硝普钠和L-硝基-精氨酸甲酯对大鼠生精功能的影响 被引量：8

1

作者 李美香 贺丽萍 +3 位作者 谢远杰 温南 张晓红 刘月顺 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2004年第5期327-329,333,共4页

目的 :观察硝普钠 (SNP)与L 硝基 精氨酸甲酯 (L NAME)对大鼠睾丸生精细胞DNA及倍体细胞群的影响 ,探讨一氧化氮 (NO)对睾丸生精功能的作用。　方法 :4 0只雄性SD大鼠均分为 4组 ,分别于腹腔内注射SNP、L NAME、SNP +L NAME与生理盐水 ... 目的 :观察硝普钠 (SNP)与L 硝基 精氨酸甲酯 (L NAME)对大鼠睾丸生精细胞DNA及倍体细胞群的影响 ,探讨一氧化氮 (NO)对睾丸生精功能的作用。　方法 :4 0只雄性SD大鼠均分为 4组 ,分别于腹腔内注射SNP、L NAME、SNP +L NAME与生理盐水 (NS) ,1次 /d ,共 12d。于最后 1次给药后 2h颈动脉放血处死动物。收集血清于- 70℃冻存 ,放射免疫法测定血清内睾酮含量 ;Greiss法测定血清NOx-(硝酸盐 /亚硝酸盐 )含量 ;流式细胞术(FCM)测定睾丸内各级生精细胞DNA含量 ,计算 1c、2c、4c期细胞的百分比。　结果 :SNP组血清内NOx-含量高于NS组 (P <0 .0 1) ,睾酮含量低于NS组 (P <0 .0 1) ,1c细胞减少 (P <0 .0 1) ;L NAME组血清内NOx-含量低于NS组(P <0 .0 1) ,睾酮含量高于NS组 (P <0 .0 1) ,1c细胞增加 (P <0 .0 1)。SNP和L NAME混合注射时 ,血清内NOx-、睾酮的含量及 1c细胞与NS组无显著性变化 (P >0 .0 5 )。　结论 :增加外源性NO可抑制精子的产生 ,而抑制NO生成途径则可促进精子的生成。 展开更多

关键词 生精细胞 L-硝基-精氨酸甲酯 硝普钠 流式细胞术 大鼠

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硝普钠和L-硝基-精氨酸甲酯对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响 被引量：5

2

作者 李美香 贺丽萍 +4 位作者 谢远杰 张晓红 温南 龙治峰 刘月顺 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期66-69,共4页

目的　观察硝普钠 (SNP)和L 硝基 精氨酸甲酯 (L NAME)对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。　方法雄性SD大鼠分为 4组 :分别于腹腔内注射SNP、L NAME、SNP +L NAME与生理盐水 ,每天 1次 ,共 12d。颈动脉放血处死动物。流式细胞术 (FCM)结合... 目的　观察硝普钠 (SNP)和L 硝基 精氨酸甲酯 (L NAME)对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。　方法雄性SD大鼠分为 4组 :分别于腹腔内注射SNP、L NAME、SNP +L NAME与生理盐水 ,每天 1次 ,共 12d。颈动脉放血处死动物。流式细胞术 (FCM)结合TUNEL法检测睾丸生精细胞的凋亡。　结果　FCM结合TUNEL法检测发现SNP组亚单倍体峰 (AP峰 )及凋亡指数 (AI)较生理盐水组明显增高 ,L NAME组AP峰及AI显著低于生理盐水组 (P<0 0 1)。SNP和L NAME混合注射时 ,AP峰及AI与生理盐水组无显著性差异 (P >0 0 5 )。　结论　SNP促进生精细胞的凋亡 ,L NAME抑制生精细胞的凋亡 ,其对生精细胞凋亡的调节可能是由一氧化氮 (NO)介导的。 展开更多

关键词 生精细胞 硝普钠 L-硝基-精氨酸甲酯 凋亡 大鼠

原文传递

Caveolin-1对胃癌细胞系MGC803细胞生长的影响 被引量：9

3

作者 罗红梅 唐圣松 +6 位作者 廖端芳 严鹏科 谭力铭 汪煜华 龙治峰 刘月顺 朱炳阳 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2006年第15期1448-1452,共5页

