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醛固酮及其拮抗剂安体舒通对高糖刺激下肾小管上皮细胞转分化的影响 被引量:5
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作者 刘抗寒 周巧玲 +4 位作者 敖翔 Veeraragoo Pouranan 洪学敏 肖舟 袁明霞 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期222-229,共8页
目的:通过观察高糖环境下,醛固酮(aldosterone,Aldo)及其拮抗剂安体舒通(spironolac-tone,SP)对大鼠肾小管上皮细胞(normal rat kidney epithelial cell,NRK-52E)转分化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)的影响,探讨Aldo及SP在糖... 目的:通过观察高糖环境下,醛固酮(aldosterone,Aldo)及其拮抗剂安体舒通(spironolac-tone,SP)对大鼠肾小管上皮细胞(normal rat kidney epithelial cell,NRK-52E)转分化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)的影响,探讨Aldo及SP在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾保护作用中的机制。方法:用无血清DMEM(Dulbecco's modification of Eagle's medium Dulbecco)同步化培养NRK-52E细胞系12h后分为6组。LG组:采用低糖(1000mg/L)DMEM;HG组:采用高糖(4500mg/L)DMEM培养;10nmol/L Aldo组、50nmol/L Aldo组、100nmol/L Aldo组:分别采用高糖DMEM加10,50,100nmol/L Al-do培养;SP组采用高糖(4500mg/L)DMEM加10-7mol/L SP培养。采用细胞免疫化学、RT-PCR和Western免疫印迹方法检测各组细胞E-cadherin和α-SMA mRNA的表达情况。结果:RT-PCR结果表明,与LG组比较,HG组E-cadherinmRNA表达明显降低(P<0.01),α-SMAmRNA表达明显升高(P<0.05);50nmol/L Aldo组、100nmol/L Aldo组E-cadherinmRNA表达明显低于高糖组,而α-SMAmRNA表达明显高于高糖组(P<0.05),两者与Aldo呈浓度依赖关系(r=-0.70,P<0.05;r=0.67,P<0.05);SP组E-cadherinmRNA明显高于HG组,而α-SMAmRNA表达低于HG组(P<0.01)。细胞免疫化学和West-ern免疫印迹检测表明,与低糖组比较,HG组E-cadherin蛋白表达明显减低,而α-SMA表达明显升高(P<0.01);10nmol/L Aldo组、50nmol/L Aldo组、100nmol/L Aldo组E-cadherin蛋白表达明显低于HG组,而α-SMA蛋白表达明显高于HG组(P<0.05),与Aldo呈浓度依赖关系(r=-0.83,P<0.05;r=0.81,P<0.05);而SP组E-cadherin蛋白表达明显高于高糖组,α-SMA蛋白则明显低于HG组(P<0.05)。结论:Aldo能促进高糖环境下肾小管上皮细胞EMT的发生,致DN肾间质纤维化,而使用SP可抑制高糖诱导肾小管上皮细胞的EMT,这可能是其阻遏肾间质纤维化的重要机制。 展开更多
关键词 高糖 醛固酮 安体舒通 肾小管上皮细胞转分化
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狼疮性肾炎患者血浆组蛋白乙酰化酶和组蛋白去乙酰化酶表达及其与IL-6、INF-γ的关系 被引量:3
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作者 刘抗寒 梁玉梅 +4 位作者 饶慧 欧阳沙西 曾清华 黄安兰 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第15期51-54,共4页
目的研究狼疮性肾炎(LN)患者血浆组蛋白乙酰化酶(HAT)、组蛋白去乙酰化酶(HDAC)表达水平,分析其与LN活动性、炎性细胞因子等的关系,探究组蛋白乙酰化酶在LN发病机制中的作用。方法共收入正常对照组(N组,8例),狼疮性肾炎患者组(18例)。... 目的研究狼疮性肾炎(LN)患者血浆组蛋白乙酰化酶(HAT)、组蛋白去乙酰化酶(HDAC)表达水平,分析其与LN活动性、炎性细胞因子等的关系,探究组蛋白乙酰化酶在LN发病机制中的作用。方法共收入正常对照组(N组,8例),狼疮性肾炎患者组(18例)。狼疮性肾炎组分为非活动期(I组,8例),活动期(A组,10例)。采用ELISA检测血浆HAT、HDAC、IL-6、INF-γ水平;采用直线相关性分析HAT、HDAC表达与IL-6、INF-γ相关性。结果 I组患者血浆HAT含量低于N组,但差异无统计学意义,A组患者HAT含量明显低于N组,差异有统计学意义[(9.74±3.67)vs(15.32±3.32),P<0.05],但I组与A组患者比较,差异无统计学意义;与N组比较,I组和A组患者中血浆HDAC含量明显降低[(6.75±2.05)vs(17.08±6.46),P<0.05;(4.53±3.62)vs(17.08±6.46),P<0.05],但两组之间比较差异无统计学意义。I组和A组患者血浆IL-6、INF-γ均明显高于N组,A组患者血浆中IL-6、INF-γ均明显高于I组。相关性分析,发现HAT、HDAC与IL-6呈负相关(r分别为-0.532和-0.665);而HAT、HDAC与INF-γ呈负相关(r分别为-0.621和-0.720)。结论LN患者血浆HDAC含量、活动期患者HAT低于正常人群,与IL-6、INF-γ呈负相关,HAT、HDAC可能影响IL-6、INF-γ等细胞因子水平参与LN的发病。 展开更多
