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猪附红细胞体病的研究进展 被引量:10
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作者 刘马峰 孔庆娟 +1 位作者 杨爱明 任家琰 《中国畜牧兽医》 CAS 2005年第7期57-60,共4页
附红细胞体病是由附红细胞体感染机体引起的一种人畜共患的传染病,而附红细胞体则是寄生于红细胞表面、血浆及骨髓中的一类微生物。作者就猪附红细胞体的病原特点、流行病学、发病机理、临床症状、病理变化、诊断及防治对策作一综述。
关键词 猪附红细胞体 流行病学 临床症状 预防和治疗
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猪圆环病毒的研究进展 被引量:12
2
作者 孔庆娟 刘马峰 +1 位作者 杨爱明 任家琰 《中国畜牧兽医》 CAS 2005年第5期48-49,共2页
猪圆环病毒感染是近几年发现的猪的一种病毒性传染病,已引起世界范围内养猪生产者的高度重视。猪感染圆环病毒后可引起的疾病有:断奶仔猪多系统衰弱综合征( PMWS)、猪皮炎和肾病综合征( PDNS)、猪呼吸系统衰弱综合征( PRDC)、仔猪传染... 猪圆环病毒感染是近几年发现的猪的一种病毒性传染病,已引起世界范围内养猪生产者的高度重视。猪感染圆环病毒后可引起的疾病有:断奶仔猪多系统衰弱综合征( PMWS)、猪皮炎和肾病综合征( PDNS)、猪呼吸系统衰弱综合征( PRDC)、仔猪传染性先天性震颤等。作者对其病原学、流行病学、临床症状、病理变化。 展开更多
关键词 猪圆环病毒 病理变化 防治
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大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌的药敏试验 被引量:2
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作者 孔庆娟 刘马峰 +2 位作者 白建 王汝都 任家琰 《畜禽业》 2005年第1期64-66,共3页
大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌是动物肠道内的常见细菌,体弱和幼龄动物受气温变化或食物变换等因素的影响时,肠道内的这些条件性病原菌便大量繁殖,引起胃肠道疾病或败血病。采集这2种病原菌EL-1株(大肠埃希氏菌)和EL-2株(肺炎克雷伯氏... 大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌是动物肠道内的常见细菌,体弱和幼龄动物受气温变化或食物变换等因素的影响时,肠道内的这些条件性病原菌便大量繁殖,引起胃肠道疾病或败血病。采集这2种病原菌EL-1株(大肠埃希氏菌)和EL-2株(肺炎克雷伯氏菌),在培养基上培养生长,再制备各种抗菌药片进行药敏试验。经动物试验肠霉素试验和抗原性研究,证明EL-1株和EL-2株能致死小白鼠,能产生肠毒素,具有较好的抗原性和较强的毒性。本试验通过药敏试验来检测这2种病原菌对不同抗菌药物的敏感性,以选择出有效药物用于预防和治疗这类疾病。试验表明,EL-1株和EL-2株除对氟哌酸、氟嗪酸、氯霉素和复方磺胺抗菌素有较高敏感性外,对其它抗菌药物具有不同程度抗药性。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯氏菌 药敏试验 大肠埃希氏菌 抗菌药物 抗原性 病原菌 肠道 幼龄 繁殖 生长
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魏氏梭菌引起家畜“猝死症”的研究进展 被引量:6
4
作者 孔庆娟 刘马峰 任家琰 《畜禽业》 2010年第8期20-23,共4页
家畜猝死症是我国目前日趋严重的动物疾病之一,经研究证明魏氏梭菌感染是引起该病的主要原因。因此,针对该病流行病学情况、病原、临床症状、病理学变化、微生物学诊断及其防治等方面的研究进展进行了综述。
关键词 魏氏梭菌 猝死症 研究进展
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猪圆环病毒病 被引量:2
5
作者 王汝都 白建 +2 位作者 孔庆娟 刘马峰 马海利 《吉林畜牧兽医》 2005年第4期16-18,共3页
