猪急性腹泻综合征冠状病毒S蛋白多克隆抗体的制备及在检测该病毒感染中的应用 被引量：1

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作者 刘大凯 韩郁茹 +8 位作者 张记宇 张燎原 冯廷帅 杨小曼 曾苗苗 时洪艳 秦毅斌 石达 冯力 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期499-504,共6页

为制备猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)纤突蛋白(S)的多克隆抗体(PAb),本研究经PCR扩增SADS-Co V S蛋白S1亚基C端结构域(S1-CTD)基因片段(384 bp),并将其克隆至原核表达载体p GEX-6p-1中,构建重组质粒p GEX-6p-1-S1-CTD,经双酶切和... 为制备猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)纤突蛋白(S)的多克隆抗体(PAb),本研究经PCR扩增SADS-Co V S蛋白S1亚基C端结构域(S1-CTD)基因片段(384 bp),并将其克隆至原核表达载体p GEX-6p-1中,构建重组质粒p GEX-6p-1-S1-CTD,经双酶切和测序鉴定正确后,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,利用IPTG诱导表达,通过western blot鉴定重组S1-CTD蛋白(rS1-CTD)的表达及反应原性。结果显示,r S1-CTD以包涵体的形式表达,在40 ku处出现特异性条带。诱导表达后的r S1-CTD经不同浓度尿素重悬并超声离心,SDS-PAGE检测后切胶纯化,得到纯化的重组蛋白。利用BCA试剂盒测得蛋白的浓度为33μg/m L。将该重组蛋白乳化后经3次免疫新西兰大白兔,并在3免一周后采血,分离血清获得S1-CTD蛋白PAb。将SADS-Co V感染Vero E6细胞24 h后,以获得的兔PAb为一抗,分别采用western blot和间接免疫荧光试验(IFA)检测该PAb的反应原性。Western blot结果显示,在约250 ku处出现特异性条带,而阴性对照组无该条带;IFA结果显示,SADS-Co V感染的细胞中出现绿色荧光,而阴性对照细胞无绿色荧光。将SADS-Co V感染仔猪的回肠组织制备病理切片,以制备的PAb为一抗,通过免疫组织化学(IHC)检测SADS-Co V的抗原。结果显示,该组织切片中出现棕色阳性信号,而阴性对照仔猪回肠组织切片则无该棕色信号。表明该PAb可与感染SADS-Co V的仔猪回肠组织中的相应抗原发生特异性免疫反应。综上所述,本实验制备的S1-CTD蛋白PAb具有良好的反应原性和免疫原性,可以用于western blot、IFA、IHC检测体内外SADS-Co V的感染,为后续SADS-Co V检测方法的建立及S蛋白生物学功能的研究奠定基础。 展开更多

关键词 猪急性腹泻综合征冠状病毒 S蛋白 原核表达 多克隆抗体 初步应用

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猪急性腹泻综合征冠状病毒诱导细胞自噬并增强病毒复制的研究 被引量：3

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作者 曾苗苗 刘大凯 +8 位作者 张记宇 张燎原 冯廷帅 杨小曼 时洪艳 张鑫 陈建飞 石达 冯力 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期61-69,共9页

为研究猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)感染细胞是否诱导自噬及自噬对病毒复制的影响,本研究将SADS-CoV(MOI 0.1)接种Vero E6细胞培养36 h后,经透射电子显微镜观察可见,SADS-CoV感染的细胞中出现了包裹胞浆的自噬体样双层膜结构,证... 为研究猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)感染细胞是否诱导自噬及自噬对病毒复制的影响,本研究将SADS-CoV(MOI 0.1)接种Vero E6细胞培养36 h后,经透射电子显微镜观察可见,SADS-CoV感染的细胞中出现了包裹胞浆的自噬体样双层膜结构,证实SADS-CoV可以诱导Vero E6细胞发生自噬。构建pEGFP-LC3的真核表达质粒并经双酶切及测序鉴定正确后转染Vero E6细胞,24 h后以SADS-CoV感染,24 h后经激光共聚焦显微镜观察可见,与阴性对照组细胞相比,感染SADS-CoV的细胞出现绿色荧光的点状聚集。进一步将SADS-CoV(MOI 0.1)感染Vero E6细胞不同时间后通过western blot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和p62表达水平的变化,结果显示,与阴性对照组相比,SADS-CoV感染组LC3-Ⅱ的表达水平升高,LC3-Ⅱ/GAPDH比值呈上升趋势,而p62蛋白表达水平则显著降低(P<0.05),表明SADS-CoV感染能够诱导Vero E6细胞产生完整的自噬应答。为了探究自噬对病毒复制的影响,本研究分别采用自噬抑制剂3-MA和自噬诱导剂Rapamycin处理Vero E6细胞后以SADS-CoV感染,于感染后不同时间收获细胞,通过western blot和病毒滴度(TCID_(50))测定检测SADS-CoV N蛋白表达水平的变化。结果显示,与仅感染病毒的对照组相比,采用3-MA处理Vero E6细胞后SADS-CoV N蛋白的表达水平及TCID_(50)均显著降低(P<0.05),而采用Rapamycin处理后SADS-CoV N蛋白的表达水平及TCID_(50)则均显著升高(P<0.05)。针对ATG5基因设计3条特异性的ATG5 si RNA(siATG5-1/2/3),将干扰效率较好的siATG5-1转染Vero E6细胞后再以SADS-CoV感染,24 h后检测病毒滴度并利用western blot检测SADS-CoV N蛋白表达水平的变化。结果显示,与未转染siATG5的3组阴性细胞相比,转染细胞中SADS-CoV N蛋白的表达水平及病毒滴度均显著降低(P<0.05)。本研究首次表明SADS-CoV感染可以诱导宿主细胞自噬并促进病毒的复制,该结果为深入研究SADS-CoV感染与其致病机理以及防控该病毒的感染奠定了基础。 展开更多

