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人肠道病毒71型VP0蛋白的原核表达及多克隆抗体制备 被引量:1
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作者 冯嫣芳 刘庆伟 +3 位作者 库志强 闻洁君 单虎 黄忠 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期535-538,共4页
目的:原核表达并纯化人肠道病毒71型(EV71)VP0蛋白,免疫豚鼠制备多克隆抗体,并鉴定其用于EV71检测的反应性和特异性。方法:PCR方法扩增VP0基因,构建原核表达质粒pET-VP0并转化大肠杆菌,诱导表达并纯化VP0重组蛋白,免疫豚鼠制备抗VP0多... 目的:原核表达并纯化人肠道病毒71型(EV71)VP0蛋白,免疫豚鼠制备多克隆抗体,并鉴定其用于EV71检测的反应性和特异性。方法:PCR方法扩增VP0基因,构建原核表达质粒pET-VP0并转化大肠杆菌,诱导表达并纯化VP0重组蛋白,免疫豚鼠制备抗VP0多克隆抗体,ELISA方法检测抗VP0抗体效价,细胞免疫荧光和Western blot方法鉴定抗体特异性。结果:VP0重组蛋白在大肠杆菌BL21中高效表达,制备的抗VP0抗体效价为1∶106。细胞免疫荧光及Western blot检测结果显示,抗VP0多克隆抗体可以识别原核表达及EV71感染细胞中的VP0蛋白。结论:原核表达了EV71的VP0蛋白并制备出抗VP0多克隆抗体,为EV71的临床诊断、疫苗开发和分子病毒学研究提供了新的研究工具和手段。 展开更多
关键词 手足口病 人肠道病毒71型 VPO 多克隆抗体
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Ⅰ群禽腺病毒疫苗研究进展 被引量:13
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作者 楚电峰 刘文亭 +3 位作者 冯嫣芳 薄智勇 刘秋云 刘相娥 《中国家禽》 北大核心 2017年第12期44-47,共4页
近年来,Ⅰ群禽腺病毒在多国引起家禽暴发疫情,主要表现为血清4和8型引起的心包积水-肝炎综合征和鸡包涵体肝炎,3~8周龄肉仔鸡高死亡率给养殖业造成了严重的经济损失。目前,我国国内尚无商品化Ⅰ群禽腺病毒疫苗,国内外有相关疫苗研制的... 近年来,Ⅰ群禽腺病毒在多国引起家禽暴发疫情,主要表现为血清4和8型引起的心包积水-肝炎综合征和鸡包涵体肝炎,3~8周龄肉仔鸡高死亡率给养殖业造成了严重的经济损失。目前,我国国内尚无商品化Ⅰ群禽腺病毒疫苗,国内外有相关疫苗研制的很多报道,如灭活疫苗、减毒活疫苗及新兴起的基因工程疫苗,均能提供不同程度的免疫保护。文章综述了Ⅰ群禽腺病毒疫苗的国内外研究现状,以期为相关疫病的预防提供参考。 展开更多
关键词 Ⅰ群禽腺病毒 肉仔鸡 防控 疫苗
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Ⅰ群禽腺病毒的流行病学和防控研究现状 被引量:14
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作者 楚电峰 刘相娥 +3 位作者 薄智勇 刘秋云 冯嫣芳 刘文亭 《中国动物检疫》 CAS 2017年第5期86-89,共4页
近年来,Ⅰ群禽腺病毒在多国引发疫情,主要引起禽的心包积水-肝炎综合征和鸡包涵体肝炎,给养殖业造成了严重的经济损失。本文介绍了Ⅰ群禽腺病毒的血清型分类和流行病学研究概况,阐述了Ⅰ群禽腺病毒综合防控措施,介绍了灭活疫苗、活疫苗... 近年来,Ⅰ群禽腺病毒在多国引发疫情,主要引起禽的心包积水-肝炎综合征和鸡包涵体肝炎,给养殖业造成了严重的经济损失。本文介绍了Ⅰ群禽腺病毒的血清型分类和流行病学研究概况,阐述了Ⅰ群禽腺病毒综合防控措施,介绍了灭活疫苗、活疫苗和基因工程疫苗的研究进展,以期为该病的防控提供参考。 展开更多
关键词 I群禽腺病毒 心包积水-肝炎综合征 鸡包涵体肝炎 肉仔鸡 防控 疫苗
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禽脑脊髓炎病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用 被引量:3
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作者 薄智勇 楚电峰 +4 位作者 刘秋云 刘文亭 李智超 姚丹 冯嫣芳 《中国家禽》 北大核心 2019年第22期22-25,共4页
利用禽脑脊髓炎病毒(Avian encephalomyelitis virus,AEV)YBF02株VPI基因序列设计一对特异性引物,通过对反应体系条件的确定和阳性质粒标准曲线的建立,建立了用于快速检测AEV含量的SYBR Green I荧光定量RT-PCR。结果显示:该方法能特异... 利用禽脑脊髓炎病毒(Avian encephalomyelitis virus,AEV)YBF02株VPI基因序列设计一对特异性引物,通过对反应体系条件的确定和阳性质粒标准曲线的建立,建立了用于快速检测AEV含量的SYBR Green I荧光定量RT-PCR。结果显示:该方法能特异性地检测AEV YBF02株,且与其他禽类病毒无交叉反应;敏感性试验表明,该方法最低能检出10拷贝的AEV RNA模板,为普通PCR的100倍;使用该方法和鸡胚半数感染量(EID50)法对样品进行检测,二者具有良好的线性关系,且重复性试验的变异系数均小于4%。研究表明,建立的SYBR Green I荧光定量RT-PCR敏感性高、特异性强、重复性好,为AEV含量的快速检测提供了一种新的技术手段。 展开更多
关键词 AEV SYBR Green I荧光定量RT-PCR 病毒含量
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家禽活疫苗中禽白血病病毒污染检测方法比较 被引量:3
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作者 楚电峰 杜元钊 +4 位作者 冯嫣芳 薄智勇 刘秋云 马洪芹 刘相娥 《中国动物检疫》 CAS 2017年第8期108-113,共6页
本研究对家禽活疫苗中禽白血病病毒的不同检测方法进行了对比,通过直接ELISA检测法、RT-PCR法、病毒分离法和SPF鸡抗体检测法,对不同来源的家禽活疫苗进行了禽白血病病毒污染的检测。通过进一步测序验证发现,直接ELISA检测法和RT-PCR检... 本研究对家禽活疫苗中禽白血病病毒的不同检测方法进行了对比,通过直接ELISA检测法、RT-PCR法、病毒分离法和SPF鸡抗体检测法,对不同来源的家禽活疫苗进行了禽白血病病毒污染的检测。通过进一步测序验证发现,直接ELISA检测法和RT-PCR检测法都可出现"假阳性"。试验结果表明,病毒分离法虽然结果准确,但是操作难度大、技术要求高,而SPF鸡抗体检测法既简单、准确,又能确切反映疫苗的纯净性,利于推广应用。 展开更多
关键词 活疫苗 禽白血病病毒 检测方法 SPF鸡抗体检测法
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