猪圆环病毒病是近年来流行于世界上许多国家的一种新的病毒病。其病原为猪圆环病毒(Porcinecircovirus,PCV),可引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(Postweaningmultisystemicwastingsyndrome,PMWS)等疾病。本文对其研究历史、病原特性、致病... 猪圆环病毒病是近年来流行于世界上许多国家的一种新的病毒病。其病原为猪圆环病毒(Porcinecircovirus,PCV),可引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(Postweaningmultisystemicwastingsyndrome,PMWS)等疾病。本文对其研究历史、病原特性、致病性、临床症状、病理变化、诊断方法及防治措施作了阐述,并结合国内外研究进展陈述自己的观点。关键词:猪圆环病毒; 展开更多
关键词 猪圆环病毒 多系统衰竭综合征
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旋毛虫肌幼虫p45cDNA的克隆及鉴定
6
作者 孙树民 吴秀萍 +7 位作者 付宝权 王学林 郭恒 于申业 邓洪宽 刘马峰 P.Boireau 刘明远 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期439-441,445,共4页
目的本研究根据GenBank中旋毛虫45kDa抗原基因的序列设计引物,采用PCR技术从旋毛虫肌幼虫cDNA文库中扩增靶基因p45cDNA,并克隆到pMD-18T载体,转化至大肠埃希氏菌NovaBlue后测序分析。获得827bp的p45cD-NA。该序列与GenBank中的旋毛虫p4... 目的本研究根据GenBank中旋毛虫45kDa抗原基因的序列设计引物,采用PCR技术从旋毛虫肌幼虫cDNA文库中扩增靶基因p45cDNA,并克隆到pMD-18T载体,转化至大肠埃希氏菌NovaBlue后测序分析。获得827bp的p45cD-NA。该序列与GenBank中的旋毛虫p45基因序列相比共有1个核苷酸发生改变,二者的同源性为99%,其编码蛋白质由268个氨基酸组成,与45kDa抗原的同源性为99%。将p45cDNA克隆到原核表达载体pET28a并转化至表达菌BL21star(DE3)后,经IPTG诱导表达出约30kDa的重组蛋白。Western-blot检测表明,p45重组蛋白可以被旋毛虫感染猪血清识别,具有良好的抗原性。 展开更多
关键词 旋毛虫 P45 CDNA 克隆 表达 抗原性
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RNA干扰技术在寄生虫基因功能研究中的应用
7
作者 孙磊 邓洪宽 +3 位作者 刘明远 夏慧卿 刘马峰 崔国祯 《国际医学寄生虫病杂志》 CAS 2007年第4期189-192,共4页
RNA干扰(RNAi)技术是近几年发现的一种基因沉默技术,已成为分析寄生虫基因功能的有效手段,它为基因治疗、药物阻断剂候选基因的筛选等方面的研究提供了新方法。该文对RNAi技术的发现、作用机制、分子特征及其在寄生虫基因功能研究... RNA干扰(RNAi)技术是近几年发现的一种基因沉默技术,已成为分析寄生虫基因功能的有效手段,它为基因治疗、药物阻断剂候选基因的筛选等方面的研究提供了新方法。该文对RNAi技术的发现、作用机制、分子特征及其在寄生虫基因功能研究中的最新进展作一综述。 展开更多
关键词 RNA干扰 基因沉默 寄生虫 基因功能
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浅谈附红细胞体病的研究概况
8
作者 杨爱明 孔庆娟 +3 位作者 李德银 白建 刘马峰 任家琰 《畜禽业》 2005年第2期46-47,共2页
附红细胞体病是由附红细胞体感染机体引起的一种人畜共患的传染病。而附红细胞体则是寄生于红细胞表面、血浆、及骨髓中的一类微生物。近年来随着我国养猪业的蓬勃发展,该病的流行已有越来越烈之势,并逐渐成为危害养猪业的传染病之一。... 附红细胞体病是由附红细胞体感染机体引起的一种人畜共患的传染病。而附红细胞体则是寄生于红细胞表面、血浆、及骨髓中的一类微生物。近年来随着我国养猪业的蓬勃发展,该病的流行已有越来越烈之势,并逐渐成为危害养猪业的传染病之一。本文就猪附红细胞体的病原特点、流行病学、发病机理、临床症状、病理变化、诊断及防治对策作一综述。 展开更多
关键词 诊断 传染病 研究概况 红细胞表面 骨髓 血浆 感染 附红细胞体病 猪附红细胞体 病原特点
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鸭甲肝病毒3型在人工感染雏鸭体内分布与诱导肝病变及细胞因子表达的关联性分析 被引量:6
