柱前衍生非水毛细管电泳分离钴、镍和铜 被引量：6

1

作者 刘笔锋 刘良斌 程介克 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1998年第8期1232-1235,共4页

提出柱前衍生非水毛细管电泳分离金属离子的方法．应用新合成的２－（６－甲基－２－苯并噻唑偶氮）－５－二乙胺基酚作为柱前衍生试剂，乙醇和Ｎ，Ｎ－二甲基甲酰胺为非水溶剂，在６ｍｉｎ内实现了钴、镍和铜的分离，灵敏度高，检测限... 提出柱前衍生非水毛细管电泳分离金属离子的方法．应用新合成的２－（６－甲基－２－苯并噻唑偶氮）－５－二乙胺基酚作为柱前衍生试剂，乙醇和Ｎ，Ｎ－二甲基甲酰胺为非水溶剂，在６ｍｉｎ内实现了钴、镍和铜的分离，灵敏度高，检测限分别为９．１８×１０－８ｍｏｌ／Ｌ、２．７９×１０－７ｍｏｌ／Ｌ和４．４７×１０－７ｍｏｌ／Ｌ．考察了柱前衍生条件、非水溶剂配比以及分离参数对分离的影响． 展开更多

关键词 柱前衍生 非水 毛细管电泳 钴 镍 铜 分离

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电泳芯片微通道中分子传递效率的比较研究 被引量：2

2

作者 刘笔锋 骆清铭 +1 位作者 Shigeru Terabe 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第z1期11-12,共2页

选用聚二甲基硅氧烷为电泳芯片材料,比较了同步辐射和紫外光刻蚀技术制作的芯片微通道内样品的分子分散特性.研究结果表明,采用同步辐射刻蚀技术制作的微通道具有更好的分子传递效率.根据扫描电子显微镜的表征结果初步推断,可能与通道... 选用聚二甲基硅氧烷为电泳芯片材料,比较了同步辐射和紫外光刻蚀技术制作的芯片微通道内样品的分子分散特性.研究结果表明,采用同步辐射刻蚀技术制作的微通道具有更好的分子传递效率.根据扫描电子显微镜的表征结果初步推断,可能与通道的内表面的粗糙度有关.进一步的色谱保留分析证实了该假设的可靠性. 展开更多

关键词 电泳芯片 微通道 分子传递

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滇池水华蓝藻藻蓝蛋白的分离纯化与毒性研究 被引量：7

3

作者 沈强 沈银武 +1 位作者 刘永定 刘笔锋 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期497-501,共5页

采用从昆明滇池机械收获的产毒水华蓝藻为材料,通过采用抽提、粗过滤、微滤、超滤脱毒(截留分子量100kDa)、低温静置离心、真空干燥等提取纯化方法,从1kg微囊藻粉中制备纯度(A620/A280)高达1.80的57g藻蓝蛋白干粉.小鼠急性毒性试验显示... 采用从昆明滇池机械收获的产毒水华蓝藻为材料,通过采用抽提、粗过滤、微滤、超滤脱毒(截留分子量100kDa)、低温静置离心、真空干燥等提取纯化方法,从1kg微囊藻粉中制备纯度(A620/A280)高达1.80的57g藻蓝蛋白干粉.小鼠急性毒性试验显示,纯化的藻蓝蛋白无毒性;LD50大于3.71g·kg-1,而对照原料藻粉的LD50为0.10g·kg-1.Ames试验结果显示,5个藻蓝蛋白剂量组回变菌落数均未超过阴性对照菌落数2倍,亦无剂量-效应关系,Ames实验结果阴性,初步通过食品安全性毒理学评价程序. 展开更多

关键词 水华蓝藻 滇池 藻蓝蛋白 微囊藻毒素 超滤 毒性

原文传递

采用枯草芽孢杆菌发酵菜籽饼粕生产溶栓酶条件的优化 被引量：6

4

作者 董绪燕 胡小加 +7 位作者 江木兰 郭璐璐 魏芳 沈明珍 陈洪 罗凡 刘笔锋 胡磊 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期239-241,共3页

