循证医学在肿瘤科临床病例讨论教学中的应用 被引量：9

1

作者 卓文磊 朱波 +3 位作者 孙建国 谢启超 李启明 陈正堂 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第24期2555-2555,2568,共2页

医学研究获得的证据和临床实践之间往往存在差距,仅凭个人习惯、经验或权威作出临床决策,结果可能无效甚至有害。1992年加拿大McMaster大学提出循证医学（evidence-based medicine,EBM）概念。其定义为慎重、准确和明智地应用目前可获... 医学研究获得的证据和临床实践之间往往存在差距,仅凭个人习惯、经验或权威作出临床决策,结果可能无效甚至有害。1992年加拿大McMaster大学提出循证医学（evidence-based medicine,EBM）概念。其定义为慎重、准确和明智地应用目前可获得的最好的临床证据,同时将临床医师个人的临床实践和经验与客观的科学研究证据结合,考虑患者的价值和愿望, 展开更多

关键词 循证医学 临床病例 应用 肿瘤科 教学 临床证据 临床实践 医学研究

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针对CTGF的shRNA抑制TGFβ1诱导人肾小管上皮细胞合成胶原 被引量：13

2

作者 卓文磊 王彦 张璟 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期981-984,共4页

目的研究针对结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfactor,CTGF)的短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)对转化生长因子β1(TGFβ1)诱导人肾小管上皮细胞株(humanrenaltubularepithelialcell,HKC)合成胶原的抑制作用。方法设计和构建带... 目的研究针对结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfactor,CTGF)的短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)对转化生长因子β1(TGFβ1)诱导人肾小管上皮细胞株(humanrenaltubularepithelialcell,HKC)合成胶原的抑制作用。方法设计和构建带有U6启动子的能产生针对CTGF的shRNA的RNA干扰表达质粒,转染至受TGFβ1刺激的HKC,以RT-PCR和Westernblot检测HKC转染前后CTGF表达,以3H脯氨酸掺入法检测总胶原合成量。结果和仅受TGFβ1刺激组相比,转染了RNA干扰表达质粒的受TGFβ1刺激的HKCCTGFmRNA和蛋白表达明显减弱,总胶原合成量下降(P<0.01)。结论针对CTGF的短发夹RNA能明显抑制TGFβ1诱导HKC合成胶原。 展开更多

关键词 RNA干扰 结缔组织生长因子 胶原 人肾小管上皮细胞

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RNA干扰抑制Snail表达对A549细胞上皮-间充质转分化及体外侵袭的影响 被引量：6

3

作者 卓文磊 张云嵩 +2 位作者 王彦 敖绪军 陈正堂 《现代肿瘤医学》 CAS 2008年第6期889-893,共5页

目的:研究用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术抑制转录因子Snail表达后,对人肺腺癌A549细胞上皮-间充质转分化表型和体外侵袭能力的影响。方法:构建能表达针对Snail的小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)的RNA干扰载体(Snail siR... 目的:研究用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术抑制转录因子Snail表达后,对人肺腺癌A549细胞上皮-间充质转分化表型和体外侵袭能力的影响。方法:构建能表达针对Snail的小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)的RNA干扰载体(Snail siRNA vector)和表达不针对任何已知mRNA的siRNA的阴性对照RNA干扰载体(control siRNA vector),分别转染A549细胞,新霉素抗性筛选得到Snail表达受抑制的A549-siSnail细胞和Snail表达未受影响的A549-siControl细胞。针对非转染(A549-nontransfection)、A549-siSnail、A549-siControl三组细胞,分别采用RT-PCR和Western blot技术检测Snail、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙粘素表达,用Boyden chamber模型检测细胞侵袭能力。结果:A549-nontransfection组:Snail和α-SMA表达强阳性,E-钙粘素表达弱阳性;A549-siSnail组:和A549-nontransfection组相比,Snail和α-SMA表达显著减弱(P<0.01),E-钙粘素表达显著增强(P<0.01),Boyden chamber穿膜细胞数显著减少(P<0.01);A549-siControl组:Snail、α-SMA和E-钙粘素表达,及Boyden chamber穿膜细胞数皆和A549-nontransfection组无显著差异(P>0.05)。结论:通过RNA干扰阻滞Snail表达能有效地抑制A549细胞上皮-间充质转分化及体外侵袭能力。Snail可能在肺腺癌上皮-间充质转分化及侵袭过程中扮演重要角色,抑制Snail表达可能成肺腺癌治疗的可行策略。 展开更多