关键词 狼疮性肾炎 组蛋白乙酰化酶 组蛋白去乙酰化酶 细胞因子
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外周血CD4^+T细胞组蛋白乙酰化在狼疮性肾炎中的作用 被引量:2
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作者 刘抗寒 +3 位作者 梁玉梅 饶慧 陈莹 曾清华 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第30期4193-4195,共3页
目的研究狼疮性肾炎(LN)患者外周血CD4+T细胞组蛋白乙酰化水平,探究其在LN发病中的作用。方法 18例LN患者均来自该科病房,全部患者都达到美国风湿学会1997年推荐的系统性红斑狼疮(SLE)的分类诊断标准。满足以下条件为活动性的LN,蛋白尿... 目的研究狼疮性肾炎(LN)患者外周血CD4+T细胞组蛋白乙酰化水平,探究其在LN发病中的作用。方法 18例LN患者均来自该科病房,全部患者都达到美国风湿学会1997年推荐的系统性红斑狼疮(SLE)的分类诊断标准。满足以下条件为活动性的LN,蛋白尿大于0.5g/d,或活动性尿沉渣改变(血尿红细胞超过5个/Hp,或脓尿白细胞大于5个/Hp,或细胞管型大于1个/Hp),血肌酐升高大于1.2mg/L,排除感染、肾结石和其他原因引起的。非活动的LN:蛋白尿小于0.5g/L,非活动性的尿沉渣。将LN患者分为两组:非活动性(I组)8例、活动性的LN组(A组)10例,对照组(N组)8例。分别采集LN患者和N组的外周血50mL,密度梯度离心法(Ficoll法)分离出外周血中的单个核细胞,采用免疫磁珠技术分选出CD4+T细胞,并提取组蛋白,采用组蛋白H3/H4乙酰化检测试剂盒检测组蛋白H3/H4的乙酰化水平,分析组蛋白H3/H4乙酰化水平及与疾病的关系。结果 (1)与N组相比,A和I组LN患者外周血CD4+T细胞的组蛋白H3、H4均呈低乙酰化状态(P<0.01);(2)A组的组蛋白H4的乙酰化水平低于I组(P<0.01),而组蛋白H3乙酰化水平两组间差异无统计学意义(P>0.05)。(3)组蛋白H4的乙酰化水平与24h尿蛋白排泄量呈负相关(r=-0.661,P<0.05)。结论在LN患者中的CD4+T细胞组蛋白H3和组蛋白H4均呈低乙酰化状态可能参与了LN的发病,CD4+T细胞组蛋白H4的乙酰化水平可能与LN的活动性有关。 展开更多
关键词 组蛋白类 乙酰化作用 狼疮肾炎 蛋白尿
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阿法骨化醇对腹膜透析患者微炎症状态的影响 被引量:2
4
作者 刘抗寒 陈善亚 +1 位作者 彭容 梁玉梅 《药品评价》 CAS 2020年第2期5-6,13,共3页
目的:分析维持性腹透患者血清中25羟基维生素D(25(OH)D)与炎性因子IL-6、CRP、血小板/淋巴细胞比值(PLR)之间的关系;采用阿法骨化醇进行干预实验,观察阿法骨化醇纠正25(OH)D缺乏对腹膜透析患者炎症状态的影响。方法:选取2015年9月至2016... 目的:分析维持性腹透患者血清中25羟基维生素D(25(OH)D)与炎性因子IL-6、CRP、血小板/淋巴细胞比值(PLR)之间的关系;采用阿法骨化醇进行干预实验,观察阿法骨化醇纠正25(OH)D缺乏对腹膜透析患者炎症状态的影响。方法:选取2015年9月至2016年9月我院肾科透析龄在6个月至2年之间的腹膜透析患者,共纳入70例腹膜透析患者。将患者分为两组:25(OH)D正常组(25(OH)D≥30ng/mL),26例;25(OH)D缺乏组(25(OH)D<30ng/mL),44例。抽血采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白介素-6(IL-6)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、25(OH)D含量,并计算PLR,分析25(OH)D与IL-6、hs-CRP、血小板淋巴细胞比率(PLR)的关系。25(OH)D缺乏组患者排除明显软组织异位钙化、高钙血症(Ca>2.5mmol/L)、高磷血症(P<1.78mmol/L)等情况,共21人纳入干预实验,予阿法骨化醇0.25μg/d,干预治疗1月。治疗前后分别抽血,ELISA检测IL-6、hs-CRP、25(OH)D含量,计算PLR。结果:本中心25(OH)D缺乏的维持性腹透患者为62.9%;25(OH)D缺乏组患者血清IL-6、hs-CRP水平和PLR明显高于25(OH)D正常组[(47.19±7.21)pg/mL vs(33.51±3.26)pg/mL,P<0.05;(9.34±0.82)pg/mL vs(6.51±0.49)pg/mL,P<0.05;(120.32±11.23)vs(95.12±10.21),P<0.05]。腹膜透析患者IL-6、hs-CRP、PLR与25(OH)D水平呈负相关(r分别为-0.70、-0.49、-0.63,P<0.05)。给予阿法骨化醇治疗后,25(OH)D缺乏患者血清25(OH)D较治疗前有所升高[(33.32±2.52)pg/mL vs(17.91±3.75)pg/mL,P<0.05],同时,血清IL-6、hs-CRP和PLR有所下降[(48.23±7.40)pg/mL vs(41.32±5.86)pg/mL,(9.20±0.83)pg/mL vs(6.90±0.71)pg/mL,(117.12±9.76)vs(101.28±8.43);P<0.05]。结论:25(OH)D缺乏可能与腹膜透析患者微炎症状态有关,阿法骨化醇能减轻PD患者微炎症。 展开更多
关键词 腹膜透析 微炎症 25羟基维生素D 白介素-6 高敏C反应蛋白
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冬虫夏草对糖尿病肾病大鼠肾组织HIF-1α及VEGF表达的影响 被引量:26
5
作者 袁明霞 唐荣 +3 位作者 周巧玲 刘抗寒 肖舟 Veeraragoo Pouranan 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期448-457,共10页