利用枯草芽孢杆菌对菜籽饼粕进行发酵,并以影响菜籽饼粕发酵的重要因素,即培养基组成、发酵pH、发酵时间做三因素三水平正交试验,对发酵产生激酶的溶栓活性进行测定,并监测菜籽饼粕中有毒有害物质硫甙、异硫氰酸酯和恶唑烷硫酮发酵前后... 利用枯草芽孢杆菌对菜籽饼粕进行发酵,并以影响菜籽饼粕发酵的重要因素,即培养基组成、发酵pH、发酵时间做三因素三水平正交试验,对发酵产生激酶的溶栓活性进行测定,并监测菜籽饼粕中有毒有害物质硫甙、异硫氰酸酯和恶唑烷硫酮发酵前后含量的变化。结果表明:最佳发酵条件是采用LB培养基活化菌株,发酵pH7,发酵时间24h。发酵后的菜籽饼粕中的硫甙、异硫氰酸酯和恶唑烷硫酮得到基本降解,极大地降低了菜籽饼粕的毒性。本项研究结果将为菜籽饼粕的综合利用开辟出一条新途径。 展开更多

关键词 菜籽饼粕 发酵 溶栓酶 正交 条件优化

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毛细管电泳--多光子激发荧光检测分析生物胺 被引量：7

5

作者 张桂森 陈胜 +2 位作者 徐友志 杜伟 刘笔锋 《光子学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第5期1006-1009,共4页

构建了毛细管电泳-连续光多光子激发荧光检测系统并应用于生物分析.对几种常见生物胺,如腐胺,尸胺,组胺,精胺,亚精胺和苯乙胺的分析结果表明,该系统具有分离效率高、质量检测灵敏度高和低消耗等特点,适于复杂体系如生物样品的测量.定量... 构建了毛细管电泳-连续光多光子激发荧光检测系统并应用于生物分析.对几种常见生物胺,如腐胺,尸胺,组胺,精胺,亚精胺和苯乙胺的分析结果表明,该系统具有分离效率高、质量检测灵敏度高和低消耗等特点,适于复杂体系如生物样品的测量.定量分析显示,生物胺的检测限在nM级,线性范围超过2个数量级,进一步将多光子激发荧光检测与传统单光子激发荧光检测结果对比,发现前者还具有改善分离选择性的优势. 展开更多

关键词 毛细管电泳 多光子激发荧光 生物胺

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毛细管电泳聚乙烯吡咯烷酮与羟乙基纤维素混配无胶筛分介质分离DNA片段 被引量：5

6

作者 陈洪 张乐 +2 位作者 刘笔锋 曾勇 程介克 《分析科学学报》 CAS CSCD 1999年第6期441-445,共5页

本文报道了毛细管电泳聚乙烯吡咯烷酮与羟乙基纤维素混配无胶筛分介质分离较短的 p GEM7Zf(+) Hae DNA片段 (DNA长度为 1 8～ 675bp)。研究表明 ,在 1 %的羟乙基纤维素无胶筛分介质中 ,加入 2 %的聚乙烯吡咯烷酮能显著提高 DNA片段的... 本文报道了毛细管电泳聚乙烯吡咯烷酮与羟乙基纤维素混配无胶筛分介质分离较短的 p GEM7Zf(+) Hae DNA片段 (DNA长度为 1 8～ 675bp)。研究表明 ,在 1 %的羟乙基纤维素无胶筛分介质中 ,加入 2 %的聚乙烯吡咯烷酮能显著提高 DNA片段的分辨率和分离效率。在混配无胶筛分介质中 ,聚乙烯吡咯烷酮有两种作用 ,一是动态涂渍 ,降低毛细管内壁对 DNA片段与 DNA荧光插入试剂的吸附 ,改善分离效率 ;二是两种不同长度、性质的线性高分子能形成更为致密的“缠绕网络”,有利于较短的 DNA片段电泳分离。 展开更多

关键词 DNA片段 分离 PVP 毛细管电泳 羟乙基纤维素

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芯片毛细管电泳-激光诱导荧光-电荷耦合器件检测系统 被引量：3

