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后PD-1/PD-L1抑制剂时代肿瘤治疗展望
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作者 单保恩 《肿瘤防治研究》 CAS 2023年第9期833-841,共9页
免疫检查点抑制剂能够重启并维持肿瘤-免疫循环,使抗肿瘤免疫反应正常化。目前,以抗PD-1/PD-L1单抗为代表的免疫检查点抑制剂已显著改善多种恶性肿瘤患者的预后,是免疫治疗的新里程碑。然而,单独使用抗PD-1/PD-L1单抗有效率低,与手术、... 免疫检查点抑制剂能够重启并维持肿瘤-免疫循环,使抗肿瘤免疫反应正常化。目前,以抗PD-1/PD-L1单抗为代表的免疫检查点抑制剂已显著改善多种恶性肿瘤患者的预后,是免疫治疗的新里程碑。然而,单独使用抗PD-1/PD-L1单抗有效率低,与手术、化疗、放疗和靶向治疗等传统治疗手段的联合应用展现出巨大潜力,且新的免疫检查点抑制剂单药或联合使用也在研究中,从而进入后抗PD-1/PD-L1单抗时代。然而,联合方式和生物标志物的筛选仍然是关注的焦点。本文就免疫检查点抑制剂治疗现状作简要综述并对后抗PD-1/PD-L1单抗时代进行展望。 展开更多
关键词 肿瘤免疫治疗 免疫检查点抑制剂 PD-1/PD-L1抗体
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幽门螺旋杆菌疫苗研发研究进展
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作者 张颖 李可心 +4 位作者 毕艳娜 李晓亚 单保恩 胡代伦 赵连梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期564-570,共7页
幽门螺杆菌(Hp)是引起胃溃疡、十二指肠溃疡、胃癌等消化道疾病的主要致病菌,已经被世界卫生组织(WHO)列为Ⅰ类致癌因子。目前临床上主要使用抗生素和质子泵抑制剂联合治疗Hp,但随着Hp耐药性的逐年增加,Hp疫苗可能成为根除Hp的最终解决... 幽门螺杆菌(Hp)是引起胃溃疡、十二指肠溃疡、胃癌等消化道疾病的主要致病菌,已经被世界卫生组织(WHO)列为Ⅰ类致癌因子。目前临床上主要使用抗生素和质子泵抑制剂联合治疗Hp,但随着Hp耐药性的逐年增加,Hp疫苗可能成为根除Hp的最终解决办法。尿素酶、毒力因子、外膜蛋白和鞭毛等成分在Hp感染、定殖和繁殖过程中发挥重要的作用,也成为Hp疫苗开发中潜在的候选抗原,以这些抗原为基础设计的疫苗在动物模型上取得了阶段性研究成果。我们总结了Hp疫苗的研究现状,以期为相关研究提供参考。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌(Hp) 尿素酶 毒力因子 鞭毛 外膜蛋白 疫苗 综述
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白花蛇舌草的免疫学调节活性和抗肿瘤活性 被引量:183
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作者 单保恩 张金艳 +4 位作者 杜肖娜 李巧霞 山下优毅 吉田安宏 杉浦勉 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期370-374,共5页
目的 :研究白花蛇舌草的免疫学调节活性和抗肿瘤活性。方法 :用3H介入法分析了白花蛇舌草提取物 (Oldenlandiadiffusaextract,ODE)对小鼠脾细胞的增殖活性 ;用51Cr游离实验测定了小鼠和人杀伤细胞对肿瘤细胞的特异性杀伤活性 ,用ELISA... 目的 :研究白花蛇舌草的免疫学调节活性和抗肿瘤活性。方法 :用3H介入法分析了白花蛇舌草提取物 (Oldenlandiadiffusaextract,ODE)对小鼠脾细胞的增殖活性 ;用51Cr游离实验测定了小鼠和人杀伤细胞对肿瘤细胞的特异性杀伤活性 ,用ELISA法和生物法研究了B细胞抗体的产生以及单核细胞的细胞因子产生 ,并用3H介入法分析了单核细胞对肿瘤细胞的吞噬功能 ;用层析法、蛋白酶消化法和糖分解处理(即NaIO4 处理 )分析了白花蛇舌草的化学成分。结果 :ODE对小鼠脾细胞的增殖活性有很强的促进作用 ;ODE增强小鼠和人杀伤细胞对肿瘤细胞的特异性杀伤活性 ,增强B细胞抗体的产生以及单核细胞的细胞因子产生 ,并增强单核细胞对肿瘤细胞的吞噬功能。白花蛇舌草的化学成分为 90道尔顿的糖蛋白。结论 :ODE对小鼠和人有免疫调节作用 ,并通过刺激机体的免疫系统杀伤或吞噬肿瘤细胞 ,这些活性可应用于临床调节免疫功能和治疗肿瘤等疾病。 展开更多
关键词 白花蛇舌草 T细胞 B细胞 单核细胞 抗肿瘤活性 免疫调节
