原核表达的褐黄血蜱唾液腺蛋白和铁蛋白1的免疫保护效果评价

1

作者 陈玲 陈浩 +4 位作者 岳婵娟 马锐 范雪阳 刘颂蕊 杨光友 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期688-697,共10页

旨在获得褐黄血蜱重组蛋白(rHfFer1和rHfAV422)并评价其作为抗蜱疫苗的免疫保护效果。通过原核表达获得rHfFer1和rHfAV422,然后将22只新西兰兔随机分为3组(皂素对照组和两个免疫组),其中皂素对照组6只,两个免疫组各8只,所有兔均免疫两次... 旨在获得褐黄血蜱重组蛋白(rHfFer1和rHfAV422)并评价其作为抗蜱疫苗的免疫保护效果。通过原核表达获得rHfFer1和rHfAV422,然后将22只新西兰兔随机分为3组(皂素对照组和两个免疫组),其中皂素对照组6只,两个免疫组各8只,所有兔均免疫两次,首免14 d后同等剂量进行二免,二免后一周感染幼蜱,根据蜱的饱血率和蜕皮率为指标评估抗蜱效果。结果显示,rHfFer1和rHfAV422免疫组的饱血率和蜕皮率与对照组均存在显著差异(P<0.05),计算得出rHfFer1和rHfAV422的抗蜱效果分别为68.06%和50.00%。研究结果表明,rHfFer1和rHfAV422可以作为抗蜱疫苗研发的候选抗原。 展开更多

关键词 褐黄血蜱 铁蛋白1 Fer1 唾液腺蛋白 AV422 重组蛋白 抗蜱效果

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头孢噻呋钠脂质体的毒性研究

2

作者 刘颂蕊 易超 +2 位作者 刘凡 郭定宗 杨世锦 《中国奶牛》 2012年第17期29-32,共4页

按每千克体重1 000mg、500mg和200mg给15只小鼠腹腔注射头孢噻呋钠脂质体,7d后小鼠仍健活;再将56只小鼠随机分为7组,即头孢噻呋钠脂质体高、中、低剂量组(分别相当于临床剂量的20、10和5倍),头孢噻呋钠原料药高、中、低剂量组和生理盐... 按每千克体重1 000mg、500mg和200mg给15只小鼠腹腔注射头孢噻呋钠脂质体,7d后小鼠仍健活;再将56只小鼠随机分为7组,即头孢噻呋钠脂质体高、中、低剂量组(分别相当于临床剂量的20、10和5倍),头孢噻呋钠原料药高、中、低剂量组和生理盐水对照组,连续21d腹腔注射头孢噻呋钠脂质体和头孢噻呋钠后,进行血液学、血清生化学和组织病理学检查。小鼠血常规及生化指标经t检验后显示,头孢噻呋钠高剂量组对小鼠有明显的毒性,脂质体高剂量组也有一定毒性,但相比同剂量的原料药毒性有所降低。肝脏和肾脏病理切片结果显示,脂质体对小鼠造成的毒性影响明显比头孢噻呋钠小。本研究结果表明,经脂质体包封后的头孢噻呋钠毒性明显下降,安全性提高。 展开更多

关键词 头孢噻呋钠 脂质体 毒性 小鼠

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大熊猫源奇异变形杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌多重PCR检测方法的建立及应用

3

作者 刘圣 郑维超 +12 位作者 黄虹秀 刘颂蕊 杨梅 燕霞 李运莉 岳婵娟 侯蓉 张东升 范雪阳 张洪文 李林 曹立亭 苏小艳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期598-603,共6页