7

作者 陈洪 曾勇 +2 位作者 刘笔锋 庞代文 程介克 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期93-96,共4页

采用自组建的芯片毛细管电泳 -激光诱导荧光 -电荷耦合器件 ( CCD)检测系统在数十秒内满意地分离了曙红和荧光素。设计了一种进样、分离电路 ,可以有效地消除进样通道的样品溶液向分离通道的渗漏。解决了由这种渗漏所引起的电泳峰变宽... 采用自组建的芯片毛细管电泳 -激光诱导荧光 -电荷耦合器件 ( CCD)检测系统在数十秒内满意地分离了曙红和荧光素。设计了一种进样、分离电路 ,可以有效地消除进样通道的样品溶液向分离通道的渗漏。解决了由这种渗漏所引起的电泳峰变宽、拖尾等问题。 展开更多

关键词 芯片毛细管电泳 激光诱导荧光 电荷耦合器件 曙红 荧光素 检测系统 电泳分离

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普瑞巴林的合成 被引量：10

8

作者 张桂森 杨相平 刘笔锋 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期617-618,共2页

异戊醛经Knoevenagel缩合、Michael加成、水解脱羧得3-异丁基戊二酸,与尿素酰亚胺化反应得3-异丁基戊二酰亚胺,再经Hofmann重排得3-(氨甲基)-5-甲基己酸,用(S)-(+)-扁桃酸拆分得普瑞巴林,总收率为33%。

关键词 普瑞巴林 抗癫痫药 止神经痛剂 合成

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系统生物学实验课教学质量的创新实践与探索 被引量：1

9

作者 谢青 刘笔锋 杨广笑 《实验科学与技术》 2011年第5期62-64,共3页

系统生物学是随着生物科学发展而出现的一门新的分支学科。为紧跟国外生物科学发展的步伐,华中科技大学生命科学与技术学院在国内率先开设了系统生物学实验课,将实验实践教学作为专业人才培养过程中的一个重要教学环节,注重学生创新意... 系统生物学是随着生物科学发展而出现的一门新的分支学科。为紧跟国外生物科学发展的步伐,华中科技大学生命科学与技术学院在国内率先开设了系统生物学实验课,将实验实践教学作为专业人才培养过程中的一个重要教学环节,注重学生创新意识、创新思维、创新精神、创新文化的培养,为建设高水平的系统生物学实验课堂在教学观念、体系、方法和评价等方面进行了改革与实践,探索了促进实验实践教学质量提高的途径和方法。 展开更多

关键词 系统生物学 创新 教学质量 科研素质

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微流控超快混合器及生物大分子折叠动力学应用研究进展

10

作者 李颖 刘笔锋 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期276-282,共7页

生物大分子如蛋白质或核酸的功能与其三维结构密切相关,折叠动力学研究可揭示生物大分子从自由的一级结构形成具有活性高级结构的动态过程,近年来倍受科学界重视。生物大分子的折叠过程一般发生在毫秒、微秒甚至是亚微秒时间水平,而启... 生物大分子如蛋白质或核酸的功能与其三维结构密切相关,折叠动力学研究可揭示生物大分子从自由的一级结构形成具有活性高级结构的动态过程,近年来倍受科学界重视。生物大分子的折叠过程一般发生在毫秒、微秒甚至是亚微秒时间水平,而启动折叠反应则需在更短的时间内完成。基于微流控芯片的超快混合器能使溶液在短时间内达到完全混合从而触发反应,已被广泛应用于生物大分子折叠动力学研究。该文系统评述了超快微混合器的国内外研究进展,并介绍了其在大分子折叠动力学研究中的应用。 展开更多

关键词 生物大分子 折叠动力学 微流控芯片 混合器

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基于滑移芯片的双浓度梯度反应阵列 被引量：2

11

作者 鄢兴华 胡亮 +2 位作者 李颖 冯晓均 刘笔锋 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1520-1525,共6页

