文摘目的:体外研究刀豆蛋白A(Concanavalin A,Con A)联合淋巴细胞对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞形态、活力、凋亡以及顺铂敏感性的影响。方法:应用密度梯度离心法分离健康成人新鲜血中的单个核细胞,培养3～5d待单核细胞完全贴壁后分离出悬浮的淋巴细胞,与SKOV3细胞混合培养,并设对照组(未处理的SKOV3)、实验组1(SKOV3培养体系中仅加入5μg/mL Con A)、实验组2(SKOV3和淋巴细胞混合培养)和实验组3(SKOV3和淋巴细胞混合培养体系中加入5μg/mL Con A)。培养7d后将SKOV3分离出继续培养,并进行以下实验,在光学显微镜下观察细胞形态变化;CCK8检测24和48h细胞活性;流式细胞术检测24和48h细胞凋亡情况;用浓度0和60μmol/L顺铂处理SKOV3细胞24和48h后,流式细胞术检测细胞凋亡率以判断细胞对顺铂的敏感性。结果:与对照组比较,实验组1和实验组2中细胞无明显改变,而实验组3中SKOV3与淋巴细胞混合培养后发生明显改变,如细胞突起减少,细胞变圆。与对照组比较,实验组1中24和48h细胞存活率分别为(105.68±7.12)%(z=-1.256,P=0.30)和(111.90±8.28)%(z=-1.766,P=0.13),实验组2分别为(101.05±5.92)%(z=-0.215,P=0.79)和(109.72±6.54)%(z=-1.766,P=0.13),差异均无统计学意义;而实验组3分别为(25.08±7.71)%(z=-2.087,P=0.004)和(14.6±4.41)%(z=-3.431,P=0.001),差异有统计学意义。与对照组比较,实验组1中24和48h细胞凋亡率分别为(4.43±1.49)%(z=-2.78,P=0.61)和(10.95±1.09)%(z=-1.982,P=0.08),实验组2分别为(4.79±0.83)%(z=-1.349,P=0.28)和(10.59±1.03)%(z=-1.349,P=0.28),差异均无统计学意义;实验组3分别为(13.88±1.00)%(z=-2.247,P=0.003)和(21.37±2.35)%(z=-2.137,P=0.006),差异有统计学意义。顺铂处理各组SKOV3细胞后,与对照组比较,实验组1中24和48h细胞凋亡率分别为(11.25±1.86)%(z=-0.361,P=0.59)和(33.66±4.96)%(z=-0.536,P=0.54),实验组2分别为(10.32±0.14)%(z=-0.225,P=0.65)和(31.56±6.21)%(z=-0.163,P=0.83),差异均无统计学意义;实验组3分别为(41.99±6.66)%(z=-2.14,P=0.03)和(66.5±2.55)%(z=-1.909,P=0.04),差异有统计学意义。结论:Con A联合淋巴细胞可显著改变SKOV3细胞形态,降低细胞活力,促进细胞凋亡,并增加细胞对顺铂的敏感性,而Con A或淋巴细胞单独处理并无此效应。