为建立一种快速鉴别检测大熊猫3种病原菌的多重PCR方法,本研究根据NCBI登录的奇异变形杆菌(PM)ureR基因、肺炎克雷伯菌(KPN)phoE基因、大肠杆菌(E.coli)phoA基因,设计3对引物,并对各反应条件优化,初步建立检测大熊猫源PM、KPN和E.coli... 为建立一种快速鉴别检测大熊猫3种病原菌的多重PCR方法,本研究根据NCBI登录的奇异变形杆菌(PM)ureR基因、肺炎克雷伯菌(KPN)phoE基因、大肠杆菌(E.coli)phoA基因,设计3对引物,并对各反应条件优化,初步建立检测大熊猫源PM、KPN和E.coli的多重PCR方法。特异性结果显示,本研究建立的多重PCR方法对PM、KPN和E.coli能够分别扩增到308 bp、456 bp和666 bp的目的条带,而对大熊猫常见的其它20种病原菌均无扩增;敏感性试验结果显示,该方法对PM、KPN和E.coli DNA的检测限分别为2.8×10^(7)拷贝/μL(ureR)、3×10^(7)拷贝/μL(phoE)、6×10^(7)拷贝/μL(phoA)。利用本研究建立的多重PCR方法对100份大熊猫临床样品检测,结果显示:PM、KPN和E.coli的检出率分别为30%(30/100)、90%(90/100)和100%(100/100),均与研究报道的单一PCR检出率相同,对PM和KPN的检出率均高于传统病原分离方法(25%、83%)。本研究建立的大熊猫源PM、KPN、E.coli多重PCR检测方法特异性较强、敏感性较高,且可以同时检测3种病原,为大熊猫细菌性疾病的诊断提供了新的检测手段,极大缩短了检测时间,对临床防控相应细菌性疾病具有重要意义。 展开更多

关键词 大熊猫 奇异变形杆菌 肺炎克雷伯菌 大肠杆菌 多重PCR

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四种致泻性大肠杆菌多重PCR检测方法的建立及在大熊猫上的应用

4

作者 王路才 苏小艳 +4 位作者 张焕容 刘颂蕊 燕霞 杨梅 李明喜 《四川畜牧兽医》 2023年第9期31-35,共5页

致泻性大肠杆菌可引起大熊猫血水样便、休克,严重者可危及生命。为准确鉴定4种致泻性大肠杆菌病原,本研究通过对引物浓度、退火温度、反应条件等进行优化,建立了能同时检测EPEC和EHEC的多重PCR方法以及ETEC和EAEC的多重PCR方法。结果得... 致泻性大肠杆菌可引起大熊猫血水样便、休克,严重者可危及生命。为准确鉴定4种致泻性大肠杆菌病原,本研究通过对引物浓度、退火温度、反应条件等进行优化,建立了能同时检测EPEC和EHEC的多重PCR方法以及ETEC和EAEC的多重PCR方法。结果得出:两种多重PCR方法特异性强,仅对特有的毒力基因进行扩增,对其他10种大熊猫源病原菌的扩增结果均为阴性;敏感性较高,细菌基因组DNA检测中EHEC和EPEC的检测下限为2.71×10^(4)拷贝/μL,EAEC的检测下限为3.23×10^(4)拷贝/μL,ETEC的检测下限为3.23×10^(3)拷贝/μL;菌液检测中EPEC和EHEC的检测下限为1.85×10^(4)CFU/mL,ETEC的检测下限为2.9×10^(3)CFU/mL,EAEC的检测下限为2.62×10^(4)CFU/mL;不同时间段重复8次,均扩增出对应的目的条带,证明重复性好。利用多重PCR和单一PCR方法分别检测110份样品,结果得出esc V基因阳性率为1.82%(2/110),其余均为阴性;多重PCR与单一PCR方法的阳性符合率为100%。 展开更多