目的:观察缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)在大鼠糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾组织中的表达及冬虫夏草(Cordyceps sinensis,CS)干预后... 目的:观察缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)在大鼠糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾组织中的表达及冬虫夏草(Cordyceps sinensis,CS)干预后对其的影响,探讨冬虫夏草的抗缺氧损伤的肾保护机制。方法:健康雄性Wistar大鼠通过一次性腹腔注射链脲佐菌素(60 mg/kg)制作成糖尿病模型,4周时测定24 h尿蛋白>30 mg/d为DN模型大鼠(n=30),随机分为糖尿病肾病组(DN组,n=15)和冬虫夏草组(CS组,n=15),另取15只正常大鼠作为对照组(NC,n=15)。CS组予CS提取原液5.0 g/(kg d)灌胃,NC和DN组均予以等量饮用水灌胃,分别于灌胃2,4,6周时随机处死三组大鼠各5只,检测24 h尿蛋白定量、尿β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(β-N-acetyl glucosaminidase,NAG酶)、血清肌酐水平;HE及MASSON染色观察肾脏组织形态学变化;反转录PCR方法检测HIF-1α和VEGF mRNA表达;免疫组织化学方法检测肾组织中HIF-1α及VEGF蛋白的表达。结果:与NC组相比较,DN组肾小管空泡变性明显,肾小球系膜区基质增多,24 h尿蛋白排泄量、尿NAG酶、血肌酐显著升高,肾组织HIF-1α和VEGF mRNA及其蛋白表达均显著增加(均P<0.05),两者的表达均随着病程延长而逐渐增强,且两组HIF-1α与VEGF表达呈正相关(r=0.850,r=0.887,均P<0.05);与DN组相比较,CS组大鼠肾小管病变程度减轻,24 h尿蛋白排泄量、尿NAG酶、血肌酐降低,肾组织HIF-1α和VEGF mRNA及其蛋白表达均下调(均P<0.05),但仍明显高于NC组(P<0.05),但CS治疗第4周、第6周HIF-1α的mRNA及蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DN病大鼠肾组织HIF-1α及VEGF表达上调,两者呈正相关,提示DN肾组织存在慢性缺氧。CS可通过下调DN肾组织HIF-1α及VEGF的表达起到抗慢性缺氧损伤的肾保护作用。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 缺氧诱导因子-lα 血管内皮生长因子 冬虫夏草
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冬虫夏草对糖尿病肾病模型鼠肾组织转化生长因子β_1、结缔组织生长因子表达的影响 被引量:54
6
作者 周巧玲 刘抗寒 +2 位作者 王衍慧 胡杨青 彭卫生 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 2006年第5期443-446,468,共5页
目的:观察冬虫夏草制剂对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病(DN)模型大鼠肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨冬虫夏草制剂抗肾纤维化的作用机制。方法:45只Wistar大鼠随机分为正常组、DN模型组、冬... 目的:观察冬虫夏草制剂对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病(DN)模型大鼠肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨冬虫夏草制剂抗肾纤维化的作用机制。方法:45只Wistar大鼠随机分为正常组、DN模型组、冬虫夏草组。虫草组予人工冬虫夏草粉5·0g/(kg·d)进行干预。第2、4、6周处死大鼠(每组5只)。检测24h尿蛋白定量、血肌酐(SCr)水平和肾组织病理变化;用免疫组化法检测肾组织CTGF、Ⅳ胶原(ColⅣ)的表达;用RT-PCR法检测肾组织TGF-β1、CTGF、ColⅣmRNA的表达。结果:DN模型组尿蛋白排泄明显增加(P<0·01),SCr水平上升(P<0·05)同时肾组织内细胞基质增多,TGF-β1、ColⅣ和CTGF出现高表达。冬虫夏草制剂干预,与DN模型组比较,虫草干预组尿蛋白排泄明显减少,SCr水平降低,肾组织病理改变减轻,并且肾组织中TGF-β1、CTGF、ColⅣ表达均有下调(P<0·05或P<0·01)。结论:冬虫夏草制剂对DN具有一定肾保护作用及抗肾小球纤维化的作用,其作用机制可能是通过使TGF-β、CTGF的表达下调而实现的。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 转化生长因子 结缔组织生长因子 冬虫夏草
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冬虫夏草对糖尿病肾病鼠肾组织转化生长因子β/C-myc表达的影响 被引量:28
7
作者 胡杨青 周巧玲 +1 位作者 刘抗寒 王衍慧 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 2005年第5期413-417,共5页
