达氏鲟生长激素基因cDNA克隆、表达及免疫荧光定位研究 被引量：10

1

作者 单喜双 岳华梅 +3 位作者 陈细华 叶欢 杨晓鸽 李创举 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期307-314,共8页

为研究达氏鲟(Acipenser dabryanus)生长激素(Growth Hormone,GH)基因的功能,合成了达氏鲟垂体SMART c DNA,克隆得到GH全长c DNA序列。达氏鲟GH全长c DNA序列为1008 bp,由52 bp的5′端非编码区(Untranslated region,UTR)、编码214个氨... 为研究达氏鲟(Acipenser dabryanus)生长激素(Growth Hormone,GH)基因的功能,合成了达氏鲟垂体SMART c DNA,克隆得到GH全长c DNA序列。达氏鲟GH全长c DNA序列为1008 bp,由52 bp的5′端非编码区(Untranslated region,UTR)、编码214个氨基酸的645 bp开放阅读框(Open reading frame,ORF)和311 bp的3′UTR构成。运用GH氨基酸序列构建进化树分析发现,达氏鲟与两栖类、爬行类和哺乳类的一致性要高于真骨鱼类。实时荧光定量PCR结果表明,达氏鲟GH m RNA主要在垂体和下丘脑中表达,且垂体中GH的表达量约为下丘脑的110倍;Western-blot研究结果与q RT-PCR一致,仅在垂体和下丘脑中检测到生长激素蛋白,且垂体中GH的表达量远高于下丘脑。免疫荧光定位结果显示,GH主要定位于垂体中部,下丘脑中也有少量荧光信号;苏木精-伊红组织切片染色研究表明,GH主要是由嗜酸性的生长激素分泌细胞分泌。研究为深入研究脊椎动物生长激素基因的进化和人工养殖达氏鲟的生长调控提供了基础。 展开更多

关键词 达氏鲟 生长激素 q RT-PCR WESTERN-BLOT 荧光免疫组化

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“互联网+双创”背景下的水产现代学徒制核心课程“水族创客训练营”探索与实践 被引量：5

2

作者 单喜双 王加美 +2 位作者 周根中 王权 王建国 《科教导刊》 2019年第20期64-65,共2页

当前'互联网+'深刻的影响着每一个普通人的生活,也在逐渐影响着高等职业教育领域,'观赏鱼养殖'是水族和水产专业的必修课程,作为传统的偏重理论教学的'观赏鱼养殖'课程已经不再适用于当前的形势。如何在'... 当前'互联网+'深刻的影响着每一个普通人的生活,也在逐渐影响着高等职业教育领域,'观赏鱼养殖'是水族和水产专业的必修课程,作为传统的偏重理论教学的'观赏鱼养殖'课程已经不再适用于当前的形势。如何在'互联网+'与'大众创业、万众创新'的时代特色背景下进行课程改革成为了我们课程改革的重要努力方向,当前基于现代学徒制的职业教育体系正在全国范围内试点展开,作者结合现代学徒制试点水产养殖技术专业课程改革实施过程中遇到的问题进行了一些思考和分析。本文总结了全国'互联网+'现代农牧业创新创业大赛一等奖'水族创客训练营'课程的实施情况,以供大家交流探讨。 展开更多

关键词 互联网+ 创新创业 水产现代学徒制 水族课程

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密度和雌雄比例对隆线溞混交雌体生殖方式的影响

3

作者 单喜双 崔晓翠 +2 位作者 王建国 王洲 陈俊杰 《安徽农业科学》 CAS 2017年第15期120-121,128,共3页

[目的]研究密度及雌雄比例对隆线溞混交雌体生殖方式的影响。[方法]将产过1次冬卵的隆线溞雌体按不同密度和不同雌雄比例进行分组,研究不同密度及雌雄比例对隆线溞混交雌体生殖方式的影响。[结果]当密度为0.1、0.2、0.5、0.8、1.0个/mL... [目的]研究密度及雌雄比例对隆线溞混交雌体生殖方式的影响。[方法]将产过1次冬卵的隆线溞雌体按不同密度和不同雌雄比例进行分组,研究不同密度及雌雄比例对隆线溞混交雌体生殖方式的影响。[结果]当密度为0.1、0.2、0.5、0.8、1.0个/mL时,冬卵率和夏卵率无显著差异;当密度为2.0个/mL时,冬卵率显著高于其他5组(P<0.05),而夏卵率显著低于其他5组(P<0.05)。不同雌雄比例对隆线溞混交雌体产冬卵的量没有显著影响(P>0.05)。[结论]该研究结果可为将枝角类作为水产动物饵料生物的开发利用奠定基础。 展开更多

