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面向老年用户的家具产品设计路径研究
1
作者 刘玲玲 朱诗怡 刘继中 《林产工业》 北大核心 2024年第4期76-84,共9页
为满足老年用户对各类家具产品的使用需求和功能诉求,提高老年群体的生活品质,本研究集成AHP-AD-TOPSIS方法构建了一种面向老年用户的家具产品设计方法,并以适老化餐桌椅为例进行设计实践。首先,采用访谈法、观察法及问卷调查法对老年... 为满足老年用户对各类家具产品的使用需求和功能诉求,提高老年群体的生活品质,本研究集成AHP-AD-TOPSIS方法构建了一种面向老年用户的家具产品设计方法,并以适老化餐桌椅为例进行设计实践。首先,采用访谈法、观察法及问卷调查法对老年用户进行深入调研,并结合德尔菲法获取老年用户对适老化餐桌椅的需求,以构建层次分析评价模型。其次,运用层次分析法中求解的各指标权重,明确餐桌椅设计中的重点需求。然后,运用AD理论将用户需求转化为设计参数,通过AD理论中独立性原则完成适老化餐桌椅功能域与设计域的映射,并根据设计参数进行方案设计。最后,基于TOPSIS法通过构建判断矩阵来计算正负理想解距离及相对贴近度,进而对各方案进行设计评估,以明确最佳设计方案。结果表明,该方法可设计出符合老年用户需求的适老化餐桌椅,并为今后相关产品的设计提供了新思路。 展开更多
关键词 老年用户 家具产品 适老化餐桌椅 用户需求 AHP-AD-TOPSIS
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基于FBS-AHP方法的老年运动鞋设计
2
作者 刘继中 刘玲玲 《网印工业》 2024年第6期60-62,共3页
本文基于AHP和FBS模型,深入研究了老年运动鞋设计,提出创新方案以提升舒适性和美观性。通过用户调研和权重分析,为设计实践提供科学依据,有助于推动老年运动鞋市场的发展,提升老年人生活质量。
关键词 运动鞋设计 老年人 AHP层次分析法 FBS模型 用户旅程图
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OPG/RANKL/RANK系统与骨破坏性疾病 被引量：54
3
作者 刘继中 纪宗玲 陈苏民 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期655-660,共6页
近年来发现的OPG RANKL RANK系统在破骨细胞生成中起着至关重要的作用 ,是骨骼生理研究领域的重大进展。成骨细胞、骨髓基质细胞、激活的T淋巴细胞表达RANKL ,与破骨细胞前体细胞或成熟破骨细胞表面上的RANK结合后 ,促进破骨细胞的分化... 近年来发现的OPG RANKL RANK系统在破骨细胞生成中起着至关重要的作用 ,是骨骼生理研究领域的重大进展。成骨细胞、骨髓基质细胞、激活的T淋巴细胞表达RANKL ,与破骨细胞前体细胞或成熟破骨细胞表面上的RANK结合后 ,促进破骨细胞的分化及骨吸收活性。成骨细胞及骨髓基质细胞分泌表达OPG可与RANKL竞争性结合 ,从而阻断RANKL与RANK之间的相互作用。体内多种激素或因子通过影响骨髓微环境内的OPG RANKL比率来调节骨代谢。此外 ,乳腺上皮细胞表达有RANK ,孕期在性激素的诱导下可表达RANKL ,OPG RANKL RANK系统在孕期乳腺发育以及母体向胎儿的钙转运过程中发挥重要作用。阻断RANKL RANK通路有望给骨质疏松、类风湿关节炎及癌症骨转移等骨破坏性疾病的治疗开辟新的途径。进一步研究应了解OPG RANKL RANK系统与其它信号传导途径的关系 ,重视骨骼、免疫及内分泌系统之间的相互作用。目前 ,开发与OPG功能相似或促进其表达的合成药物有可能成为具有良好经济效益和社会效益的产业。 展开更多
关键词 骨保护素 破骨细胞生成 T细胞 骨吸收 骨破坏性疾病
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大段异体骨关节移植的关节功能重建和术后康复 被引量：8
4
作者 刘继中 王臻 +3 位作者 李明全 韩一生 朱庆生 张春礼 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2001年第4期244-247,共4页