目的:①研究糖尿病肾病(DN)模型鼠肾组织转化生长因子β(TGF-β)与C-myc的表达状况及C-myc基因在DN发病中的作用和意义;②研究冬虫夏草对TGF-β与C-myc基因表达的影响。方法:45只Wistar大鼠随机分为正常对照组N组,DN模型组D组,冬虫夏草... 目的:①研究糖尿病肾病(DN)模型鼠肾组织转化生长因子β(TGF-β)与C-myc的表达状况及C-myc基因在DN发病中的作用和意义;②研究冬虫夏草对TGF-β与C-myc基因表达的影响。方法:45只Wistar大鼠随机分为正常对照组N组,DN模型组D组,冬虫夏草干预组C组[冬虫夏草5·0g/(kg·d),灌胃]。第2、4、6周各组处死5只并收集标本,检测24h尿蛋白定量、血肌酐、血胆固醇、血三酰甘油、血TGF-β、血Col-Ⅳ及肾脏病理改变,应用免疫组化法检测肾组织TGF-β与C-myc基因的表达,并分析TGF-β与C-myc之间的相关关系。结果:C组24h尿蛋白定量低于D组(P<0·01),血肌酐、血胆固醇、血TGF-β、血Col-Ⅳ均低于D组(P<0·05),肾脏病变减轻,免疫组化显示D组TGF-β与C-myc基因的表达高于N组(P<0·05),C组TGF-β与C-myc基因的表达低于D组(P<0·05)。结论:冬虫夏草抑制肾组织TGF-β与C-myc基因表达,对早期DN可能具有保护作用。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 转化生长因子Β C-myc 冬虫夏草 C-MYC表达 转化生长因子Β 冬虫夏草 糖尿病肾病 鼠肾组织 C-myc基因 24h尿蛋白定量 免疫组化法检测 肾病(DN)
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NRK-52E缺血再灌注损伤时Kim-1、NO变化及虫草对其的干预作用 被引量:7
8
作者 洪学敏 周巧玲 +3 位作者 唐荣 何楠 刘抗寒 杨敬华 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第31期3866-3871,共6页
目的通过抗霉素A(Antimycin A,AA)刺激大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)模拟体外缺血再灌注损伤过程,观察缺血再灌注损伤时NRK-52E中肾损伤分子-1(kidney injury molecule-1,Kim-1)及NO表达的变化及冬虫夏草对其的干预作用。方法将体外培养... 目的通过抗霉素A(Antimycin A,AA)刺激大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)模拟体外缺血再灌注损伤过程,观察缺血再灌注损伤时NRK-52E中肾损伤分子-1(kidney injury molecule-1,Kim-1)及NO表达的变化及冬虫夏草对其的干预作用。方法将体外培养的NRK-52E分为对照组、模型组和虫草组。虫草组予含40 mg/L虫草原液的培基预处理。培养72 h后NRK-52E去除培基,予10-10 mol/L抗霉素A(AA)刺激1 h,模拟体外缺血过程,1 h后再加入培基,模拟体外再灌注损伤过程。分别在AA刺激前,AA刺激后1 h,加入培基再灌注10 min,30 min,60 min,120 min共6个时间点终止实验。用流式细胞仪以Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡;分别用硝酸还原酶法和ELISA检测细胞上清液Kim-1与NO浓度;用RT-PCR法观察Kim-1 mRNA表达。结果 NRK-52E细胞经AA刺激后,细胞凋亡率显著增高,同时Kim-1表达上调;缺血60 min较缺血前Kim-1蛋白水平增加了3.1倍,再灌注10 min增加了3.6倍(P<0.05)。Kim-1 mRNA也呈现类似结果。NO浓度随灌注时间延长发生类似变化。与模型组比较,虫草组对缺血再灌注损伤显示出较明显的耐受性,主要表现为在细胞凋亡率降低的同时Kim-1表达及NO浓度下降(P<0.05)。结论抗霉素A能诱导NRK-52E细胞出现以凋亡为主的缺血再灌注损伤状态,伴随Kim-1 mRNA的早期高表达及NO浓度升高;冬虫夏草可通过下调Kim-1的表达及降低NO浓度,抑制细胞凋亡,发挥肾保护作用。 展开更多
关键词 肾小管上皮细胞 缺血再灌注损伤 肾损伤分子-1 NO 凋亡 冬虫夏草
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高糖对人类肾小球系膜细胞PKC及MMPs/TIMPs的影响 被引量:4
9
作者 杨敬华 周巧玲 +2 位作者 王衍慧 刘抗寒 张军 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期425-431,共7页
目的:研究体外高糖环境下人类肾小球系膜细胞(NHMC)中PKC激活或使用PKC抑制剂干预后MMP2,9/TIMP1,2的表达,探讨PKC与MMPs/TIMPs信号转导在糖尿病肾病发生发展中的作用。方法:将NHMC分4组:N组(对照组,5mmol/L葡萄糖);H组(高糖组,30mmol/... 目的:研究体外高糖环境下人类肾小球系膜细胞(NHMC)中PKC激活或使用PKC抑制剂干预后MMP2,9/TIMP1,2的表达,探讨PKC与MMPs/TIMPs信号转导在糖尿病肾病发生发展中的作用。方法:将NHMC分4组:N组(对照组,5mmol/L葡萄糖);H组(高糖组,30mmol/L葡萄糖);P组(抑制剂组,30mmol/L葡萄糖+10-5mol/L白屈菜红碱);M组(甘露醇组,5mmol/L葡萄糖+25mmol/L甘露醇)。分别于上述4种不同成分培养基中进行细胞培养,第24,48,72h用MTT法测定NHMC增殖;并于培养后第24,48h收集细胞,抽提mRNA及蛋白质,用ELISA方法测定胞膜、胞核蛋白质PKC活性。用RT-PCR和Western印迹方法检测MMP2,9,TIMP1,2mRNA和蛋白质的表达。结果:高糖组细胞膜和胞核部分的PKC活性较对照组明显升高(P<0.01),MMP2,9,TIMP1,2mRNA及蛋白质的表达较对照组明显上升(P<0.01);而MMP-9/TIMP-1,MMP-2/TIMP-2比值较对照组明显下降(P<0.05)。高糖加PKC抑制剂白屈菜红碱后,MMP2,9,TIMP1mRNA及蛋白质表达较对照组明显升高(P<0.01),但MMP9/TIMP1,MMP2/TIMP2比值较高糖组明显升高(分别P<0.05,P<0.01)。PKC活性与MMP-2/TIMP-2及MMP-9/TIMP-1的蛋白质比值均呈负相关(分别r=-0.651,r=-0.702,均P<0.05)。结论:高糖可刺激人类肾小球系膜细胞PKC活化,在DN中PKC活化与MMP2,9/TIMP1,2的表达水平有密切关系。 展开更多
