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免疫共沉淀结合质谱分析筛选HMGB4相互作用蛋白 被引量：9
1
作者 王成 赵晓蒙 +4 位作者 帅勇 李晓峰 刘喜枝 张晓婷 周畅 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2012年第2期71-75,共5页
为揭示HMGB4在精子发生过程中所起的作用,采用免疫共沉淀技术富集NTera-2细胞中的HMGB4结合蛋白.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对免疫沉淀复合物进行分离,从胶中切取HMGB4结合蛋白条带,胶内酶解后进行电喷雾串联质谱(LC-ESI-MS/MS)... 为揭示HMGB4在精子发生过程中所起的作用,采用免疫共沉淀技术富集NTera-2细胞中的HMGB4结合蛋白.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对免疫沉淀复合物进行分离,从胶中切取HMGB4结合蛋白条带,胶内酶解后进行电喷雾串联质谱(LC-ESI-MS/MS)分析,得到相应的肽序列标签(peptide sequence tags,PST).通过搜索数据库在NTera-2细胞系中鉴定到5个HMGB4相互作用蛋白,分别是Pdha1、Keratin 6B、Keratin 5、Actb Actin cytoplasmic 1、RPL18.为进一步研究HMGB4在精子发生机制中的生理功能提供了基础. 展开更多
关键词 HMGB4 NTera-2 免疫共沉淀 相互作用蛋白
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阿司匹林诱导人恶性睾丸生殖细胞瘤NTera-2细胞凋亡 被引量：6
2
作者 易朵 李晓峰 +4 位作者 赵晓蒙 王成 张晓婷 刘喜枝 周畅 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期630-636,共7页
阿司匹林,又称乙酰水杨酸,已证实有抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡和抑制血管生成等多种抗癌功能.除已知对环氧合酶COX-2的活性有抑制外,阿司匹林抗癌分子机制尚不十分清楚.已报道阿司匹林可以降低多种癌症发生风险,但应用于人类... 阿司匹林,又称乙酰水杨酸,已证实有抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡和抑制血管生成等多种抗癌功能.除已知对环氧合酶COX-2的活性有抑制外,阿司匹林抗癌分子机制尚不十分清楚.已报道阿司匹林可以降低多种癌症发生风险,但应用于人类睾丸肿瘤治疗的研究报道很少.本文研究了阿司匹林对人恶性睾丸肿瘤NTera-2细胞凋亡的机制.通过MTT方法检测细胞活力,发现阿司匹林以时间和剂量依赖方式抑制NTera-2细胞增殖.不同浓度阿司匹林处理NTera-2细胞后,采用Hoechest 33258染色方法和Annexin V-FITC/PI流式法分别检测NTera-2细胞的形态学变化、凋亡小体形成、细胞凋亡水平;RT-PCR结果显示,NTera-2细胞中Fas和caspase-8的表达以阿司匹林剂量依赖性上升;蛋白印迹结果显示,FasL的蛋白表达水平下降并活化caspase-8、caspase-3蛋白表达,PARP出现剪切体.进一步的实验证明,caspase广谱抑制剂Z-VAD-FMK能够减弱阿司匹林诱导NTera-2细胞凋亡.结果显示,阿司匹林能明显抑制NTera-2细胞活力,并通过激活caspase通路诱导NTera-2细胞的凋亡,为进一步利用阿司匹林治疗人类睾丸肿瘤的研究奠定基础. 展开更多
关键词 阿司匹林 NTera-2细胞 细胞凋亡 胱天蛋白酶
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转录因子OCT-4对靶基因AP-2γ表达调控的研究 被引量：2
3
作者 赵晓蒙 王成 +3 位作者 李晓峰 张晓婷 刘喜枝 周畅 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2013年第1期43-49,共7页
OCT-4和AP-2γ是近年来睾丸生殖细胞瘤诊断过程中研究的热点基因.作为一个在胚胎发育中起着重要作用的转录因子,OCT-4基因在发育的不同时期、不同分化过程中发挥着多种生物学功能,其作用是通过对靶基因的调控来实现的.本研究运用多种软... OCT-4和AP-2γ是近年来睾丸生殖细胞瘤诊断过程中研究的热点基因.作为一个在胚胎发育中起着重要作用的转录因子,OCT-4基因在发育的不同时期、不同分化过程中发挥着多种生物学功能,其作用是通过对靶基因的调控来实现的.本研究运用多种软件分析,发现AP-2γ启动子区域的序列部分有OCT-4的结合位点.利用CHIP-PCR方法鉴定AP-2γ是OCT-4调控的靶基因.应用Luciferase assay、免疫荧光实验、小鼠隐睾模型等实验进行验证,OCT-4基因抑制AP-2γ转录活性和影响其蛋白质水平的表达.这一新发现,有利于从分子水平上研究睾丸生殖细胞瘤的发生机制. 展开更多
关键词 睾丸生殖细胞肿瘤 OCT-4 靶基因 AP-2γ
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塑造种子品牌形象浅议
4
作者 王爱珍 师泓 +2 位作者 姜宏勋 李玲 刘喜枝 《河南农业科学》 CSCD 2000年第10期12-12,共1页
关键词 中国 种子业 品牌战略 种子质量 技术创新
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4UMC-70型残膜回收起茬机的正确使用
5
作者 刘喜枝 《农村牧区机械化》 1999年第4期29-29,共1页
关键词 残膜回收 拖拉机 轴头螺母 粘重土壤 作业质量 入土深度 液压悬挂机构 输送链 作业进度 回头转弯
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术前应用平痛新术后镇痛效果的初步观察
6
作者 黄国建 曹定睿 +1 位作者 刘喜枝 李晓霖 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 1999年第2期111-111,共1页
平痛新是比鸦片类镇痛药副作用少的非鸦片类镇痛药［１］。我们在手术前试用了平痛新，现将其术后镇痛效果报告如下。资料与方法一般资料先天性脊柱侧弯ＣＤ棒内固定矫形术患者３０例。ＡＳＡⅠ～Ⅱ级，男１７例，女１３例，年龄９～... 平痛新是比鸦片类镇痛药副作用少的非鸦片类镇痛药［１］。我们在手术前试用了平痛新，现将其术后镇痛效果报告如下。资料与方法一般资料先天性脊柱侧弯ＣＤ棒内固定矫形术患者３０例。ＡＳＡⅠ～Ⅱ级，男１７例，女１３例，年龄９～２５岁，体重２１～２６ｋｇ，手术切... 展开更多
关键词 手术后 镇痛 平痛新
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2MBS—1型犁用马铃薯播种施肥联合作业机的推广
7
作者 刘喜枝 《农村牧区机械化》 2002年第1期28-28,共1页
关键词 犁用马铃薯播种施肥联合作业机 2MBS-1 推广
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机械宽垄种植马铃薯技术多点试验研究
8
作者 刘喜枝 《内蒙古科技与经济》 2000年第3期74-74,共1页
关键词 马铃薯 种植技术 机械宽垄种植
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