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白附子对人T细胞和单核细胞的调节活性 被引量:33
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作者 单保恩 张金艳 +6 位作者 李巧霞 乔芳 李宏 叶静 杜肖娜 山下优毅 黑田悦史 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第10期768-772,共5页
目的 :研究中药白附子的免疫学调节活性。方法 :用3H介入法测定了中药白附子提取物(Rhizomatyphoniiextract,RTE)对小鼠脾细胞和人淋巴细胞的增殖活性 ;用绵羊红细胞花结形成试验分离纯化淋巴细胞后 ,检测了RTE的效应细胞 ;用51Cr游离... 目的 :研究中药白附子的免疫学调节活性。方法 :用3H介入法测定了中药白附子提取物(Rhizomatyphoniiextract,RTE)对小鼠脾细胞和人淋巴细胞的增殖活性 ;用绵羊红细胞花结形成试验分离纯化淋巴细胞后 ,检测了RTE的效应细胞 ;用51Cr游离实验测定了人杀伤细胞和自然杀伤细胞的杀伤活性 ,用ELISA法和生物法研究了单核细胞的细胞因子产生 ,并用3H介入法分析了单核细胞对肿瘤细胞的吞噬功能 ;用层析法分析了白附子的化学成分 ,并用SDS PAGE法测定了其有效成分的分子量。结果 :RTE对小鼠脾细胞和人淋巴细胞的增殖活性有很强的促进作用 ,并有较好的量效关系 ;RTE的效应细胞是T细胞 ;RTE增强人杀伤细胞对肿瘤细胞的特异性杀伤活性和自然杀伤细胞的非特异性杀伤活性、增强单核细胞的细胞因子 (肿瘤坏死因子和白细胞介素 1)产生 ,并增强单核细胞对肿瘤细胞的吞噬功能。白附子的化学成分为 66道尔顿的糖蛋白。结论 :RTE对人的T细胞和单核细胞有免疫增强作用 ,并通过刺激机体的免疫系统杀伤或吞噬肿瘤细胞和外来抗原 ,这些活性可应用于临床调节免疫功能和治疗肿瘤等疾病。 展开更多
关键词 白附子 T细胞 单核细胞 抗肿瘤活性 糖蛋白
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中药五加皮提取成分抗肿瘤活性作用机理研究 被引量:15
5
作者 单保恩 付小梅 +5 位作者 华正祥 李巧霞 梁文杰 刘冀琴 张华 刘刚叁 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期825-828,共4页
目的研究五加皮提取成分(Acanthopanaxgracilistylusextract,Age)对肿瘤细胞的作用机理。方法采用〔3H〕TdR掺入法测定肿瘤细胞增殖反应;用流式细胞技术分析Age对肿瘤细胞周期的影响;用蛋白印迹技术检测Age对肿瘤细胞Rb(retinoblastoma)... 目的研究五加皮提取成分(Acanthopanaxgracilistylusextract,Age)对肿瘤细胞的作用机理。方法采用〔3H〕TdR掺入法测定肿瘤细胞增殖反应;用流式细胞技术分析Age对肿瘤细胞周期的影响;用蛋白印迹技术检测Age对肿瘤细胞Rb(retinoblastoma)、Cdk(cyclindependentkinases)等酶类的影响。结果体外细胞活力试验证明,Age仅抑制肿瘤细胞增殖,并不导致细胞死亡。在Age的作用下,肿瘤细胞增殖停止在细胞周期的G0/G1期,而未见直接的细胞毒效应。Age可诱导Rb、Cdk2和Cdk4表达降低,使细胞停止增殖。结论Age对肿瘤细胞的作用机制是通过调节控制细胞周期的酶类而发挥作用的。 展开更多
关键词 五加皮提取成分 细胞周期 RB CDK 抗肿瘤机制 机理研究 提取成分 抗肿瘤 五加皮 活性作用
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中药五加皮抗肿瘤作用体内外实验研究 被引量:24
6
作者 单保恩 李巧霞 +4 位作者 梁文杰 许红 刘冀琴 张华 刘刚叁 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期55-58,共4页
目的 :分离中药五加皮抗肿瘤活性物质 ,研究五加皮提取物在体内外的抗肿瘤细胞作用 ,为五加皮抗肿瘤新药开发、研制提供依据。经皮下注射肿瘤细胞建立荷瘤小鼠动物模型 ,通过灌胃给药检测五加皮提取物的体内抗肿瘤作用。方法 :用3H TdR... 目的 :分离中药五加皮抗肿瘤活性物质 ,研究五加皮提取物在体内外的抗肿瘤细胞作用 ,为五加皮抗肿瘤新药开发、研制提供依据。经皮下注射肿瘤细胞建立荷瘤小鼠动物模型 ,通过灌胃给药检测五加皮提取物的体内抗肿瘤作用。方法 :用3H TdR掺入法测定了肿瘤细胞增殖反应 ;用凝胶层析法初步分离、纯化了五加皮抗肿瘤成分。结果 :五加皮提取物对多种组织来源的肿瘤细胞增殖有较强的抑制作用 (P <0 0 1) ,而且有较好的量效关系。五加皮提取物经口投入荷瘤小鼠后 ,实验组小鼠一般情况较对照组小鼠好 ,肿瘤生长较慢 ,生存期明显延长 (P <0 0 1)。经凝胶层析分析 ,分离得到一种对肿瘤细胞增殖反应有抑制作用的蛋白质成分 ,分子量为 6 4kda。结论 :中药五加皮不仅在体外对多种肿瘤细胞增殖有抑制作用 ,在体内也有较好的抗肿瘤效果。其抗肿瘤活性与一种分子量为 6 4kda的蛋白质成分有关 ,该成分的进一步分离、纯化和作用机理研究 ,对五加皮抗肿瘤作用的临床应用和新药开发提供科学依据。 展开更多