关键词 猪急性腹泻综合征冠状病毒 自噬 病毒复制 LC3-Ⅱ

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半月板成形术联合中药治疗单纯半月板损伤的临床观察

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作者 李安石 齐志明 +2 位作者 李志君 刘挺 刘大凯 《中国中医急症》 2023年第6期1072-1075,共4页

目的 观察关节镜半月板成形术后应用中药汤剂治疗半月板损伤的疗效并探讨其作用机制。方法120例患者按照随机数字表法分为观察组与对照组各60例。两组均实施关节镜半月板成形术,术后常规处理,观察组术后给予中药汤剂连续治疗2周。比较... 目的 观察关节镜半月板成形术后应用中药汤剂治疗半月板损伤的疗效并探讨其作用机制。方法120例患者按照随机数字表法分为观察组与对照组各60例。两组均实施关节镜半月板成形术,术后常规处理,观察组术后给予中药汤剂连续治疗2周。比较两组的临床效果,膝关节功能恢复指标[视觉模拟量表(VAS)评分、关节活动度、Lysholm评分、日本骨科协会量表(JOA)评分]、关节液细胞因子水平白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮、透明质酸及不良反应。结果 两组患者均至少随访2周,无失访病例。观察组总有效率为95.00%,高于对照组的81.67%(P <0.05)。两组术后2周VAS疼痛评分较术前降低,且观察组低于对照组(均P <0.05);两组术后2周膝关节活动度、Lysholm膝关节评分、膝关节JOA评分均较术前增高,且观察组高于对照组(均P <0.05)。两组术后2周关节液IL-6、TNF-α、一氧化氮水平较术前降低,且观察组低于对照组(P <0.05);而关节液透明质酸水平较术前增高,观察组高于对照组(均P <0.05)。两组患者的手术切口均为I期愈合并拆线,治疗期间未发生严重不良反应;血尿常规、心电图、肝肾功均无异常。结论关节镜半月板成形术后应用中药汤剂治疗半月板损伤的疗效显著,能有效缓解疼痛,促进膝关节功能恢复,改善关节液细胞因子水平,安全性高。 展开更多

关键词 半月板损伤 关节镜半月板成形术 中药汤剂 膝关节功能 细胞因子

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猪急性腹泻综合征冠状病毒S1蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立

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作者 杨小曼 时洪艳 +8 位作者 张燎原 张鑫 张记宇 刘大凯 冯廷帅 曾苗苗 陈建飞 石达 冯力 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期608-613,共6页