建立了一种基于微流控滑移芯片的反应微阵列体系,并应用于双浓度梯度研究。在此反应微阵列芯片中,两种试剂分别通过芯片进样形成多级浓度梯度,进一步在正交方向上形成双浓度梯度的微反应阵列,经过滑动、接触和混合,简便实现多路反应。... 建立了一种基于微流控滑移芯片的反应微阵列体系,并应用于双浓度梯度研究。在此反应微阵列芯片中,两种试剂分别通过芯片进样形成多级浓度梯度,进一步在正交方向上形成双浓度梯度的微反应阵列,经过滑动、接触和混合,简便实现多路反应。采用不同色素和荧光染料对系统进行了表征,确认了方法的可靠性,在此基础上,考察了β-半乳糖苷酶(β-gal)的反应条件。将45 nmol/Lβ-gal和45μmol/L底物荧光素二半乳糖苷(FDG)分别注入芯片上下层,在芯片通道中各自形成浓度梯度,滑移后进行不同酶浓度和不同底物浓度的反应测定。结果表明,随着底物浓度的提高,反应产物逐渐增多;一定底物浓度下,产物随酶浓度升高而逐渐增多,但很快到达平台期。芯片上酶与底物的浓度对反应的影响与芯片外基本一致。此芯片具有结构简单、操作简便和消耗低等特点,适用于多因素和多水平的复杂反应分析。 展开更多

关键词 微流控 滑移芯片 双浓度梯度 Β-半乳糖苷酶

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微流控芯片技术在体外诊断领域中的应用进展 被引量：6

12

作者 李顺基 肖育劲 +1 位作者 陈鹏 刘笔锋 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期639-645,共7页

微流控芯片技术具有高度集成化、微型化等优势,是体外诊断(In-vitro Diagnosis,IVD)未来发展依托的主要检测技术平台之一。微流控芯片技术将大型实验室的各个单元集成在微米,甚至纳米级微结构芯片上,具有体积小、可精确控制流体、试剂... 微流控芯片技术具有高度集成化、微型化等优势,是体外诊断(In-vitro Diagnosis,IVD)未来发展依托的主要检测技术平台之一。微流控芯片技术将大型实验室的各个单元集成在微米,甚至纳米级微结构芯片上,具有体积小、可精确控制流体、试剂消耗少等特点,与IVD整体发展方向高精度、高灵敏度及便携性相契合。本文将从生化、核酸、免疫角度入手,聚焦微流控芯片结构设计及检测原理,总结其在IVD行业中的典型应用、最新进展及未来发展趋势。 展开更多

关键词 体外诊断 微流控芯片 生化检测 核酸检测 免疫检测

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基于多光子激发荧光-毛细管电泳的DNA分析新技术 被引量：1

13

作者 陈胜 徐友志 +1 位作者 杜伟 刘笔锋 《光子学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第2期356-359,共4页

研制了一套新型毛细管电泳-连续光多光子激发荧光检测系统,并用该系统对含有多种荧光染料的样品进行了电泳分离和多光子激发荧光检测.结果表明:该系统具有分离效率高、质量检测限低和宽谱激发等特点,适合生物体系等复杂样品的测量并实现... 研制了一套新型毛细管电泳-连续光多光子激发荧光检测系统,并用该系统对含有多种荧光染料的样品进行了电泳分离和多光子激发荧光检测.结果表明:该系统具有分离效率高、质量检测限低和宽谱激发等特点,适合生物体系等复杂样品的测量并实现了DNA样品的分离分析. 展开更多

关键词 毛细管电泳 多光子激发荧光 DNA分析

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基于正交质谱的N-糖组谱揭示哈夫病潜在病原学

14

作者 刘思 刘圆圆 +4 位作者 林佳静 刘笔锋 何振宇 吴晓旻 刘欣 《Engineering》 SCIE EI CAS CSCD 2023年第7期63-73,I0003,共12页

