目的探讨滋阴补肾片(ZYBS)对H_(2)O_(2)诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞ARPE-19氧化应激损伤的保护作用。方法将ARPE-19细胞分为对照组(CG)、模型组(MG)、低剂量ZYBS组(LZYBS)、中剂量ZYBS组(MZYBS)、高剂量ZYBS组(HZYBS),CG组不作任...目的探讨滋阴补肾片(ZYBS)对H_(2)O_(2)诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞ARPE-19氧化应激损伤的保护作用。方法将ARPE-19细胞分为对照组(CG)、模型组(MG)、低剂量ZYBS组(LZYBS)、中剂量ZYBS组(MZYBS)、高剂量ZYBS组(HZYBS),CG组不作任何处理,MG组加入200 mM H_(2)O_(2)处理24 h,LZYBS、MZYBS、HZYBS组分别加入0.5%、1.0%、2.0%的ZYBS含药血清后,再加入200 mM H_(2)O_(2)处理24 h。细胞计数试剂-8(CCK-8)测定各组细胞活性,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)细胞原位凋亡试剂盒测定细胞凋亡,生化试剂盒检测细胞上清液中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)的表达水平。结果(1)细胞活性:与CG组比较,MG组ARPE-19细胞活性降低(t=27.844,P=0.000);与MG组比较,LZYBS、MZYBS、HZYBS组ARPE-19细胞活性升高(t_(LZYBS)=3.550,P=0.003;t_(MZYBS)=7.402,t_(HZYBS)=10.930,均P=0.000),差异均有统计学意义,且细胞活性随浓度的升高呈剂量依赖性。(2)细胞凋亡:与CG组比较,MG组ARPE-19细胞凋亡率升高(t=25.611,P=0.000);与MG组比较,MZYBS、HZYBS组ARPE-19细胞凋亡率降低(t_(MZYBS)=4.376,P=0.001;t_(HZYBS)=8.166,P=0.000),差异均有统计学意义,且细胞凋亡率随浓度的升高呈剂量依赖性。(3)氧化应激:与CG组比较,MG组ARPE-19细胞ROS、MDA水平升高(t_(ROS)=27.333,t_(MDA)=23.922,均P=0.000),SOD、GSH-Px水平降低(t_(SOD)=11.083,t_(GSH-Px)=14.192,均P=0.000);与MG组比较,LZYBS、MZYBS、HZYBS组ARPE-19细胞ROS(t_(LZYBS)=6.410,t_(MZYBS)=10.417,t_(HZYBS)=10.116,均P=0.000)、MDA(t_(LZYBS)=4.998,t_(MZYBS)=12.319,t_(HZYBS)=19.922,均P=0.000)水平降低,SOD(t_(LZYBS)=6.268,t_(MZYBS)=7.889,t_(HZYBS)=14.894,均P=0.000)、GSH-Px(GSH-Px:t_(LZYBS)=4.453,P=0.001;t_(MZYBS)=6.162,t_(HZYBS)=11.501,均P=0.000)水平升高,差异均有统计学意义,且呈剂量依赖性。结论ZYBS可降低H_(2)O_(2)诱导的RPE细胞的氧化应激损伤,抑制凋亡并减轻氧化应激水平。展开更多
文摘目的探讨滋阴补肾片(ZYBS)对H_(2)O_(2)诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞ARPE-19氧化应激损伤的保护作用。方法将ARPE-19细胞分为对照组(CG)、模型组(MG)、低剂量ZYBS组(LZYBS)、中剂量ZYBS组(MZYBS)、高剂量ZYBS组(HZYBS),CG组不作任何处理,MG组加入200 mM H_(2)O_(2)处理24 h,LZYBS、MZYBS、HZYBS组分别加入0.5%、1.0%、2.0%的ZYBS含药血清后,再加入200 mM H_(2)O_(2)处理24 h。细胞计数试剂-8(CCK-8)测定各组细胞活性,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)细胞原位凋亡试剂盒测定细胞凋亡,生化试剂盒检测细胞上清液中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)的表达水平。结果(1)细胞活性:与CG组比较,MG组ARPE-19细胞活性降低(t=27.844,P=0.000);与MG组比较,LZYBS、MZYBS、HZYBS组ARPE-19细胞活性升高(t_(LZYBS)=3.550,P=0.003;t_(MZYBS)=7.402,t_(HZYBS)=10.930,均P=0.000),差异均有统计学意义,且细胞活性随浓度的升高呈剂量依赖性。(2)细胞凋亡:与CG组比较,MG组ARPE-19细胞凋亡率升高(t=25.611,P=0.000);与MG组比较,MZYBS、HZYBS组ARPE-19细胞凋亡率降低(t_(MZYBS)=4.376,P=0.001;t_(HZYBS)=8.166,P=0.000),差异均有统计学意义,且细胞凋亡率随浓度的升高呈剂量依赖性。(3)氧化应激:与CG组比较,MG组ARPE-19细胞ROS、MDA水平升高(t_(ROS)=27.333,t_(MDA)=23.922,均P=0.000),SOD、GSH-Px水平降低(t_(SOD)=11.083,t_(GSH-Px)=14.192,均P=0.000);与MG组比较,LZYBS、MZYBS、HZYBS组ARPE-19细胞ROS(t_(LZYBS)=6.410,t_(MZYBS)=10.417,t_(HZYBS)=10.116,均P=0.000)、MDA(t_(LZYBS)=4.998,t_(MZYBS)=12.319,t_(HZYBS)=19.922,均P=0.000)水平降低,SOD(t_(LZYBS)=6.268,t_(MZYBS)=7.889,t_(HZYBS)=14.894,均P=0.000)、GSH-Px(GSH-Px:t_(LZYBS)=4.453,P=0.001;t_(MZYBS)=6.162,t_(HZYBS)=11.501,均P=0.000)水平升高,差异均有统计学意义,且呈剂量依赖性。结论ZYBS可降低H_(2)O_(2)诱导的RPE细胞的氧化应激损伤,抑制凋亡并减轻氧化应激水平。