关键词 中药 五加皮 抗肿瘤作用 实验研究 药理
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香加皮水提取物诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡及其作用机制 被引量:22
7
作者 单保恩 李俊新 张静 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1184-1188,共5页
目的研究香加皮水提取物(CPE)诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡及其作用机制。方法采用G iem sa染色观察细胞凋亡形态学变化;电子显微镜观察凋亡细胞的超微结构变化;流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳方法检测BGC-823细胞凋亡率、细胞周期和细胞凋亡... 目的研究香加皮水提取物(CPE)诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡及其作用机制。方法采用G iem sa染色观察细胞凋亡形态学变化;电子显微镜观察凋亡细胞的超微结构变化;流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳方法检测BGC-823细胞凋亡率、细胞周期和细胞凋亡的DNA水平变化;RT-PCR方法检测细胞凋亡相关基因bcl-2、bax和surv iv in mRNA表达水平变化;免疫细胞化学方法检测bcl-2、bax和surv iv in蛋白表达的变化。结果经CPE作用后,人胃癌细胞BGC-823出现明显的细胞凋亡形态学变化及超微结构改变,细胞DNA琼脂糖凝胶电泳呈现梯形图。经250μg/mL CPE处理48 h后,多数BGC-823细胞被阻滞在G2/M期,而且细胞发生明显的凋亡变化,BGC-823细胞凋亡率可达18.9%。CPE可抑制BGC-823细胞bcl和surv iv in mRNA及蛋白的表达,促进baxmRNA及蛋白的表达。CPE可明显延长S180荷瘤小鼠生存期,且具有剂量依赖性。结论CPE通过阻滞BGC-823细胞于G2/M期及诱导BGC-823细胞凋亡发挥抗肿瘤作用,其作用机制与抑制细胞的bcl-2和surv iv in基因mRNA及蛋白表达、促进bax基因和蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 香加皮 人胃癌细胞BGC-823 bcl-2 BAX SURVIVIN GIEMSA染色 细胞凋亡
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五加皮抗肿瘤活性物质Age对单核细胞产生TNF-α和IL-12的影响 被引量:10
8
作者 单保恩 段建萍 +5 位作者 张丽华 梁文杰 李巧霞 刘冀琴 张华 刘刚叁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期490-493,共4页
目的 :研究五加皮抗肿瘤成分Age对单核细胞功能的影响 ,揭示Age抗肿瘤机制。方法 :使用对TNF敏感的L92 9细胞采用生物法测定了TNF含量 ,用ELISA法测定了IL 12的含量。用RT PCR法分析了单核细胞的细胞因子mRNA表达。用同位素法分析了Age... 目的 :研究五加皮抗肿瘤成分Age对单核细胞功能的影响 ,揭示Age抗肿瘤机制。方法 :使用对TNF敏感的L92 9细胞采用生物法测定了TNF含量 ,用ELISA法测定了IL 12的含量。用RT PCR法分析了单核细胞的细胞因子mRNA表达。用同位素法分析了Age对单核细胞吞噬功能的作用。结果 :Age与单核细胞共同培养后 ,单核细胞TNF α、IL 12等细胞因子的产生明显增加 (P <0 0 1) ,而且有较好的量效关系。在单核细胞与LPS的培养液中加入不同浓度的Age ,经培养后与单独加入LPS相比TNF α分泌的量显著增加 ,显示了Age对LPS的单核细胞刺激有相加作用。经Age处理后 ,单核细胞的TNF α、IL 12等细胞因子的mRNA表达也明显增强。体内实验结果也显示 ,Age对单核细胞的细胞因子产生有一定的影响。荷瘤小鼠经口连续投入Age后 ,血清中和脾脏分离的单核细胞体外培养上清中TNF α和IL 12含量明显提高 ,单核细胞TNF α、IL 12mR NA表达也明显增强 (P <0 0 1) ,从蛋白水平和分子水平证明了Age对单核细胞的细胞因子产生有促进作用。结论 :中药五加皮抗肿瘤有效成分Age对单核细胞有较强的刺激作用。通过促进其细胞因子的分泌和吞噬功能的增强杀伤肿瘤或抵抗肿瘤发生 ,所分泌的细胞因子还可通过调节免疫功能达到治疗肿瘤作用。该结果对五加皮? 展开更多