关键词 SNAIL RNA干扰 上皮-间充质转分化 A549细胞 侵袭

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RNAi抑制Layilin表达对肺腺癌A549细胞体外侵袭和荷瘤鼠体内淋巴转移的影响 被引量：4

4

作者 卓文磊 王彦 +1 位作者 陈正堂 敖绪军 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2007年第2期110-114,共5页

背景与目的:透明质酸参与了多种肿瘤细胞的侵袭行为,Layilin是一种新发现的特异性透明质酸受体。本研究在发现Layilin表达于人肺腺癌A549细胞株的前期工作基础上,观察用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术抑制Layilin表达后,对人肺腺癌... 背景与目的:透明质酸参与了多种肿瘤细胞的侵袭行为,Layilin是一种新发现的特异性透明质酸受体。本研究在发现Layilin表达于人肺腺癌A549细胞株的前期工作基础上,观察用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术抑制Layilin表达后,对人肺腺癌A549细胞体外侵袭和体内淋巴道转移的影响。方法:构建能表达针对Layilin的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)的RNAi质粒(Layilin siRNA plasmid)和表达不针对任何已知mRNA的siRNA的阴性对照RNAi质粒(control siRNA plasmid),分别转染A549细胞,新霉素抗性筛选得到Layilin表达受抑制的A549-siLayilin细胞和Layilin表达未受影响的A549-siControl细胞。针对非转染(A549-nontransfec-tion)、A549-siLayilin、A549-siControl 3组细胞,分别采用RT-Real time PCR和Western blot技术检测Layilin表达,用Boyden小室实验检测细胞体外侵袭能力,用爪垫皮下种植淋巴结转移模型检测淋巴转移能力。结果:与A549-non-transfection组和A549-siControl组相比,A549-siLayilin组细胞Layilin表达减少,体外侵袭能力降低,体内淋巴转移率下降。结论:通过RNAi抑制Layilin表达后,能有效抑制透明质酸所诱导的A549细胞体外侵袭和裸鼠移植瘤淋巴转移。本研究为通过RNAi手段抑制Layilin表达,进而抑制肺腺癌淋巴转移提供了有益的思路。 展开更多

关键词 RNAi Layilin 侵袭 A549细胞 淋巴道转移

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CD44v3短发夹RNA对透明质酸诱导人结肠癌SW480细胞体外粘附和侵袭的抑制作用 被引量：6

5

作者 卓文磊 王彦 陈正堂 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2005年第6期518-521,共4页

目的:研究CD44v3的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)对体外培养的人结肠癌SW480细胞CD44v3表达及透明质酸诱导的粘附侵袭行为的抑制作用。方法:设计和构建带有U6启动子的CD44v3基因特异性的shRNA干扰表达质粒,转染至SW480细胞,以RT-... 目的:研究CD44v3的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)对体外培养的人结肠癌SW480细胞CD44v3表达及透明质酸诱导的粘附侵袭行为的抑制作用。方法:设计和构建带有U6启动子的CD44v3基因特异性的shRNA干扰表达质粒,转染至SW480细胞,以RT-PCR和Western blot检测SW480细胞转染前后CD44v3表达,以平板粘附模型和Boyden小室模型检测SW480细胞转染前后粘附和侵袭能力。结果:和转染前相比,转染了RNA干扰表达质粒的SW480细胞CD44v3mRNA和蛋白表达、以及受透明质酸诱导而粘附于平板和穿过Boyden小室隔膜的细胞数皆显著减少(P<0.01)。结论:针对CD44v3的短发夹RNA能显著抑制透明质酸诱导人结肠癌SW480细胞体外粘附和侵袭行为。 展开更多