目的　探讨肢体恶性肿瘤切除后行大段同种异体骨关节移植、骨与软组织的修复重建及术后肢体功能康复的方法。方法　 1992年 5月～ 1999年 1月 ,对 90例肢体恶性骨肿瘤患者行瘤段切除后 ,应用不同内固定方式行深低温冷冻异体骨关节移植 ... 目的　探讨肢体恶性肿瘤切除后行大段同种异体骨关节移植、骨与软组织的修复重建及术后肢体功能康复的方法。方法　 1992年 5月～ 1999年 1月 ,对 90例肢体恶性骨肿瘤患者行瘤段切除后 ,应用不同内固定方式行深低温冷冻异体骨关节移植 ,术后随访时间 18～ 89个月 ,平均 37.5个月。依据 Enneking肢体恶性肿瘤保肢术后功能评价标准进行判定。结果　 1皮肤坏死、早期感染、异体骨骨折及骨不连等是影响术后肢体功能康复的主要术后并发症 ;2 90例患者术后肢体功能优良率为 73.3% ,其中髋关节、膝关节异体骨关节移植术后肢体功能优于肩关节 ,异体骨段移植优于异体半关节移植 ,内锁髓内钉固定、异体骨段复合人工关节置换术优于普通的自制内锁髓内钉和加压钢板固定 ;3术后早期进行功能锻炼 ,利于肢体康复。结论　选择合适的手术适应证和内固定、完善的软组织修复重建及术后早期行肢体康复训练 。 展开更多
关键词 异体骨移植 功能重建 术后康复 骨肿瘤
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股骨近端肿瘤合并病理骨折的手术治疗 被引量：4
5
作者 刘继中 李明全 +3 位作者 王臻 王全平 陶惠人 韩利华 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2002年第1期62-64,共3页
目的分析股骨近端病理骨折的手术方法及效果。方法３９例患者接受手术治疗，平均随访３８．５个月。结果　恶性肿瘤及复发性骨巨细胞瘤采用异体骨段复合人工假体置换，骨囊肿等行刮除植骨术，多病灶型骨纤维结构不良行外翻截骨及内锁髓... 目的分析股骨近端病理骨折的手术方法及效果。方法３９例患者接受手术治疗，平均随访３８．５个月。结果　恶性肿瘤及复发性骨巨细胞瘤采用异体骨段复合人工假体置换，骨囊肿等行刮除植骨术，多病灶型骨纤维结构不良行外翻截骨及内锁髓内钉固定术，术后总评优良率７６．９％。肿瘤复发、植骨吸收是常见的术后并发症。结论病变的性质、侵袭范围、股骨近端的应力分布等是手术选择的依据。良性病变瘤壁上残存肿瘤组织的灭活方法仍需继续探讨。 展开更多
关键词 骨肿瘤 股骨近端 病理骨折 外科治疗 并发症
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腺病毒介导的基因治疗在骨创伤及骨病中的应用 被引量：6
6
作者 刘继中 纪宗玲 胡蕴玉 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2003年第3期215-218,共4页
目的　介绍腺病毒介导的基因治疗的特点及其在骨创伤和骨病中的应用。　方法　广泛查阅有关重组腺病毒载体的制备原理、特点及应用研究进展等方面的文献 ,并总结腺病毒介导的基因治疗在促进骨愈合、治疗骨质疏松及类风湿性关节炎等骨病... 目的　介绍腺病毒介导的基因治疗的特点及其在骨创伤和骨病中的应用。　方法　广泛查阅有关重组腺病毒载体的制备原理、特点及应用研究进展等方面的文献 ,并总结腺病毒介导的基因治疗在促进骨愈合、治疗骨质疏松及类风湿性关节炎等骨病研究中的应用情况。　结果　腺病毒载体具有高转染率、目的基因的高表达率及在宿主细胞内的表达有一定的时限等特点 ,能有效转染软骨细胞、成骨细胞、破骨细胞、骨髓基质细胞、关节滑膜细胞、椎间盘髓核细胞及成纤维细胞等 ,适用于骨折愈合、脊柱融合、骨质疏松及类风湿性关节炎等骨病的基因治疗。　结论　腺病毒介导的基因治疗可望为骨创伤、骨病的治疗提供新的途径。 展开更多
关键词 腺病毒介导 基因治疗 骨创伤 骨病 重组腺病毒载体 基因治疗 应用
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骨转移癌的早期诊断与治疗效果评价 被引量：5
7