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作者 朱玉东 汪铭书 +8 位作者 程安春 朱德康 贾仁勇 刘马峰 陈舜 赵新新 杨乔 吴英 陈孝跃 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期164-172,共9页
探究鸭甲肝病毒3型(DHAV-3)在感染7日龄雏鸭体内动态分布规律与致肝病变和诱导IFN及促炎因子表达之间的关联。以DHAV-3强毒感染7日龄雏鸭,于感染后1、3、6、9、12、24、48、72和96h采集雏鸭的血液、肝、脾、肾、脑、胰、肺、胸腺、法氏... 探究鸭甲肝病毒3型(DHAV-3)在感染7日龄雏鸭体内动态分布规律与致肝病变和诱导IFN及促炎因子表达之间的关联。以DHAV-3强毒感染7日龄雏鸭,于感染后1、3、6、9、12、24、48、72和96h采集雏鸭的血液、肝、脾、肾、脑、胰、肺、胸腺、法氏囊、哈德氏腺和十二指肠共11种组织样品,以一步法TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR检测病毒含量变化、染料法实时荧光定量RT-PCR检测肝中抗病毒细胞因子(IFN-α、IFN-β和IFN-γ)及促炎因子(IL-1β、IL-2和IL-6)在转录水平的变化,用光学显微镜对肝组织病理学变化进行观察,分析这些变化之间的联系。结果表明:DHAV-3感染1h后即在所有的样品中检测到。组织器官中病毒含量,血液和胰分别在感染后12和96h达到峰值,其余器官均在感染24~48h后达到峰值。病毒含量较高的前三位器官是肝、脾和肾(分别为10^(11.15)、10^(10.37)和10^(10.30) copies·g^(-1))。肝组织病理学变化在感染3~12h后以空泡变性为主、24~48h以坏死为主。肝中上述6种细胞因子转录量除IL-1β在12h达到最高外,其余均在感染后24~48h达到最高,感染48h后,其转录量变化随肝中病毒含量下降而降低,并与肝病变严重程度呈正相关。DHAV-3在雏鸭体内具有广泛的组织嗜性,肝、脾、肾是病毒攻击的主要靶器官,肝中细胞因子极有可能在抑制病毒增殖和修复组织损伤过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 鸭甲肝病毒3型 病毒分布 肝病变 细胞因子
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新型鹅细小病毒四川株的全基因组扩增及遗传进化分析 被引量:5
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作者 葛志琪 刘亚刚 +9 位作者 陈舜 朱德康 刘马峰 汪铭书 贾仁勇 孙昆峰 杨乔 吴英 赵新新 程安春 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期574-580,共7页
【目的】了解四川地区新型鹅细小病毒(Novel goose parvovirus,NGPV)的分子生物学特征及遗传变异情况。【方法】根据Gen Bank中发表的新型鹅细小病毒的全基因组序列,设计5对兼并引物采用PCR方法分段扩增新型鹅细小病毒四川株的全基因组... 【目的】了解四川地区新型鹅细小病毒(Novel goose parvovirus,NGPV)的分子生物学特征及遗传变异情况。【方法】根据Gen Bank中发表的新型鹅细小病毒的全基因组序列,设计5对兼并引物采用PCR方法分段扩增新型鹅细小病毒四川株的全基因组序列,并利用DNAstar等生物信息分析软件对获得的基因组序列进行分子特性与遗传演变分析。【结果】获得的新型鹅细小病毒四川株(命名为SC16)全长5 109 nt,5′端ITR长408 nt,3′端ITR长407 nt,NS基因长1 884 nt,VP基因长2 199 nt。序列比对和遗传进化分析显示,SC16株与山东分离株SDLC01(KT343253.1)及QH15(KT751090.1)的基因组核苷酸同源性高达99%,与两者的亲缘关系最近,基于NS及VP蛋白的氨基酸序列系统进化树分析结果与此一致。但SC16株的5′端ITR还是发生了一定的变异:与SDLC01及QH15相比,多了几个14 nt的插入片段。【结论】研究结果丰富了NGPV的分子生物学资料。 展开更多
关键词 新型鹅细小病毒 鸭短喙侏儒综合征 全基因组扩增 遗传进化分析
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1型鸭甲肝病毒VP3蛋白的抗血清中和活性分析及B细胞表位鉴定 被引量:2