关键词 RNA干扰 CD44V3 粘附 侵袭 SW480细胞株

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针对layilin的shRNA抑制透明质酸诱导人肺腺癌A549细胞体外黏附和侵袭 被引量：4

6

作者 卓文磊 王彦 陈正堂 《中国肺癌杂志》 CAS 2006年第3期236-240,共5页

背景与目的透明质酸参与了多种肿瘤细胞黏附侵袭行为。layilin是一种新发现的与细胞骨架有密切联系的透明质酸受体。本研究的目的是观察针对layilin的短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)对体外培养的人肺腺癌A549细胞layilin表达及受透... 背景与目的透明质酸参与了多种肿瘤细胞黏附侵袭行为。layilin是一种新发现的与细胞骨架有密切联系的透明质酸受体。本研究的目的是观察针对layilin的短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)对体外培养的人肺腺癌A549细胞layilin表达及受透明质酸诱导黏附侵袭行为的影响。方法设计和构建带有U6启动子的能产生针对layilin的shRNA的RNA干扰质粒,转染至A549细胞,以RT-PCR、Westernblot和免疫荧光检测A549细胞转染前后layilin表达,以平板黏附模型和Boyden小室模型检测A549细胞转染前后黏附和侵袭能力。结果和转染前相比,转染了RNA干扰表达质粒的A549细胞layilin表达明显减少(P<0.01),而且受透明质酸诱导而黏附于平板和穿过Boyden小室隔膜的A549细胞数皆明显减少(P<0.01)。结论针对layilin的shRNA能明显抑制透明质酸诱导的人肺腺癌A549细胞体外黏附和侵袭能力。 展开更多

关键词 RNA干扰layilin 黏附 侵袭 A549细胞

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透明质酸黏素和肿瘤 被引量：9

7

作者 卓文磊 陈正堂 《重庆医学》 CAS CSCD 2005年第6期936-939,共4页

关键词 透明质酸黏素 肿瘤 侵袭 转移

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针对Twist的短发夹RNA抑制A549细胞上皮-间充质转分化及体外侵袭 被引量：3

8

作者 卓文磊 王彦 +1 位作者 陈正堂 敖绪军 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2006年第5期325-328,共4页

背景与目的:上皮-间充质转分化在胚胎发育和肿瘤转移过程中起重要作用。在发现人肺腺癌A549细胞高表达转录因子Tw ist的基础上,本实验研究了针对Tw ist的短发夹RNA(short hairp in RNA,shRNA)对体外培养的人肺腺癌A549细胞上皮-间充质... 背景与目的:上皮-间充质转分化在胚胎发育和肿瘤转移过程中起重要作用。在发现人肺腺癌A549细胞高表达转录因子Tw ist的基础上,本实验研究了针对Tw ist的短发夹RNA(short hairp in RNA,shRNA)对体外培养的人肺腺癌A549细胞上皮-间充质转分化和体外侵袭能力的影响。方法:构建能表达针对Tw ist mRNA的shRNA的阳性RNA干扰(RNA i)质粒和表达不针对任何已知mRNA的shRNA的阴性RNA i质粒,分别转染至A549细胞,新霉素抗性筛选得到Tw ist表达受抑制的阳性RNA i细胞(P i组)和Tw ist表达未受影响的阴性RNA i细胞(N i组)。针对正常(C组)、P i、N i三组A549细胞,分别采用RT-PCR和W estern b lot技术检测Tw is、tα-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙粘素表达,用Boyden小室模型检测细胞体外侵袭能力。结果:C组:Tw ist和α-SMA表达强阳性,E钙-粘素表达弱阳性,Boyden小室穿膜细胞数为57.4±3.4;P i组:和C组相比,Tw ist和α-SMA表达显著减弱(P<0.01),E钙-粘素表达显著增强(P<0.01),Boyden小室穿膜细胞数显著减少(P<0.01);N i组:Tw is、tα-SMA和E-钙粘素表达,及Boyden小室穿膜细胞数皆和C组无显著差异(P>0.05)。结论:针对Tw ist的shRNA能有效地抑制A549细胞上皮-间充质转分化及体外侵袭能力。 展开更多