作者 刘继中 王臻 +3 位作者 黄耀添 胡蕴玉 马平 王全平 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2001年第2期114-116,共3页
目的:评价X光线平片、CT扫描、核磁共振和ECT骨扫描在骨转移癌的早期诊断和治疗效果评估中的作用。方法:总结1983～1998年间有随访结果的73例骨转移癌患者的确诊方法,测量X片中长骨骨皮质破坏厚度（或椎体骨折塌陷的程度）和肿瘤体积做... 目的:评价X光线平片、CT扫描、核磁共振和ECT骨扫描在骨转移癌的早期诊断和治疗效果评估中的作用。方法:总结1983～1998年间有随访结果的73例骨转移癌患者的确诊方法,测量X片中长骨骨皮质破坏厚度（或椎体骨折塌陷的程度）和肿瘤体积做为定量计算指标。随访时间1.5～8 5年,平均28个月。结果:（1）早期诊断骨转移癌应在临床怀疑基础上行骨扫描、X线或CT检查,骨扫描的敏感度为91％,X线平片的敏感度为72％,MRI具有更高的敏感性与准确性。（2）骨扫描与X线平片及CT序惯应用,能监测治疗过程中的病灶变化。MRI扫描更具有优越性。（3）当负重区长骨骨皮质破坏>正常厚度的50％,椎体塌陷>正常椎体高度的25％,肿瘤体积>正常骨段体积的60％时,长骨即有骨折的危险性,脊柱可能发生滑脱。结论:X线平片、CT扫描、核磁共振和同位素骨扫描等能协助早期诊断骨转移癌和评估治疗效果,所反映出的骨转移病灶信息可做为外科治疗选择的依据。 展开更多
关键词 骨转移癌 早期诊断 治疗 评估
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肢体骨转移癌的大段异体骨关节移植术后康复 被引量：13
8
作者 刘继中 王臻 +3 位作者 胡蕴玉 李明全 马真胜 于会东 《现代康复》 CSCD 2000年第10期1468-1469,共2页
目的探讨肢体骨转移癌患者行大段异体骨关节移植术及肢体功能康复方法并进行评价。方法１７例肢体骨转移癌患者接受大段异体骨关节移植或复合异体骨段的人工股骨头置换术，根据Ｅｎｎｅｋｉｎｇ肢体恶性肿瘤保肢术后功能评价系统及Ｋａ... 目的探讨肢体骨转移癌患者行大段异体骨关节移植术及肢体功能康复方法并进行评价。方法１７例肢体骨转移癌患者接受大段异体骨关节移植或复合异体骨段的人工股骨头置换术，根据Ｅｎｎｅｋｉｎｇ肢体恶性肿瘤保肢术后功能评价系统及Ｋａｒｎｏｆ－ｓｋｙ评分标准对患者进行手术前后比较并做统计学分析，平均随访１６．５个月。结果（１）术后８２．４％（１４／１７）的患者肢体功能明显改善， Ｋａｒｎｏｆｓｋｙ评分增加（Ｐ＜ ０． ０１），８８． ２％（１５／１７）患者疼痛减轻（ Ｐ＜ ０． ０１）。（２）骨不连（２／１７）、假体松动（１／７）及肩关节无力（３／５）是主要的术后并发症。结论选择合适的手术适应证后，异体骨关节移植可使骨转移癌患者的骨骼系统得到坚强的固定；术后早期锻炼有利于患者肢体功能康复。 展开更多
关键词 骨转移 异体骨转移 术后 康复 癌
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人骨保护素(OPG)重组腺病毒的制备及其生物活性研究 被引量：2
9
作者 刘继中 纪宗玲 +3 位作者 胡蕴玉 陈苏民 朱帮福 杨彤涛 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期35-40,共6页
采用RT PCR法得到人OPG的编码区cDNA ,克隆至穿梭质粒pShuttle,构建重组有OPG编码区cDNA的腺病毒DNA ,经PacI酶切线性化 ,在脂质体介导下转染HEK2 93细胞 ,制备重组腺病毒并测定病毒滴度约为 5× 10 6 ～1 5× 10 7pfu mL。体... 采用RT PCR法得到人OPG的编码区cDNA ,克隆至穿梭质粒pShuttle,构建重组有OPG编码区cDNA的腺病毒DNA ,经PacI酶切线性化 ,在脂质体介导下转染HEK2 93细胞 ,制备重组腺病毒并测定病毒滴度约为 5× 10 6 ～1 5× 10 7pfu mL。体外感染小鼠成肌细胞C2C12 ,Westernblot及ELISA检测证实有OPG蛋白的表达 ,并可在细胞培养上清中持续表达 6周。感染OPG重组腺病毒的C2C12细胞生长状态良好、细胞周期无明显变化。将重组腺病毒加入体外培养的小鼠骨髓细胞的培养基中 ,诱导形成的破骨细胞数量及在象牙片上形成的吸收陷窝的数量显著减少 (P <0 0 1)。 展开更多
