.别开 +9 位作者 刘文鑫 关玮琨 孟相秋 韩林林 李金萍 袁超文 唐杰 李星月 赵志腾 师东方 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期304-309,共6页

为研究重组大肠杆菌肠毒素融合蛋白LTA192-STa13的免疫原性,本研究将产肠毒素大肠杆菌(ETEC)elt A和est A基因定点突变后构建融合基因,进行重组蛋白LTAR192G-STaG13Q的表达。利用纯化的重组蛋白和灭活菌液分别免疫小鼠,比较不同抗原诱... 为研究重组大肠杆菌肠毒素融合蛋白LTA192-STa13的免疫原性,本研究将产肠毒素大肠杆菌(ETEC)elt A和est A基因定点突变后构建融合基因,进行重组蛋白LTAR192G-STaG13Q的表达。利用纯化的重组蛋白和灭活菌液分别免疫小鼠,比较不同抗原诱导小鼠体液免疫应答能力,以及体外免疫血清对毒素的中和作用。结果显示,各组免疫小鼠均可以产生高滴度抗LTA和STa抗体,其血清抗体可以通过乳汁传递给新生仔鼠,其中蛋白免疫组血清抗体效价更高。体内外中和试验证明,实验组小鼠三免后的血清能够中和LT和STa毒素对实验鼠的毒性作用,并且能够中和LT对Y-1细胞的毒性作用,蛋白免疫组血清抗体中和效价可达到1∶89.13,明显高于灭活菌免疫组。研究表明,重组蛋白LTA192-STa13对小鼠具有良好的免疫原性,能够诱导免疫鼠产生良好的体液免疫应答,可以作为ETEC亚单位疫苗的候选抗原。 展开更多

关键词 大肠杆菌 肠毒素 重组蛋白 体液免疫

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犬瘟热病毒N基因环介导等温扩增检测方法的建立 被引量：1

8

作者 何丽丽 关玮琨 +5 位作者 江馗语 朱颖 刘文鑫 冯瑜菲 胡文霞 师东方 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期138-141,共4页

为建立犬瘟热病毒(CDV)环介导等温扩增(LAMP)检测方法,本研究根据GenBank中CDVN基因保守序列设计合成了2对LAMP引物,内引物FIP、BIP和外引物F3、B3。以CDVN基因重组质粒(pMD-CDV-N)为模板,经反应条件优化、特异性试验、敏感性试验及临... 为建立犬瘟热病毒(CDV)环介导等温扩增(LAMP)检测方法,本研究根据GenBank中CDVN基因保守序列设计合成了2对LAMP引物,内引物FIP、BIP和外引物F3、B3。以CDVN基因重组质粒(pMD-CDV-N)为模板,经反应条件优化、特异性试验、敏感性试验及临床样品检测。检测结果显示,该方法于61℃水浴60min即可完成反应,最低检出量为70个拷贝,比RT-PCR灵敏10倍。该检测方法仅对CDV产生阳性扩增,而对狂犬病毒,犬细小病毒,犬腺病毒Ⅱ型扩增结果均为阴性。用建立的LAMP方法检测临床样品,检测结果与RT-PCR检测结果一致。本方法简便,特异,有利于CDV的临床检测。 展开更多

关键词 犬瘟热病毒 N基因 环介导等温扩增

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断奶仔猪对毒力基因缺失大肠杆菌的免疫应答

9

作者 胡文霞 冯瑜菲 +3 位作者 何丽丽 关玮琨 江馗语 师东方 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期471-475,共5页