关键词 TWIST RNA干扰 上皮-间充质转分化 培养的细胞 侵袭

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Layilin的RNAi对透明质酸诱导人肺腺癌A549细胞体外增殖的影响 被引量：2

9

作者 卓文磊 王彦 陈正堂 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期990-993,共4页

目的：研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术抑制透明质酸受体layilin表达,对透明质酸(hyaluronan,HA)诱导人肺腺癌A549细胞体外增殖的影响。方法：构建能表达针对layilin的短发夹RNA(shRNA)的阳性RNA干扰(posi- tive RNAi,Pi)质粒... 目的：研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术抑制透明质酸受体layilin表达,对透明质酸(hyaluronan,HA)诱导人肺腺癌A549细胞体外增殖的影响。方法：构建能表达针对layilin的短发夹RNA(shRNA)的阳性RNA干扰(posi- tive RNAi,Pi)质粒和表达不针对任何已知mRNA的shRNA的阴性RNAi(negative RNAi,Ni)质粒,分别转染至A549细胞,以RT-PCR和Western blot检测A549细胞转染前后layilin表达,并用新霉素抗性筛选得到layilin表达受抑制的阳性RNAi(Pi)细胞和layilin表达未受影响的阴性RNAi(Ni)细胞。分别在存在或不存在外源性透明质酸的培养条件下,以MTT实验和软琼脂细胞集落形成实验比较正常(control,C)、Pi、Ni组细胞体外增殖能力。结果：在不存在外源性透明质酸的培养条件下,C、Pi、Ni组A549细胞体外增殖能力无显著差异(P＞0．05),在存在外源性透明质酸的培养条件下,Pi和C组相比,体外增殖能力显著降低(P＜0．01),Ni和C组相比,体外增殖能力无显著差异(P＞0．05)。结论：抑制layilin表达能抑制透明质酸诱导人肺腺癌A549细胞体外增殖。 展开更多

关键词 肺肿瘤 腺癌 RNA干扰 透明质酸 Layilin A549细胞

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反义寡核苷酸抑制TGFβ_1诱导人肾小管上皮细胞表达CTGF 被引量：7

10

作者 卓文磊 张璟 《重庆医学》 CAS CSCD 2004年第5期732-734,共3页

目的　研究结缔组织生长因子 (connectivetissuegrowthfactor,CTGF)的反义寡核苷酸 (antisenseoligonucleotide,AS)转染人肾小管上皮细胞 (humanrenaltubularepithelialcells,HKC)后对转化生长因子 β1 (TGFβ1 )诱导CTGF表达的抑制作... 目的　研究结缔组织生长因子 (connectivetissuegrowthfactor,CTGF)的反义寡核苷酸 (antisenseoligonucleotide,AS)转染人肾小管上皮细胞 (humanrenaltubularepithelialcells,HKC)后对转化生长因子 β1 (TGFβ1 )诱导CTGF表达的抑制作用。方法　采用脂质体转染试剂DOTAP ,包裹针对CTGF的反义寡核苷酸转染HKC。用MTT比色法检测DOTAP对细胞增殖的影响 ,用荧光显微镜和荧光分光光度计检测 5′异硫氰酸荧光素 (5′FITC)标记的AS在细胞内的分布 ,用RT PCR和免疫组化分别检测TGFβ1 和AS对CTGFmRNA和蛋白表达的影响。结果　MTT比色 :不同浓度 (0、3.3、6 .7、1 0 μl/ml)的DOTAP对细胞增殖的影响无明显差异 (P >0 .0 5 )。荧光检测 :DOTAP能高效地介导AS转染入HKC。RT PCR和免疫组化 :浓度为 4 0 μg/ml的TGFβ1 能诱导HKC表达CTGFmRNA和蛋白 ,同时加入DOTAP AS复合物后 (DOTAP浓度为 6 .7μl/ml,AS浓度为 1 μg/ml) ,CTGFmRNA和蛋白的表达明显下降 (P <0 .0 1 )。结论　DOTAP能高效低毒地把CTGF反义寡核苷酸转染入HKC ,进而能有效地封闭TGFβ1 展开更多