关键词 蛋白激酶C 基质金属蛋白酶 金属蛋白酶组织抑制物 糖尿病肾病 系膜细胞
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金属基质蛋白酶9及其组织抑制物1在肾组织中的表达和调控 被引量:7
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作者 周巧玲 杨敬华 +2 位作者 彭卫生 王衍慧 刘抗寒 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 2007年第2期134-140,共7页
目的:观察STZ鼠肾组织及高糖状态下正常人类系膜细胞(NHMC)中金属基质蛋白酶9(MMP-9)、金属基质蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)表达状况及磷酸肌酸激酶(PKC)抑制剂对其表达的影响,探讨糖尿病肾病(DN)时PKC抑制剂在细胞外基质降解中的作用。... 目的:观察STZ鼠肾组织及高糖状态下正常人类系膜细胞(NHMC)中金属基质蛋白酶9(MMP-9)、金属基质蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)表达状况及磷酸肌酸激酶(PKC)抑制剂对其表达的影响,探讨糖尿病肾病(DN)时PKC抑制剂在细胞外基质降解中的作用。方法:Wistar大鼠随机分为正常对照组、DN模型组、PKC抑制剂组。PKC抑制剂组采用根皮素10mg/(kg.d)混悬液灌胃进行干预。第8周处死大鼠(每组6只)。检测24h尿蛋白定量、血肌酐水平。用免疫组化方法检测肾脏组织MMP-9、TIMP-1的表达。用ELISA方法检测肾脏组织PKC活性。体外实验,将NHMC置37℃,5%CO2培养箱中进行培养。并将NHMC分为N组(对照组):糖浓度5mmol/L,H组(高糖组):糖浓度30mmol/L,P组(高糖加PKC抑制剂):糖浓度30mmol/L加chelery thrine chloride 10-5mmol/L,M组(甘露醇组):甘露醇30mmol/L。于培养24、48、72h后用MTT法测定细胞增值。采用ELISA方法检测四组PKC活性。分别用RT-PCR及Western Blot检测各组MMP-9、TIMP-1mRNA及蛋白表达。结果:DN模型组尿蛋白排泄明显增加(P<0.01),血肌酐上升(P<0.05),PKC活性明显增高,MMP-9和TIMP-1出现表达,MMP-9/TIMP-1比值降低。PKC抑制剂干预后其尿蛋白排泄明显减少,血肌酐水平降低,PKC活性下降,MMP-9、TIMP-1表达上调,其MMP-9/TIMP-1比值增高。体外实验中,高糖能促进NHMC增殖,且NHMC的增殖状况随时间的递增而明显增加。高糖(30mmol/L)能增加系膜细胞PKC的活性,MMP-9、TIMP-1较高表达,MMP-9/TIMP-1比值降低。而PKC抑制剂使PKC的活性降低同时,MMP-9、TIMP-1表达上调,MMP-9/TIMP-1比值增高。结论:高糖可诱导PKC活性,PKC抑制剂能使MMP-9、TIMP-1表达上调,MMP-9/TIMP-1表达比值升高,推测PKC的活性状况可影响DN细胞外基质降解过程。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 金属基质蛋白酶9 金属基质蛋白酶组织抑制物1 磷酸肌酸激酶抑制剂
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罗格列酮联合洛沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞的协同保护作用 被引量:7
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作者 陈立平 周巧玲 +4 位作者 彭卫生 刘抗寒 欧阳春 吴晓英 尹红玲 《实用医学杂志》 CAS 2007年第8期1124-1126,共3页
目的:探讨罗格列酮联合洛沙坦对糖尿病肾病(DN)大鼠足细胞的协同保护作用。方法:制备DN大鼠模型,将动物随机分为DN模型组、罗格列酮干预组、洛沙坦干预组及罗格列酮联合洛沙坦干预组,另设正常对照组。8周后观察尿蛋白排泄量,用免疫组化... 目的:探讨罗格列酮联合洛沙坦对糖尿病肾病(DN)大鼠足细胞的协同保护作用。方法:制备DN大鼠模型,将动物随机分为DN模型组、罗格列酮干预组、洛沙坦干预组及罗格列酮联合洛沙坦干预组,另设正常对照组。8周后观察尿蛋白排泄量,用免疫组化、RT-PCR方法检测肾皮质nephrin、podocin蛋白及mRNA表达,用透射电镜检测足细胞超微结构变化。结果:(1)各干预组DN鼠尿蛋白排泄均减少。(2)联合干预组对足细胞超微结构及nephrin、podocin下调的改善作用优于单药干预组。结论:罗格列酮与洛沙坦联合用药对DN大鼠肾脏保护作用优于单种药物治疗,其机制部分与改善足细胞超微结构及上调nephrin、podocin表达有关。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 噻唑烷二酮类 洛沙坦 大鼠 足细胞
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洛沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞nephrin及podocin表达的影响 被引量:4
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作者 陈立平 周巧玲 +2 位作者 刘抗寒 吴晓英 尹红玲 《中国全科医学》 CAS CSCD 2008年第17期1544-1546,1549,共4页