关键词 五加皮 抗肿瘤活性物质 Age 单核细胞 TNF-Α IL-12
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香加皮羽扇豆烷乙酸酯对人外周血淋巴细胞免疫调节功能的影响 被引量:10
9
作者 单保恩 赵连梅 +3 位作者 艾军 何兰欣 陈书红 丁春艳 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1035-1039,共5页
目的研究香加皮中提取的羽扇豆烷乙酸酯(CPLA)对正常人外周血淋巴细胞和吞噬细胞免疫调节功能的影响。方法无菌分离人外周血淋巴细胞和巨噬细胞,加入PHA和不同质量浓度的CPLA,MTT法检测其对淋巴细胞增殖及巨噬细胞对食管癌细胞株ECA-10... 目的研究香加皮中提取的羽扇豆烷乙酸酯(CPLA)对正常人外周血淋巴细胞和吞噬细胞免疫调节功能的影响。方法无菌分离人外周血淋巴细胞和巨噬细胞,加入PHA和不同质量浓度的CPLA,MTT法检测其对淋巴细胞增殖及巨噬细胞对食管癌细胞株ECA-109生长的影响;RT-PCR法检测CPLA对γ-干扰素(INF-γ)mRNA表达的影响;ELISA法检测CPLA作用后淋巴细胞和巨噬细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)等细胞因子分泌的变化。结果5~40μg/mLCPLA能明显增强PHA活化的人外周血淋巴细胞的增殖(P<0.01);20、40μg/mL的CPLA能使淋巴细胞IFN-γ mRNA的表达水平明显升高(P<0.01);用CPLA处理后的巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤功能明显增强(P<0.01),并证实了该作用可能与CPLA促进巨噬细胞分泌TNF-α增多有关;CPLA能促进淋巴细胞产生IL-2和TNF-α,并呈现浓度依赖性(P<0.01)。结论CPLA能增强人外周血淋巴细胞和巨噬细胞的免疫功能,发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 CPLA 外周血 淋巴细胞 增殖 抗肿瘤免疫
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淫羊藿苷促进脐血来源树突状细胞的分化与成熟 被引量:8
10
作者 单保恩 潘晓明 +3 位作者 赵连梅 刘丽华 王欣荣 张超 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期325-330,共6页
目的:研究淫羊藿苷(icariin,ICA)体外对脐血单个核细胞来源树突状细胞的分化、成熟及免疫活性的影响。方法:无菌条件下采集脐血,密度梯度离心法分离脐血单个核细胞,用GM-CSF、IL-4诱导树突状细胞(dendritic cells,DCs),第5天后将DCs分为... 目的:研究淫羊藿苷(icariin,ICA)体外对脐血单个核细胞来源树突状细胞的分化、成熟及免疫活性的影响。方法:无菌条件下采集脐血,密度梯度离心法分离脐血单个核细胞,用GM-CSF、IL-4诱导树突状细胞(dendritic cells,DCs),第5天后将DCs分为3组(ICA组、TNF-α组和阴性对照组)并作相应处理。倒置显微镜和透射电镜下观察DCs形态,流式细胞术检测DCs表面分子CD1a、CD80、CD83和CD86的表达情况,ELISA法检测DCs培养上清中IL-12和IFN-γ的水平,MTT法检测DCs刺激T细胞增殖的能力。结果:ICA刺激后,脐血单个核细胞来源DCs呈现典型的成熟DCs形态学特征。ICA组DCs表面CD1a、CD80、CD83和CD86表达水平较对照组均明显上调(P<0.05),且CD86的表达水平显著高于TNF-α组(P<0.05)。ICA组DCs上清中IL-12、IFN-γ的水平及诱导T细胞增殖的能力较对照组DCs明显增高(P<0.05),但与TNF-α组DCs无显著差异。结论:ICA可刺激脐血单个核细胞来源DCs的分化和成熟,增强DCs的免疫学活性。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 树突状细胞 脐血 免疫活性
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血管内皮生长因子在食管癌组织中的表达及其临床意义研究 被引量:12