关键词 脂质体 结缔组织生长因子 反义寡核苷酸

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转化生长因子β_1诱导人肾小管上皮细胞表达结缔组织生长因子 被引量：1

11

作者 卓文磊 张璟 +2 位作者 杨惠标 王彦 黄云剑 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第19期1717-1719,共3页

目的　研究转化生长因子 β1(transforminggrowthfactorβ1,TGFβ1)对人肾小管上皮细胞 (humanproximaltubularep ithelialcells ,HTECs)表达结缔组织生长因子 (connectivetissuegrowthfactor ,CTGF)的影响。方法　体外培养的HTEC被根... 目的　研究转化生长因子 β1(transforminggrowthfactorβ1,TGFβ1)对人肾小管上皮细胞 (humanproximaltubularep ithelialcells ,HTECs)表达结缔组织生长因子 (connectivetissuegrowthfactor ,CTGF)的影响。方法　体外培养的HTEC被根据随机数字表分为 3组 :对照组 (C组 ) :无血清培养基 (freeserummedium ,FSM)培养 ;TGFβ1a和TGFβ1b组 (Ta 组和Tb 组 ) :分别用含不同浓度TGFβ1(Ta 组 :2 0ng/ml,Tb 组 :40ng/ml)的FSM培养 ,96h后 ,分别用RT PCR和免疫组化方法检测HTEC表达CT GFmRNA和蛋白。结果　①C组 :CTGFmRNA和蛋白表达为阴性 ;②Tb 组和Ta 组 :CTGFmRNA和蛋白表达皆呈阳性。Tb 组和Ta 组相比 ,CTGF的mRNA和蛋白表达量皆显著增加 (P <0 .0 1)。结论　TGFβ1能呈剂量依赖性地诱导HTEC合成CTGF。 展开更多

关键词 TGFΒ1 结缔组织生长因子 转化生长因子β1 蛋白表达 肾小管上皮细胞 RNA CTGF 无血清培养基 体外培养 RT-PCR

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透明质酸诱导人肺腺癌A549细胞表达血管内皮生长因子-C 被引量：2

12

作者 卓文磊 王彦 +1 位作者 陈正堂 敖绪军 《医学研究生学报》 CAS 2007年第2期128-131,I0004,共5页

目的:研究透明质酸(HA)对体外培养的人肺腺癌A549细胞表达血管内皮生长因子-C(VEGF-C)的影响。方法:体外培养的A549细胞被随机分为三组,对照组:无血清培养基(FSM)培养;HA 10μg/ml组和HA 20μg/ml组:分别用HA 10μg/ml和20μg/ml的FSM培... 目的:研究透明质酸(HA)对体外培养的人肺腺癌A549细胞表达血管内皮生长因子-C(VEGF-C)的影响。方法:体外培养的A549细胞被随机分为三组,对照组:无血清培养基(FSM)培养;HA 10μg/ml组和HA 20μg/ml组:分别用HA 10μg/ml和20μg/ml的FSM培养,48h后,分别用RT-PCR、Western blot和免疫荧光方法检测A549细胞VEGF-C mRNA和蛋白表达。结果:对照组VEGF-C mRNA和蛋白表达为弱阳性;HA 10μg/ml和HA 20μg/m组lVEGF-C mRNA和蛋白表达皆呈强阳性。HA 20μg/ml组与HA 10μg/ml组相比,VEGF-C mRNA和蛋白表达皆显著增加(P<0.01)。结论:HA能呈剂量依赖性地诱导A549细胞表达VEGF-C。 展开更多