目的探讨洛沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞超微结构及其相关分子nephrin、podocin表达的影响。方法将30只Wistar大鼠随机分为3组:正常对照组(N组)、糖尿病肾病组(D组)和洛沙坦干预组(L组)。L组大鼠给予洛沙坦50mg·kg-1·d-1灌胃,... 目的探讨洛沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞超微结构及其相关分子nephrin、podocin表达的影响。方法将30只Wistar大鼠随机分为3组:正常对照组(N组)、糖尿病肾病组(D组)和洛沙坦干预组(L组)。L组大鼠给予洛沙坦50mg·kg-1·d-1灌胃,N组和D组大鼠给予等量饮用水灌胃。于第4周和第8周检测3组大鼠24h尿蛋白(Pro)量、血清肌酐(Scr)、三酰甘油(TG)和胆固醇(CHO)水平;用免疫组化、RT-PCR方法检测肾皮质nephrin、podocin蛋白及二者mRNA表达水平;用透射电镜检测足细胞超微结构变化。结果造模后第4周和第8周,D组大鼠24h Pro、Scr、TG、CHO水平与N组比较,差别有统计学意义(P<0.01);造模后第4周,L组大鼠24 hPro与D组比较,差别有统计学意义(P<0.05),造模后第8周,L组大鼠24h Pro和Scr水平与D组比较,差别有统计学意义(P<0.01)。第4周和第8周,D组大鼠nephrin及podocin蛋白表达水平与N组比较,差别有统计学意义(P<0.05);而且L组大鼠nephrin及podocin蛋白表达水平与D组比较,差别亦有统计学意义(P<0.05)。第4周和第8周,D组大鼠足细胞数、足突平均宽度(FPW)、足突融合率、基底膜厚度与N组比较,差别有统计学意义(P<0.01);L组大鼠足细胞数、FPW、足突融合率、基底膜厚度与D组比较,差别亦有统计学意义(P<0.01)。第4和第8周,D组大鼠nephrin mRNA和podocin mRNA表达水平与N组比较,差别有统计学意义(P<0.01);L组大鼠nephrin mRNA和podocin mRNA表达水平与D组大鼠比较,差别亦有统计学意义(P<0.05)。结论洛沙坦能通过上调nephrin和podocin表达水平来改善足细胞超微结构,减少糖尿病肾病大鼠蛋白尿。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 洛沙坦 NEPHRIN PODOCIN
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泌尿系统感染的细菌学临床分析
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作者 刘抗寒 《中文科技期刊数据库(文摘版)医药卫生》 2015年第5期43-43,12,共2页
目的:研究分析泌尿系统感染的病原菌分布及耐药情况,为临床治疗提供依据。方法:从我院泌尿科感染患者的终端尿标本中分离300株病原菌,采用迪尔半自动微生物分析鉴定以对病原菌的分布进行鉴定,并选用K-B法行药敏实验,对研究进过进... 目的:研究分析泌尿系统感染的病原菌分布及耐药情况,为临床治疗提供依据。方法:从我院泌尿科感染患者的终端尿标本中分离300株病原菌,采用迪尔半自动微生物分析鉴定以对病原菌的分布进行鉴定,并选用K-B法行药敏实验,对研究进过进行耐药性分析,结果:300株离菌中,203株革兰氏阴性杆菌,占总例数百分比67.6%,62株属于革兰阳性球菌,占总例数百分比20.6,真菌共35株,占总例数11.8。药敏结果显示,各类菌种对抗病菌药物的耐药性都比较强,以头孢类抗菌药物的耐药性尤为突出,所有病菌对此类药物的耐药性都超过了500/o,多数在60%以上。结论:头孢类抗菌药物有着很高的耐药性,作为医护人员必须予以重视,要全面提高合理使用抗菌药的意识,在进行抗感染前需先做细菌培养和药敏实验,针对病原菌来合理选用相应的抗菌药物。 展开更多
关键词 泌尿系统 病原菌 耐性性
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冬虫夏草抑制ET-1对糖尿病肾病大鼠肾小管上皮细胞转分化作用 被引量:11
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作者 肖舟 陈晨 +4 位作者 李晓照 刘抗寒 袁明霞 包瑞南 周巧玲 《中国中西医结合肾病杂志》 2012年第12期1082-1085,I0013,I0014,共6页
目的:观察冬虫夏草对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾小管上皮细胞转分化过程中所起的作用,探讨其在抗肾纤维化中可能的作用机制。方法:(1)干预处理后检测各组大鼠血、尿等相关指标,验证DN大鼠模型是否构建成功,比较不同组... 目的:观察冬虫夏草对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾小管上皮细胞转分化过程中所起的作用,探讨其在抗肾纤维化中可能的作用机制。方法:(1)干预处理后检测各组大鼠血、尿等相关指标,验证DN大鼠模型是否构建成功,比较不同组大鼠血糖、体重、肾重、肾脏肥大指数等的差异;(2)比较各组大鼠24h尿蛋白及血肌酐的差异;(3)免疫组化分析各组大鼠肾脏病理改变及纤维化程度;(4)免疫组化分析各组大鼠肾组织中ET-1、α-SMA和E-Cadherin等蛋白的表达病分析其相关性;(5)RT-PCR检测各组大鼠肾组织中ET-1、α-SMA和E-Cadherin mRNA水平的表达。结果:(1)DN大鼠模型构建成功,与对照组比较DN组大鼠血糖、体重、肾重、肾脏肥大指数差异明显(P<0.01);虫草组介于模型组与DN组之间(P<0.05);(2)各组大鼠的肌酐、蛋白尿差异有统计学意义(P<0.05);(3)虫草组病理改变较正常组严重(P<0.05),较模型组轻微(P<0.01);(4)DN大鼠肾组织中ET-1、α-SMA表达上调,E-Cadherin表达减少(P<0.05或P<0.01)。ET-1与α-SMA呈正相关(r=0.795,P<0.01),与E-Cadherin呈负相关(r=0.7353,P<0.01)。(5)冬虫夏草能明显减少糖尿病肾病大鼠尿蛋白排泄量,降低血清肌酐,改善糖尿病肾病肾组织病理形态学(P<0.05或P<0.01)同时能明显抑制肾组织中ET-1表达,调整肾组织α-SMA与E-Cadherin表达水平(P<0.05及P<0.01)。结论:冬虫夏草可以减轻DN大鼠模型肾脏纤维化的程度,这可能是通过抑制ET-1对糖尿病肾病大鼠肾小管上皮细胞转分化作用而实现的。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 肾小管上皮转分化冬虫夏草 内皮素
