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空肠弯曲杆菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立
1
作者 张风荣 冯之航 +4 位作者 王艳 陈翔 王辰 杨新奥 杨金保 《中国动物检疫》 CAS 2023年第3期85-89,共5页
空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)是一种人兽共患病病原菌,给养殖业带来了较大经济损失。为实现对空肠弯曲杆菌的快速检测,针对其MapA基因序列设计特异性引物,优化反应条件和反应体系,建立了空肠弯曲杆菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检... 空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)是一种人兽共患病病原菌,给养殖业带来了较大经济损失。为实现对空肠弯曲杆菌的快速检测,针对其MapA基因序列设计特异性引物,优化反应条件和反应体系,建立了空肠弯曲杆菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性、重复性进行了评估。结果显示:建立的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法具有良好的特异性,仅能特异性扩增出空肠弯曲杆菌,对胎儿空肠杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌无交叉反应;敏感性较强,最低检测限为6.42 copies/μL;以5个稀释度的重组质粒为模板分别进行组内和组间重复性试验,发现组内和组间Ct值变异系数(CV)均小于2.50%,说明该方法具有良好的可重复性。结果表明,本研究建立的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR具有良好的特异性、敏感性及重复性,可用于空肠弯曲杆菌的快速诊断和流行病学调查。 展开更多
关键词 空肠弯曲杆菌 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR 特异性 敏感性 重复性
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欧盟动物进境检疫法规体系概述及启示
2
作者 薛俊欣 乔彩霞 +6 位作者 方海萍 林颖峥 蒋静 冯之航 王艳 李健 季新成 《中国动物检疫》 CAS 2023年第10期52-60,共9页
欧盟在根除动物疫病方面积累了丰富的经验,动物疫病防范制度完善,现有法规体系的动物疫情防控效果理想。欧盟进境动物检疫重视风险分析,对授权进口动物的基本卫生要求普遍较高,对出口欧盟的国家、地区实行清单管理,对主要检疫疫病的最... 欧盟在根除动物疫病方面积累了丰富的经验,动物疫病防范制度完善,现有法规体系的动物疫情防控效果理想。欧盟进境动物检疫重视风险分析,对授权进口动物的基本卫生要求普遍较高,对出口欧盟的国家、地区实行清单管理,对主要检疫疫病的最短无疫时间做了明确规定,动物境外隔离期限较长而境内隔离期限较短。由此建议,我国应强化风险分析在动物进境检疫中的预警作用,在法律层面完善准入清单制度,并对特定疫病做附加规定,依据疫病特点规定出口国最短无疫时间,适当增加境外隔离检疫期限并减少境内隔离检疫期限。本文对于提升和完善我国进境动物检疫工作具有参考意义。 展开更多
关键词 欧盟 进境动物检疫 动物卫生 法规体系
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基于ERA-CRISPR/Cas12a-LFD的犀牛特异性检测技术
3
作者 王瑛 张冲 +4 位作者 蔡一村 王鑫杰 林颖峥 冯之航 潘良文 《野生动物学报》 北大核心 2023年第4期798-806,共9页
野生犀牛(Rhinocerotidae)种群的生存正面临极大威胁,包括栖息地减少、碎片化及偷猎等,在对打击犀牛角等非法贸易的努力中,物种的特异性检测至关重要,为了在现场就可以迅速完成犀牛源性成分鉴定,将酶促重组等温扩增(enzymatic recombina... 野生犀牛(Rhinocerotidae)种群的生存正面临极大威胁,包括栖息地减少、碎片化及偷猎等,在对打击犀牛角等非法贸易的努力中,物种的特异性检测至关重要,为了在现场就可以迅速完成犀牛源性成分鉴定,将酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA)、CRISPR/Cas12a和侧向流试纸条(lateral flow dipstick,LFD)技术相结合,研发了一种适于现场使用的犀牛特异性核酸检测方法。结果表明:该方法只能检测出5种现生犀牛特异性核酸,与其他哺乳动物核酸测试样本没有交叉反应,最低检测下限可达100拷贝/孔,具有较好的特异性和灵敏度。该方法可以在36.5~40.0℃条件下,27~30 min完成特异性识别,无需高规格的实验室环境和精密仪器,从而提供更快、更准确和更灵敏的检测方案。 展开更多
关键词 犀牛源性成分 CRISPR/Cas12a 酶促重组等温扩增 侧向流试纸条
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进境马匹非洲马瘟传入风险分析 被引量：2
4
作者 冯之航 张晓文 +4 位作者 张风荣 郑小龙 朱雅君 刘静远 王艳 《中国动物检疫》 CAS 2022年第4期41-45,共5页
我国已被世界动物卫生组织(OIE)认可为非洲马瘟(African horse sickness,AHS)历史无疫国家。2020年泰国、马来西亚发生的AHS疫情,对我国防范AHS传入带来了极大压力。为有效防止AHS传入,基于OIE风险分析框架,利用OIE风险评估矩阵,从传入... 我国已被世界动物卫生组织(OIE)认可为非洲马瘟(African horse sickness,AHS)历史无疫国家。2020年泰国、马来西亚发生的AHS疫情,对我国防范AHS传入带来了极大压力。为有效防止AHS传入,基于OIE风险分析框架,利用OIE风险评估矩阵,从传入评估、暴露评估和后果评估三个角度,分析进境马匹传入AHS的风险。结果显示:传入评估的生物学因素风险为“高”,国家因素风险为“中”,商品因素风险为“高”,综合传入风险为“中”;暴露评估的生物学因素风险为“高”,国家因素风险为“高”,商品因素风险为“高”,综合暴露风险为“高”;AHS传入将会给我国马属动物相关产业带来不可估量的损失,传入后造成的后果风险为“非常高”。综合传入评估、暴露评估和后果评估三方面风险分析结果,判定AHS随进境马匹传入我国的整体风险为高。建议采取严格产地预检、进口后隔离检疫等风险管理措施,有效控制AHS传入。 展开更多
关键词 非洲马瘟 传入风险 进境马匹
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