关键词 透明质酸 肺腺癌 血管内皮生长因子-C A549细胞

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循证医学思想在医学进修生带教中的应用 被引量：4

13

作者 卓文磊 朱波 +3 位作者 谢启超 李启明 李德志 陈正堂 《临床合理用药杂志》 2009年第7期7-7,共1页

关键词 循证医学 医学教育 应用

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透明质酸促进人肺腺癌A549细胞体外增殖、黏附和侵袭 被引量：1

14

作者 卓文磊 陈正堂 王彦 《重庆医学》 CAS CSCD 2006年第9期811-812,814,共3页

目的研究透明质酸(hyaluronan,HA)对体外培养的人肺腺癌A549细胞增殖、黏附和侵袭能力的影响。方法体外培养的A549细胞被随机分为3组:对照组(C组):无血清培养基(free serum medium,FSM)培养;HA1和HA2组:分别用含不同浓度HA(HA1组:10μg/... 目的研究透明质酸(hyaluronan,HA)对体外培养的人肺腺癌A549细胞增殖、黏附和侵袭能力的影响。方法体外培养的A549细胞被随机分为3组:对照组(C组):无血清培养基(free serum medium,FSM)培养;HA1和HA2组:分别用含不同浓度HA(HA1组:10μg/ml,HA2组:20μg/ml)的FSM培养,一段时间后,以MTT实验和软琼脂细胞集落形成实验比较A549细胞增殖能力,用平板黏附模型和Boyden小室模型比较A549细胞黏附侵袭能力。结果和C组相比,HA1和HA2组细胞增殖数量、软琼脂细胞集落、黏附于平板和穿过Boyden小室隔膜的细胞数皆显著增加,差异有统计学意义(P<0.01)(呈剂量依赖)。结论HA能呈剂量依赖性地增强A549细胞体外增殖、黏附和侵袭能力。 展开更多

关键词 透明质酸 增殖 黏附 侵袭 A549细胞 肺腺癌

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循证医学在肿瘤科教学查房中的应用 被引量：4

15

作者 卓文磊 朱波 +2 位作者 谢启超 李启明 陈正堂 《临床医学工程》 2009年第6期101-101,共1页

循证医学对当今临床实践产生了重大影响,在肿瘤科教学查房过程中,应用循证医学的原则,以指导查房前、查房中、查房后的工作,能有效地增强教学查房的效果,并提高上下级医师的临床水平。

关键词 循证医学 肿瘤学 医学教育

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透明质酸对人结肠癌细胞SW480增殖、粘附和侵袭能力的影响 被引量：1

16

作者 卓文磊 王彦 陈正堂 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2007年第1期26-28,共3页

背景与目的:透明质酸广泛存在于结肠癌间质中,本研究旨在探讨透明质酸(hyaluronan,HA)对体外培养的人结肠癌SW480细胞增殖、粘附和侵袭能力的影响。材料与方法:体外培养的SW480细胞被随机分为3组:对照组(无血清培养基培养)、HA1(HA为10... 背景与目的:透明质酸广泛存在于结肠癌间质中,本研究旨在探讨透明质酸(hyaluronan,HA)对体外培养的人结肠癌SW480细胞增殖、粘附和侵袭能力的影响。材料与方法:体外培养的SW480细胞被随机分为3组:对照组(无血清培养基培养)、HA1(HA为10μg/ml)和HA2(HA为20μg/ml)组,经培养不同时间后,以MTT实验和软琼脂细胞集落形成实验(softagarcloneformationassay)比较SW480细胞增殖能力,用平板粘附模型和Boydenchamber小室模型比较SW480细胞粘附和侵袭能力。结果:HA1和HA2组与对照组相比,细胞增殖数量、软琼脂细胞集落、粘附于平板和穿过Boydenchamber隔膜的细胞数皆显著增加(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论:HA能增强SW480细胞体外增殖、粘附和侵袭能力。 展开更多

关键词 透明质酸 增殖 粘附 侵袭 SW480细胞

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缺氧/放射活化Epo/e9增强子调控Layilin siRNA表达以抑制人肺腺癌A549细胞侵袭的研究 被引量：1