为建立猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)S1蛋白抗体的间接ELISA检测方法,本研究通过构建重组真核分泌型表达质粒p CAGGS-S1-His并转染HEK293F悬浮细胞进行可溶性表达S1蛋白。转染重组质粒5 d后的细胞上清利用HisTrapTMExcel亲和层析... 为建立猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)S1蛋白抗体的间接ELISA检测方法,本研究通过构建重组真核分泌型表达质粒p CAGGS-S1-His并转染HEK293F悬浮细胞进行可溶性表达S1蛋白。转染重组质粒5 d后的细胞上清利用HisTrapTMExcel亲和层析柱纯化,浓缩后的蛋白经SDS-PAGE、western blot鉴定显示获得了分子量约为130 ku且大于理论大小的重组S1蛋白,表明该蛋白为分泌表达且具有良好的翻译后修饰。利用获得的重组S1蛋白作为包被抗原,通过优化反应条件,初步建立了SADS-CoV S1蛋白抗体的间接ELISA检测方法。该方法与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪圆环病毒2型(PCV2)阳性血清均无交叉反应,仅与SADS-CoV阳性血清反应,表明该方法特异性较强;该方法检测SADS-CoV阳性血清,当稀释至1:3 200时仍为阳性,表明该方法具有较高的敏感性;对4份阳性血清的批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,表明该方法具有良好的重复性和稳定性;利用该方法和间接免疫荧光试验(IFA)对50份临床样品检测,结果显示该间接ELISA检测到9份阳性样品,41份阴性样品;IFA检出5份阳性样品,45份阴性样品,二者的总符合率为92%。综上表明,本研究建立的间接ELISA检测方法能够特异、灵敏地检测SADS-CoV S1蛋白抗体,可以用于SADS-CoV灭活疫苗的免疫效果评价以及该病原的血清学流行病学调查和免疫水平监测,为SADS-CoV所致疫病的鉴别诊断和防控奠定基础。 展开更多

关键词 猪急性腹泻综合征冠状病毒 S1蛋白 间接ELISA方法 抗体检测

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黄芩总黄酮对大鼠膝骨性关节炎软骨组织Camk2d、Ppp3r2表达的影响 被引量：9

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作者 刘大凯 郑希福 李安石 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2022年第3期241-245,250,共6页

目的:探讨黄芩总黄酮对大鼠膝骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)软骨组织钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱδ(Camk2d)、蛋白磷酸酶3调节亚基2(Ppp3r2)表达的影响。方法:采用膝关节腔内注射木瓜蛋白酶的方法制备大鼠KOA模型,阴性对照组和... 目的:探讨黄芩总黄酮对大鼠膝骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)软骨组织钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱδ(Camk2d)、蛋白磷酸酶3调节亚基2(Ppp3r2)表达的影响。方法:采用膝关节腔内注射木瓜蛋白酶的方法制备大鼠KOA模型,阴性对照组和模型组大鼠灌胃给予生理盐水,黄芩总黄酮低、中和高剂量组大鼠灌胃给予黄芩总黄酮,剂量分别为12.5、25、50 mg/kg,阳性对照组大鼠灌胃给予塞来昔布(10 mg/kg),连续14 d后对大鼠膝关节进行病理学观察和Makin′s评分,同时ELISA法检测膝关节软骨组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-6含量,蛋白质印迹法检测膝关节软骨组织中Camk2d和Ppp3r2表达水平。结果:模型组大鼠膝关节软骨纤维结缔组织增生,结构不清,伴炎症细胞浸润;黄芩总黄酮低剂量组大鼠膝关节软骨纤维结缔组织增生,细胞排列无规则,炎症细胞浸润,但较模型组明显改善,随着黄芩总黄酮剂量的增加,病变改善越明显。与阴性对照组比较,模型组大鼠膝关节软骨组织Makin′s评分,TNF-α、IL-1β、IL-6和Camk2d水平明显升高,Ppp3r2水平明显降低(P均<0.05);与模型组相比,黄芩总黄酮各剂量组及阳性对照组大鼠膝关节软骨组织Makin′s评分,TNF-α、IL-1β、IL-6和Camk2d水平明显降低,Ppp3r2水平明显升高,且黄芩总黄酮各剂量组效应呈剂量依赖性(P均<0.05);黄芩总黄酮高剂量组和阳性对照组间各指标差异无统计学意义(P均>0.05)。结论:黄芩总黄酮可能通过增加软骨组织中Ppp3r2表达,降低Camk2d表达,对大鼠KOA发挥治疗作用。 展开更多

关键词 黄芩总黄酮 膝骨性关节炎 钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱδ 蛋白磷酸酶3调节亚基2 大鼠 软骨

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腰椎滑脱不同复位程度对临床疗效的影响 被引量：2

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作者 刘大凯 王罡 易东升 《当代医学》 2017年第27期51-52,共2页

目的研究分析腰椎滑脱复位程度对临床疗效的影响。方法选取腰椎滑脱患者66例作为研究对象,应用椎弓根螺钉系统内固定、椎间或加横突间植骨融合术等治疗所有患者,治疗后患者腰椎滑脱复位程度不同,主要为完全复位和部分复位,分别为26例患... 目的研究分析腰椎滑脱复位程度对临床疗效的影响。方法选取腰椎滑脱患者66例作为研究对象,应用椎弓根螺钉系统内固定、椎间或加横突间植骨融合术等治疗所有患者,治疗后患者腰椎滑脱复位程度不同,主要为完全复位和部分复位,分别为26例患者和40例患者,判断不同复位程度患者的临床治疗效果。结果术后、末次随访的椎体滑脱率、椎间盘指数、JOA评分均优于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,完全复位组患者滑脱角、椎间盘指数、JOA评分与部分复位组差异无统计学意义;治疗后,完全复位组滑脱率比部分复位组低,差异有统计学意义(P<0.05);末次随访时,完全复位组、部分复位组患者再滑脱率、植骨融合率、JOA评分优良率的差异无统计学意义;两组患者术后均无严重并发症发生。结论腰椎滑脱复位程度对临床治疗效果并无显著影响。 展开更多

