采用硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤和离子交换层析等方法，对毕赤酵母工程菌发酵液中的原果胶酶进行了分离纯化，测定了其分子质量，并确定了离子交换层析法的最佳离子交换条件。结果表明，硫酸铵的饱和度为70％时，可以使原果胶酶的回收率...采用硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤和离子交换层析等方法，对毕赤酵母工程菌发酵液中的原果胶酶进行了分离纯化，测定了其分子质量，并确定了离子交换层析法的最佳离子交换条件。结果表明，硫酸铵的饱和度为70％时，可以使原果胶酶的回收率达到71．9％，比活力为1096．35U／mg；经Sephadex G75凝胶过滤，原果胶酶回收率达到57．6％，酶的比活力提高到3762．40U／mg；最佳离子交换条件为：0～0．5mol／L NaCl（缓冲休系为NoAc—HAc，pH5．8）溶液线性洗脱、Sepharose Fast Flow离子交换层析分离．在该条件下酶的比活力提高到9743．20U／mg，纯度为粗酶液的18．91倍。达到了电泳级；SDS-PAGE电泳结果表明，其分子质量为43．17ku。展开更多
研究了脂肪酶催化猪油与辛酸酸解制备功能性脂。在所选5种脂肪酶中,固定化脂肪酶L iopzym e TLIM的催化效果最好。研究了加酶量、底物比率、反应时间和反应温度对猪油中辛酸插入率的影响。用高效液相色谱法(HPLC)进行产物分析。最终确定...研究了脂肪酶催化猪油与辛酸酸解制备功能性脂。在所选5种脂肪酶中,固定化脂肪酶L iopzym e TLIM的催化效果最好。研究了加酶量、底物比率、反应时间和反应温度对猪油中辛酸插入率的影响。用高效液相色谱法(HPLC)进行产物分析。最终确定2种体系中辛酸插入的条件为:在正己烷体系中,当加酶量为15%,猪油与辛酸摩尔比为1∶2,55℃反应24 h,辛酸插入率(摩尔分数)为(34.9±1.7)%;无溶剂体系中,加酶量为20%,猪油与辛酸摩尔比为1∶2,在50℃反应24 h时,辛酸插入率(摩尔分数)为(32.4±2.6)%。展开更多
文摘采用硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤和离子交换层析等方法，对毕赤酵母工程菌发酵液中的原果胶酶进行了分离纯化，测定了其分子质量，并确定了离子交换层析法的最佳离子交换条件。结果表明，硫酸铵的饱和度为70％时，可以使原果胶酶的回收率达到71．9％，比活力为1096．35U／mg；经Sephadex G75凝胶过滤，原果胶酶回收率达到57．6％，酶的比活力提高到3762．40U／mg；最佳离子交换条件为：0～0．5mol／L NaCl（缓冲休系为NoAc—HAc，pH5．8）溶液线性洗脱、Sepharose Fast Flow离子交换层析分离．在该条件下酶的比活力提高到9743．20U／mg，纯度为粗酶液的18．91倍。达到了电泳级；SDS-PAGE电泳结果表明，其分子质量为43．17ku。