目的:研究Caveolin-1对胃癌细胞增殖、分化的影响,以探讨Caveolin-1作为基因治疗的候选基因的可能性．方法:运用基因重组技术,将人全长 Caveolin-1基因稳定转染胃癌细胞系MGC803．建立能稳定表达Caveolin-1的胃癌细胞系．同时建立空载... 目的:研究Caveolin-1对胃癌细胞增殖、分化的影响,以探讨Caveolin-1作为基因治疗的候选基因的可能性．方法:运用基因重组技术,将人全长 Caveolin-1基因稳定转染胃癌细胞系MGC803．建立能稳定表达Caveolin-1的胃癌细胞系．同时建立空载体转染的MGC803细胞系作为空白对照,另用PD98059处理48 h作为阳性对照．以重组细胞系作为研究模型,通过免疫细胞化学及Western blot确认Caveolin-1蛋白在被转染细胞中的稳定表达．运用光学显微镜观察转染前后MGC803细胞形态的变化;另运用细胞计数检测了Caveolin-1对MGC803细胞生长的影响,流式细胞术分析了Caveolin-1对MGC803 细胞周期分布的影响．结果:Western blot结果显示,基因转染组及阳性对照组细胞中Vaveolin-1表达比未处理组细胞中明显增强(P<0．001,q值分别为23．067 与13.3376),且基因转染组中Caveolin-1表达比阳性对照组更强(P<0．00l,q=9．7294);基因转染后的MGC803细胞形态发生明显变化,由异形性明显、核大、胞质很少、核分裂明显变得形态较一致、胞质丰富、核／质比明显变小、核分裂相很少见;基因转染后细胞的群体倍增时间明显延长,由46．67 h延长至65．46 h,差异有统计学意义(P<0．05,q =4．8695):基因转染后细胞周期分布发生了明显变化,G0／G1期细胞数明显增多(P<0．01, q=9．1824),S期细胞数明显减少(P<0．01,q= 7．827),G2／M期细胞数无明显变化(P>0．05), Caveolin-1基因转染组与阳性对照组间细胞周期分布的变化也有明显差异性(其中G0／G1期 P<0．01,q=4．9323;S期P<0．05,q=3．3295)．结论:Caveolin-1既能诱导MGC803细胞分化又能将其阻滞于G0/G1期,通过延长细胞群体倍增时间而抑制胃癌细胞的体外增殖． 展开更多

关键词 CAVEOLIN-1 胃癌 细胞增殖 分化 基因治疗

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Bcl-2/Bax蛋白在生后大鼠卵巢不同发育时期的表达 被引量：4

4

作者 屈丽华 屈姣华 +4 位作者 刘月顺 龙治峰 罗文奇 石金凤 罗红梅 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期469-473,共5页

目的探讨Bcl-2/Bax与卵泡发育和凋亡的关系。方法用免疫组织化学技术和图像分析系统,对95只大鼠生后不同发育时期卵巢中凋亡相关因子Bcl-2/Bax的表达情况进行研究。结果0-360 d卵巢各级卵泡中的卵母细胞均呈Bcl-2/Bax阳性染色。正常卵... 目的探讨Bcl-2/Bax与卵泡发育和凋亡的关系。方法用免疫组织化学技术和图像分析系统,对95只大鼠生后不同发育时期卵巢中凋亡相关因子Bcl-2/Bax的表达情况进行研究。结果0-360 d卵巢各级卵泡中的卵母细胞均呈Bcl-2/Bax阳性染色。正常卵细胞中Bcl-2反应强于Bax,退化卵细胞中Bax的反应强于Bcl-2。Bcl-2/Bax在卵泡细胞中的表达模式有所不同,21d前Bcl-2为阳性,21-150d之间为Bcl-2阴性;180d以后正常卵泡为阴性,闭锁卵泡为阳性;Bax的表达,180d前全为阴性,180d后的表达同Bcl-2。膜细胞中Bcl-2/Bax的表达与卵泡细胞存在相似之处。Bcl-2/Bax在黄体中的表达只见于180d后。结论Bcl-2/Bax对卵细胞的生长、发育、存活和凋亡可能有重要的调节作用,其对卵泡细胞、膜细胞及黄体细胞的存活和凋亡的调节作用不明显。 展开更多

关键词 卵泡 BCL-2 BAX 免疫组织化学 大鼠

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N-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠实验性隐睾生精细胞凋亡及Bax表达的影响 被引量：3

5

作者 谢远杰 李美香 +3 位作者 赖琼 龙治峰 刘月顺 贺丽萍 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期710-714,共5页

