背景:活髓切断术现作为永久保存活髓的治疗方法,术中选择合适的盖髓材料可在较大程度上增强其临床疗效并扩大其应用范围。目的:探讨云南白药、iRoot BP Plus及其联合应用对炎症状态下牙髓干细胞矿化的影响。方法:采用组织块法培养人原...背景:活髓切断术现作为永久保存活髓的治疗方法,术中选择合适的盖髓材料可在较大程度上增强其临床疗效并扩大其应用范围。目的:探讨云南白药、iRoot BP Plus及其联合应用对炎症状态下牙髓干细胞矿化的影响。方法:采用组织块法培养人原代牙髓干细胞,MTT法测定云南白药、iRoot BP Plus对牙髓干细胞增殖的影响,确定最佳干预质量浓度。将第3-6代牙髓干细胞分为5组:正常对照组、炎症对照组、云南白药组、iRoot BP Plus组、云南白药+iRoot BP Plus组,后4组使用1μg/mL脂多糖诱导2 h进行细胞造模,然后分别采用75μg/mL云南白药、100μg/mL iRoot BP Plus及两者联用进行刺激,采用碱性磷酸酶染色法、茜素红S染色法、Real time-PCR法、Western blot法检测药物对细胞矿化的影响。结果与结论:①与炎症对照组比较,云南白药、iRoot BP Plus及其联合应用处理后抑制了肿瘤坏死因子αmRNA的表达(P<0.001),云南白药+iRoot BP Plus组肿瘤坏死因子αmRNA的表达明显低于云南白药组、iRoot BP Plus组(P<0.001);②与炎症对照组比较,经云南白药、iRoot BP Plus及其联合应用处理后矿化结节数量、碱性磷酸酶活性显著增加,云南白药+iRoot BP Plus组矿化结节量、碱性磷酸酶活性高于云南白药组、iRoot BP Plus组(P<0.001);③与炎症对照组比较,经云南白药、iRoot BP Plus及其联合应用处理后DSPP、IBSP、MEPE mRNA的表达增加(P<0.001),云南白药+iRoot BP Plus组DSPP、IBSP、MEPE mRNA的表达高于云南白药组、iRoot BP Plus组(P<0.001);④与炎症对照组比较,云南白药组、云南白药+iRoot BP Plus组Akt、mTOR的磷酸化增加(P<0.001);⑤结果表明,云南白药、iRoot BP Plus均能促进牙髓干细胞矿化,两者联合应用矿化作用更显著;云南白药对牙髓干细胞的促矿化作用与Akt/mTOR通路相关。展开更多
目的:通过过表达及knockdown c-Jun基因,观察小鼠成釉细胞中釉成熟蛋白(amelotin)的表达变化,以初步确定c-Jun对amelotin的调控作用。方法:①应用免疫组化和细胞免疫荧光方法观察体内外成釉细胞中的c-Jun及amelotin的表达情况;②RT-PCR...目的:通过过表达及knockdown c-Jun基因,观察小鼠成釉细胞中釉成熟蛋白(amelotin)的表达变化,以初步确定c-Jun对amelotin的调控作用。方法:①应用免疫组化和细胞免疫荧光方法观察体内外成釉细胞中的c-Jun及amelotin的表达情况;②RT-PCR获得c-Jun基因,克隆至pcDNA3.1/myc-hisA,瞬时转染成釉细胞,real time RT-PCR观察其对amelotin表达的影响;③化学合成c-Jun siRNA,瞬时转染成釉细胞,re-al time RT-PCR观察其对amelotin表达的影响。结果:①体内外成釉细胞中c-Jun和amelotin均有表达,c-Jun主要在成釉细胞胞核中表达,amelotin在成釉细胞和釉质全层均有表达;②成功构建c-Jun真核重组表达载体pcDNA3.1/myc-hisA-c-Jun,转染成釉细胞后amelotin mRNA表达水平显著上升;③成功沉默c-Jun,amelotin在转染c-Jun siRNA组表达水平显著下降。结论:在成釉细胞中,c-Jun在转录水平调控amelotin基因的表达。展开更多
文摘背景:活髓切断术现作为永久保存活髓的治疗方法,术中选择合适的盖髓材料可在较大程度上增强其临床疗效并扩大其应用范围。目的:探讨云南白药、iRoot BP Plus及其联合应用对炎症状态下牙髓干细胞矿化的影响。方法:采用组织块法培养人原代牙髓干细胞,MTT法测定云南白药、iRoot BP Plus对牙髓干细胞增殖的影响,确定最佳干预质量浓度。将第3-6代牙髓干细胞分为5组:正常对照组、炎症对照组、云南白药组、iRoot BP Plus组、云南白药+iRoot BP Plus组,后4组使用1μg/mL脂多糖诱导2 h进行细胞造模,然后分别采用75μg/mL云南白药、100μg/mL iRoot BP Plus及两者联用进行刺激,采用碱性磷酸酶染色法、茜素红S染色法、Real time-PCR法、Western blot法检测药物对细胞矿化的影响。结果与结论:①与炎症对照组比较,云南白药、iRoot BP Plus及其联合应用处理后抑制了肿瘤坏死因子αmRNA的表达(P<0.001),云南白药+iRoot BP Plus组肿瘤坏死因子αmRNA的表达明显低于云南白药组、iRoot BP Plus组(P<0.001);②与炎症对照组比较,经云南白药、iRoot BP Plus及其联合应用处理后矿化结节数量、碱性磷酸酶活性显著增加,云南白药+iRoot BP Plus组矿化结节量、碱性磷酸酶活性高于云南白药组、iRoot BP Plus组(P<0.001);③与炎症对照组比较,经云南白药、iRoot BP Plus及其联合应用处理后DSPP、IBSP、MEPE mRNA的表达增加(P<0.001),云南白药+iRoot BP Plus组DSPP、IBSP、MEPE mRNA的表达高于云南白药组、iRoot BP Plus组(P<0.001);④与炎症对照组比较,云南白药组、云南白药+iRoot BP Plus组Akt、mTOR的磷酸化增加(P<0.001);⑤结果表明,云南白药、iRoot BP Plus均能促进牙髓干细胞矿化,两者联合应用矿化作用更显著;云南白药对牙髓干细胞的促矿化作用与Akt/mTOR通路相关。
文摘目的:通过过表达及knockdown c-Jun基因,观察小鼠成釉细胞中釉成熟蛋白(amelotin)的表达变化,以初步确定c-Jun对amelotin的调控作用。方法:①应用免疫组化和细胞免疫荧光方法观察体内外成釉细胞中的c-Jun及amelotin的表达情况;②RT-PCR获得c-Jun基因,克隆至pcDNA3.1/myc-hisA,瞬时转染成釉细胞,real time RT-PCR观察其对amelotin表达的影响;③化学合成c-Jun siRNA,瞬时转染成釉细胞,re-al time RT-PCR观察其对amelotin表达的影响。结果:①体内外成釉细胞中c-Jun和amelotin均有表达,c-Jun主要在成釉细胞胞核中表达,amelotin在成釉细胞和釉质全层均有表达;②成功构建c-Jun真核重组表达载体pcDNA3.1/myc-hisA-c-Jun,转染成釉细胞后amelotin mRNA表达水平显著上升;③成功沉默c-Jun,amelotin在转染c-Jun siRNA组表达水平显著下降。结论:在成釉细胞中,c-Jun在转录水平调控amelotin基因的表达。