关键词 致泻性大肠杆菌 EPEC EHEC EAEC ETEC 多重PCR 大熊猫 检测技术

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大熊猫粪便样品中犬瘟热病毒的检测 被引量：2

5

作者 张焕容 徐桂丽 +1 位作者 刘颂蕊 侯蓉 《西南民族大学学报（自然科学版）》 CAS 2017年第3期237-241,共5页

根据GenBank中登录的犬瘟热病毒(CDV)N基因序列,设计合成1对特异性引物,以犬瘟热病毒疫苗中提取的RNA为阳性模板建立了快速检测CDV的RT-PCR方法,结果显示,所建立的CDV RT-PCR扩增得到与理论设计值大小一致的456 bp的特异性片段,对犬细... 根据GenBank中登录的犬瘟热病毒(CDV)N基因序列,设计合成1对特异性引物,以犬瘟热病毒疫苗中提取的RNA为阳性模板建立了快速检测CDV的RT-PCR方法,结果显示,所建立的CDV RT-PCR扩增得到与理论设计值大小一致的456 bp的特异性片段,对犬细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、牛轮状病毒(BRV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、大肠杆菌(E.coli)和新城疫病毒(NDV)的扩增结果均为阴性;最低可检出约1.53×10~2拷贝/μL的核酸;重复性试验结果表明,该方法检测重复性好.此方法对成都大熊猫繁育研究基地的37份眼观正常的大熊猫粪便样品检测,未检测出犬瘟热病毒,与胶体金试纸卡检测结果一致. 展开更多

关键词 犬瘟热病毒 RT-PCR 大熊猫

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大熊猫粪源大肠杆菌耐药性及整合子研究 被引量：5

6

作者 闫国栋 刘颂蕊 +5 位作者 侯蓉 高彤彤 王爽 代鹏飞 邓林 林居纯 《四川动物》 北大核心 2015年第4期489-493,共5页

为了解大熊猫粪源大肠杆菌的耐药性、整合子-基因盒的分布特性,分析整合子对细菌耐药性的影响,采用Kirby-Bauer（K-B）纸片法进行了50株大肠杆菌对13种抗菌药物的药物敏感性试验;PCR-测序法检测了1、2、3型整合酶基因,进一步对阳性菌株... 为了解大熊猫粪源大肠杆菌的耐药性、整合子-基因盒的分布特性,分析整合子对细菌耐药性的影响,采用Kirby-Bauer（K-B）纸片法进行了50株大肠杆菌对13种抗菌药物的药物敏感性试验;PCR-测序法检测了1、2、3型整合酶基因,进一步对阳性菌株可变区的基因盒序列鉴定分析。结果显示,菌株对13种抗菌药物表现出不同的耐药性,其中对氨苄西林、头孢唑林、四环素和复方新诺明表现出较高耐药性（耐药率为30%-68%）,对其余药物耐药性较低（耐药率低于14%）;50株菌中有15株（30%）含有1型整合子,未发现2型和3型整合子;15株1型整合子阳性菌中,有6株（40%）扩增出1200-2000 bp的基因盒,主要介导氨基糖苷类和磺胺-甲氧苄啶耐药的aad A和dfr A基因家族。以dfr A27＋aad A2为主（检出率83.33%）,1株为aac A4＋aad A1＋cat B2。以上说明本次检测的大熊猫粪源大肠杆菌对多种抗菌药物呈低水平耐药;1型整合子在大肠杆菌中广泛分布,整合子-基因盒是造成整合子阳性菌株耐氨基糖苷类、磺胺-甲氧苄啶类、氯霉素的主要原因。 展开更多

关键词 大熊猫 粪源大肠杆菌 耐药性 整合子-基因盒

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小熊猫源大肠杆菌病的病理诊断与病原鉴定 被引量：2

7

作者 张懋 刘颂蕊 +6 位作者 张泽钧 洪明生 黄文俊 岳婵娟 刘礼 侯蓉 彭西 《贵州师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2019年第3期61-66,共6页

大肠埃希氏菌的致病性血清型菌株可引起幼龄动物严重的腹泻与败血症。采用常规病理学方法,剖检死亡小熊猫(Ailurus fulgens)并取肠道和实质器官做组织学观察,发现其病变特征为坏死性肠炎及败血症。从肝、脾、肾中无菌分离培养出致病菌,... 大肠埃希氏菌的致病性血清型菌株可引起幼龄动物严重的腹泻与败血症。采用常规病理学方法,剖检死亡小熊猫(Ailurus fulgens)并取肠道和实质器官做组织学观察,发现其病变特征为坏死性肠炎及败血症。从肝、脾、肾中无菌分离培养出致病菌,经革兰氏染色及16S rDNA测序鉴定为大肠杆菌。经小鼠毒力实验测得该菌半数致死量LD_(50)为6. 5×10~7CFU,并且从攻毒小鼠脏器分离得到了相同的大肠杆菌。结论:该小熊猫致死原因为致病性大肠杆菌感染。 展开更多