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血清YKL-40、FABP4水平与腹膜透析患者容量超负荷的关系 被引量:3
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作者 罗逊 曼婷 +2 位作者 李世瑶 刘抗寒 陈莹 《山东医药》 CAS 2018年第41期30-33,共4页
目的探讨血清甲壳酶类似蛋白(YKL-40)、脂肪酸结合蛋白(FABP4)水平与腹膜透析患者容量超负荷的关系。方法选择肾内科收治的腹膜透析患者98例,并分为容量超负荷组(59例)和容量正常组(39例)。采用多频生物电阻抗(BIA)分析仪测量人体细胞外... 目的探讨血清甲壳酶类似蛋白(YKL-40)、脂肪酸结合蛋白(FABP4)水平与腹膜透析患者容量超负荷的关系。方法选择肾内科收治的腹膜透析患者98例,并分为容量超负荷组(59例)和容量正常组(39例)。采用多频生物电阻抗(BIA)分析仪测量人体细胞外液/总液体值(ECW/TBW),采集空腹静脉血标本测定血生化指标和FABP4、YKL-40,收集患者24 h尿量检测尿素和尿肌酐,计算残余肾功能(RRF)。分析上述指标与容量超负荷的相关性。结果容量超负荷组年龄、甘油三酯(TG)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、FABP4、YKL-40高于容量正常组(P均<0. 05),容量超负荷组白蛋白(Alb)、RRF低于容量正常组(P均<0. 05); ECW/TBW与年龄、hs-CRP、FABP4、YKL-40呈正相关(r分别为0. 344、0. 544、0. 422、0. 395,P均<0. 05),与Alb、RRF呈负相关(r分别为-0. 424、-0. 367,P均<0. 05)。Logistic回归分析显示,hs-CRP、RRF、FABP4及YKL-40与腹膜透析患者容量负荷水平有关(P均<0. 05)。结论血清YKL-40、FABP4水平与腹膜透析患者容量负荷呈正相关,二者可能在容量超负荷进展中发挥协同作用。 展开更多
关键词 腹膜透析 容量负荷 甲壳酶类似蛋白 脂肪酸结合蛋白
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肾病综合征合并血栓栓塞症21例临床分析 被引量:3
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作者 陈立平 周巧玲 刘抗寒 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第19期3026-3027,共2页
目的提高对肾病综合征(NS)合并血栓栓塞症的认识。方法对21例NS合并血栓栓塞症患者进行回顾分析。结果NS时,深静脉血栓最多见;生化检查示血脂、а2-球蛋白、纤维蛋白原明显升高;抗凝+溶栓治疗有效。结论NS时常存在高凝状态,易并发血栓形... 目的提高对肾病综合征(NS)合并血栓栓塞症的认识。方法对21例NS合并血栓栓塞症患者进行回顾分析。结果NS时,深静脉血栓最多见;生化检查示血脂、а2-球蛋白、纤维蛋白原明显升高;抗凝+溶栓治疗有效。结论NS时常存在高凝状态,易并发血栓形成;一旦疑有此症,应尽早检查确诊并立即溶栓。 展开更多
关键词 肾病综合征 血栓 栓塞
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血管紧张素Ⅱ在5/6肾切除动物模型EMT中作用的研究 被引量:1
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作者 许辉 刘抗寒 陶立坚 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第15期2250-2253,共4页
目的探讨血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)可能在慢性肾脏纤维化动物模型上皮-间充质细胞转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的表达及可能的作用。方法大鼠慢性肾纤维化模型用5/6肾切除法制作,假手术组为对照组,模型组随... 目的探讨血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)可能在慢性肾脏纤维化动物模型上皮-间充质细胞转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的表达及可能的作用。方法大鼠慢性肾纤维化模型用5/6肾切除法制作,假手术组为对照组,模型组随机分为手术组和培跺普利治疗组。治疗5周后,用Masson三色染色半定量法检测胶原在3组肾脏的沉积;Western-blotting法检测E钙黏蛋白(E-cadherin)在3组肾组织中的表达;实时荧光定量PCR法检测AngⅡ与E-cadherin mRNA在肾组织的表达。结果与对照组比,手术组的胶原含量和AngⅡmRNA明显增加(P<0.01);而E-cadherin与E-cadherin mRNA在手术组的含量明显降低(P<0.01)。培跺普利能减少胶原的沉积和AngⅡmRNA的表达(P<0.01),显著增加E-cadherin与E-cadherin mRNA的表达。E-cadherin的表达与AngⅡ负相关(r=-0.64,P<0.01)。结论AngⅡ可能通过降低E-cadherin的表达参与EMT,导致肾脏纤维化;培跺普利可通过减少AngⅡ和增加E-cadherin的表达来减轻肾脏纤维化。 展开更多
关键词 纤维化 血管紧张素Ⅱ E钙黏蛋白 动物模型