关键词 腰椎滑脱 复位程度 椎弓根螺钉系统 植骨融合术 椎间盘指数 JOA评分 临床疗效

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血府逐瘀血清对大鼠背根神经元缺氧损伤的保护作用的研究 被引量：1

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作者 刘大凯 王罡 +1 位作者 赵钢 迟晓飞 《中国现代药物应用》 2017年第20期189-191,共3页

目的探索分析血府逐瘀血清对大鼠背根神经元缺氧损伤的保护作用。方法 10只新生24 h SD大鼠,取背根神经节(DRG),培养大鼠背根神经节神经元,并分成空白对照组(正常培养7 d不进行缺氧损伤)、损伤对照组(建立细胞缺氧损伤模型,在缺氧损伤前... 目的探索分析血府逐瘀血清对大鼠背根神经元缺氧损伤的保护作用。方法 10只新生24 h SD大鼠,取背根神经节(DRG),培养大鼠背根神经节神经元,并分成空白对照组(正常培养7 d不进行缺氧损伤)、损伤对照组(建立细胞缺氧损伤模型,在缺氧损伤前24 h给予磷酸缓冲试剂)、空白血清组(建立细胞缺氧损伤模型,细胞种植3 d后加入空白血清)、含药血清组[建立细胞缺氧损伤模型,在缺氧损伤前24 h加入含药(血府逐瘀血清)血清]、神经营养因子保护组[建立细胞缺氧损伤模型,在缺氧损伤前24 h加入神经生长因子(NGF)],检测比较各组不同时间丙二醛(MDA)含量及过氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)活力,并通过MTT法检测细胞的存活率。结果空白对照组MDA在各个时间点的变化不大,损伤对照组是各组中同时间点MDA含量最高的。12 h后MDA含量含药血清组明显低于空白血清组及损伤对照组,比较差异具有统计学意义(P<0.05);但含药血清组与神经营养因子保护组比较差异无统计学意义(P>0.05)。空白对照组各个时间点SOD含量变化不大。同时间点含药血清组SOD含量明显高于损伤对照组及空白血清组,比较差异具有统计学意义(P<0.05);同时间点含药血清组与神经营养因子保护组SOD含量比较差异无统计学意义(P>0.05)。损伤后24 h,含药血清组LDH含量明显低于损伤对照组及空白血清组,比较差异有统计学意义(P<0.05),但与神经营养因子保护组比较差异无统计学意义(P>0.05)。空白对照组细胞存活率为(0.624±0.054),含药血清组细胞存活率为(0.529±0.010),空白血清组细胞存活率为(0.229±0.038),损伤对照组细胞存活率为(0.221±0.034)、神经营养因子保护组细胞存活率为(0.548±0.056),含药血清组细胞存活率明显高于空白血清组及损伤对照组,与神经营养因子保护组及空白对照组较为接近。结论血府逐瘀血清对大鼠背根神经元缺氧损伤具有保护作用,可以促进神经元的生长。 展开更多

关键词 血府逐瘀血清 大鼠背根神经元 缺氧损伤 保护

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观察肱骨近端锁定钢板治疗老年肱骨近端骨折的临床效果 被引量：1

8

作者 刘大凯 王文辉 李安石 《当代医学》 2017年第22期60-62,共3页

目的观察分析肱骨近端锁定钢板治疗老年肱骨近端骨折的临床效果。方法随机选择接受治疗的老年肱骨近端骨折患者进行研究,共选择108例患者作为研究对象。采用随机数字抽取表法将患者分为观察组与对照组,每组54例。其中观察组患者采用肱... 目的观察分析肱骨近端锁定钢板治疗老年肱骨近端骨折的临床效果。方法随机选择接受治疗的老年肱骨近端骨折患者进行研究,共选择108例患者作为研究对象。采用随机数字抽取表法将患者分为观察组与对照组,每组54例。其中观察组患者采用肱骨近端锁定钢板治疗方式,对照组患者采用传统钢板治疗,对两组患者的临床疗效进行比较。结果观察组患者手术时间(63.52±10.15)min短于对照组,术中出血量(171.23±35.69)m L少于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组患者质量优良率为90.74%,远远高于对照组患者治疗优良率64.81%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论与传统钢板治疗老年肱骨近端骨折效果比较,锁定钢板治疗效果更好,术中出血量少,且操作简单,促使患者早日痊愈,值得在临床上推广应用。 展开更多