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作者 单保恩 潘立峰 +1 位作者 李巧霞 王俊霞 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期644-647,共4页
目的探讨食管癌组织中VEGF的表达水平与食管癌生物学特性的关系。方法应用免疫组化法分析人食管癌组织中VEGF的表达和微血管密度;应用RT-PCR法检测食管癌组织及人食管癌细胞株VEGFmRNA的表达。结果食管癌组织的VEGF阳性表达率为70.9%,V... 目的探讨食管癌组织中VEGF的表达水平与食管癌生物学特性的关系。方法应用免疫组化法分析人食管癌组织中VEGF的表达和微血管密度;应用RT-PCR法检测食管癌组织及人食管癌细胞株VEGFmRNA的表达。结果食管癌组织的VEGF阳性表达率为70.9%,VEGF在肿瘤组织的表达水平明显高于癌旁组织,其表达水平与肿瘤的病理学分级、肿瘤的浸润深度及淋巴结转移等行为有关。食管癌组织中微血管分布不均,血管密集区主要集中在癌灶边缘;MVD与肿瘤的分化程度和淋巴结转移相关;MVD与VEGF的表达之间存在正相关关系。食管癌组织的VEGFmRNA表达比癌旁组织增高,以VEGF189、VEGF165和VEGF121三种亚型为主。结论VEGF在食管癌组织中呈高表达状态,该现象与肿瘤的恶性程度、转移情况及微血管形成能力相关。 展开更多
关键词 食管癌 血管内皮生长因子 微血管密度
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一种植物由来的糖蛋白(郑氏植物蛋白)——肿瘤相同性抗原的研究 被引量:5
12
作者 单保恩 郑振海 +5 位作者 张子杰 李宏 钟小伟 王永利 郑新文 王增林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期328-331,共4页
目的 :研究一种植物提取物的肿瘤相同抗原性及其在肿瘤早期诊断上的应用。方法 :采用3H掺入法测定了淋巴细胞和肿瘤细胞增殖反应 ;将人新鲜肿瘤组织块移植于小鼠 ,观察肿瘤在异种动物体内成活情况。瘤细胞DNA含量用流式细胞仪测定。通... 目的 :研究一种植物提取物的肿瘤相同抗原性及其在肿瘤早期诊断上的应用。方法 :采用3H掺入法测定了淋巴细胞和肿瘤细胞增殖反应 ;将人新鲜肿瘤组织块移植于小鼠 ,观察肿瘤在异种动物体内成活情况。瘤细胞DNA含量用流式细胞仪测定。通过凝胶层析及SDS PAGE等方法对该提取液进行了化学成分鉴定。结果 :该植物提取物对恶性肿瘤和癌前病变患者的淋巴细胞增殖有很强的刺激作用 (P <0 0 1) ,但对正常人淋巴细胞无刺激作用。提取物对 70 %以上肿瘤患者的肿瘤细胞增殖有刺激作用。将人新鲜肿瘤组织块移植到经该提取物预处理的幼鼠后 ,成活率达 90 %以上 ,而且可以成功传代 ;未经提取物预处理的小鼠 ,30天后肿瘤组织死亡而被吸收。经初步鉴定 ,该提取物的化学成分为 5 0kD的糖蛋白。结论 :该植物糖蛋白具有肿瘤抗原活性或肿瘤相同抗原性 ,这种特性可应用于肿瘤诊断、治疗和肿瘤疫苗制备等。 展开更多
关键词 糖蛋白 肿瘤相同性抗原 研究 植物糖蛋白 移植瘤
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中药五加皮抗肿瘤活性成分的分离 被引量:14
13
作者 单保恩 斯重阳 +4 位作者 张金忠 梁文杰 李巧霞 张华 刘刚叁 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2004年第4期203-205,222,共4页
背景与目的 :分离中药五加皮抗肿瘤活性成分 ,确定其分子量 ,为抗肿瘤新药开发研制提供依据。 材料与方法 :采用3H_TdR掺入法测定五加皮有效成分对肿瘤细胞增殖反应的影响 ;经凝胶层析进一步分离五加皮抗肿瘤成分 ;用SDS_PAGE电泳、二... 背景与目的 :分离中药五加皮抗肿瘤活性成分 ,确定其分子量 ,为抗肿瘤新药开发研制提供依据。 材料与方法 :采用3H_TdR掺入法测定五加皮有效成分对肿瘤细胞增殖反应的影响 ;经凝胶层析进一步分离五加皮抗肿瘤成分 ;用SDS_PAGE电泳、二次元电泳分离并确定其成分和分子量 ;经蛋白酶E和NaIO4 处理分析了有效成分的化学组成。结果 :经凝胶层析和SDS_PAGE电泳分析 ,我们从五加皮提取物(S200F2)中分离得到分子量约64kDa的单一成分 ,该成分对MT_2细胞增殖有抑制作用。经蛋白酶E和NaIO4 处理分析 ,该成分的抗肿瘤作用与蛋白质成分有关 ,与糖成分无关 ,说明该成分是蛋白质。经二次元电泳法分离后确认该成分是单一蛋白质。 结论 :以上结果提示 ,五加皮抗肿瘤活性是一种分子量约64kDa的单纯蛋白质成分 。 展开更多
关键词 五加皮 有效成分分离 抗肿瘤
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杠柳苷对人食管癌细胞增殖的抑制作用及与Rb蛋白表达的关系 被引量:9