关键词 隆线溞 混交雌体 密度 冬卵 生殖方式

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利用人工湿地处理水产养殖废水 被引量：1

4

作者 单喜双 肖自东 +1 位作者 全萌 王权 《农业与技术》 2017年第14期253-254,共2页

近年来可持续的经济发展逐渐成为热议的话题,水产养殖除受到水域污染的影响,自身产生的污染也不容小觑。人工湿地作为养殖水处理的一种方式,已经在部分地区得以应用,在人们对环境问题日益重视的今天,人工湿地的应用将会越来越多。

关键词 人工湿地 水产养殖 养殖废水 无公害养殖

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溱湖地区河蟹生态养殖模式下的养殖生态系统构建与维护 被引量：1

5

作者 单喜双 陈逸江 《江西农业》 2019年第14期42-43,共2页

江苏省泰州市姜堰区溱湖附近水域自古就有吃蟹的习俗,溱湖簖蟹更是名满天下,溱湖地区河蟹品质理应更高一筹,但从目前全区的养殖效果来看,并未完全实现同其他地区的差异化,商品蟹品质一般、养殖综合效益不高等因素限制了溱湖河蟹产业的... 江苏省泰州市姜堰区溱湖附近水域自古就有吃蟹的习俗,溱湖簖蟹更是名满天下,溱湖地区河蟹品质理应更高一筹,但从目前全区的养殖效果来看,并未完全实现同其他地区的差异化,商品蟹品质一般、养殖综合效益不高等因素限制了溱湖河蟹产业的发展。泰州市鑫隆源水产养殖专业合作社近年来应用多种生物技术,采用生态养殖方法养殖大规格河蟹,不仅取得了很好的经济效益形成了自主品牌,更是通过应用各种物理与生物修复技术,实现了养殖经济效益、环境效益和谐统一。基于此,总结了合作社的部分养殖实践经验与读者分享。 展开更多

关键词 溱湖 河蟹 生态养殖 生态系统

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GH重组蛋白对达氏鲟生长、血液生化和体组成的影响 被引量：8

6

作者 李创举 单喜双 +2 位作者 岳华梅 阮瑞 危起伟 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1106-1113,共8页

为研究生长激素(GH)重组蛋白对达氏鲟生长、代谢及鱼体肝组分的影响,构建了GH成熟肽融合原核表达载体pET32a-AdGH,并将其在宿主菌BL21(DE3)中诱导表达,重组蛋白rAdGH以包涵体的形式存在。设置了4个试验组,分别在鲟鱼商品饲料中添加含量... 为研究生长激素(GH)重组蛋白对达氏鲟生长、代谢及鱼体肝组分的影响,构建了GH成熟肽融合原核表达载体pET32a-AdGH,并将其在宿主菌BL21(DE3)中诱导表达,重组蛋白rAdGH以包涵体的形式存在。设置了4个试验组,分别在鲟鱼商品饲料中添加含量为0(对照组)、10(低处理组)、50(中处理组)和100mg/kg(高处理组)的粉状rAdGH,连续投喂8周。结果表明,低水平rAdGH添加能够显著促进鱼体生长,提高特定生长率,降低饵料系数,提高肝体比和脏体比;进一步的分析表明,低水平rAdGH添加可提高除血糖外所有测定的血液指标数值,反映了机体代谢水平的增强。各浓度rAdGH的添加均能提高鱼体肝和肌肉中蛋白质、水分含量,降低脂肪含量。rAdGH对鱼体生长和代谢的影响可能与其剂量相关,低水平的添加可显著增强鱼体代谢水平,加快肝中蛋白质的沉积与脂肪的消耗,促进鱼体生长;高水平的添加进一步增强其代谢水平,但其促生长的功能下降,部分血液指标异常,肝组分异常,疑似肝损伤。研究探索了鲟鱼重组生长激素的生长调控功能,为重组生长激素在鲟鱼养殖中的应用提供了基础。 展开更多