关键词 小熊猫 大肠杆菌 病理诊断 病原鉴定

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一例大熊猫肺炎克雷伯菌与奇异变形杆菌感染的诊断 被引量：8

8

作者 陈垚焱 刘颂蕊 +5 位作者 苏小艳 耿毅 黄文俊 陈欣 白明焕 程子瑄 《野生动物学报》 北大核心 2020年第4期1013-1019,共7页

在四川某自然保护区发现1只死亡大熊猫,为明确其死因,对其进行了病理学与病因学分析,病理剖检发现其体表多处外伤,肌肉坏死;淋巴结肿大,呈暗紫色;肺出血;脾萎缩;肝、肾与胰肿胀。病理组织学上,多组织器官表现为变性、坏死与炎性细胞浸润... 在四川某自然保护区发现1只死亡大熊猫,为明确其死因,对其进行了病理学与病因学分析,病理剖检发现其体表多处外伤,肌肉坏死;淋巴结肿大,呈暗紫色;肺出血;脾萎缩;肝、肾与胰肿胀。病理组织学上,多组织器官表现为变性、坏死与炎性细胞浸润,同时在心、肝、肺与淋巴结等组织中发现大量细菌入侵。从肝、心与淋巴结等器官分离到2株优势菌,经16S rDNA序列分析鉴定其分别为肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)和奇异变形杆菌(Proteus mirabilis),而犬瘟热病毒与轮状病毒RT-PCR检测阴性。综上,该只大熊猫是因外伤继发肺炎克雷伯菌与奇异变形杆菌感染致全身多组织器官功能障碍而死亡。 展开更多

关键词 大熊猫 菌血症 肺炎克雷伯菌 奇异变形杆菌 病理损伤

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大熊猫自然保护区(瓦屋山、大相岭)潜在风险区域犬瘟热等病毒病的防控 被引量：1

9

作者 燕霞 苏小艳 +8 位作者 马锐 张东升 李林 齐敦武 李运莉 岳婵娟 冯娜 侯蓉 刘颂蕊 《野生动物学报》 北大核心 2022年第4期888-896,共9页

为掌握瓦屋山和大相岭大熊猫自然保护区潜在风险区域内犬饲养及其携带犬瘟热病毒(CDV)、细小病毒(PV)、轮状病毒(RV)和狂犬病病毒(RABV)的情况,并在潜在风险区域建立犬瘟热等多种病毒病的免疫隔离带,以保护野生大熊猫(Ailuropoda melano... 为掌握瓦屋山和大相岭大熊猫自然保护区潜在风险区域内犬饲养及其携带犬瘟热病毒(CDV)、细小病毒(PV)、轮状病毒(RV)和狂犬病病毒(RABV)的情况,并在潜在风险区域建立犬瘟热等多种病毒病的免疫隔离带,以保护野生大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)的种群健康。采用逐户走访、问卷调查、称体重和量体长的方法对保护区潜在风险区域的犬进行数量、饲养方式、体型和性别统计;采用PCR技术和血清中和抗体试验调查犬携带CDV、PV、RV病原情况和RABV在血清中的抗体水平;犬通过接种犬瘟热、腺病毒2型、副流感和细小病毒病四联活疫苗建立保护区犬瘟热等病毒的免疫隔离带。结果显示:瓦屋山和大相岭大熊猫自然保护区潜在风险区域内,共有犬178只,其中51.7%的犬(92/178)为自由散养状态,且以中小型犬(86.0%,153/178)为主;犬携带的RV为大熊猫源RV(GPRV),阳性率为76.9%(60/78);未检测到CDV和PV;12.7%的犬(7/55)RABV血清抗体阳性;犬疫苗免疫率为88.8%(158/178)。研究结果可为大熊猫保护区潜在风险区犬瘟热等多种病毒病的防控预警提供流行病学数据,并为大熊猫自然保护区周边犬的管理提供科学建议。 展开更多