食用煮熟的小龙虾可能导致哈夫病(HD),该病被认为是由不明毒素引起的,而病因尚不清楚。N-糖组的剖析将促进破译疾病的分子机制,而HD相关的糖基化从未被探索过。2019-2020年期间,本研究团队招募了来自武汉市疾病预防控制中心的90份HD患... 食用煮熟的小龙虾可能导致哈夫病(HD),该病被认为是由不明毒素引起的,而病因尚不清楚。N-糖组的剖析将促进破译疾病的分子机制,而HD相关的糖基化从未被探索过。2019-2020年期间,本研究团队招募了来自武汉市疾病预防控制中心的90份HD患者和对照组血清样本。本文中,采用基于高通量的正交质谱对HD中血清和血清衍生的IgG的N-糖组谱进行了表征。数据显示,HD与总血清糖蛋白的核心岩藻糖基化和单半乳糖醇化升高有关。血清IgG水平是HD患者的良好指标。此外,IgG的差异半乳糖基化和唾液酸化与HD密切相关。值得注意的是,IgG1和IgG2的半乳糖基化和唾液酸化的变化具有亚类特异性。有意义的是,IgG2或IgG3/4的唾液酸化和半乳糖基化改变与HD的临床标志物密切相关。本研究表明差异化IgG N-糖基化与HD的关联,为这种罕见疾病的病因提供了新的见解。 展开更多

关键词 Haff disease SERUM Immunoglobulin G GLYCOSYLATION Disease pathogenesis

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基因芯片—玻璃表面两种不同DNA探针固定化方法的比较研究

15

作者 张国军 庞代文 +1 位作者 刘笔锋 吕应堂 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第9期1452-1456,共5页

研究了基因芯片相关的DNA探针在芯片表面最佳固定化方法.用两种不同的双功能试剂1,4-苯二异硫氰酸酯和戊二醛分别把5＇-端氨基衍生的21-mer寡脱氧核苷酸探针直接共价固定到玻片表面,固定化的寡脱氧核苷酸探针与5＇-端FITC标记的互补靶... 研究了基因芯片相关的DNA探针在芯片表面最佳固定化方法.用两种不同的双功能试剂1,4-苯二异硫氰酸酯和戊二醛分别把5＇-端氨基衍生的21-mer寡脱氧核苷酸探针直接共价固定到玻片表面,固定化的寡脱氧核苷酸探针与5＇-端FITC标记的互补靶序列进行分子杂交,杂交后用配有CCD的Ⅸ70型荧光倒置显微镜成像检测.结果表明,两种固定化方法的效果都比较好,能检测到靶序列的最低终浓度为1.5×10-9 mol/L优化了探针固定化时间、杂交时间、杂交温度等对DNA芯片分析性能的影响,为构建高灵敏度基因芯片打下良好基础. 展开更多

关键词 基因芯片 DNA探针 固定化 核酸分子杂交 荧光检测 玻璃表面

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合成纳米孔/通道的离子传输性质

16

作者 刘国畅 陈威 +1 位作者 刘笔锋 赵元弟 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期671-676,共6页

合成纳米孔/通道由于在控制物质和离子传输方面展示出的独特性能而备受关注。目前,已发现有各种各样的纳米孔离子传输行为,包括离子电流整流、离子电流饱和、离子电流振荡、离子传输迟滞和负差分电阻等。基于这些独特的离子传输行为,合... 合成纳米孔/通道由于在控制物质和离子传输方面展示出的独特性能而备受关注。目前,已发现有各种各样的纳米孔离子传输行为,包括离子电流整流、离子电流饱和、离子电流振荡、离子传输迟滞和负差分电阻等。基于这些独特的离子传输行为,合成纳米孔/通道已广泛应用于能量转化、生化分析和生物传感等方面。本文详细介绍了合成纳米孔/通道的离子传输性质并讨论其相关机制,同时也介绍了合成纳米孔/通道的制备方法并对其应用进行了展望。 展开更多

关键词 纳米孔 纳米通道 离子传输

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基于XML的生物代谢Petri网模型的标准化

17

作者 许滔 廖莎 +1 位作者 曾绍群 刘笔锋 《计算机与数字工程》 2005年第1期17-20,共4页

针对分析生物代谢网络的需要 ,构建了生物代谢Petri网模型建模环境 ,并采用基于XML的Petri网标记语言PNML为标准 ,利用DOM实现XML解析 ,完成Petri网模型的标准化 ,通过对代谢网络Petri网模型实例的仿真 ,验证了标准化模型的正确性。