关键词 锁定钢板 传统钢板 老年肱骨近端骨折 出血量 手术时间

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单侧椎弓根钉棒系统在腰椎融合手术中的应用研究 被引量：1

9

作者 刘大凯 王罡 李安石 《中国医药指南》 2018年第10期138-139,共2页

目的研究分析单侧椎弓根螺钉钉棒系统在腰椎融合手术中的应用效果。方法选2015年8月至2016年8月实行腰椎融合手术患者86例。分2组。对照组和观察组各43例。对照组应用传统腰椎后路椎体间植骨融合术,观察组采取改良腰椎后路椎体间植骨融... 目的研究分析单侧椎弓根螺钉钉棒系统在腰椎融合手术中的应用效果。方法选2015年8月至2016年8月实行腰椎融合手术患者86例。分2组。对照组和观察组各43例。对照组应用传统腰椎后路椎体间植骨融合术,观察组采取改良腰椎后路椎体间植骨融合术。对比两组患者临床应用效果。结果手术治疗结束后,观察两组患者短期ODI、VAS评分与椎间隙高度,并未发现明显的差异(P>0.05);而观察组患者手术时间、术中出血量均显著优于对照组,差异显著(P<0.05);与治疗前相对比,所有患者椎间隙高度均明显改变,差异显著(P<0.05),而观察组与对照组术后椎间隙高度并未体现出差异性,且两组患者术后1年植骨融合率均达到100%,差异不显著(P>0.05)。结论腰椎融合手术操作的过程中,改良腰椎后路椎间植骨单侧椎弓根螺钉固定实用性较高,与传统手术相对比有着较多的优势,可在临床上进行推广应用。 展开更多

关键词 腰椎椎弓根螺钉 腰椎融合手术 应用

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滋补脾阴方药血清、他克莫司及其联合应用对大鼠背根神经元生长的影响 被引量：3

10

作者 刘阳 吕德成 +2 位作者 张卫国 张杨 刘大凯 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期294-297,共4页

目的:观察滋补脾阴方药血清、他克莫司(FK506)及两者联合应用对大鼠背根神经元生长的影响,探讨两种药物对神经细胞的作用机理。方法:取8只新生24hSD大鼠的背根神经节,剥除神经外膜,剪成约1mm3大小的碎块,用0.25%胰蛋白酶消化后进行纯化... 目的:观察滋补脾阴方药血清、他克莫司(FK506)及两者联合应用对大鼠背根神经元生长的影响,探讨两种药物对神经细胞的作用机理。方法:取8只新生24hSD大鼠的背根神经节,剥除神经外膜,剪成约1mm3大小的碎块,用0.25%胰蛋白酶消化后进行纯化培养,建立体外新生大鼠背根神经元培养体系。培养96h后,将背根神经元分为空白对照组(A组)、空白血清对照组(B组)、1%滋补脾阴方药血清组(C组)、FK506(1nmol/L)组(D组)和联合用药组(E组)。继续培养48h后,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞活力,用逆转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测生长相关蛋白-43信使核糖核酸(GAP-43mRNA)的表达情况。结果:B组的MTT吸光度(OD)值及GAP-43mRNA的相对表达量与A组比较无显著性差异(P>0.05),C组、D组和E组的MTTOD值及GAP-43mRNA的相对表达量均较A组显著增高(P<0.05);C组和D组的MTTOD值及GAP-43mRNA的相对表达量均较B组显著增高(P<0.05),E组与B组比较无显著性差异(P>0.05);D组、E组与C组比较无显著性差异(P>0.05),E组与D组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:滋补脾阴方药和FK506对体外培养的大鼠背根神经元具有保护和促再生作用,但两者联合应用时作用明显减弱。 展开更多