关键词 大熊猫自然保护区 潜在风险区域 犬 病毒病 免疫隔离带

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大熊猫源产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的耐药性和致病性研究 被引量：4

10

作者 燕霞 杨梅 +8 位作者 蒋雨林 李林 张东升 李运莉 侯蓉 岳婵娟 嵇晓光 刘颂蕊 苏小艳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期214-218,共5页

为了掌握产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(CRKP)在圈养大熊猫中的流行、耐药和致病情况,本研究采用碳青霉烯酶Carba NP检测法从178株大熊猫源肺炎克雷伯菌中分离鉴定出8株CRKP(4.5%)。进一步采用纸片扩散法(K-B法)和PCR技术分别对CRKP分离株... 为了掌握产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(CRKP)在圈养大熊猫中的流行、耐药和致病情况,本研究采用碳青霉烯酶Carba NP检测法从178株大熊猫源肺炎克雷伯菌中分离鉴定出8株CRKP(4.5%)。进一步采用纸片扩散法(K-B法)和PCR技术分别对CRKP分离株进行耐药性和碳青霉烯酶基因型研究,随机选取其中一株CRKP分离株E28研究其对小鼠的致病性。结果显示大熊猫源CRKP对氨曲南、卡那霉素、庆大霉素、氧氟沙星和诺氟沙星敏感,对碳青霉烯类抗生素耐药严重,其中对亚胺培南耐药率(87.5%)高于美罗培南(12.5%);6株CRKP的碳青霉烯酶基因型为blaKPC2-13酶型,2株为bla KPC2-13+bla NDM-1酶型;CRKP分离株E28对小鼠的半数致死量(LD50)为5.6×10^(7)cfu/mL。本研究首次证实CRKP存在于圈养大熊猫中,在大熊猫的临床治疗中应合理使用抗生素,避免CRKP进一步扩散。 展开更多

关键词 大熊猫 肺炎克雷伯菌 碳青霉烯酶 耐药性 致病性

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“肉鸭及鸭肉产品生产、加工综合技术经验”专栏(六) 实验室使肉鸭生产、加工可达到最高卫生标准

11

作者 刘颂蕊 《国外畜牧学（猪与禽）》 2010年第1期11-13,共3页

该公司实验室给人印象深刻，它承担着兽医检测和食品安全检测的双重职能，并在公司生产链各个环节的质量控制上起着关键性的支持作用。

关键词 实验室 生产链 卫生标准 食品安全检测 肉鸭 加工 质量控制

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首例大熊猫睾丸精原细胞瘤的病理学诊断

12

作者 陈梦竹 刘颂蕊 +4 位作者 岳婵娟 耿毅 苏小艳 陈垚焱 程子瑄 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期651-654,共4页

大熊猫(Ailuropoda melanoleuca),是我国濒危珍稀的国家一级保护动物,其疾病的研究与防控受到高度关注。目前在寄生虫疾病、病毒性疾病、细菌性疾病(李玉欢等,2013;杨虎田,2014;Jin et al.,2017)等方面进行了大量研究,对大熊猫保护起到... 大熊猫(Ailuropoda melanoleuca),是我国濒危珍稀的国家一级保护动物,其疾病的研究与防控受到高度关注。目前在寄生虫疾病、病毒性疾病、细菌性疾病(李玉欢等,2013;杨虎田,2014;Jin et al.,2017)等方面进行了大量研究,对大熊猫保护起到了重要作用。 展开更多