为研究猪水肿病大肠杆菌SLT-Ⅱe编码基因突变菌株作为口服疫苗的免疫效果,本实验用构建的突变菌株(O139/SLT-Ⅱe*/07)口服免疫断奶仔猪后,检测突变菌株在仔猪肠道的定植情况,仔猪血清及粪便中的特异性抗体和细胞因子水平,并进行了免疫... 为研究猪水肿病大肠杆菌SLT-Ⅱe编码基因突变菌株作为口服疫苗的免疫效果,本实验用构建的突变菌株(O139/SLT-Ⅱe*/07)口服免疫断奶仔猪后,检测突变菌株在仔猪肠道的定植情况,仔猪血清及粪便中的特异性抗体和细胞因子水平,并进行了免疫保护效力评价。结果显示,免疫后21 d仍能在实验1组(微胶囊口服免疫)和2组(直接口服免疫)的仔猪粪便中检出突变菌株;从免疫后第7 d、14 d和21 d开始,在实验1组血清样品中可分别检测到抗SLT-ⅡeA蛋白、F18ab菌毛蛋白和O139抗原的IgG抗体(P/N>2);从免疫后第7 d、14 d开始,在粪便中可分别检测到抗SLT-ⅡeA蛋白、SLT-ⅡeB蛋白、O139抗原、F18ab菌毛蛋白的sIgA抗体(P/N>2);免疫仔猪血清中的INF-γ的含量升高;实验2组的血清特异性IgG水平和粪便中sIgA抗体水平比实验1组低;该突变菌株对仔猪具有免疫保护作用。研究结果表明该大肠杆菌基因突变株可作为仔猪水肿病口服疫苗的候选菌株。 展开更多

关键词 猪水肿病 大肠杆菌 基因突变菌株 免疫应答

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亚硒酸钠对意大利蜜蜂蜂王卵巢基因表达的影响

10

作者 史文凯 黎力之 +4 位作者 张海波 何旭江 郭冬生 关玮琨 袁安 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期5974-5982,共9页

本试验旨在利用转录组测序研究饲粮中添加亚硒酸钠对意大利蜜蜂蜂王卵巢基因表达的影响。控制蜂王产卵得到幼虫后进行人工移虫,次日开始每天使用微量进样器为王台中的幼虫分别饲喂5μL的双蒸水作为对照组(CON组)和5μL的3.2 mg/L亚硒酸... 本试验旨在利用转录组测序研究饲粮中添加亚硒酸钠对意大利蜜蜂蜂王卵巢基因表达的影响。控制蜂王产卵得到幼虫后进行人工移虫,次日开始每天使用微量进样器为王台中的幼虫分别饲喂5μL的双蒸水作为对照组(CON组)和5μL的3.2 mg/L亚硒酸钠作为亚硒酸钠组(SS组),连续喂养3 d。蜂王出房后取卵巢组织进行转录组测序。结果表明:1)2组蜂王的基础形态指标及出房率、化蛹率均无显著差异(P>0.05)。2)与CON组相比,SS组有214个差异显著上调基因[log2差异倍数(FC)≥1、P≤0.05],60个差异显著下调基因(log2FC≤-1、P≤0.05)。3)差异表达基因主要与细胞组分和分子功能相关,少部分参与生物代谢过程;差异表达基因富集于视黄醇代谢、苯丙氨酸代谢和氧化磷酸化等14条代谢通路。与CON组相比,SS组差异表达基因gene-CPR1、gene-LOC552689和gene-LOC100576637表达量显著下调(P<0.05),其他差异表达基因表达量均显著上调(P<0.05)。由此可见,饲粮中添加3.2 mg/L亚硒酸钠对意大利蜜蜂蜂王基础形态指标及出房率、化蛹率无显著影响,亚硒酸钠通过影响卵巢组织中gene-LOC100577156、gene-100577725、gene-ATP6、gene-ND1、gene-ND3和gene-ND4等差异表达基因的表达,作用于视黄醇代谢、苯丙氨酸代谢和氧化磷酸化等通路,以此来调控意大利蜜蜂抗氧化能力和机体几丁质更新。 展开更多

关键词 蜂王 亚硒酸钠 卵巢 基因表达

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G蛋白偶联胆汁酸受体1调控机体炎症信号通路的研究进展

11

作者 何孟娟 黎力之 +5 位作者 幸清凤 关玮琨 廖晓鹏 张海波 郭冬生 樊庆灿 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期59-63,69,共6页