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作者 沈友林 汪铭书 +8 位作者 程安春 贾仁勇 朱德康 陈舜 刘马峰 刘菲 杨乔 孙昆峰 陈孝跃 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期141-148,共8页
旨在探究1型鸭甲肝病毒(DHAV-1)VP3蛋白抗血清的中和活性并鉴定VP3的线性B细胞表位。利用pGEX-4T-1表达载体,在BL21(DE3)宿主菌中原核表达DHAV-1 VP3基因,以切胶纯化出的蛋白质为抗原免疫兔制备多克隆抗体,通过鸡胚中和试验对多抗的中... 旨在探究1型鸭甲肝病毒(DHAV-1)VP3蛋白抗血清的中和活性并鉴定VP3的线性B细胞表位。利用pGEX-4T-1表达载体,在BL21(DE3)宿主菌中原核表达DHAV-1 VP3基因,以切胶纯化出的蛋白质为抗原免疫兔制备多克隆抗体,通过鸡胚中和试验对多抗的中和效价进行检测;采用Karplus&Schulz、Emini、Jameson-Wolf和Parker方法分别对柔韧性、表面可及性、抗原性及亲水性进行分析,得到了4条候选线性B细胞表位,以制备的兔抗VP3多克隆抗体为一抗,通过间接ELISA方法对人工合成的B细胞表位进行鉴定,并进一步用临床鸭血清样品对鉴定的B细胞表位的抗体检测能力进行评估。结果显示,VP3在BL21(DE3)中以包涵体形式表达,大小约54ku,Western blot分析表明重组蛋白质具有较好的反应原性。制备的兔抗VP3多克隆抗体的琼扩效价达到1∶16,并能中和DHAV-1,中和效价为1∶39;利用间接ELISA鉴定出GKRKPCRRPIHKPKNPPQEP(1—20aa)、FNTGRYQMSWYPIADGEQSL(131—150aa)和VNSSAPSNID(200—209aa)为VP3的B细胞表位,抗体检测能力试验结果显示表位肽可检测临床DHAV-1鸭血清。本研究表明DHAV-1VP3的抗血清具备一定的中和活性,1—20aa、131—150aa和200—209aa为VP3的B细胞表位且具有临床应用前景。 展开更多
关键词 1型鸭甲肝病毒 VP3蛋白 多克隆抗体 中和活性 B细胞表位
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革兰氏阴性菌血红素转运系统结构及功能特点 被引量:10
12
作者 程兴军 刘马峰 程安春 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期848-855,共8页
铁是大多数生物包括细菌生存的必需营养元素.对于感染宿主的致病细菌,血红素(heme/haem)可作为一种主要的铁来源.血红素转运系统在革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌中均有发现和鉴定,其转运机制在革兰氏阴性菌中有较为深入研究.革兰氏阴性菌... 铁是大多数生物包括细菌生存的必需营养元素.对于感染宿主的致病细菌,血红素(heme/haem)可作为一种主要的铁来源.血红素转运系统在革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌中均有发现和鉴定,其转运机制在革兰氏阴性菌中有较为深入研究.革兰氏阴性菌血红素转运系统主要由分泌于细胞外的血红素载体(hemophore)、血红素受体、TonB-ExbB-ExbD复合物、ABC转运体、血红素降解蛋白和调控蛋白等结构单元组成.对参与该系统的各个蛋白结构特点以及它们之间的相互作用机制的讨论,有助于对病原菌致病机制的深入研究和抗菌新药的研发. 展开更多
关键词 微生物 病原菌 血红素转运
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鸭坦布苏病毒NS3蛋白的原核表达及其多克隆抗血清的制备 被引量:3
13
作者 林霄 贺煜 +15 位作者 程安春 汪铭书 贾仁勇 朱德康 刘马峰 杨乔 吴英 赵新新 张沙秋 黄娟 刘韵雅 张玲 潘磊昌 欧旭敏 毛塞 陈舜 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2020年第5期619-623,共5页