关键词 达氏鲟 原核表达 生长激素重组蛋白 生长性能 血液生化指标 体组分

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小龙虾-鳑鲏-贝类的生态立体养殖模式 被引量：2

7

作者 周智勤 王建国 +6 位作者 王权 王洲 单喜双 朱峰 童震 程汉东 袁胜 《贵州农业科学》 CAS 2019年第7期80-84,共5页

为小龙虾的立体生态养殖提供参考,利用中华鳑鲏(Rhodeus sinensis)嘬食残饵的特性,以及河蚌(Anodonta woodiana)具有滤食净化水质,又是鳑鲏产卵孵幼伴侣的特点,将克氏原螯虾(Procambarus clarkii)-中华鳑鲏-河蚌进行生态混养,667 m 2池... 为小龙虾的立体生态养殖提供参考,利用中华鳑鲏(Rhodeus sinensis)嘬食残饵的特性,以及河蚌(Anodonta woodiana)具有滤食净化水质,又是鳑鲏产卵孵幼伴侣的特点,将克氏原螯虾(Procambarus clarkii)-中华鳑鲏-河蚌进行生态混养,667 m 2池塘(水深0.5 m)分别放养平均体重(5.323 1±1.682 7)g的克氏原螯虾1万尾(低密度组)和2万尾(高密度组),均混养平均体重(1.325 6±0.212 6)g的中华鳑鲏0.5万尾,投放方形环棱螺250 kg、背角无齿蚌100 kg,以无鳑鲏组为对照,饲养130 d,从饲养40 d开始捕大留小,探究小龙虾与鳑鲏、贝类生态立体养殖模式的效果。结果表明:低密度克氏原螯虾组的平均体重显著(P<0.05)高于高密度组,但混养中华鳑鲏组和对照组间差异不显著(P>0.05);混养中华鳑鲏,低密度组比对照组的虾产量提高9.23%,高密度组提高19.69%;高密度组虾的成活率比对照组高11百分点。低密度组比对照组的中华鳑鲏总重减少23.3%,高密度组减少35.8%,平均体重显著(P<0.05)低于放养前。混养中华鳑鲏的池塘氨氮和亚硝酸盐氮含量显著(P<0.05)低于不混养池塘。克氏原螯虾-中华鳑鲏-河蚌生态混养模式能改善池塘环境,有利于小龙虾种群的生长。 展开更多

关键词 小龙虾 克氏原螯虾 中华鳑鲏 河蚌 养殖模式

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兴国红鲤ER基因克隆表达及EE2暴露对肝中ER表达的影响 被引量：1

8

作者 宋明月 单喜双 +4 位作者 陈细华 岳华梅 叶欢 杨晓鸽 李创举 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期26-32,共7页

为评估环境内分泌干扰物对鱼类的影响,研究克隆了兴国红鲤雌激素受体(Estrogen receptor,ER)4种亚型ERα、ERβ、ERβ1、ERβ2的全长c DNA序列,氨基酸序列比对发现兴国红鲤ERs分别与3种鲤科鱼类相应亚型具有较高的同源性。实时荧光定量P... 为评估环境内分泌干扰物对鱼类的影响,研究克隆了兴国红鲤雌激素受体(Estrogen receptor,ER)4种亚型ERα、ERβ、ERβ1、ERβ2的全长c DNA序列,氨基酸序列比对发现兴国红鲤ERs分别与3种鲤科鱼类相应亚型具有较高的同源性。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测结果表明,4种ER亚型m RNA在雌雄成体组织中呈现差异表达,雌性个体中,肝、卵巢和肠中4种ERs的表达量均较高;在雄性个体中,ERα和ERβ主要在肝中表达,ERβ1、ERβ2分别在肠和精巢中的表达量最高。将150日龄的兴国红鲤幼鱼分别暴露在0.01、0.1和1 nmol/L的17α-乙炔基雌二醇(EE2)中4周,检测了雌性幼鱼肝中4种ER基因的表达变化情况。在EE2中暴露1—2周后,兴国红鲤雌性幼鱼肝中ERα基因的表达水平有极显著的提升;各浓度EE2能持续显著促进其肝中ERβ的表达;在1—2周内各浓度EE2对ERβ1表达有所抑制;第1周EE2能够抑制ERβ2基因m RNA的表达,并在0.01 nmol/L时抑制作用达到了显著的水平。上述研究结果表明,EE2暴露能诱导或抑制兴国红鲤雌性幼鱼肝中ER亚型的表达,相对于ERβ、ERβ1和ERβ2、ERα可作为EE2短期(1—2周)敏感性生物学标记。 展开更多