关键词 滋补脾阴方药 他克莫司 背根神经元 神经保护

原文传递

PLGA薄膜与生物蛋白胶联合应用对兔椎板切除术后硬膜外及神经根粘连的预防作用研究 被引量：4

11

作者 王罡 陈勇 +1 位作者 王国华 刘大凯 《临床和实验医学杂志》 2017年第2期137-140,共4页

目的探究聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)薄膜与生物蛋白胶联合应用对椎板切除术后硬膜外及神经根粘连的预防作用。方法应用随机数字表法将160只新西兰雄兔随机分为薄膜组、生物蛋白胶组、联合组、明胶组以及对照组,每组32只。薄膜组在硬... 目的探究聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)薄膜与生物蛋白胶联合应用对椎板切除术后硬膜外及神经根粘连的预防作用。方法应用随机数字表法将160只新西兰雄兔随机分为薄膜组、生物蛋白胶组、联合组、明胶组以及对照组,每组32只。薄膜组在硬膜裸露区覆盖PLGA薄膜;生物蛋白胶组在硬膜裸露区喷洒生物蛋白胶1 ml;联合组先在硬膜裸露区喷洒1 ml生物蛋白胶,待其充分吸收后,覆盖PLGA薄膜;明胶组在硬膜裸露区覆盖明胶海绵处理;对照组在相应部位的硬膜裸露区喷洒生理盐水。分析5组术后疤痕增生个数、切口愈合时间、发生炎症反应个数之间的差异。观察比较5组术后粘连程度以及粘连分级。在术后第2、8周比较各组的成纤维细胞个数以及神经根活动范围。结果 5组在疤痕增生个数(χ~2=2.06,P=0.84)、切口愈合时间(F=0.91,P=0.46)、发生炎症反应个数(χ~2=1.10,P=0.95)之间无显著差异。联合组的粘连程度较其他4组低(χ~2=158.00,P<0.01),硬膜外粘连分级等级低(χ~2=160.00,P<0.01)。术后第2、8周情况:联合组的成纤维细胞个数明显低于其余4组(F=23.53,P<0.01;F=142.20,P<0.01);联合组的神经根活动范围均高于其余4组(F=70.90,P<0.01;F=152.80,P<0.01)。结论PLGA薄膜与生物蛋白胶联合应用对椎板切除术后硬膜外及神经根粘连具有预防作用,且不影响术后疤痕增生以及切口愈合。 展开更多

关键词 兔 椎板切除术 粘连 PLGA薄膜 生物蛋白胶 联合应用

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后侧倒L入路联合前外侧入路三钢板固定胫骨平台三柱骨折的临床疗效 被引量：11

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作者 辛兵 刘大凯 刘建民 《局解手术学杂志》 2021年第1期70-74,共5页

目的探讨后侧倒L入路联合前外侧入路三钢板固定对胫骨平台三柱骨折术后复位质量和膝关节功能的影响。方法回顾性分析在我院接受治疗的76例胫骨平台三柱骨折患者的临床资料,依据手术方式分为对照组和观察组。对照组39例患者行前外侧联合... 目的探讨后侧倒L入路联合前外侧入路三钢板固定对胫骨平台三柱骨折术后复位质量和膝关节功能的影响。方法回顾性分析在我院接受治疗的76例胫骨平台三柱骨折患者的临床资料,依据手术方式分为对照组和观察组。对照组39例患者行前外侧联合后内侧入路双钢板固定,观察组37例患者行后侧倒L入路联合前外侧入路三钢板固定。比较2组患者手术时间、术中出血量、膝关节锻炼时间、住院时间、骨折愈合时间、完全负重时间、内翻角(TPA)、后倾角(PSA)、膝关节功能优良率、术后并发症、美国纽约特种外科医院(HSS)评分和36条目健康调查量表(SF-36)评分。结果2组患者手术时间、术中出血量、膝关节锻炼时间、住院时间、HSS评分及SF-36评分比较,差异均有统计学意义(P<0.05);2组患者骨折愈合时间和完全负重时间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与术后即刻比较,2组患者术后12个月PSA均更大、TPA均更小(P<0.05);观察组患者术后即刻TPA大于对照组(P<0.05),2组患者术后即刻PSA及术后12个月TPA、PSA比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者术后12个月膝关节功能优良率高于对照组(P<0.05)。2组术后并发症发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论相较于前外侧联合后内侧入路双钢板固定,后侧倒L入路联合前外侧入路三钢板固定治疗胫骨平台三柱骨折虽手术过程复杂,术中出血量多,但该术式可使患者尽快进行膝关节锻炼,一定程度上提高了复位质量,有利于膝关节功能的恢复。 展开更多

关键词 三钢板固定 双钢板固定 胫骨平台三柱骨折 骨折复位 膝关节功能 后侧倒L入路 外侧入路

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Taylor外固定架与钢板内固定在老年膝内翻骨关节炎患者行胫骨高位截骨术中的应用比较 被引量：2

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作者 王国华 刘大凯 +2 位作者 杨茂伟 李志君 张寅权 《老年医学与保健》 CAS 2021年第6期1252-1255,1278,共5页