关键词 大熊猫 精原细胞瘤 生殖细胞癌 组织病理学

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小熊猫源大肠杆菌的药敏特性及致病性 被引量：1

13

作者 李运莉 张东升 +7 位作者 侯蓉 岳婵娟 苏小艳 燕霞 李林 杨奎兴 彭西 刘颂蕊 《野生动物学报》 北大核心 2022年第1期177-183,共7页

为探明死亡圈养小熊猫(Ailurus fulgens)体内分离大肠杆菌(Escherichia coli,MT820501)的耐药情况及致病性,对分离菌株进行药敏特性分析,同时以小鼠感染实验检测其致病性。结果显示:该分离菌株对哌拉西林、头孢西丁、头孢曲松、头孢吡... 为探明死亡圈养小熊猫(Ailurus fulgens)体内分离大肠杆菌(Escherichia coli,MT820501)的耐药情况及致病性,对分离菌株进行药敏特性分析,同时以小鼠感染实验检测其致病性。结果显示:该分离菌株对哌拉西林、头孢西丁、头孢曲松、头孢吡肟、美罗培南、哌拉西林-他唑巴坦、氨苄青霉素-舒巴坦、卡那霉素、丁胺卡那、新霉素、米诺环素、左氧氟沙星、呋喃唑酮、多黏菌素B敏感,对大部分β-内酰胺类药物及少部分氨基糖苷类药物耐药;小鼠感染实验结果显示,分离菌株半数致死量为8.42×10^(7) cfu/mL,死亡小鼠体内分离出与小熊猫体内一致的菌株,病理表现为各实质脏器出现不同程度水肿、充血及炎性细胞浸润,与死亡小熊猫病理损伤特点高度相似,但不完全相同,这可能与感染方式、种属差异、耐受性等相关。 展开更多

关键词 小熊猫 大肠杆菌 耐药性 致病性

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小熊猫寄生虫性肺炎继发急性肠炎的病理诊断 被引量：1

14

作者 刘江枫 刘颂蕊 +4 位作者 岳婵娟 李运莉 黄文俊 张东升 彭西 《山地农业生物学报》 2020年第2期75-77,共3页

本文报道了一例小熊猫由肺部寄生虫感染继发急性肠炎的病例。剖检观察死亡小熊猫各组织器官的眼观变化,并采取心、肝、脾、肺、肾、胰腺和消化道各段固定于4%多聚甲醛溶液,石蜡包埋、切片、HE染色后观察病理组织学变化。结果显示:寄生... 本文报道了一例小熊猫由肺部寄生虫感染继发急性肠炎的病例。剖检观察死亡小熊猫各组织器官的眼观变化,并采取心、肝、脾、肺、肾、胰腺和消化道各段固定于4%多聚甲醛溶液,石蜡包埋、切片、HE染色后观察病理组织学变化。结果显示:寄生虫性肺炎、肠炎及肝、肾、脾充血和实质细胞变性是该例小熊猫的损伤特征,病理学诊断为寄生虫性肺炎继发急性肠炎。 展开更多

关键词 小熊猫 寄生虫病 肠源性细菌感染 病理诊断

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一例小熊猫化脓性食管炎的病理诊断 被引量：1

15

作者 王欢 刘颂蕊 +3 位作者 黄文俊 张东升 侯蓉 彭西 《山地农业生物学报》 2019年第1期88-92,共5页

本文报道了一例小熊猫化脓性食管炎的病例。剖检观察死亡小熊猫各组织器官的眼观变化,并采取心、肝、脾、肺、肾、胰腺、食道、胃和小肠固定于4%多聚甲醛溶液,石蜡包埋切片后观察病理组织学变化。结果显示:该小熊猫的食道黏膜上皮细胞... 本文报道了一例小熊猫化脓性食管炎的病例。剖检观察死亡小熊猫各组织器官的眼观变化,并采取心、肝、脾、肺、肾、胰腺、食道、胃和小肠固定于4%多聚甲醛溶液,石蜡包埋切片后观察病理组织学变化。结果显示:该小熊猫的食道黏膜上皮细胞溶解性坏死,大量中性粒细胞和脓细胞浸润,消化道的各肠段和肝脏、呼吸系统的肺脏、免疫系统的脾脏、泌尿系统的肾脏均有炎性病变,以中性粒细胞、巨噬细胞、浆细胞和淋巴细胞浸润为特征。病理学诊断为化脓性食道炎继发的败血症。 展开更多