关键词 PETRI网 生物代谢 PNML XML DOM

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一种系统生物学建模语言的开发

18

作者 陈晟 鲁强 +1 位作者 曾绍群 刘笔锋 《计算机与数字工程》 2005年第1期9-12,共4页

本文设计并实现了一种用于系统生物学研究的交互式解释型语言———B语言及其运行环境。根据系统生物学标记语言 (SBML)的标准定义设计B语言的建模语法 ,介绍了B语言解释器和运行环境的开发过程 ,最后通过仿真实例对B语言与Matlab语言... 本文设计并实现了一种用于系统生物学研究的交互式解释型语言———B语言及其运行环境。根据系统生物学标记语言 (SBML)的标准定义设计B语言的建模语法 ,介绍了B语言解释器和运行环境的开发过程 ,最后通过仿真实例对B语言与Matlab语言的仿真方式进行了比较 ,结果表明B语言可更快速获得仿真结果。 展开更多

关键词 系统生物学 解释型语言 建模 仿真

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胶束电动毛细管色谱分离氨基酸和磷酸化氨基酸 被引量：5

19

作者 刘笔锋 曾永辉 吕应堂 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期102-105,共4页

本文报道了胶束电动毛细管色谱分离、汞灯诱导荧光电荷耦合器件检测分析氨基酸和磷酸化氨基酸的 4-氟 - 7-硝基苯 - 2 - 口恶 - 1 ,3-丫唑衍生物。研究表明 ,在 p H9.35的 1 0 mmol/L硼砂和 1 0 mmol/L十二烷基硫酸钠的电泳缓冲介质中 ,... 本文报道了胶束电动毛细管色谱分离、汞灯诱导荧光电荷耦合器件检测分析氨基酸和磷酸化氨基酸的 4-氟 - 7-硝基苯 - 2 - 口恶 - 1 ,3-丫唑衍生物。研究表明 ,在 p H9.35的 1 0 mmol/L硼砂和 1 0 mmol/L十二烷基硫酸钠的电泳缓冲介质中 ,5种氨基酸和 3种磷酸化氨基酸在 1 0 min内完全分离 ,检测灵敏度为 1 .2 1× 1 0 - 8～ 5 .2 1×1 0 - 8mol/L ,分离效率达 7.3× 1 0 5～ 3.0× 1 0 5/m理论塔板数 。 展开更多

关键词 胶束电动毛细管色谱 氨基酸 磷酸化氨基酸 荧光检测 分离

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微流控芯片药物诱导细胞凋亡 被引量：4

20

作者 汪耀 李颖 +2 位作者 徐波 冯晓均 刘笔锋 《中国科学：化学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1629-1635,共7页

发展了一种以微流控芯片为平台的药物诱导细胞凋亡的新方法.选择HeLa细胞为对象,通过浓度梯度芯片形成稳定的药物浓度梯度,诱导HeLa细胞凋亡,利用荧光能量共振转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)成像系统进行实时监测,... 发展了一种以微流控芯片为平台的药物诱导细胞凋亡的新方法.选择HeLa细胞为对象,通过浓度梯度芯片形成稳定的药物浓度梯度,诱导HeLa细胞凋亡,利用荧光能量共振转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)成像系统进行实时监测,分析细胞对不同浓度化合物的毒性反应.结果表明,细胞在顺铂诱导下发生明显的起泡和皱缩,FRET比率值逐渐降低,在药物浓度梯度作用下,芯片每个通道内细胞呈现不同程度的凋亡.该方法实现了药物浓度梯度诱导细胞凋亡的实时监测和定量分析,为抗肿瘤药物评价和高通量药物筛选提供了新的手段. 展开更多

关键词 微流控芯片 细胞凋亡 抗肿瘤药物筛选 浓度梯度

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