14
作者 单保恩 赵连梅 +2 位作者 何兰欣 邸红琴 任凤芝 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2008年第5期342-345,共4页
背景与目的:分析中药香加皮醇提物杠柳苷(CPP)对食管癌细胞株TE-13的生长抑制作用,探讨其诱导细胞凋亡和周期阻滞与Rb蛋白表达的关系。材料与方法:取对数生长期的人食管癌细胞TE-13,接种于96孔培养板,分为实验组、阴性对照组和阳性对照... 背景与目的:分析中药香加皮醇提物杠柳苷(CPP)对食管癌细胞株TE-13的生长抑制作用,探讨其诱导细胞凋亡和周期阻滞与Rb蛋白表达的关系。材料与方法:取对数生长期的人食管癌细胞TE-13,接种于96孔培养板,分为实验组、阴性对照组和阳性对照组。实验组加入不同浓度的CPP,阴性对照孔加入完全培养基,阳性对照孔加入化疗药物羟甲基喜树碱,应用MTT法检测CPP对TE-13细胞的抑制作用;光镜下观察TE-13细胞的形态学变化;流式细胞技术检测细胞凋亡率;免疫组化法检测TE-13细胞经药物处理前后去磷酸化Rb蛋白表达的变化。结果:CPP对TE-13细胞增殖具有明显的抑制作用(P<0.01),其药物浓度越大,作用时间越长,抑制效应越强;CPP作用48 h时,对TE-13细胞的半数抑制浓度(IC50)为0.61μg/ml。出现亚二倍体和凋亡峰(Ap);CPP能提高TE-13细胞中Rb蛋白的表达(P<0.01)。结论:CPP能显著抑制TE-13细胞的增殖,促进其凋亡,其作用机制可能与CPP提高Rb蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 杠柳苷 食管癌 RB蛋白 香加皮
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北豆根抗肿瘤有效成分的分离、纯化和活性分析 被引量:8
15
作者 单保恩 任风枝 +3 位作者 梁文杰 张静 李巧霞 曾亚平 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2006年第3期175-179,共5页
背景与目的:提取、纯化和鉴定北豆根抗肿瘤有效成分,并对纯化的成分作进一步的活性研究。材料与方法:常规方法制备北豆根水提液(RMW)和醇提液(RME),对RME以3%HCl溶解、有机溶剂萃取和水相浓缩得到纯化提取物1、2、3(PE1、PE2、PE3)。用... 背景与目的:提取、纯化和鉴定北豆根抗肿瘤有效成分,并对纯化的成分作进一步的活性研究。材料与方法:常规方法制备北豆根水提液(RMW)和醇提液(RME),对RME以3%HCl溶解、有机溶剂萃取和水相浓缩得到纯化提取物1、2、3(PE1、PE2、PE3)。用MTT法测定各提取物的抑瘤活性。根据抑瘤实验结果,通过凝胶和硅胶柱层析将PE2进一步分离得到两个单体化合物PF1和PF2。提取RME后的北豆根药渣用水回流提取,去除蛋白和鞣酸,再经乙醇沉淀和冷冻干燥得到多糖成分(RMP)。有效成分采用薄层层析和改良碘化铋钾显色对其进行鉴定分析。用电喷雾质谱ESI-MS检测单体化合物PF1和PF2的分子量。用紫外分光光度计检测RMP的纯度。结果:RMW和RME对K562、BGC823及TE13三种肿瘤细胞的增殖反应均有明显的抑制作用(P<0.01),并有良好的量效及时效关系,RMP无此作用。进一步将RME应用3步法纯化得到PE1、PE2、PE3。PE1和PE2对上述3种细胞的增殖反应均有明显的抑制作用(提高了近10倍)(P<0.01),PE3无此抑制作用。有效成分分析结果显示,PE2主要含一系列生物碱成分。对PE2进一步分离得到两个化合物PF1和PF2,分子量分别为624和610。PF1和PF2对K562、BGC823及TE13细胞均有显著抑制作用(P<0.01),PF2的抑制作用更强,PF2可导致上述细胞的形态学改变,表现为细胞体积变小,形态不规则等。PF2对肿瘤组织原代培养细胞增殖反应有较强抑制作用(P<0.01)。结论:北豆根水提物和醇提物在体外均有很强的抗肿瘤作用,醇提物的作用高于水提物。PE2是醇提物抗肿瘤的有效部位,其化学成分为生物碱;PF1和PF2均是醇提物抗肿瘤的有效成分,可能为蝙蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱,PF2对肿瘤组织原代培养细胞也有较强的杀伤作用。北豆根多糖成分对K562等3种肿瘤细胞均无抑制作用。 展开更多
关键词 北豆根 抗肿瘤 有效成分 分离纯化
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北豆根提取物PE2成分的体内抗肿瘤作用及其免疫学调节机制研究 被引量:6
16
作者 单保恩 刘东青 +2 位作者 梁文杰 张静 李巧霞 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2006年第5期351-354,共4页