G蛋白偶联胆汁酸受体1(GPBAR1)与胆汁酸(BAs)及其衍生物结合后,激活下游通路传导,调控动物的多种代谢过程。GPBAR1通过核转录因子κB(NF-κB)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体信号转导通路,调节动物体... G蛋白偶联胆汁酸受体1(GPBAR1)与胆汁酸(BAs)及其衍生物结合后,激活下游通路传导,调控动物的多种代谢过程。GPBAR1通过核转录因子κB(NF-κB)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体信号转导通路,调节动物体炎症反应。因此,本文重点阐述GPBAR1对动物炎症通路的调控进展,为BAs及其衍生物成为治疗炎症性疾病的潜在药物提供参考。 展开更多

关键词 G蛋白偶联胆汁酸受体1 炎症 核转录因子ΚB 信号转导和转录激活因子3 NOD样受体蛋白3 胆汁酸

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有机溶质转运体α-β在动物胆汁酸代谢中的作用

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作者 尚隆华 黎力之 +5 位作者 幸清凤 关玮琨 廖晓鹏 张海波 郭冬生 彭赟 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期36-40,共5页

有机溶质转运体α-β(OSTα-OSTβ)是影响胆汁酸代谢的关键因子之一,其主要通过转运胆汁酸,活化法尼醇X受体(FXR),激活胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)途径,调控胆汁酸合成量。且OSTα-OSTβ表达缺失时,胆汁酸合成减少,脂质吸收率降低,对胰岛... 有机溶质转运体α-β(OSTα-OSTβ)是影响胆汁酸代谢的关键因子之一,其主要通过转运胆汁酸,活化法尼醇X受体(FXR),激活胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)途径,调控胆汁酸合成量。且OSTα-OSTβ表达缺失时,胆汁酸合成减少,脂质吸收率降低,对胰岛素信号传导的损伤减轻,维持胰岛素敏感性,改善机体健康状况。本文就OSTα-OSTβ对动物胆汁酸的调控作用进行综述,旨在为OSTα-OSTβ在畜牧生产中的应用提供参考。 展开更多

关键词 有机溶质转运体α-β 胆汁酸代谢 法尼醇X受体 胆固醇7Α-羟化酶

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山东省貂源铜绿假单胞菌分离株的血清型和致病性 被引量：5

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作者 赵志腾 江俄尔汗.热斯拜 +4 位作者 陶婧 关玮琨 李星月 李婷婷 师东方 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期38-41,58,共5页

为了解山东省貂源铜绿假单胞菌(PA)的血清型分布,本研究从部分市县采集的山东77份水貂肺脏病料样品中分离PA,并进行生化鉴定、分子生物学鉴定、血清学鉴定、生长曲线测定和半数致死量(LD_(50))测定。结果显示,共分离获得53株PA,分别属... 为了解山东省貂源铜绿假单胞菌(PA)的血清型分布,本研究从部分市县采集的山东77份水貂肺脏病料样品中分离PA,并进行生化鉴定、分子生物学鉴定、血清学鉴定、生长曲线测定和半数致死量(LD_(50))测定。结果显示,共分离获得53株PA,分别属于11个血清型,其中G型27株、B型5株、D型4株。其他血清型分离株较少。其中G、B和D型分离株SD004、SD050、SD052生长性能良好,对小鼠的LD50分别为1.99×10^(10) cfu、2.51×10^(10)cfu、5.62×10^(10)cfu。该研究为水貂出血性肺炎灭活疫苗菌株的选择提供实验依据。 展开更多

关键词 水貂 出血性肺炎 铜绿假单胞菌 血清型 致病性

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大肠杆菌耐热肠毒素基因多拷贝串联表达及其单克隆抗体的制备

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作者 韩林林 阿力马斯别克.哈山 +6 位作者 李金萍 唐杰 刘文鑫 关玮琨 李星月 赵志腾 师东方 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期233-237,共5页