目的研究N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对大鼠实验性隐睾生精细胞凋亡及凋亡相关基因Bax表达的影响。方法手术建立大鼠单侧隐睾模型,实验分为隐睾组、隐睾+L-NAME组[术后腹腔注射溶于生理盐水的L-NAME 50 mg/(kg.d)]、隐睾+生理盐水组、... 目的研究N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对大鼠实验性隐睾生精细胞凋亡及凋亡相关基因Bax表达的影响。方法手术建立大鼠单侧隐睾模型,实验分为隐睾组、隐睾+L-NAME组[术后腹腔注射溶于生理盐水的L-NAME 50 mg/(kg.d)]、隐睾+生理盐水组、假手术组,7 d后采用化学比色法检测睾丸组织NOS活性,流式细胞术(FCM)和原位缺口末端标记法(TUNEL)检测生精细胞凋亡,RT-PCR和免疫组织化学法检测Bax基因表达变化。结果隐睾组和隐睾+生理盐水组之间检测指标无明显差异;隐睾+L-NAME组隐睾凋亡细胞百分比和生精细胞凋亡指数均低于隐睾组及隐睾+生理盐水组,高于假手术组(P<0.05);Bax mRNA和蛋白表达水平隐睾组及隐睾+生理盐水组最高,假手术组次之,隐睾+L-NAME组最低。结论隐睾生精细胞Bax表达增加,L-NAME可通过下调Bax的表达抑制隐睾生精细胞凋亡。 展开更多

关键词 N-硝基-L广精氨酸甲酯 生精细胞 凋亡 Bax 原位缺口末端标记法 RT-PCR 大鼠

原文传递

p-p38MAPK在SD大鼠隐睾中的表达 被引量：5

6

作者 赖琼 贺丽萍 +3 位作者 谢远杰 李美香 龙治峰 刘月顺 《中国计划生育学杂志》 2004年第12期735-737,共3页

目的 :探讨丝裂原活化蛋白激酶 (p - p38MAPK)在隐睾所致生精障碍过程中的可能作用。方法 :SD雄性大鼠 4 0日龄时复制单侧隐睾模型 ,免疫组化SP法检测大鼠睾丸中p - p38MAPK的表达。结果 :术后第 7天 ,与正常侧睾丸相比 ,隐睾侧睾丸重... 目的 :探讨丝裂原活化蛋白激酶 (p - p38MAPK)在隐睾所致生精障碍过程中的可能作用。方法 :SD雄性大鼠 4 0日龄时复制单侧隐睾模型 ,免疫组化SP法检测大鼠睾丸中p - p38MAPK的表达。结果 :术后第 7天 ,与正常侧睾丸相比 ,隐睾侧睾丸重量明显减少 ,生精小管内生精细胞排列紊乱 ,生精细胞与精子的数量减少 ,可见较多多核巨细胞 ;p - p38MAPK只见于隐睾侧睾丸内生精上皮及间质细胞 ,在正常侧睾丸内未见表达。结论 :隐睾可导致p38MAPK活化 ,而 展开更多

关键词 p38MAPK 隐睾 睾丸 表达 正常 生精细胞 SD大鼠 多核巨细胞 丝裂原活化蛋白激酶 精子

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N-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠隐睾生精细胞凋亡的影响 被引量：3

7

作者 谢远杰 贺丽萍 +2 位作者 李美香 龙治峰 刘月顺 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期176-179,共4页

目的 :研究N 硝基 L 精氨酸甲酯 (L NAME)对实验性大鼠隐睾生精细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 :手术建立大鼠单侧隐睾模型 ,术后分别注射L NAME及生理盐水 ,7d后采用流式细胞术检测 2组大鼠隐睾生精细胞凋亡 ,免疫组化法检测隐睾内... 目的 :研究N 硝基 L 精氨酸甲酯 (L NAME)对实验性大鼠隐睾生精细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 :手术建立大鼠单侧隐睾模型 ,术后分别注射L NAME及生理盐水 ,7d后采用流式细胞术检测 2组大鼠隐睾生精细胞凋亡 ,免疫组化法检测隐睾内Bcl 2和Bax基因表达变化。结果 :实验组隐睾重量较对侧正常睾丸重量减轻的程度低于对照组 ,生精细胞凋亡百分比及Bax表达较对照组低 ,而Bcl 2表达较对照组高。结论 :L NAME可通过调控Bcl 2和Bax的表达抑制隐睾导致的生精细胞凋亡。 展开更多

关键词 N-硝基-L-精氨酸甲酯 大鼠 隐睾 生精细胞 细胞凋亡 流式细胞术 免疫组化法

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L-精氨酸与N-硝基-L-精氨酸单甲酯对雄性大鼠促性腺激素分泌的影响 被引量：3

8

作者 贺丽萍 李美香 +3 位作者 罗红梅 田英 刘月顺 龙治峰 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期220-222,共3页