背景与目的探讨中药北豆根提取物的体内抗肿瘤作用和免疫学调节作用机制。材料与方法采用水提取、醇提取及水回流等方法对北豆根进行成分分离。采用四甲基偶氮唑蓝[3-(4,5-dimethy-2-thiazoly)-2,5-diphenyl-2-tetrazoliumbromide,MTT]... 背景与目的探讨中药北豆根提取物的体内抗肿瘤作用和免疫学调节作用机制。材料与方法采用水提取、醇提取及水回流等方法对北豆根进行成分分离。采用四甲基偶氮唑蓝[3-(4,5-dimethy-2-thiazoly)-2,5-diphenyl-2-tetrazoliumbromide,MTT]显色法分析北豆根提取物对肿瘤细胞和淋巴细胞增殖反应的作用。采用中性红法检测了北豆根提取物对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响。采用皮下接种肿瘤细胞建立荷瘤小鼠动物模型,采用北豆根提取物灌胃,观察北豆根提取物对小鼠的体内抗肿瘤作用和免疫调节作用。结果北豆根乙醇提取物(RME)比水提取物(RMW)具有更强的抑瘤活性,醇提取物中的PE2成分可能是北豆根的主要抗肿瘤活性部分。经北豆根提取物PE2灌胃后的荷瘤小鼠,与对照组荷瘤小鼠相比其胸腺指数、脾指数明显增加;腹腔巨噬细胞吞噬功能和细胞因子分泌功能增强;NK细胞活性增加;一般情况较对照组小鼠好;肿瘤生长缓慢而局限;生存期明显延长。结论PE2是北豆根抗肿瘤作用的主要有效部分,PE2体内也具有抗肿瘤作用,能通过增强荷瘤小鼠巨噬细胞的吞噬功能,增强NK细胞和小鼠脾细胞的活性,而发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 北豆根提取成分 抗肿瘤作用 免疫学调节作用 脾细胞 腹腔巨噬细胞
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中药香加皮与其易混品体外抑瘤效果研究 被引量:15
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作者 单保恩 李俊新 +2 位作者 张静 梁文杰 李宏芬 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2005年第5期265-268,共4页
背景与目的:比较中药香加皮及其易混品水提取物的体外抗肿瘤效果。材料与方法:采用四甲基偶氮唑蓝(3_[4,5_dimethylthiazol_2_yl]_2,5diphenyltetrazoliumbromide,MTT)法测定了中药香加皮及其易混品水提取物对多种不同组织来源的肿瘤细... 背景与目的:比较中药香加皮及其易混品水提取物的体外抗肿瘤效果。材料与方法:采用四甲基偶氮唑蓝(3_[4,5_dimethylthiazol_2_yl]_2,5diphenyltetrazoliumbromide,MTT)法测定了中药香加皮及其易混品水提取物对多种不同组织来源的肿瘤细胞增殖反应的影响。结果:香加皮水提取物对人红白血病细胞株K562,人胃癌细胞株BGC_823,人食管癌细胞株TE_13的增殖有明显的抑制作用,且量效关系明显;对实验组其它肿瘤细胞株也有较高抑制率。香加皮易混品水提取物对肿瘤细胞虽也有一定的抑制作用,但其强度明显弱于香加皮水提取物。结论:香加皮水提取物对不同组织来源的肿瘤细胞株有广泛的抑制作用,其抗肿瘤作用明显高于其易混品,香加皮作为抗肿瘤药物有待进一步开发。 展开更多
关键词 香加皮 抗肿瘤作用
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兔抗Syk抗体制备和在乳腺癌诊断中的应用 被引量:4
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作者 单保恩 董青 +3 位作者 王晓玲 陈兴 董金琢 马洪 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期486-488,共3页
目的 :制备兔抗小鼠脾酪氨酸激酶 (Syk)抗体 ,分析其在乳腺癌诊断中的价值。方法 :应用重组小鼠Syk蛋白 ,常规免疫雄性家兔制备抗Syk抗体。用免疫印迹法检测Syk抗体的纯度和特异性。应用免疫组化法 ,检测乳腺组织中Syk蛋白的表达。结果 ... 目的 :制备兔抗小鼠脾酪氨酸激酶 (Syk)抗体 ,分析其在乳腺癌诊断中的价值。方法 :应用重组小鼠Syk蛋白 ,常规免疫雄性家兔制备抗Syk抗体。用免疫印迹法检测Syk抗体的纯度和特异性。应用免疫组化法 ,检测乳腺组织中Syk蛋白的表达。结果 :用重组小鼠Syk蛋白免疫家兔 6wk后 ,静脉血中抗Syk抗体效价为 1∶6 4 0 0 (A450 =1.0 3)。将Syk经SDS PAGE分离 ,可见 1条相对分子质量 (Mr)为 72 0 0 0的蛋白条带 ,与理论值相符。用抗Syk血清做免疫印迹证实 ,在Mr 为 72 0 0 0处有 1条明显的带 ,证明是抗Syk特异性抗体。乳腺组织切片经抗Syk抗体免疫组化染色 ,在正常乳腺组织细胞胞浆中可见棕黄色颗粒 ,而浸润性乳腺导管癌组织的细胞浆不着色。结论 :制备了高效价、特异性的兔抗Syk抗体。用该抗体检测证实 ,Syk在正常乳腺组织细胞中呈高表达 ,在乳腺癌组织细胞中表达缺失。 展开更多