关键词 小熊猫 食道炎 败血症 病理诊断

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大熊猫轮状病毒PCR检测方法的建立及应用

16

作者 苏小艳 李林 +3 位作者 燕霞 张东升 侯蓉 刘颂蕊 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期254-260,共7页

轮状病毒是威胁大熊猫健康的主要病原微生物之一。为了对大熊猫轮状病毒进行快速、方便且准确地检测,研发适合于基层饲养单位和保护区的检测方法是非常有必要的。本研究通过合成大熊猫轮状病毒Vp7基因序列,构建了PUC-VP7的重组质粒,并... 轮状病毒是威胁大熊猫健康的主要病原微生物之一。为了对大熊猫轮状病毒进行快速、方便且准确地检测,研发适合于基层饲养单位和保护区的检测方法是非常有必要的。本研究通过合成大熊猫轮状病毒Vp7基因序列,构建了PUC-VP7的重组质粒,并将其作为阳性对照对大熊猫轮状病毒样本进行PCR检测和分析。结果表明,在进行PCR扩增分析时,该质粒和病毒cDNA二者均在340 bp处出现了特异性条带。此外,对收集到的45份大熊猫粪便样本进行轮状病毒抗原检测时,其中2份样品在340 bp处出现条带,该基因片段与大熊猫轮状病毒CH-1株的相似性为99.89%。本研究构建的PUC-VP7质粒不但可以作为大熊猫轮状病毒PCR检测中的阳性质控品,而且还能有效地促进该PCR病毒检测技术在基层饲养单位和保护区的推广和应用。 展开更多

关键词 大熊猫轮状病毒 PCR检测 VP7基因 质粒构建

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大熊猫细菌性疾病研究进展 被引量：2

17

作者 刘圣 杨梅 +11 位作者 燕霞 刘颂蕊 李运莉 张东升 岳婵娟 侯蓉 范雪阳 张洪文 李林 郑维超 曹立亭 苏小艳 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2023年第7期42-47,共6页

细菌性疾病已成为严重危害大熊猫生命健康的主要疫病。随着抗生素的广泛使用,在大熊猫圈养种群内,细菌耐药性不断涌现并呈逐年攀升趋势,甚至出现多重耐药现象,给大熊猫健康构成了巨大的威胁。文章对国内外大熊猫主要细菌性疾病的病原生... 细菌性疾病已成为严重危害大熊猫生命健康的主要疫病。随着抗生素的广泛使用,在大熊猫圈养种群内,细菌耐药性不断涌现并呈逐年攀升趋势,甚至出现多重耐药现象,给大熊猫健康构成了巨大的威胁。文章对国内外大熊猫主要细菌性疾病的病原生物学特性、耐药现状及常见细菌性疾病的诊断与防治等进行了综述,以期为大熊猫细菌性疾病的诊断和疾病防控提供思路。 展开更多

关键词 大熊猫 细菌性疾病 病原学 诊断 防治

原文传递

大熊猫源细菌耐药性研究进展

18

作者 燕霞 苏小艳 +2 位作者 侯蓉 刘颂蕊 邓俊良 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期977-992,共16页

耐药菌和耐药基因已成为一种新型环境污染物,引发世界公共卫生问题。细菌耐药性尤其是多重耐药菌在人医临床、畜禽养殖以及环境传播等多个方面得到越来越多的关注,而关于大熊猫等野生动物的耐药性研究相对较少。大熊猫(Ailuropoda melan... 耐药菌和耐药基因已成为一种新型环境污染物,引发世界公共卫生问题。细菌耐药性尤其是多重耐药菌在人医临床、畜禽养殖以及环境传播等多个方面得到越来越多的关注,而关于大熊猫等野生动物的耐药性研究相对较少。大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)是世界公认的珍稀野生动物,其种群数量易受到各种疾病的威胁,尤其是肠道细菌性疾病。随着抗菌药物在疾病预防和控制中的普遍使用,由此带来的耐药性危害日益明显。本文总结了关于大熊猫源细菌耐药的国内外研究报道,对其耐药表型、耐药基因型、耐药机制及水平传播机制等方面内容进行了综述,旨在为大熊猫源细菌耐药性的研究和防控提供依据,为临床科学用药提供理论参考,从而助力大熊猫迁地保护。 展开更多