关键词 人骨保护素 OPG 重组腺病毒 制备 生物活性 破骨细胞
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人破骨细胞生成抑制因子在真核细胞中的表达 被引量：2
10
作者 刘继中 纪宗玲 +3 位作者 陈苏民 胡蕴玉 路凡 陶惠人 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期116-118,127,共4页
目的克隆人破骨细胞生成抑制因子(OPG/OCIF)编码区基因并在真核 细 胞中表达，为进一步研究OPG/OCIF的生理功能及探讨骨质疏松症等疾病的治疗奠定基础。方法以人骨肉瘤细胞系MG63的mRNA为模板，采用RT-PCR法得到人OPG/OCIF 的 编码区cDN... 目的克隆人破骨细胞生成抑制因子(OPG/OCIF)编码区基因并在真核 细 胞中表达，为进一步研究OPG/OCIF的生理功能及探讨骨质疏松症等疾病的治疗奠定基础。方法以人骨肉瘤细胞系MG63的mRNA为模板，采用RT-PCR法得到人OPG/OCIF 的 编码区cDNA，构建真核表达载体并转染成肌细胞，应用核酸杂交及western blot法证实OP G/OCIF在真核细胞中表达。结果获得人破骨细胞生成抑制因子(OPG/OCI F) 编码区全长cDNA，经序列测定证实与文献报道的OPG/OCIF编码区基因的核苷酸序列完全一致 。成功构建OPG/OCIF真核表达载体pcDNA3-OPG。重组质粒转染小鼠成肌细胞C2C12，建立稳 定转染OPG/OCIF编码区cDNA的细胞系，经核酸杂交及western blot法证实OPG/OCIF在真核细 胞中表达。结论 获得人破骨细胞生成抑制因子(OPG/OCIF)编码区全长cD NA并证实在真核细胞中表达，为OPG/OCIF进一步的功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 破骨细胞生成抑制因子 基因重组 真核细胞表达 骨质疏松症 RT-PCR 人体
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人骨保护素在毕赤酵母中的分泌表达及表达产物的生物活性分析(英文) 被引量：2
11
作者 刘继中 陈苏民 +3 位作者 李毅 胡蕴玉 纪宗玲 杨彤涛 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期566-571,共6页
为了在毕赤酵母表达系统中分泌表达人骨保护素 (osteoprotegerin ,OPG) ,以人骨肉瘤细胞系MG6 3的mRNA为模板 ,采用RT PCR法得到人OPG编码区cDNA ,克隆入毕赤酵母表达载体pPICZ B ,电转化毕赤酵母GS115 (Mut+) ,经 3%甲醇诱导分泌表达人... 为了在毕赤酵母表达系统中分泌表达人骨保护素 (osteoprotegerin ,OPG) ,以人骨肉瘤细胞系MG6 3的mRNA为模板 ,采用RT PCR法得到人OPG编码区cDNA ,克隆入毕赤酵母表达载体pPICZ B ,电转化毕赤酵母GS115 (Mut+) ,经 3%甲醇诱导分泌表达人OPG与组氨酸的融合蛋白 .SDS PAGE及Western印迹分析表明 ,有分子量约 6 6kD的目的蛋白表达 .纯化后的表达产物加入体外培养的小鼠骨髓细胞培养基中 ,当浓度为 10 0ng ml时 ,象牙片上骨吸收陷窝的数量及玻片上的TRAP阳性多核细胞的数量均减少 (P <0 0 5 ) .而同时加入人OPG的多克隆抗体后 ,这一抑制作用可被拮抗 ,在浓度为 5 0ng ml时则无此作用 .人OPG蛋白在酵母系统的成功表达 ,为该蛋白的进一步应用研究提供了依据 . 展开更多
关键词 人骨保护素 毕赤酵母 分泌表达 表达产物 生物活性
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人破骨细胞生成抑制因子(OPG/OCIF)编码区基因的克隆和序列分析 被引量：2
12