目的 :阐明NO前体左旋精氨酸 (L arginine ,L Arg)和NO合酶的竞争性抑制剂N 硝基 L 精氨酸单甲基酯(Nω nitrio L arginine methyl ester,L NAME)对雄性性腺轴中腺垂体内分泌功能具有调节作用。　方法 :雄性SD大鼠分为 4组 ,每组 10只 ... 目的 :阐明NO前体左旋精氨酸 (L arginine ,L Arg)和NO合酶的竞争性抑制剂N 硝基 L 精氨酸单甲基酯(Nω nitrio L arginine methyl ester,L NAME)对雄性性腺轴中腺垂体内分泌功能具有调节作用。　方法 :雄性SD大鼠分为 4组 ,每组 10只 ,分别于腹腔内注射L Arg、L NAME、L Arg +L NAME和生理盐水 ,1次 /d ,注射 4 8d ,首次剂量加倍 ;分别于注射前及注射后 1、4、8、13、2 4、3 6、4 8d在大鼠尾部采血 ,用放射免疫测定法测定血清中黄体生成素(LH)和卵泡刺激素 (FSH)的含量 ,对所得数据进行统计学处理。　结果 :L Arg对FSH和LH的分泌具有促进作用(P <0 0 1) ,而L NAME则抑制FSH和LH的分泌 (P <0 0 1) ,两者都具有时间依赖性。L Arg和L NAME混合注射时 ,其FSH和LH的含量与生理盐水注射组无区别 (P >0 0 5 )。　结论 :NO对雄性大鼠垂体促性腺激素的分泌具有促进作用。 展开更多

关键词 一氧化氮 腺垂体 卵泡刺激素 黄体生成素 大鼠

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硝普钠和N^ω-单硝基-L-精氨酸甲酯对去垂体大鼠生精能力的影响 被引量：2

9

作者 李美香 谢远杰 +4 位作者 张晓红 温南 龙治峰 刘月顺 贺丽萍 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期270-272,共3页

目的:阐明NO对大鼠生精能力的影响及其作用机制。方法:大鼠去垂体,观察硝普钠(SNP)与N-ω单硝基L-精氨酸甲酯(L-NAME)对大鼠生精功能的直接作用。用放射免疫法测定血清内卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及睾酮含量;Greiss法测定血清NO-... 目的:阐明NO对大鼠生精能力的影响及其作用机制。方法:大鼠去垂体,观察硝普钠(SNP)与N-ω单硝基L-精氨酸甲酯(L-NAME)对大鼠生精功能的直接作用。用放射免疫法测定血清内卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及睾酮含量;Greiss法测定血清NO-x含量;流式细胞术测定各生精细胞DNA含量,计算1c、2c及4c期细胞的百分比。结果:各组血清LH、FSH和睾酮浓度显著下降或逐渐下降。SNP组血清内NO-x含量显著升高,L-NAME组血清内NO-x含量显著降低;对照组、L-NAME组和SNP+LNAME混合注射组的细胞分布均以1c为主;而SNP组的细胞以2c为主。结论:体内高浓度的糖皮质激素可屏蔽LH和FSH的分泌,进一步抑制睾酮的分泌;SNP与LNAME可通过NO直接影响生精细胞的凋亡。 展开更多

关键词 L-精氨酸甲酯 生精能力 去垂体 单硝基 硝普钠 大鼠 卵泡刺激素(FSH) 黄体生成素(LH) L-NAME 放射免疫法测定 细胞DNA含量 流式细胞术 糖皮质激素 SNP 作用机制 直接作用 生精功能 血清LH 细胞分布 混合注射 生精细胞 睾酮

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SB203580对大鼠隐睾生精细胞凋亡的影响 被引量：3

10

作者 石金凤 赖琼 +4 位作者 谢远杰 李美香 刘月顺 龙治峰 贺丽萍 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期157-159,共3页

目的:探讨SB203580对大鼠隐睾所致生精细胞凋亡过程中的作用。方法:雄性SD大鼠随机分为隐睾组、隐睾+SB203580(p38MAPK抑制剂)组、隐睾+溶媒组、假手术组。复制单侧隐睾模型,术后分别腹腔内注射溶媒或SB203580。7 d后快速断颈椎处死,TU... 目的:探讨SB203580对大鼠隐睾所致生精细胞凋亡过程中的作用。方法:雄性SD大鼠随机分为隐睾组、隐睾+SB203580(p38MAPK抑制剂)组、隐睾+溶媒组、假手术组。复制单侧隐睾模型,术后分别腹腔内注射溶媒或SB203580。7 d后快速断颈椎处死,TUNEL原位末端标记法结合流式细胞术(FCM)检测各组右侧睾丸生精细胞凋亡,免疫组化观察各组右侧睾丸磷酸化p38MAPK蛋白表达的变化。结果:FCM及TUNEL法均显示隐睾+ SB203580组生精细胞凋亡指数低于隐睾组和隐睾+溶媒组,同时磷酸化p38MAPK蛋白表达减少。结论:SB203580能降低p-p38MAPK蛋白表达并抑制热压诱导的生精细胞凋亡。 展开更多