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罗格列酮对高糖时人肾小球系膜细胞单核细胞趋化蛋白-1表达的影响 被引量:2
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作者 杨敬华 周巧玲 +1 位作者 王衍慧 刘抗寒 《医学临床研究》 CAS 2006年第12期1948-1950,共3页
【目的】探讨高糖对人肾小球系膜细胞(HRMC)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响,以及过氧化物酶增殖体激动剂罗格列酮对其影响及作用机制。【方法】将HRMC分为三组处理:①正常对照组(糖浓度5.5 mmol/L);②高糖(30 mmol/L)组;③高糖加... 【目的】探讨高糖对人肾小球系膜细胞(HRMC)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响,以及过氧化物酶增殖体激动剂罗格列酮对其影响及作用机制。【方法】将HRMC分为三组处理:①正常对照组(糖浓度5.5 mmol/L);②高糖(30 mmol/L)组;③高糖加罗格列酮(5μmol/L,10μmol/L)组。用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测MCP-1 mRNA表达,用ElISA方法测定细胞上清MCP-1蛋白浓度。【结果】高糖刺激系膜细胞后MCP-1 mRNA表达明显升高,蛋白浓度增加,加入罗格列酮后MCP-1表达明显下降。且随罗格列酮浓度增大,作用更明显。【结论】高糖刺激HRMC,其MCP-1表达增强,可能是糖尿病肾病(DN)发病机制中的一个重要途径。罗格列酮能抑制MCP-1mRNA表达及蛋白合成,说明其具有抑制炎症的作用,在预防DN的发生发展中可能有重要意义。 展开更多
关键词 肾小球膜/细胞学 单核细胞化学吸引蛋白质类 噻唑类
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α-硫辛酸对终末期肾脏疾病患者晚期氧化蛋白产物的影响 被引量:1
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作者 刘抗寒 +2 位作者 殷薇 陈愔音 梁玉梅 《医学临床研究》 CAS 2014年第2期349-351,共3页
【目的】研究α-硫辛酸对终末期肾脏疾病(ES RD )患者晚期氧化蛋白产物的影响,探讨其可能的保护作用。【方法】将在本院进行维持性血液透析或腹膜透析的ES RD患者共45例,随机分为三组,每组15例,A组为α-硫辛酸治疗组,B组为维生素... 【目的】研究α-硫辛酸对终末期肾脏疾病(ES RD )患者晚期氧化蛋白产物的影响,探讨其可能的保护作用。【方法】将在本院进行维持性血液透析或腹膜透析的ES RD患者共45例,随机分为三组,每组15例,A组为α-硫辛酸治疗组,B组为维生素E治疗组,C组为常规治疗组。另外选取本院健康体检者15例为正常对照组(N组)。治疗前及各组治疗半个月后,抽血监测血浆氧化应激指标晚期氧化蛋白产物(AOPP )、超氧化物歧化酶(SOD)并进行比较。【结果】治疗前A、B、C三组患者血浆AOPP含量均高于N组,SOD含量均低于N组,且与N组相比较差异均有显著性(均 P <0.01),而 A、B、C三组之间 AOPP、SOD含量相比较差异均无显著性( P >0.05)。治疗后A、B组AOPP含量较治疗前均有所下降,且与治疗前相比差异均有显著性( P<0.05),与B组比较,A组AOPP含量下降更为明显,且差异有显著性( P <0.01)。而A、B组SOD含量较治疗前均有所升高,且与治疗前相比差异均有显著性( P <0.05),与B组比较,A 组SOD含量升高更明显,且差异有显著性( P <0.01)。C组患者AOPP、SOD含量与治疗前相比较差异均无显著性( P >0.05)。【结论】α-硫辛酸能降低ESRD患者氧化应激水平,且疗效优于使用维生素E治疗组。 展开更多
关键词 肾疾病 硫辛酸 蛋白质类
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Lee氏分级和牛津分型在IgA肾病中应用和临床意义 被引量:5
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作者 付双双 杨伊雅 +5 位作者 梁玉梅 殷薇 刘抗寒 陈莹 陈愔音 罗逊 《中国实验诊断学》 2019年第10期1679-1682,共4页
目的探究Lee氏分级和牛津分型与临床指标之间的相关性,为临床制定个体化治疗方案,判断预后提供依据。方法收集2017年8月至2018年8月在湖南省人民医院(湖南师范大学附属第一医院)肾脏免疫科经肾活检确诊的67例原发性IgA肾病患者的临床和... 目的探究Lee氏分级和牛津分型与临床指标之间的相关性,为临床制定个体化治疗方案,判断预后提供依据。方法收集2017年8月至2018年8月在湖南省人民医院(湖南师范大学附属第一医院)肾脏免疫科经肾活检确诊的67例原发性IgA肾病患者的临床和病理资料,采用单因素logistic回归分析进行统计学分析。结果 IgA肾病占同期总肾活检病例的36.7%,67例IgA肾病患者男女比例为28∶39,平均年龄(36.15±11.86)岁,平均病程(19.65±29.55)个月。无症状性血尿、伴或不伴轻度蛋白尿型患者Lee氏分级多为Ⅱ型或Ⅲ型;慢性肾炎综合征型患者除Lee氏Ⅰ型外,其它类型均有分布;肾病综合征型集中在Ⅱ型或V型。Lee氏分级与eGFR呈正相关,且有统计学意义(P<0.05)。无症状性血尿、伴或不伴轻度蛋白尿型患者牛津分型多为M1E0S0T0C0,细胞或纤维细胞新月体病变相对较轻。细胞或纤维细胞新月体病变与24小时尿蛋白定量、血浆纤维蛋白原呈正相关,且有统计学意义(P<0.05)。结论 eGFR、24小时尿蛋白定量、血浆纤维蛋白原与Lee氏分级或牛津分型呈正相关,对于上述临床指标异常的患者应及时行肾活检,明确病理分级,给予个体化治疗,改善预后。 展开更多
关键词 IGA肾病 Lee氏分级 牛津分型 临床指标
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