目的比较Taylor外固定架与钢板内固定在老年膝内翻骨关节炎患者行胫骨高位截骨术(HTO)中的应用疗效,为治疗该病提供适宜的固定方式。方法回顾性分析2018年6月—2021年6月于大连市第二人民医院骨外科收治的82例膝内翻骨关节炎患者的临床... 目的比较Taylor外固定架与钢板内固定在老年膝内翻骨关节炎患者行胫骨高位截骨术(HTO)中的应用疗效,为治疗该病提供适宜的固定方式。方法回顾性分析2018年6月—2021年6月于大连市第二人民医院骨外科收治的82例膝内翻骨关节炎患者的临床资料,根据不同固定方式分成A组与B组,每组41例。2组均行HTO,A组采取钢板内固定,B组采取Taylor外固定。比较2组两组术中情况(术中出血量和手术时间),以及术前和术后1、3、6和12个月的纽约特种外科医院(HSS)评分、胫股骨角(FTA)值和日本骨科协会(JOA)评分。结果B组手术时间显著短于A组(P<0.05),但切口感染发生率和治疗费用显著高于A组(P<0.05),2组术中出血量差异无统计学意义(P>0.05)。术前,2组FTA值、JOA评分和HSS评分差异均无统计学意义(P>0.05);术后1、3、6和12个月时,2组FTA值均随着术后随访时间的延长而递减(P<0.05),B组FTA值均显著低于A组(P<0.05);2组JOA评分和HSS评分均随着术后随访时间的延长而递增(P<0.05),B组JOA评分和HSS评分均显著高于A组(P<0.05)。结论与钢板内固定比较,Taylor外固定架应用于老年膝内翻骨关节炎患者HTO,手术时间更短,可更好的调节下肢力线,改善患者膝关节功能,但切口感染概率和治疗费用更高,临床可根据患者具体情况选用适宜的固定方式。 展开更多

关键词 老年 膝内翻骨关节炎 胫骨高位截骨术 Taylor外固定架 钢板内固定 疗效

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七厘散含药血清对大鼠雪旺细胞增殖分化的影响

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作者 王罡 刘大凯 +1 位作者 赵钢 迟晓飞 《中国现代药物应用》 2017年第20期194-195,共2页

目的观察七厘散含药血清对体外培养的SD大鼠臂丛神经雪旺经细胞增殖分化能力的影响。方法 4只2月龄SD大鼠,无菌条件下分离臂丛神经。取SD雄性大鼠臂丛神经体外培养第3代,实验组加入七厘散含药血清,对照组加入等量生理盐水进行干预。S-10... 目的观察七厘散含药血清对体外培养的SD大鼠臂丛神经雪旺经细胞增殖分化能力的影响。方法 4只2月龄SD大鼠,无菌条件下分离臂丛神经。取SD雄性大鼠臂丛神经体外培养第3代,实验组加入七厘散含药血清,对照组加入等量生理盐水进行干预。S-100免疫荧光法鉴定雪旺细胞及纯度,利用噻唑蓝(MTT)比色检测细胞活力。结果雪旺细胞经S-100免疫荧光标记染色提示阳性细胞率达90%以上,纯化后的大鼠臂丛雪旺细胞纯度为(97.5±1.3)%。5%七厘散含药血清可以促进雪旺细胞增殖。细胞计数显示,实验组倍增时间为6 d,明显优于对照组的8 d。且实验组A490值为(0.385±0.037),高于对照组的(0.347±0.045),差异有统计学意义(P<0.05)。结论七厘散含药血清具有促进体外培养雪旺细胞增殖的作用,为促进活体神经损伤的修复途径提供了一些研究基础。 展开更多

关键词 七厘散 雪旺细胞 臂丛神经 增殖 分化

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IC卡通用读卡器的设计及应用

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作者 刘大凯 王延青 《电脑学习》 1997年第1期19-20,共2页

介绍IC卡通用读卡器的性能、硬件结构和软件设计等。

关键词 单片机 IC卡 读卡器 CMOS

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关节镜联合开放楔形胫骨高位截骨治疗内翻性膝骨关节炎 被引量：7

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作者 夏坤阳 阮文礼 +1 位作者 刘大凯 王守赟 《实用骨科杂志》 2022年第8期750-754,共5页