关键词 SB203580 隐睾 生精细胞 凋亡

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大鼠睾丸内一氧化氮合酶的表达 被引量：3

11

作者 李美香 贺丽萍 +2 位作者 郭子倩 刘月顺 龙治峰 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2002年第4期250-252,共3页

目的 :阐明一氧化氮合酶 (NOS)在睾丸内的表达 ,探讨一氧化氮 (NO)在睾丸生殖功能中的作用。　方法 :取雄性SD大鼠睾丸于 4 %多聚甲醛中固定 ,常规石蜡切片。用免疫组化ABC法检测成年大鼠睾丸NOS的表达和定位。　结果 :内皮型NOS(eNOS)... 目的 :阐明一氧化氮合酶 (NOS)在睾丸内的表达 ,探讨一氧化氮 (NO)在睾丸生殖功能中的作用。　方法 :取雄性SD大鼠睾丸于 4 %多聚甲醛中固定 ,常规石蜡切片。用免疫组化ABC法检测成年大鼠睾丸NOS的表达和定位。　结果 :内皮型NOS(eNOS)、神经型NOS(nNOS)、诱导型NOS(iNOS)在睾丸间质细胞内均有表达 ,精曲小管周围肌样细胞、血管内皮细胞和平滑肌细胞内仅为eNOS免疫反应阳性 ,而血管外膜纤维内仅有nNOS表达。免疫反应物质主要定位于细胞质 ,胞核为阴性。在生精细胞内 3种NOS免疫反应均为阴性。　结论 :3种NOS在睾丸内均有表达 。 展开更多

关键词 一氧化氮合酶 睾丸 免疫组织化学

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大鼠卵巢的生后发育 被引量：2

12

作者 屈丽华 罗文奇 +5 位作者 刘月顺 龙治峰 罗红梅 李美香 石金凤 莫中成 《四川动物》 CSCD 北大核心 2009年第5期746-748,F0003,共4页

目的研究大鼠卵巢中卵泡生长发育的增龄性变化,为生殖生物学研究寻找动物模型。方法用组织学方法,观察了0天～15月大鼠卵巢的形态结构。结果0天见卵母细胞聚集呈团索状,未见卵泡;4天见大量原始卵泡;1周出现大量初级卵泡;2周见次级卵泡;... 目的研究大鼠卵巢中卵泡生长发育的增龄性变化,为生殖生物学研究寻找动物模型。方法用组织学方法,观察了0天～15月大鼠卵巢的形态结构。结果0天见卵母细胞聚集呈团索状,未见卵泡;4天见大量原始卵泡;1周出现大量初级卵泡;2周见次级卵泡;3周次级卵泡数量增加,卵泡腔扩大;1月可见不同发育阶段的卵泡和闭锁卵泡;45天出现黄体;2月～5月,有大量黄体和生长卵泡;6月～8月,卵巢体积缩小,卵泡数量减少;12月萎缩,未见正常卵泡和黄体;15月,纤维化,可见囊泡。结论大鼠从6月开始,生殖功能随月龄增长而进行性衰减,机体逐渐衰老。大鼠可用作研究女性生殖与衰老关系的动物模型。 展开更多

关键词 卵巢 卵泡 发育 大鼠 组织学

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L-精氨酸与N-硝基L-精氨酸甲基酯对雄性大鼠睾酮分泌的影响 被引量：2