关键词 雌激素受体 兴国红鲤 EE2 实时荧光定量PCR

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草鱼苗种、罗氏沼虾、青虾生态高效混养技术 被引量：1

9

作者 王建国 王权 +3 位作者 冯亚明 顾海龙 杨智景 单喜双 《水产养殖》 CAS 2018年第2期1-3,共3页

草鱼苗种在培育过程中,经常受到严重疾病的困扰,病毒性草鱼出血病更是草鱼大规格苗种培育的最大威胁,成活率难以提高.罗氏沼虾在江苏养殖面积逐渐增大,是一个非常有潜力的养殖品种.但罗氏沼虾放苗较晚,池塘闲置时间长,

关键词 罗氏沼虾 鱼苗种 混养技术 草鱼出血病 生态 青虾 苗种培育 养殖面积

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高职水产养殖创新人才培养的校企合作实践——以江苏农牧科技职业学院“水产饲料与营养特训营”为例 被引量：4

10

作者 宋霖 王权 单喜双 《养殖与饲料》 2020年第5期11-13,共3页

为探索高职水产养殖高素质技术应用型人才培养的校企合作新路径,江苏农牧科技职业学院依托江苏省高等学校大学生万人计划政策,举办了校企合作实践——"水产饲料与营养特训营"。本文介绍了特训营的举办过程,阐述了通过特训营... 为探索高职水产养殖高素质技术应用型人才培养的校企合作新路径,江苏农牧科技职业学院依托江苏省高等学校大学生万人计划政策,举办了校企合作实践——"水产饲料与营养特训营"。本文介绍了特训营的举办过程,阐述了通过特训营进行校企合作实践的体会:特训营之校企合作提升了专业吸引力、特训营之校企合作增强了行业适应能力、特训营之校企合作调动了教师与企业参与的积极性、特训营之校企合作推进了专业与产业深度对接。 展开更多

关键词 高职 创新人才培养 水产养殖 校企合作 特训营 实践

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项目驱动下的大学生创新创业教育探析 被引量：3

11

作者 王建国 王权 +2 位作者 单喜双 熊良伟 张春丽 《新课程研究（中旬）》 2018年第9期119-121,共3页

随着我国高等教育大众化进程的不断加快,大学生毕业人数逐年增加,大学毕业生就业难的问题也成了全社会高度关注的问题。创新创业教育是一种有效缓解大学生就业压力的手段,现阶段很多高校都开展了大学生创新创业项目。但从实际的情况来看... 随着我国高等教育大众化进程的不断加快,大学生毕业人数逐年增加,大学毕业生就业难的问题也成了全社会高度关注的问题。创新创业教育是一种有效缓解大学生就业压力的手段,现阶段很多高校都开展了大学生创新创业项目。但从实际的情况来看,项目驱动下的大学生创新创业教育仍然存在各种问题,不利于大学生创新创业教育的有效开展,本文就项目驱动下的大学生创新创业教育进行分析。 展开更多

关键词 项目驱动 大学生 创新创业教育

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互联网+时代大学生创新创业教育模式分析 被引量：2

12

作者 王建国 王权 +2 位作者 单喜双 陈小江 黄梁军 《中国教育技术装备》 2018年第3期135-137,共3页

随着"互联网+"时代的到来,对于大学生自主创新创业的要求越来越明显,只有不断开展新型创新创业教育模式,才能促进高等教育不断发展,进而提高学生的自主创新能力。针对"互联网+"时代大学生创新创业教育模式进行分析。

关键词 互联网+ 大学生 创新创业 教育模式

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庭院养殖泥鳅效益好 被引量：1

13

作者 单喜双 崔晓翠 《科学种养》 2011年第2期38-38,共1页

泥鳅味道鲜美,具有营养丰富、高蛋白、低脂肪、营养滋补等特点。泥鳅在韩国被誉为＂水中人参＂,在我国也日益受到广大城乡消费者的喜爱。随着泥鳅需求量的增加,现有的野生资源已经不能满足人们的需求,泥鳅售价随之不断上涨。我国农村的... 泥鳅味道鲜美,具有营养丰富、高蛋白、低脂肪、营养滋补等特点。泥鳅在韩国被誉为＂水中人参＂,在我国也日益受到广大城乡消费者的喜爱。随着泥鳅需求量的增加,现有的野生资源已经不能满足人们的需求,泥鳅售价随之不断上涨。我国农村的房前屋后通常都有很大的空地,在水源充足的条件下可以开发利用进行泥鳅养殖。泥鳅属于杂食性鱼类,农村的各种农副产品的＂下脚料＂都可以作为饵料投喂。泥鳅养殖技术简单、病害少,不失为农民增收致富的新选择。 展开更多