【目的】利用原核表达系统表达鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)的NS3蛋白,并以此制备鼠抗NS3蛋白的多克隆抗血清。【方法】利用PCR扩增鸭坦布苏病毒CQW1株NS3基因片段,然后将其克隆到pET-28a(+)载体,构建重组质粒pET-28a(+)-NS... 【目的】利用原核表达系统表达鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)的NS3蛋白,并以此制备鼠抗NS3蛋白的多克隆抗血清。【方法】利用PCR扩增鸭坦布苏病毒CQW1株NS3基因片段,然后将其克隆到pET-28a(+)载体,构建重组质粒pET-28a(+)-NS3。将重组表达质粒转化到大肠杆菌BL21感受态细胞中,筛选获得阳性重组菌,经IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot试验表明重组NS3蛋白在BL21细胞中成功表达,将重组NS3蛋白切胶纯化后免疫小鼠后收获抗血清。【结果】经间接免疫荧光试验和Western blot试验验证,多克隆抗血清可识别病毒感染细胞过程产生的NS3蛋白和真核表达的NS3蛋白,具有良好的反应性和特异性。【结论】成功制备的DTMUV NS3蛋白的鼠源多克隆血清,将为鸭坦布苏病毒的临床检测和NS3蛋白功能性研究奠定基础。 展开更多
关键词 鸭坦布苏病毒 NS3蛋白 原核表达 多抗血清
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细菌铁离子利用系统与宿主抗感染免疫 被引量:5
14
作者 张鹏云 刘马峰 程安春 《生命科学研究》 CAS CSCD 2016年第1期82-88,共7页
铁离子对于绝大多数微生物及其宿主都是必需的营养物质,它是许多蛋白和酶的重要辅助因子。致病菌为了成功致病,进化出了多种机制来摄取宿主体内的铁离子,其中主要包括三价铁离子转运系统和亚铁血红素转运系统。而对于宿主而言,铁离子虽... 铁离子对于绝大多数微生物及其宿主都是必需的营养物质,它是许多蛋白和酶的重要辅助因子。致病菌为了成功致病,进化出了多种机制来摄取宿主体内的铁离子,其中主要包括三价铁离子转运系统和亚铁血红素转运系统。而对于宿主而言,铁离子虽然在细胞呼吸和DNA复制等过程中扮演着重要的角色,但过多的铁离子也会产生细胞毒性。因此,宿主体内的铁离子浓度必须受到严格的调控。为限制病原菌感染,宿主先天性免疫系统进化出一系列限制自身铁离子进入微生物的机制,这一过程被称为宿主的"营养免疫"。从病原菌和宿主两个方面详细讨论病原菌是如何从宿主获取铁离子以及宿主如何防止细菌获取铁离子的分子机制,能为更好地提高宿主免疫力来阻止细菌感染和开发有效的非抗生素类药物提供理论依据。 展开更多
关键词 铁载体转运系统 血红素转运系统 宿主营养免疫
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禽疱疹病毒活载体疫苗研究进展 被引量:2
15
作者 王梦阁 吴英 +12 位作者 程安春 汪铭书 朱德康 贾仁勇 刘马峰 陈舜 赵新新 杨乔 张沙秋 黄娟 刘韵雅 张玲 于艳玲 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期85-93,共9页
禽疱疹病毒主要包括α疱疹病毒亚科的鸡马立克氏病毒(Marek’s disease virus,MDV)、传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus,IBDV)和鸭肠炎病毒(duck enteritis virus,DEV)。作为疱疹病毒家族的成员,禽疱疹病毒基因组... 禽疱疹病毒主要包括α疱疹病毒亚科的鸡马立克氏病毒(Marek’s disease virus,MDV)、传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus,IBDV)和鸭肠炎病毒(duck enteritis virus,DEV)。作为疱疹病毒家族的成员,禽疱疹病毒基因组庞大,存在多个复制非必需区,可容纳多个外源基因的插入,是表达其他禽类病原抗原基因的理想载体。总结了禽疱疹病毒的构建方法、外源基因表达水平,并对MDV、IBDV和DEV三种禽疱疹病毒的不同重组病毒疫苗免疫效果评价进行归纳,旨在为畜禽传染病防治提供参考依据。 展开更多
关键词 禽疱疹病毒 活载体疫苗 MDV IBDV DEV
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革兰氏阴性菌TonB-ExbB-ExbD复合物的功能、作用机制、分布及进化 被引量:7
16
作者 岳慧贤 程安春 刘马峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期146-155,共10页