关键词 SYK 抗体 乳腺癌 诊断
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大鼠骨髓间充质干细胞对T细胞免疫活性的影响 被引量:3
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作者 单保恩 杨兴肖 +4 位作者 马鸣 刘丽华 艾军 赵连梅 张小芳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期409-413,共5页
目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stemcells,MSCs)对脾脏T细胞的免疫调节作用。方法:从大鼠骨髓中分离培养间充质干细胞,通过瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态,并用流式细胞术(Flowcytometry,FCM)检测其细胞表面特征分子表达情况... 目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stemcells,MSCs)对脾脏T细胞的免疫调节作用。方法:从大鼠骨髓中分离培养间充质干细胞,通过瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态,并用流式细胞术(Flowcytometry,FCM)检测其细胞表面特征分子表达情况。MTT法测定经刀豆蛋白A(ConA)刺激后,不同数量MSCs对T细胞增殖能力的影响;ELISA法检测MSCs对T细胞分泌IFN-γ和IL-4水平的影响。FCM检测MSCs对脾脏T细胞凋亡水平的影响。MTT法测定MSCs对细胞毒性T细胞(Cytotoxic Tcells,CTL)杀伤活性的影响。结果:经不同数量MSCs作用后,脾脏T细胞增殖水平明显低于阳性对照组(P<0.01),而且MSCs比例越高,其抑制作用越强(P<0.01)。经MSCs作用后,T细胞分泌IFN-γ的水平明显降低,而分泌IL-4的水平明显升高,且这种作用随MSCs比例的增加而增强(P<0.01)。MSCs能够抑制在体外培养过程中T细胞的自发凋亡。与MSCs共培养后,T细胞对L1210细胞的杀伤活性和单独培养组相比明显下降(P<0.05)。结论:MSCs能够抑制T细胞增殖反应和CTL活性,该作用可能与MSCs改变T细胞分泌细胞因子水平有关,但与诱导T细胞凋亡无关。 展开更多
关键词 大鼠 间充质干细胞 免疫调节 T细胞 细胞毒性T细胞
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昆布水提物对B-MD-C1(ADR^(+/+))细胞耐药性的逆转作用研究 被引量:6
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作者 单保恩 李巧敏 张静 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第22期1683-1685,共3页
目的研究中药昆布水提物(thalluslami-nariaePE,TLPE)对耐药细胞株B-MD-C1(ADR+/+)耐药性的逆转作用。方法应用MTT法测定TLPE逆转多柔比星对B-MD-C(ADR+/+)的细胞毒作用,应用流式细胞仪(FCM)检测TLPE对多柔比星在细胞内的相对浓度和P-g... 目的研究中药昆布水提物(thalluslami-nariaePE,TLPE)对耐药细胞株B-MD-C1(ADR+/+)耐药性的逆转作用。方法应用MTT法测定TLPE逆转多柔比星对B-MD-C(ADR+/+)的细胞毒作用,应用流式细胞仪(FCM)检测TLPE对多柔比星在细胞内的相对浓度和P-gp蛋白表达水平的影响。结果经TLPE作用后,多柔比星对B-MD-C1(ADR+/+)细胞的抑制率显著增高,P<0·01,明显提高了多柔比星进入并聚集于B-MD-C1(ADR+/+)细胞内的浓度,P<0·01;细胞的P-gp蛋白的表达明显降低,P<0·01;以上作用均与TLPE呈浓度依赖性。结论TLPE可提高多柔比星对耐药细胞的细胞毒作用,这种作用可能与抑制细胞P-gp的表达以及增加细胞内药物浓度有关。 展开更多
关键词 逆转 多药耐药性 昆布水提物 肿瘤细胞 中药疗法
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