17

作者 卓文磊 陶光利 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期846-851,共6页

背景与目的:Layilin是一种新发现与肺腺癌侵袭转移有密切联系的特异性透明质酸受体。本研究旨在观察缺氧/放射条件下活化缺氧/放射双敏感性增强子(Epo/e9),调控针对layilin的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)表达,探讨其对人肺腺... 背景与目的:Layilin是一种新发现与肺腺癌侵袭转移有密切联系的特异性透明质酸受体。本研究旨在观察缺氧/放射条件下活化缺氧/放射双敏感性增强子(Epo/e9),调控针对layilin的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)表达,探讨其对人肺腺癌A549细胞受透明质酸诱导侵袭的影响。方法:构建携带Epo/e9增强子和U6启动子且表达针对layilin的siRNA的RNA干扰载体(Epoo/e9-siLay plasmid)和阴性对照RNA干扰载体(Epo/e9-siCtrl plasmid),分别转染A549细胞,新霉素抗性筛选得到layilin表达受抑制的A549_(Epo/e9-siLay)细胞和layilin表达未受影响的A549_(Epo/e9-siCtrl)细胞。针对非转染A549(A549_(untransfected))、A549_(Epo/e9siLay)、A549_(Epo/e9-siCtrl)三组细胞,在缺氧/放射处理下,分别采用RT-PCR和和Western blot检测layilin mRNA和和蛋白表达,用Transwell模型检测细胞侵袭能力。结果:与A549_(untransfected)组相比,A549_(Epo/e9-siLay)组layilin表达显著减弱(P<0.01),Transwell穿膜细胞数显著减少(P<0.01);A549_(Epo/e9-siCtrl)组layilin表达、Transwell穿膜细胞数皆和A549_(untransfected)组无显著差异(P>0.05)。缺氧/放射处理能进一步增加和RNA干扰的上述效应(P<0.01)。结论:在缺氧/放射条件下,Epo/e9增强子调控layilin siRNA表达能明显抑制A549细胞侵袭行为。 展开更多

关键词 Epo/e9增强子 layilin RNA干扰 侵袭 A549细胞

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结缔组织生长因子和糖尿病肾病 被引量：1

18

作者 卓文磊 张璟 《重庆医学》 CAS CSCD 2004年第1期121-124,共4页

关键词 结缔组织生长因子 糖尿病肾病 肾纤维化

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应用循证医学思想指导学生的临床见习 被引量：2

19

作者 卓文磊 王彦 《实用预防医学》 CAS 2006年第2期457-458,共2页

循证医学作为20世纪90年代引入临床医学领域的新概念,不仅对医生的临床实践活动产生了影响,对医学教育模式也有着深远的影响。临床见习是医学生临床教育的重要组成部分,同样应该积极地引入循证医学的原则和方法,以指导学生的临床见习。

关键词 循证医学 临床见习

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血管生成拟态和肿瘤的关系 被引量：1

20

作者 卓文磊 陈正堂 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期386-388,共3页

血管生成拟态指由恶性肿瘤细胞而非血管内皮细胞连接形成的、能为肿瘤提供血供的管网状结构,存在于恶性黑素瘤、卵巢癌、前列腺癌、炎性乳腺癌和某些软组织肉瘤。其发生和肿瘤细胞呈现出多潜能的胚胎样表型有关。进一步研究血管生成拟... 血管生成拟态指由恶性肿瘤细胞而非血管内皮细胞连接形成的、能为肿瘤提供血供的管网状结构,存在于恶性黑素瘤、卵巢癌、前列腺癌、炎性乳腺癌和某些软组织肉瘤。其发生和肿瘤细胞呈现出多潜能的胚胎样表型有关。进一步研究血管生成拟态的分子机制,探索有效的拮抗其过程的方案,有可能提供一种能有效治疗肿瘤、并且对正常生理过程的影响较小的策略。 展开更多

关键词 肿瘤 血管生成 血管生成拟态

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