革兰氏阴性菌在生长繁殖过程中需要从外界摄取营养物质。一些小分子营养物质可以自由地通过革兰氏阴性菌的细胞膜,而一些大分子营养物质的转运需要特异性的TonB复合物依赖性的外膜受体进行转运。TonB复合物由TonB、ExbB、ExbD构成,是革... 革兰氏阴性菌在生长繁殖过程中需要从外界摄取营养物质。一些小分子营养物质可以自由地通过革兰氏阴性菌的细胞膜,而一些大分子营养物质的转运需要特异性的TonB复合物依赖性的外膜受体进行转运。TonB复合物由TonB、ExbB、ExbD构成,是革兰氏阴性菌对外界营养物质主动转运过程的能量提供单位,在革兰氏阴性菌分布广泛。近年来,对TonB-ExbB-ExbD复合物的功能、结构及作用机制取得了重大研究进展,然而此复合物在不同的细菌也存在功能及作用机制上的差异。基于此背景,本文综述了TonB复合物的功能和结构研究进展,并分析了TonB复合物在革兰氏阴性菌中的分布、进化,比较了不同革兰氏阴性菌此复合物的差异,有助于进一步发现和揭示TonB复合物的新功能与作用机制。 展开更多
关键词 革兰氏阴性菌 TonB复合物 进化
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细菌血红素降解蛋白结构特点及作用机制 被引量:3
17
作者 税芸 刘马峰 程安春 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期806-814,共9页
铁离子是几乎所有生物包括细菌生存必需的营养元素.在宿主体内,绝大多数的铁离子均以血红素的形式存在于各种血红素结合蛋白,如血红蛋白、肌红蛋白等.当致病菌感染宿主后,血红素将成为某些致病菌主要的铁离子来源.致病菌编码血红素转运... 铁离子是几乎所有生物包括细菌生存必需的营养元素.在宿主体内,绝大多数的铁离子均以血红素的形式存在于各种血红素结合蛋白,如血红蛋白、肌红蛋白等.当致病菌感染宿主后,血红素将成为某些致病菌主要的铁离子来源.致病菌编码血红素转运系统,并利用该系统将血红素转运至胞浆,在胞浆血红素被细菌的血红素降解蛋白降解,释放铁离子供细菌利用.在致病菌中,目前至少有两种血红素降解酶被发现和鉴定.第一种为经典的血红素氧化酶(heme oxygenase,HO),它催化血红素氧化形成胆绿素、一氧化碳(CO)和Fe2+;第二种非经典降解酶,包括金黄色葡萄球菌的IsdG/IsdI蛋白及其同系物Mhu D蛋白,催化血红素分别产生staphylobilin和mycobilin.另外,部分细菌内存在其它血红素降解因子,其与前两种血红素降解酶无结构同源性,但在血红素降解实验中可产生胆绿素(biliverdin)或CO,因而被鉴定为"血红素降解蛋白".对细菌血红素降解蛋白分子结构解析及作用机制的深入理解,将有助于新的血红素降解蛋白的发现和鉴定. 展开更多
关键词 血红素 血红素氧化酶 血红素降解蛋白IsdG/IsdI
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部分革兰氏阴性菌胞外功能sigma因子结构与调控铁离子的利用机制 被引量:3
18
作者 岳慧贤 程安春 刘马峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期108-115,共8页
铁离子是大多数细菌生存所必需的一种营养物质,但摄入过多的铁离子也会对细菌造成损伤。因此,细菌对铁离子的摄取受到严格调控。革兰氏阴性菌对铁离子的摄取主要受Fur(ferric uptake regulator)蛋白和σ(sigma)因子的调控。σ因子是RNA... 铁离子是大多数细菌生存所必需的一种营养物质,但摄入过多的铁离子也会对细菌造成损伤。因此,细菌对铁离子的摄取受到严格调控。革兰氏阴性菌对铁离子的摄取主要受Fur(ferric uptake regulator)蛋白和σ(sigma)因子的调控。σ因子是RNA聚合酶的可解离亚基,能使RNA聚合酶结合到基因的启动子区域,从而引起基因转录。因此,σ因子在原核生物转录起始过程中必不可少。细菌中存在多种σ因子,参与铁离子调控的σ因子即是胞外功能σ因子(extra-cytoplasmic function sigma factor,ECF sigma factor)。通常,胞外功能σ因子活性可被抗σ因子(anti-sigma factor)抑制。当受到外界环境信号的刺激,σ因子与抗σ因子解离,从而使σ因子活化并结合RNA聚合酶核心酶形成全酶,引起目的基因的转录。本文将就胞外功能σ因子在σ因子家族中的分类地位、结构特点以及对3价铁离子和血红素的转运调控机制作一综述。 展开更多
关键词 胞外功能σ因子 铁离子调控 革兰氏阴性细菌
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鸭疫里默氏杆菌耐药基因传播方式的鉴定及分布
19
