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miR-135a-5p靶向抑制Kif3B调控小鼠腭胚突间充质细胞的自噬
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作者 冯文宣 廉舒博 +2 位作者 王哲 陈靖 何苇 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第19期3003-3011,共9页
背景:研究表明,在地塞米松诱导腭裂的小鼠胚胎腭突间充质细胞中miR-135a-5p呈高表达,初级纤毛及其介导的Shh信号通路参与小鼠胚胎腭突间充质细胞的自噬。由此猜测miR-135a-5p可能通过初级纤毛及其介导的Shh信号途径调控小鼠胚胎腭突间... 背景:研究表明,在地塞米松诱导腭裂的小鼠胚胎腭突间充质细胞中miR-135a-5p呈高表达,初级纤毛及其介导的Shh信号通路参与小鼠胚胎腭突间充质细胞的自噬。由此猜测miR-135a-5p可能通过初级纤毛及其介导的Shh信号途径调控小鼠胚胎腭突间充质细胞的自噬。目的:探讨miR-135a-5p对小鼠胚胎腭突间充质细胞自噬的调控作用。方法:体外提取并培养C57BL/6J小鼠胚胎腭突间充质细胞。细胞转染分别设置为:①对照组、miR-135a-5p阴性对照组、miR-135a-5p模拟物组。②NC+miR-NC组、KIF3B过表达组、miR-135a-5p+KIF3B组。qRT-PCR验证miR-135a-5p、KIF3B的转染效率;透射电镜观察各组细胞中自噬小体/自噬溶酶体的数目;免疫荧光技术测定自噬标记物LC3B的荧光表达程度;Western blot检测KIF3B、LC3和P62的蛋白表达。③miR-135a-5p阴性对照组、SAG处理组、SAG+miR-135a-5p组。qRT-PCR检测Shh信号下游关键转录因子Gli3的mRNA表达水平;Western blot检测自噬相关蛋白LC3和P62的蛋白表达。结果与结论:①过表达miR-135a-5p后,细胞内自噬小体/自噬溶酶体数量显著增多(P<0.01);LC3B的荧光密度显著升高(P<0.01),KIF3B、P62的蛋白表达降低(P<0.01),LC3的蛋白表达升高;②过表达KIF3B后,细胞内自噬小体/自噬溶酶体数目明显减少(P<0.01),LC3B的荧光密度降低(P<0.01),P62的蛋白表达升高(P<0.01),LC3的蛋白表达下降(P<0.01);miR-135a-5p靶向抑制KIF3B的表达(P<0.01),并使自噬小体/自噬溶酶体数目、LC3B的荧光强度以及LC3的蛋白表达得到回升(P<0.01),P62的蛋白表达下降(P<0.01);③SAG使Gli3的mRNA表达明显升高(P<0.01),P62的蛋白表达升高(P<0.01),LC3的蛋白表达下降(P<0.01);加入miR-135a-5p后,Gli3的mRNA表达显著下降(P<0.01),P62的蛋白表达下降(P<0.01),LC3的蛋白表达回升(P<0.01);④结果表明:miR-135a-5p靶向抑制KIF3B并且可能通过负向调控Shh信号通路促进小鼠胚胎间充质细胞自噬。 展开更多
关键词 自噬 胚胎腭突间充质细胞 miRNA KIF3B SHH信号通路 腭裂
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半自然热电偶测温法——一种测量摩擦界面温度及其分布的新方法 被引量：8
2
作者 杜随更 段立宇 +2 位作者 吴诗惇 王广泉 冯文宣 《焊接》 北大核心 1996年第7期5-9,20,共6页
将标准热电偶与自然热电偶两种测温方法结合起来,提出了一种能直接测量同种及异种材料摩擦界面温度及其沿径向分布的新方法.通过采用GH2132-NiSi半自然热电偶对φ25mm的GH2132-GH2132及GH2132-42CrMo摩擦焊表面温度实测,表明了半自然热... 将标准热电偶与自然热电偶两种测温方法结合起来,提出了一种能直接测量同种及异种材料摩擦界面温度及其沿径向分布的新方法.通过采用GH2132-NiSi半自然热电偶对φ25mm的GH2132-GH2132及GH2132-42CrMo摩擦焊表面温度实测,表明了半自然热电偶测温方法的实用性. 展开更多
关键词 摩擦焊 半自然热电偶 测温
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以人为本规范管理 张扬个性和谐发展——中学班级管理的规范有序性探索与实践
3
作者 张建国 冯文宣 《职业》 2007年第12期33-34,共2页
　　班级管理工作是老生常谈而又常谈常新的话题,自班级授课制产生以来班级管理工作就应运而生,且随着时代的发展、社会的变迁不断被赋予新的内涵,面对新问题,发展要有新思路,体现与时俱进的精神.……
关键词 探索与实践 班级管理 学生行为规范 班集体 管理班级 以人为本 和谐发展
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