13

作者 贺丽萍 罗红梅 +3 位作者 李美香 田英 刘月顺 龙治锋 《中国计划生育学杂志》 2002年第3期152-154,共3页

目的:阐明一氧化氮(NO)对男性生殖轴中睾丸内分泌功能的调节作用。材料与方法:于雄性SD大鼠腹腔内注射不同剂量(0～210mg/kg)的L-ARG(L-arginine,L-ARG,NO前体)与L-NAME(Nw-nitrio-L-arginine-mythel-ester,L-NAME,NO合酶的竞争性抑制... 目的:阐明一氧化氮(NO)对男性生殖轴中睾丸内分泌功能的调节作用。材料与方法:于雄性SD大鼠腹腔内注射不同剂量(0～210mg/kg)的L-ARG(L-arginine,L-ARG,NO前体)与L-NAME(Nw-nitrio-L-arginine-mythel-ester,L-NAME,NO合酶的竞争性抑制剂,0～70mg/kg),每天一次,共8天,最后一次注射后1小时采血 然后将SD大鼠分成4组,分别注射同一剂量的L-ARG(160mg/k8)、L-NAME(50mg/kg)、L-ARG+L-NAME和生理盐水,每天一次,注射13天,每隔3～4天采血一次。用放射免疫同步测定法测定血清中睾酮含量,对所得数据进行统计学处理。结果:L-ARG对睾酮分泌具有抑制作用(P<0.01),而L-NAME则促进睾酮的分泌(P<0.01),两者都具有时间依赖性,并与剂量高度相关。L-ARG和L-NAME混合注射时,睾酮的含量与生理盐水注射组无明显区别(P>0.05)。结论:NO对雄性大鼠的睾酮分泌具有抑制作用。 展开更多

关键词 一氧化氮 大鼠 睾酮 放射免疫 睾丸内分泌功能

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一氧化氮合酶在大鼠附睾内的表达及其可能的作用 被引量：2

14

作者 罗红梅 贺丽萍 +2 位作者 汪翼 刘月顺 龙治峰 《解剖科学进展》 CAS 2003年第1期23-24,共2页

目的　为了阐明一氧化氮合酶 (NOS)在附睾内的表达 ,同时探讨NO在男性生殖功能中的作用。方法　本研究采用正常大鼠附睾组织 ,用免疫组织化学ABC法研究两种NOS(iNOS、eNOS)的表达。结果　在附睾上皮细胞内eNOS及iNOS均为免疫反应阳性 ,... 目的　为了阐明一氧化氮合酶 (NOS)在附睾内的表达 ,同时探讨NO在男性生殖功能中的作用。方法　本研究采用正常大鼠附睾组织 ,用免疫组织化学ABC法研究两种NOS(iNOS、eNOS)的表达。结果　在附睾上皮细胞内eNOS及iNOS均为免疫反应阳性 ,其中eNOS表达强 ,iNOS表达较强 ,血管内皮及平滑肌细胞内仅为eNOS免疫反应阳性 ,附睾间质中仅iNOS为免疫反应阳性。结论　两种NOS在附睾内均有不同程度的表达 ,各有特定的分布区域 。 展开更多

关键词 一氧化氮合酶 雄性大鼠 附睾 免疫组织化学

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Caveolin-1表达及其与胃癌生物学行为关系的研究 被引量：14

15

作者 罗红梅 张蒙夏 +3 位作者 唐圣松 谭军 刘月顺 龙治峰 《肿瘤防治杂志》 2004年第4期341-343,369,共4页

目的 :探讨候选抑癌基因Caveolin 1在胃癌中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法 :应用免疫组织化学SABC法对 43例胃癌存档蜡块组织及 15例胃炎活检标本进行Caveolin 1蛋白检测 ,采用 χ2 检验进行统计学分析。结果 :Caveolin 1在... 目的 :探讨候选抑癌基因Caveolin 1在胃癌中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法 :应用免疫组织化学SABC法对 43例胃癌存档蜡块组织及 15例胃炎活检标本进行Caveolin 1蛋白检测 ,采用 χ2 检验进行统计学分析。结果 :Caveolin 1在胃癌的阳性表达率为 3 0 2 % ( 13 / 43 ) ,明显低于胃炎组 10 0 % ( 15 / 15 ) ,P <0 0 1;其中高分化腺癌、中分化腺癌、低分化腺癌中的阳性率分别为 6/ 6、3 / 5、17 4% ( 4 / 2 3 ) ,而印戒细胞癌及黏液腺癌中无阳性表达 ,五者之间差异有统计学意义 ,P <0 0 1;浸润至浆膜或超过浆膜组的Caveolin 1表达阳性率13 8% ( 4 / 2 9)明显低于未达浆膜组 64 3 %( 9/ 14 ) ,两组之间差异有统计学意义 ,P <0 0 1;淋巴结转移组Caveolin 1阳性率 7 7%( 1/ 13 )明显低于无淋巴结转移组 40 0 %( 12 / 3 0 ) ,两组之间差异有统计学意义 ,P <0 0 5。结论 :候选抑癌基因Caveolin 1的表达与胃癌细胞的分化、浸润和转移密切相关 。 展开更多

关键词 胃肿瘤/病理学 基因 抑制 肿瘤 免疫组织化学 预后

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NIH3T3细胞核内过表达的M-CSF对细胞运动的影响 被引量：1