作者 杨宇豪 姚弈舟 +3 位作者 朱德康 张相德 程安春 刘马峰 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期4455-4465,共11页
【目的】鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer, RA)是一种感染鸭、鹅等禽类的革兰氏阴性病原菌。该菌的临床分离株具有多重耐药性,且其耐药性呈现逐年增加的趋势,但关于这些耐药基因在该菌的传播方式尚未被明确鉴定。本研究旨在鉴... 【目的】鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer, RA)是一种感染鸭、鹅等禽类的革兰氏阴性病原菌。该菌的临床分离株具有多重耐药性,且其耐药性呈现逐年增加的趋势,但关于这些耐药基因在该菌的传播方式尚未被明确鉴定。本研究旨在鉴定耐药基因在鸭疫里默氏杆菌的传播方式,以及这些耐药基因在该菌临床分离株中的分布情况。【方法】测定参考菌株RA ATCC 11845、临床分离株RA CH-1、RA CH-2对10类28种药物的耐药表型;通过基因组分析和基因缺失株的构建鉴定耐药基因;自然转化实验鉴定其耐药基因传播方式;通过PCR检测这些耐药基因在不同临床菌株的分布情况。【结果】耐药检测结果表明,鸭疫里默氏杆菌RA CH-1株、RA CH-2株对β-内酰胺类、四环素类、大环内酯类、林可胺类及酰胺醇类等药物均具有耐药性,而RA ATCC 11845株对以上药物敏感;13个耐药基因分别缺失后对相关药物变得敏感,表明其参与耐药;以上耐药基因均可通过自然转化方式转移至敏感菌株RA ATCC 11845;相关耐药基因在2017-2023年分离的100株临床株的检出率最低为3%,最高为89%。【结论】耐药基因在鸭疫里默氏杆菌可通过自然转化的形式进行传播,不同耐药基因在该菌临床分离株中的分布不同,其中tet(X)(B739_0030)耐药基因携带率最高,blaOXA (G148_1768)耐药基因携带率最低。 展开更多
关键词 鸭疫里默氏杆菌 耐药基因 传播方式 自然转化
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鸭疫里默氏杆菌九型分泌系统(T9SS)分泌蛋白B739_0093的功能鉴定
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作者 江茵 罗睿心 +1 位作者 程安春 刘马峰 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期2407-2418,共12页
【目的】鸭疫里默氏杆菌是引起鸭浆膜炎的一种革兰氏阴性病原菌,该菌编码的九型分泌系统(type IX secretion system,T9SS)参与滑动、致病等过程。前期研究结果表明,鸭疫里默氏杆菌CH-1株B739_0093基因在限铁培养条件明显上调。序列分析... 【目的】鸭疫里默氏杆菌是引起鸭浆膜炎的一种革兰氏阴性病原菌,该菌编码的九型分泌系统(type IX secretion system,T9SS)参与滑动、致病等过程。前期研究结果表明,鸭疫里默氏杆菌CH-1株B739_0093基因在限铁培养条件明显上调。序列分析表明,B739_0093编码蛋白含有一个T9SS分泌蛋白保守的C端结构域,然而其具体功能未知。本研究旨在鉴定该基因编码蛋白是否被T9SS分泌,以及在该菌致病中的作用。【方法】用荧光定量PCR检测B739_0093是否被铁离子和铁转运调节子(ferric uptake regulator,Fur)调控;用大肠杆菌表达重组B739_0093截短蛋白制备多克隆抗体,通过Western blotting检测是否由T9SS分泌;构建B739_0093基因缺失株,通过毒力和定殖试验鉴定B739_0093在鸭疫里默氏杆菌致病中的功能。【结果】荧光定量PCR结果表明,B739_0093基因在铁离子限制性培养基明显上调,此调控是由调控蛋白Fur介导的;Western blotting结果显示,B739_0093基因编码蛋白在亲本株RA CH-1主要定位在分泌物中,而在T9SS缺失株定位在菌体且不能在分泌物被检测到;与亲本株RA CH-1相比,RA CH-1ΔB739_0093对雏鸭的致病力减弱,在雏鸭各组织器官的定殖能力明显降低。【结论】B739_0093基因编码蛋白是由鸭疫里默氏杆菌T9SS分泌的,其表达受铁离子及Fur调控,并且参与了该菌的致病。 展开更多
关键词 鸭疫里默氏杆菌 九型分泌系统 毒力
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