关键词 大熊猫 耐药菌 耐药表型 耐药基因 耐药机制 水平传播机制

原文传递

畜禽源大肠杆菌质粒介导β-内酰胺酶检测及其耐药基因特性研究 被引量：15

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作者 舒刚 侯蓉 +3 位作者 林居纯 钟钦卿 刘颂蕊 邓向东 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期92-97,共6页

为探讨畜禽源大肠杆菌临床菌株产β-内酰胺酶及其基因特性,采用常规检测法检测菌株产β-内酰胺酶情况,PCR法检测ESBLs、AmpC基因型,质粒结合转移试验研究耐药基因分子传播机制,并使用微量肉汤稀释法检测供体菌及接合子的药物敏感性。结... 为探讨畜禽源大肠杆菌临床菌株产β-内酰胺酶及其基因特性,采用常规检测法检测菌株产β-内酰胺酶情况,PCR法检测ESBLs、AmpC基因型,质粒结合转移试验研究耐药基因分子传播机制,并使用微量肉汤稀释法检测供体菌及接合子的药物敏感性。结果显示:467株食品动物源大肠杆菌未检出产碳青霉烯酶和金属β-内酰胺酶,产ESBLs和AmpC分别达36.83%和13.70%;176株产β-内酰胺酶菌株检出blaTEM、blaCTX-M、blaOXA、blaCIT和blaDHA分别为84.09%、60.80%、14.77%、35.80%和1.70%;本次质粒转移率为50%,多数转化子获得了供体菌的耐药性及耐药基因。以上结果说明,产ESBLs、AmpC菌株广泛存在于本次检测菌株中,blaTEM、blaCTX-M和blaCIT是β-内酰胺酶基因主要流行基因型,质粒在β-内酰胺酶基因的水平传播起主要作用。 展开更多

关键词 畜禽 大肠杆菌 ESBLS AMPC 基因型

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圈养大熊猫粪便源和环境源大肠杆菌质粒介导β-内酰胺类酶耐药基因的检测 被引量：3

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作者 覃振斌 侯蓉 +2 位作者 林居纯 高彤彤 刘颂蕊 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期69-74,共6页

为了解超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)及其相关耐药基因在大熊猫粪便源和环境源大肠杆菌的流行状况,采用双纸片和K-B纸片扩散法对分离自圈养大熊猫粪便(n=96株)和生活环境(n=29株)的大肠杆菌菌株,进行了产ESBLs菌株筛选和耐药性检测,并采用PC... 为了解超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)及其相关耐药基因在大熊猫粪便源和环境源大肠杆菌的流行状况,采用双纸片和K-B纸片扩散法对分离自圈养大熊猫粪便(n=96株)和生活环境(n=29株)的大肠杆菌菌株,进行了产ESBLs菌株筛选和耐药性检测,并采用PCR及测序法检测菌株ESBLs耐药基因型。结果表明:96株粪便源和29株环境源菌株ESBLs检出率分别为26.04%和24.14%;ESBL阳性菌对多数药物耐药率高于阴性菌(P≤0.05);不同来源菌株对氨苄西林等5种药物呈较高水平耐药性(耐药率≥30%),且呈严重的多重耐药性;粪便源菌株blaTEM、blaCTX-M、blaOXA和blaSHV基因检出率分别为16.67%、11.46%、7.29%和0%,而环境源菌株以上基因检出率分别为13.79%、10.34%、0%和0%。研究发现,产ESBLs菌株较广泛存在于大熊猫粪便源和环境源大肠杆菌中,这些菌株具有更严重和复杂的耐药表型,其ESBLs基因型主要为blaTEM和blaCTX-M。 展开更多

关键词 大肠杆菌 耐药性 Β-内酰胺酶 基因型

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