16

作者 张晓红 唐圣松 +2 位作者 赵飞骏 刘月顺 龙治锋 《解剖科学进展》 CAS 2007年第3期230-234,共5页

目的构建M-CSF细胞核内定位表达载体pCMV/M-CSF,探讨核内M-CSF对NIH3T3细胞运动的影响。方法采用PCR的方法扩增人M-CSF活性片段,将其插入核内真核表达载体pCMV/myc/nuc,构建重组体pCMV/M-CSF,经脂质体介导转染NIH3T3细胞,G418筛选后,用... 目的构建M-CSF细胞核内定位表达载体pCMV/M-CSF,探讨核内M-CSF对NIH3T3细胞运动的影响。方法采用PCR的方法扩增人M-CSF活性片段,将其插入核内真核表达载体pCMV/myc/nuc,构建重组体pCMV/M-CSF,经脂质体介导转染NIH3T3细胞,G418筛选后,用免疫细胞化学及Western blot鉴定其在真核细胞中的表达及定位分布,用细胞划痕实验测定M-CSF进入细胞核后对细胞运动能力的影响。结果限制性双酶切及DNA测序分析结果显示插入pCMV/M-CSF的片段为1400bp左右,与预期M-CSF分子大小相当。Western blot结果显示转染pCMV/M-CSF的NIH3T3细胞能稳定表达M-CSF蛋白;免疫细胞化学结果显示表达的M-CSF定位于NIH3T3细胞核。细胞划痕实验显示转染pCMV/M-CSF的NIH3T3细胞有较强的运动能力。结论成功构建M-CSF核内定位表达载体pCMV/M-CSF,核内M-CSF可加强NIH3T3细胞运动。 展开更多

关键词 巨噬细胞集落刺激因子(M—CSF) 核内定位载体pCMV/myc/nuc NIH3T3细胞 细胞运动

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人胎儿股骨发生过程中血管内皮生长因子的表达 被引量：1

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作者 屈丽华 屈姣华 +3 位作者 罗红梅 龙治峰 刘月顺 石金凤 《解剖科学进展》 CAS 2006年第4期320-322,I0003,共4页

目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）与人胚胎骨发生及发育的关系。方法 用免疫组化技术对11～36W人胎儿股骨中血管内皮生长因子的分布和表达情况进行了研究。结果 VEGF阳性反应主要见于成骨细胞、破骨细胞及新生骨细胞中，血管内皮细胞... 目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）与人胚胎骨发生及发育的关系。方法 用免疫组化技术对11～36W人胎儿股骨中血管内皮生长因子的分布和表达情况进行了研究。结果 VEGF阳性反应主要见于成骨细胞、破骨细胞及新生骨细胞中，血管内皮细胞及骨髓细胞也呈阳性反应；骺软骨钙化区肥大的软骨细胞为VEGF阳性反应，但其它区域的软骨细胞中无VEGF表达。结论 VEGF在胚胎发生时期在血管内皮细胞和成骨细胞的表达，说明VEGF在人胎儿骨发生及发育过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 人胎儿 股骨 血管内皮生长因子(VEGF) 免疫组织化学

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人胚胎长骨的组织学观察 被引量：5

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作者 屈丽华 李秀芝 +2 位作者 刘月顺 龙治峰 屈姣华 《南华大学学报（医学版）》 2000年第6期555-558,共4页

目的　探讨人胚胎长骨的发生及发育过程。方法　取第 9～ 38周人胚胎股骨 ,用HE、硫堇 -苦味酸及Mallory氏法染色 ,光镜观察。结果　第 9周胚胎股骨为软骨雏形。第 10～ 38周胚胎股骨可分出骺软骨、干骺端及骨干三部分 ,干骺端原始骨髓... 目的　探讨人胚胎长骨的发生及发育过程。方法　取第 9～ 38周人胚胎股骨 ,用HE、硫堇 -苦味酸及Mallory氏法染色 ,光镜观察。结果　第 9周胚胎股骨为软骨雏形。第 10～ 38周胚胎股骨可分出骺软骨、干骺端及骨干三部分 ,干骺端原始骨髓腔内富含血管、成骨细胞及造血细胞 ,成骨细胞与造血细胞的比例随胎龄而异 ,第 2 0周以前 ,以成骨细胞为主 ,造血细胞极少 ,随胎龄增加 ,成骨细胞的比例逐渐下降 ,造血细胞增加 ;骨干表面不光滑 ,有许多纵嵴、纵沟 ,骨外膜内层覆于嵴上并衬于沟内 ,纵嵴纵沟以第 13～ 2 6周胚胎为多 ,第 2 7周以后逐渐减少 ,骨干表面逐渐变得光滑 ,足月时出现外环骨板 ;骨干皮质由骨小梁网构成 ,胚胎早期网眼大、不规则 ,随胎龄增加 ,网眼变小 ,周围出现分层不清的同心圆状排列的骨板。结论　人胚胎长骨的纵向生长速率随胎龄的增加而相对减慢 ,其横向生长是由于骨外膜内层的成骨细胞以形成纵嵴的方式 ,不断地在骨干表面添加新的骨质 。 展开更多