目的探讨关节镜联合内侧开放性楔形胫骨高位截骨治疗内翻性膝关节骨关节炎的近期临床疗效。方法本研究回顾分析2017年1月至2019年1月大连市第二人民医院微创关节科收治的36例(40膝)内翻性膝骨关节炎患者资料,其中男12例(13膝),女24例(27... 目的探讨关节镜联合内侧开放性楔形胫骨高位截骨治疗内翻性膝关节骨关节炎的近期临床疗效。方法本研究回顾分析2017年1月至2019年1月大连市第二人民医院微创关节科收治的36例(40膝)内翻性膝骨关节炎患者资料,其中男12例(13膝),女24例(27膝);年龄44~65岁,平均(58.63±4.89)岁。行膝关节镜检查、内侧开放性楔形胫骨高位截骨术。记录手术前后膝关节疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)、股胫角(femoro tibial angle,FTA)、美国膝关节协会评分(knee society score,KSS)、膝关节内侧间隙距离。结果36例患者均获得随访,随访时间13~24个月,平均(18.69±3.72)个月。术后患者均未出现感染、内固定失效等并发症,1例出现皮下血肿。术后截骨处愈合良好,下肢力线位置满意,内侧间隙距离增宽,疼痛症状均明显缓解;术后VAS、FTA、KSS、膝关节内侧间隙距离较术前均明显改善,差异有统计学意义(P<0.05)。结论关节镜联合内侧开放性楔形胫骨高位截骨术治疗内翻性膝关节骨关节炎,能有效恢复膝关节功能,组织创伤小、并发症少、安全性高、近期疗效确切,值得临床应用和推广。 展开更多

关键词 关节镜 胫骨高位截骨 膝内翻 膝骨关节炎

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浅议足球音乐之内涵

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作者 刘大凯 《黄河之声》 2017年第3期121-122,共2页

常言道:"文体不分家",体育与音乐的关系常被研究。本文就足球音乐的定义、内涵、分类、功能做一个系统研究。

关键词 足球音乐 体育 音乐

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什么是好的大学排行榜?——基于全球30个大学排行榜的元评价 被引量：1

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作者 路馨苑 程雅曦 刘大凯 《中国人民大学教育学刊》 CSSCI 2023年第5期17-31,共15页

基于高等教育机构排名的柏林原则,使用德尔菲法和层次分析法,形成了评价目的的适切性、指标与权重的科学性、数据收集与处理的合理性、结果公布的规范性、排名机构的专业性5项一级指标,评价目的明确、评价内容可比、坚持分类评估、坚持... 基于高等教育机构排名的柏林原则,使用德尔菲法和层次分析法,形成了评价目的的适切性、指标与权重的科学性、数据收集与处理的合理性、结果公布的规范性、排名机构的专业性5项一级指标,评价目的明确、评价内容可比、坚持分类评估、坚持综合评价、关注办学环境的多样性等19项二级指标的“大学排行榜的元评价体系”。在此基础上,选取全球范围内30个大学排行榜作为评价对象,邀请相关研究领域数十位专家学者,依据所建立的大学排行榜评价数据库和研制的专家评价指南,使用五级等距量表对其逐项评分,并精确计算综合得分。结果显示,学位中心学科评估、CWTS莱顿大学排名、多维度全球大学排名在其中名列前茅,质量较好,被评为四星级大学排行榜。当前大学排行榜普遍存在忽视人才培养、忽视分类评价、科学性不足、透明度不足的问题,建议各方利益相关者要理性看待大学排行榜,合理利用大学排行榜。 展开更多

关键词 大学排行榜 元评价 理性看待

原文传递

处理机匣特征参数变化对多级轴流压气机性能的影响 被引量：2

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作者 吴昌明 刘大凯 《航空发动机》 北大核心 1997年第1期38-43,共6页

处理机匣对压气机性能的影响已有很多文献发表,大部分都是针对不同处理机匣对压气机性能影响的结果。而本文要介绍的内容则是针对小叶片开槽驻定式处理机匣,在一台四级低压轴流式压气机中,通过改变处理机匣对一级转子叶尖的覆盖比、容... 处理机匣对压气机性能的影响已有很多文献发表,大部分都是针对不同处理机匣对压气机性能影响的结果。而本文要介绍的内容则是针对小叶片开槽驻定式处理机匣,在一台四级低压轴流式压气机中,通过改变处理机匣对一级转子叶尖的覆盖比、容腔比、前伸量以及加大处理机匣开度比对压气机试验性能的影响。试验均在某全台压气机试验器上进行。压气机进口条件为均匀进气。 展开更多

关键词 处理机匣 多级 轴流 压气机 航空发动机

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多处理机的并行图形系统简介

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作者 付忠传 阚欣 +1 位作者 胡刚 刘大凯 《黑龙江电子技术》 1999年第6期31-31,36,共2页

简要介绍了计算机图形系统的多处理机并行结构的发展趋势及其主要设计问题，在此基础上，介绍了图形并行处理系统的两种结构方案。

关键词 多处理机 对象并行 图象并行 计算机图形学

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