作者 刘继中 纪宗玲 +3 位作者 陈苏民 胡蕴玉 陈南春 陶惠人 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期25-26,共2页
关键词 破骨细胞生成抑制因子 骨保护素 基因克隆 序列分析
原文传递
大段异体骨关节移植术后感染 被引量：3
13
作者 刘继中 王臻 +3 位作者 胡蕴玉 黄耀添 梁戈 桑宏勋 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2000年第8期736-739,共4页
目的 :分析恶性肿瘤患者行异体骨关节移植术后感染的原因及处理方法。方法 :83例患者术后平均随访41.6个月。结果 :9例 ( 10 .8% )发生感染。皮瓣坏死、血肿形成、软组织覆盖薄弱使感染危险性增高 ;革兰氏阳性菌最常见。结论 :感染是保... 目的 :分析恶性肿瘤患者行异体骨关节移植术后感染的原因及处理方法。方法 :83例患者术后平均随访41.6个月。结果 :9例 ( 10 .8% )发生感染。皮瓣坏死、血肿形成、软组织覆盖薄弱使感染危险性增高 ;革兰氏阳性菌最常见。结论 :感染是保肢手术的严重并发症。妥善的局部处理及合理应用抗菌素是重要的预防措施。 展开更多
关键词 保肢手术 异体骨移植 感染
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异体骨段复合人工股骨头置换治疗股骨近端骨转移癌 被引量：2
14
作者 刘继中 王臻 +3 位作者 胡蕴玉 李明全 韩一生 戴先文 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2001年第9期862-864,T003,共4页
目的 :总结股骨近端骨转移癌患者行异体骨段复合人工股骨头置换的手术效果。方法 :13例患者术后平均随访 11.5个月。结果 :术后患者肢体功能改善 ,手术优良率为 84.6 % ;术后骨不连、假体松动、围手术期死亡各发生 1例。结论 :异体骨段... 目的 :总结股骨近端骨转移癌患者行异体骨段复合人工股骨头置换的手术效果。方法 :13例患者术后平均随访 11.5个月。结果 :术后患者肢体功能改善 ,手术优良率为 84.6 % ;术后骨不连、假体松动、围手术期死亡各发生 1例。结论 :异体骨段复合人工股骨头置换术利于软组织修复重建和肢体功能康复 ,术前需综合评价患者的全身条件及局部转移灶状况。 展开更多
关键词 骨转移癌 股骨近端 外科治疗 异体骨段复合人工股骨头置换
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重组异种骨二次免疫的实验研究 被引量：2
15
作者 刘继中 胡蕴玉 +3 位作者 李稔生 梅丹 薛采芳 吕荣 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第4期286-288,共3页
目的：研究重组异种骨（ＲＢＸ）重复植入动物体内引起的二次免疫应答及其对成骨活性的影响。方法：将ＲＢＸ间隔不同时间重复植入雄性Ｂａｌｂ／ｃ小鼠股部肌肉内，通过ＥＬＩＳＡ测定体液免疫水平，检测局部组织的碱性磷酸酶（ＡＬＰ... 目的：研究重组异种骨（ＲＢＸ）重复植入动物体内引起的二次免疫应答及其对成骨活性的影响。方法：将ＲＢＸ间隔不同时间重复植入雄性Ｂａｌｂ／ｃ小鼠股部肌肉内，通过ＥＬＩＳＡ测定体液免疫水平，检测局部组织的碱性磷酸酶（ＡＬＰ）活性反映成骨情况。结果：ＲＢＸ第１次植入后，血清中可检测到特异性抗体；局部组织中的ＡＬＰ活性略低于正常小鼠骨骼。间隔３周或６周再次植入ＲＢＸ，血清中特异性抗体水平明显增高（Ｐ＜０．０５）；ＡＬＰ活性降低（Ｐ＜０．０１）。结论：重复植入ＲＢＸ可诱发机体产生免疫应答；ＲＢＸ诱导成骨活性受到抑制，成骨作用延迟。 展开更多
关键词 骨形成蛋白 异种骨移植 二次免疫应答 骨移植
原文传递
肢体骨肉瘤瘤段灭活再植的术后并发症 被引量：2
16
作者 刘继中 王臻 +2 位作者 胡蕴玉 李明全 梁戈 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2001年第3期235-238,共4页