为制备具有免疫原性的重组大肠杆菌耐热肠毒素蛋白(STp)及抗STp特异性单克隆抗体(MAb),本研究将5拷贝estp串联,克隆于p GEX-6p-1中,构建重组表达质粒p GEX-estp5-his,并转化于大肠杆菌中进行重组蛋白STp5-His(r STp5-His)的表达。以r ST... 为制备具有免疫原性的重组大肠杆菌耐热肠毒素蛋白(STp)及抗STp特异性单克隆抗体(MAb),本研究将5拷贝estp串联,克隆于p GEX-6p-1中,构建重组表达质粒p GEX-estp5-his,并转化于大肠杆菌中进行重组蛋白STp5-His(r STp5-His)的表达。以r STp5-His为免疫原,重组蛋白MBP-5STp为检测抗原,制备和筛选阳性杂交瘤细胞株,并采用western blot、阻断ELISA方法对MAb进行鉴定。结果显示,r STp5-His主要以包涵体形式表达,大小约为38 ku,具有良好的免疫原性,以其作为免疫原制备了4株能够识别天然STp的MAb,特异性良好。研究表明,多拷贝基因串联表达可以制备具有免疫原性的重组STp蛋白,所制备的MAb为天然STp和重组STp蛋白检测方法的建立奠定了基础。 展开更多

关键词 大肠杆菌 耐热肠毒素 基因串联体 免疫原性 单克隆抗体

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基于《家畜传染病学》教学改革初探 被引量：3

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作者 关玮琨 祖少坡 +3 位作者 李春林 张海波 郭冬生 黎力之 《江西畜牧兽医杂志》 2020年第5期4-6,共3页

《家畜传染病学》通过研究家畜传染病的发生、发展规律,来预防、控制和消灭家畜传染病。作为兽医专业的核心课程之一,不仅具有自身特点,还涉及十余门兽医专业相关理论课程,是一门与临床结合紧密,强调应用性的课程。随着社会的快速发展... 《家畜传染病学》通过研究家畜传染病的发生、发展规律,来预防、控制和消灭家畜传染病。作为兽医专业的核心课程之一,不仅具有自身特点,还涉及十余门兽医专业相关理论课程,是一门与临床结合紧密,强调应用性的课程。随着社会的快速发展和生态环境的变化,传染病的流行趋势也变的越发复杂,继续沿用传统教学方式很难满足教学上的需求。本研究抓住《家畜传染病学》的课程特点,以提高教学效果为目标,通过改革理论教学手段引入翻转课堂,营造出高质量的课堂教学效果。 展开更多

关键词 家畜传染病学 教学 改革 翻转课堂 学生 学习

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硒和硒蛋白调节动物抗氧化功能及硒在畜牧生产中应用的研究进展 被引量：14

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作者 熊传帅 张海波 +4 位作者 张进明 关玮琨 廖晓鹏 黎力之 郭冬生 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2021年第10期59-64,共6页

谷胱甘肽过氧化物酶1(Glutathione Peroxidase1,GPX1)、硫氧还蛋白还原酶(Thioredoxin Reductase,TrxR)/硫氧还蛋白(Thioredoxin,Trx)是在机体中发挥抗氧化功能的硒蛋白。GPX1可提高动物抗氧化能力,抑制核因子кB(Nuclear Factor Kappa ... 谷胱甘肽过氧化物酶1(Glutathione Peroxidase1,GPX1)、硫氧还蛋白还原酶(Thioredoxin Reductase,TrxR)/硫氧还蛋白(Thioredoxin,Trx)是在机体中发挥抗氧化功能的硒蛋白。GPX1可提高动物抗氧化能力,抑制核因子кB(Nuclear Factor Kappa B,NF-кB)信号通路,减缓细胞氧化损伤,激活核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件通路,提高Trx和TrxR蛋白活性,增强Trx/TrxR系统抗氧化功能,降低促炎因子和活性氧等产生,维持机体氧化还原稳态。因此,本文着重阐述GPX1、Trx与TrxR对动物抗氧化系统的调控作用及硒在畜牧生产中的应用进展,为硒及硒蛋白增强动物抗氧化功能方面的研究及硒在畜牧生产中的应用提供理论参考。 展开更多

关键词 硒 谷胱甘肽过氧化物酶1 硫氧还蛋白 硫氧还蛋白氧化还原酶 抗氧化功能

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肠道微生物及代谢产物对动物肠道免疫的研究进展 被引量：17

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作者 钟奇祺 张海波 +4 位作者 幸清凤 关玮琨 廖晓鹏 黎力之 郭冬生 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2021年第2期28-33,共6页