关键词 人胚胎 骨发育 哈佛氏系统 股骨

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Caveolin-1基因转染对人胃腺癌细胞生长的影响 被引量：2

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作者 罗红梅 唐圣松 +6 位作者 廖端芳 严鹏科 张晓红 汪煜华 朱炳阳 龙治峰 刘月顺 《南华大学学报（医学版）》 2007年第2期147-149,290,共4页

目的探讨外源性Caveolin-1基因在人胃腺癌细胞中的表达作用。方法将pcl-neo-caveolin-1人全长质粒转染入MGC803细胞中,用G418筛选得到细胞克隆并扩大培养,获得稳定表达caveolin-1的细胞系,通过Western-blot、细胞计数及流式细胞术等方... 目的探讨外源性Caveolin-1基因在人胃腺癌细胞中的表达作用。方法将pcl-neo-caveolin-1人全长质粒转染入MGC803细胞中,用G418筛选得到细胞克隆并扩大培养,获得稳定表达caveolin-1的细胞系,通过Western-blot、细胞计数及流式细胞术等方法检测基因表达、细胞增殖分化等情况。结果与对照组和pcl-neo空质粒转染组相比,转染caveolin-1基因后的MGC803细胞的caveolin-1的表达明显增高,而P-ERK1/2的表达却明显下降;细胞的群体倍增时间明显延长:由46.67或47.32小时延长至65.46小时,差异有显著性(P<0.01);细胞周期分布发生明显变化:G0/G1期细胞比例由35.02%增加到51.98%,S期比例由56.97%下降至39.80%,G2、M期无明显变化。结论Caveolin-1通过抑制MGC803细胞的增殖而导致其发生G0/G1期阻滞,可为肿瘤基因治疗提供实验依据。 展开更多

关键词 CAVEOLIN-1 胃腺癌 基因转染 基因治疗

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Periostin表达对鼻咽癌细胞体外侵袭行为的影响

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作者 李美香 谢远杰 +4 位作者 石金凤 赵国军 张晓红 刘月顺 龙治峰 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期837-841,共5页

目的探讨Periostin表达对体外鼻咽癌(NPC)细胞侵袭行为的影响及其机制。方法采用Western blotting检测激光捕获显微切割纯化的鼻咽癌间质和正常鼻咽黏膜间质、鼻咽癌低转移潜能细胞系6-10B和高转移潜能细胞系5-8F及NIH 3T3成纤维细胞中P... 目的探讨Periostin表达对体外鼻咽癌(NPC)细胞侵袭行为的影响及其机制。方法采用Western blotting检测激光捕获显微切割纯化的鼻咽癌间质和正常鼻咽黏膜间质、鼻咽癌低转移潜能细胞系6-10B和高转移潜能细胞系5-8F及NIH 3T3成纤维细胞中Periostin的表达水平。应用阳性脂质体法将pCMV-neo-Periostin质粒瞬时转染到NIH 3T3细胞,运用Western blotting检测转染前后NIH 3T3细胞中Periostin的表达水平,利用Boyden小室穿膜侵袭实验检测Periostin蛋白对肿瘤细胞的体外侵袭能力的影响,明胶酶谱法检测其对基质金属蛋白酶(MMPs)活性的影响。结果 Periostin在纯化的鼻咽癌间质中高表达,在纯化的正常鼻咽黏膜间质中及高转移细胞系5-8F中弱表达,在低转移细胞系6-10B及NIH 3T3细胞中不表达。瞬时转染过表达Periostin的NIH3T3细胞中Periostin的表达明显增强。Boyden小室实验提示,分泌蛋白Periostin可明显增强鼻咽癌细胞6-10B的体外侵袭能力,转染组穿膜的细胞数与空白对照组及未转染对照组比较,明显增多(P<0.01);转染组与6-10B细胞共培养后,培养上清中MMPs的活性较对照组明显增强。结论 Periostin蛋白能增强鼻咽癌细胞的侵袭能力,其机制可能与上调MMPs的活性有关。 展开更多

关键词 Perisotin 鼻咽癌 转移 基质金属蛋白酶 转染 明胶酶谱法 BOYDEN小室

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