目的:分析骨肉瘤患者接受瘤段灭活再植的术后并发症,评价该术式的临床价值。方法:1986年11月到1989年7月,39例肢体骨肉瘤患者行瘤段灭活再植术,平均随访43.5个月。瘤段灭活方法为液态氮冷冻24例,60Co照射13例,煮沸2例。结果:（1）29名... 目的:分析骨肉瘤患者接受瘤段灭活再植的术后并发症,评价该术式的临床价值。方法:1986年11月到1989年7月,39例肢体骨肉瘤患者行瘤段灭活再植术,平均随访43.5个月。瘤段灭活方法为液态氮冷冻24例,60Co照射13例,煮沸2例。结果:（1）29名患者发生了41例次的术后并发症,发生率为74.4％。11名患者因术后感染、肿瘤局部复发等原因而截肢。术后总评优良率为41.0％。（2）瘤段灭活再植术后主要并发症的发生率:肿瘤局部复发33.3％,术后感染15.4％,皮瓣坏死7.7％,骨折25.6％,骨不连10.3％。结论:采用液态氮冷冻、60Co照射、煮沸等方法行瘤段灭活再植,术后并发症发生率高,患者肢体功能较差。 展开更多
关键词 骨肉瘤 手术并发症 瘤段灭活再植术 手术方法
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内锁髓内钉并异体骨植骨治疗肱骨肿瘤切除术后骨缺损 被引量：2
17
作者 刘继中 王臻 +1 位作者 胡蕴玉 于会东 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2000年第8期745-747,共3页
目的 :评价肱骨内锁髓内钉复合异体骨段 (关节 )移植重建肱骨恶性肿瘤所致的大段骨缺损的临床效果。方法 :应用肱骨内锁髓内钉复合异体半关节或骨段移植治疗肱骨恶性骨肿瘤 11例 ,随访时间 11～ 3 8个月。结果 :8例植骨愈合 ,2例骨不连... 目的 :评价肱骨内锁髓内钉复合异体骨段 (关节 )移植重建肱骨恶性肿瘤所致的大段骨缺损的临床效果。方法 :应用肱骨内锁髓内钉复合异体半关节或骨段移植治疗肱骨恶性骨肿瘤 11例 ,随访时间 11～ 3 8个月。结果 :8例植骨愈合 ,2例骨不连 ,1例肿瘤局部复发后截肢。术后总评优良率 63 .6%。植骨延迟愈合及肩关节无力是主要的并发症。结论 :肱骨内锁髓内钉固定牢固 ,复合异体骨段 (关节 )移植允许患者早期活动 ,值得推荐。 展开更多
关键词 肱骨 内锁髓内钉 骨重建 肱骨肿瘤 治疗
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骨保护素对破骨细胞分化和骨吸收活性的抑制作用(英文) 被引量：3
18
作者 刘继中 胡蕴玉 +2 位作者 纪宗玲 陈苏民 杨彤涛 《中国临床康复》 CSCD 2004年第14期2737-2739,共3页
背景:骨保护素(osteoprotegerin,OPG)可抑制破骨细胞的分化,抑制成熟破骨细胞的骨吸收活性并诱导其凋亡,在骨质疏松、类风湿性关节炎、癌症骨转移的领域有潜在的应用价值。目的:鉴定在CHO细胞中表达的人骨保护素生物学活性。设计:随机... 背景:骨保护素(osteoprotegerin,OPG)可抑制破骨细胞的分化,抑制成熟破骨细胞的骨吸收活性并诱导其凋亡,在骨质疏松、类风湿性关节炎、癌症骨转移的领域有潜在的应用价值。目的:鉴定在CHO细胞中表达的人骨保护素生物学活性。设计:随机对照的实验研究。地点和对象:实验在解放军第四军医大学西京医院骨科研究所完成,研究对象:人骨肉瘤细胞株MG63、中国仓鼠CHO细胞株、克隆质粒pUC19及真核表达质粒pcDNA3为本室保存,12只6～8周龄BABL/c雄性小鼠由本校动物中心提供。干预:RT-PCR法获得人OPG编码区cDNA并构建真核表达载体,在脂质体介导下转染CHO细胞,经Westernblot鉴定筛选稳定表达OPG的细胞系。获取含有OPG蛋白的条件培养基浓缩液,实验组:体外培养的鼠破骨细胞培养基中加入含有OPG蛋白的条件培养基浓缩液。对照组1只加入转染pcDNA3空载体的CHO细胞培养基的浓缩液。对照组2只加入完全培养基。主要观察指标:观察人OPG对破骨细胞的分化和骨吸收的影响。结果:转染人OPG编码区基因的CHO细胞能分泌表达OPG。小鼠骨髓细胞在1α,25(OH)2D3(1×10-8mol/L)的存在下可稳定分化出具有骨吸收功能的破骨细胞样细胞,在该培养体系中加入含有OPG的CHO细胞培养上清浓缩液,TRAP染色阳性细胞数明显减少(t=5.547,P<0.01)。 展开更多