动物肠道内栖息着大量微生物,肠道微生物及其代谢产物积极参与肠道免疫稳态的建立,对防控肠道疾病具有积极影响,在动物健康中发挥不可或缺的调节作用。本文对肠道微生物及其代谢产物对宿主肠道免疫的影响进行综述,旨在为调控肠道免疫、... 动物肠道内栖息着大量微生物,肠道微生物及其代谢产物积极参与肠道免疫稳态的建立,对防控肠道疾病具有积极影响,在动物健康中发挥不可或缺的调节作用。本文对肠道微生物及其代谢产物对宿主肠道免疫的影响进行综述,旨在为调控肠道免疫、治疗动物疾病及保障机体健康提供思路和参考。 展开更多

关键词 肠道 微生物 代谢产物 肠黏膜免疫

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低聚木糖对动物肠道屏障的影响及其在动物生产中应用的研究进展 被引量：6

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作者 谢芳 张海波 +4 位作者 幸清凤 黎力之 关玮琨 郭冬生 刘小高 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2020年第10期7-12,共6页

低聚木糖(XOS)作为新型绿色饲料添加剂,其主要作用是维持肠道微生态平衡、增强肠道屏障功能及宿主免疫机能,进而提高动物生产性能。本文就XOS的结构和功能、对肠道屏障的影响及其在动物生产方面的应用进行综述,以期为XOS在动物健康养殖... 低聚木糖(XOS)作为新型绿色饲料添加剂,其主要作用是维持肠道微生态平衡、增强肠道屏障功能及宿主免疫机能,进而提高动物生产性能。本文就XOS的结构和功能、对肠道屏障的影响及其在动物生产方面的应用进行综述,以期为XOS在动物健康养殖中的进一步研究及应用提供理论参考。 展开更多

关键词 低聚木糖 动物 肠道屏障 应用

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灵芝多糖的抗氧化作用及其在动物生产中的应用研究进展 被引量：11

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作者 彭聪 黎力之 +5 位作者 张进明 关玮琨 廖晓鹏 黄晓 张海波 郭冬生 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2021年第9期33-38,共6页

灵芝多糖(Ganoderma Lucidum Polysaccharide,GLP)作为灵芝的主要功能物质之一,其通过调控Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1-介导核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件通路,促进抗氧化酶基因表达,清除自由基、活性氧等,提高动物抗氧化功能。因此... 灵芝多糖(Ganoderma Lucidum Polysaccharide,GLP)作为灵芝的主要功能物质之一,其通过调控Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1-介导核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件通路,促进抗氧化酶基因表达,清除自由基、活性氧等,提高动物抗氧化功能。因此,本文重点阐述GLP在机体中的抗氧化作用机制及其在动物生产方面的应用,旨在为改善畜禽健康水平,提高动物生产性能提供理论依据。 展开更多

关键词 灵芝多糖 抗氧化机制 Nrf2/ARE通路 自由基

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过氧化物酶体增殖物激活受体γ调控机体炎症信号通路的研究进展 被引量：6

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作者 李保锋 黎力之 +5 位作者 谢芳 郭冬生 张海波 黄晓 廖晓鹏 关玮琨 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2022年第1期32-37,共6页

过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Peroxisome Proliferators-activated Receptorγ,PPARγ)是调控炎症反应的关键物质之一,其通过减弱核因子Kappa B(Nuclear Factor-kappa B,NF-κB)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal Kinase,JNK)活性... 过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Peroxisome Proliferators-activated Receptorγ,PPARγ)是调控炎症反应的关键物质之一,其通过减弱核因子Kappa B(Nuclear Factor-kappa B,NF-κB)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal Kinase,JNK)活性,降低炎症因子含量从而缓解炎症反应,另一方面PPARγ与腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated Protein Kinase,AMPK)互相抑制,共同维持动物正常机能。本文综述了PPARγ对动物炎症通路的调控作用,为其进一步研究和应用提供参考。 展开更多

关键词 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ NF-кB信号通路 JNK信号通路 AMPK信号通路 炎症

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