关键词 破骨细胞 抑制因子 免疫 基因表达
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人骨形成蛋白-2和骨保护素在小鼠成肌细胞中的共表达 被引量：1
19
作者 刘继中 胡蕴玉 +3 位作者 纪宗玲 陈苏民 朱帮福 陶惠人 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2003年第1期1-4,共4页
目的　构建人骨形成蛋白 - 2 (BMP- 2 )和骨保护素 (OPG)的共表达真核载体 ,研究其在小鼠成肌细胞C2 C12中的表达。　方法　以人骨肉瘤细胞系 MG6 3的总 RNA为模板 ,RT- PCR法获得人 OPG的编码区 c DNA,克隆入真核表达载体 p IRES2 - E... 目的　构建人骨形成蛋白 - 2 (BMP- 2 )和骨保护素 (OPG)的共表达真核载体 ,研究其在小鼠成肌细胞C2 C12中的表达。　方法　以人骨肉瘤细胞系 MG6 3的总 RNA为模板 ,RT- PCR法获得人 OPG的编码区 c DNA,克隆入真核表达载体 p IRES2 - EGFP的多克隆位点 ,再将人 BMP- 2的编码区 c DNA克隆入 p IRES2 - EGFP中的 Bst X 位点 ,构建 BMP- 2和 OPG的双顺反子真核表达载体 p IRES2 - BMP- 2 - OPG,在阳离子脂质体介导下转染 C2 C12细胞 ,Western blot法检测 BMP- 2和 OPG的表达。　结果　 1获得人 OPG编码区全长 c DNA。 2构建人 BMP- 2和 OPG的双顺反子真核表达载体 p IRES2 - BMP- 2 - OPG。 3经 Western blot检测 ,p IRES2 - BMP- 2 - OPG转染 C2 C12细胞后 ,细胞可稳定表达 BMP- 2和 OPG。　结论　构建了人 BMP- 2和 OPG的共表达真核载体 ,并可在 C2 C12细胞中稳定表达 ,为应用 BMP- 2和 OPG进行骨质疏松等疾病的治疗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 骨形成蛋白-2 骨保护素 成肌细胞 基因表达 骨吸收 骨形成 骨质疏松 真核载体 骨转移癌
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人破骨细胞生成抑制因子编码区基因的克隆及在成肌细胞中的表达 被引量：1
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作者 刘继中 胡蕴玉 +2 位作者 纪宗玲 陈苏民 陶惠人 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2002年第10期989-991,共3页
目的 :克隆人破骨细胞生成抑制因子 (OPG/OCIF)编码区基因并在真核细胞中表达。方法 :以人骨肉瘤细胞系MG63的总RNA为模板 ,采用RT -PCR法得到OPG/OCIF的编码区cDNA ,构建真核表达载体 pIRES2 -OPG -EGFP ,在脂质体介导下转染小鼠成肌... 目的 :克隆人破骨细胞生成抑制因子 (OPG/OCIF)编码区基因并在真核细胞中表达。方法 :以人骨肉瘤细胞系MG63的总RNA为模板 ,采用RT -PCR法得到OPG/OCIF的编码区cDNA ,构建真核表达载体 pIRES2 -OPG -EGFP ,在脂质体介导下转染小鼠成肌细胞系C2C12 ,经G418压力筛选建立稳定转染人OPG/OCIF的细胞系 ,共聚焦荧光显微镜及核酸杂交方法检测OPG/OCIF在细胞中的表达。结果 :获得的人OPG/OCIF编码区全长cDNA序列与文献报道的核苷酸序列一致 ,核酸杂交证实稳定转染人OPG/OCIF编码区cDNA的小鼠成肌细胞系中有OPG/OCIFmRNA的表达。结论 :获得人破骨细胞生成抑制因子编码区全长cDNA并证实在真核细胞中稳定表达。 展开更多
关键词 成肌细胞 破骨细胞生成抑制因子 骨保护素 基因克隆 基因表达 骨质疏松
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