关键词 泥鳅养殖 庭院养殖 效益 营养丰富 杂食性鱼类 野生资源 开发利用 饵料投喂

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中华鲟促甲状腺激素β亚基基因(TSHβ)cDNA序列的克隆及其表达分析

14

作者 李创举 岳华梅 +2 位作者 叶欢 杨晓鸽 单喜双 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2015年第11期1-8,23,共9页

【目的】克隆中华鲟(Acipenser sinesis)促甲状腺激素β亚基(TSHβ)基因,分析其序列特征和进化特征,研究其在中华鲟中的组织表达特征和不同年龄垂体中的差异表达,为中华鲟生长发育调控研究提供基础数据。【方法】采用反转录聚合酶链式反... 【目的】克隆中华鲟(Acipenser sinesis)促甲状腺激素β亚基(TSHβ)基因,分析其序列特征和进化特征,研究其在中华鲟中的组织表达特征和不同年龄垂体中的差异表达,为中华鲟生长发育调控研究提供基础数据。【方法】采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE),克隆中华鲟TSHβ,对其cDNA序列及其推导的氨基酸序列进行序列特征分析和系统发生分析;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法,对TSHβ-mRNA在中华鲟肝、心、脾、性腺、肠、垂体、下丘脑、中脑、端脑、小脑和延脑等组织中的表达状况,以及在1,3,5龄中华鲟个体垂体中的表达差异进行研究。【结果】克隆获得TSHβ基因,该cDNA序列全长649bp,5′和3′端非编码区分别为142和75bp;开放阅读框432bp,编码143个氨基酸。TSHβ亚基成熟多肽含有12个半胱氨酸(Cys)和2个N连糖基化位点。氨基酸序列多重比对表明,中华鲟TSHβ与促滤泡激素β亚基和促黄体激素β亚基的一致性分别为36%和35%,但与糖蛋白激素α亚基的一致性约为10%。与其他脊椎动物的TSHβ氨基酸序列进行比对发现,中华鲟TSHβ亚基与西伯利亚鲟一致性最高(98%);与鱼类、两栖类、鸟类和哺乳类的序列一致性分别约为44%,55%,56%和60%;脊椎动物TSHβ的Cys和N连糖基化位点位置高度保守。TSHβ亚基仅在中华鲟垂体中有表达;3龄雄性个体垂体中TSHβ的表达量约为1龄的9倍,3龄和5龄雌性个体垂体中的表达量均约为1龄的5倍左右。【结论】成功获得了中华鲟TSHβ亚基基因,该基因具有与其他动物TSHβ相似的结构和表达特征;雄性个体表达量高于雌性个体,其在中华鲟个体的生长发育过程中表达量上升。 展开更多

关键词 中华鲟 TSHβ 基因克隆 基因表达

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高职水产养殖技术类专业顶岗实习内容的调研与设计

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作者 王建国 熊良伟 +6 位作者 王权 单喜双 陈小江 王明 宋欣芮 祁雪 黄梁军 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第10期233-237,共5页

顶岗实习是高职学校培养高技术技能型人才的重要环节,但顶岗实习存在目标不统一、内容随意、缺乏科学的标准等问题。笔者通过在用人单位中开展广泛的调研,科学分析,最终设计水产养殖技术专业的顶岗实习标准。经调研了解到顶岗实习岗位... 顶岗实习是高职学校培养高技术技能型人才的重要环节,但顶岗实习存在目标不统一、内容随意、缺乏科学的标准等问题。笔者通过在用人单位中开展广泛的调研,科学分析,最终设计水产养殖技术专业的顶岗实习标准。经调研了解到顶岗实习岗位主要有水生动物苗种繁育、水产养殖技术、水产养殖技术服务、渔药或饲料营销、饲料检验与化验、水产养殖应用性试验研究和新技术开发6种岗位,笔者根据岗位需要重新整合设计了顶岗实习内容,为统一的顶岗实习标准制订提供参考依据。 展开更多

关键词 顶岗实习 高职 水产养殖专业 实习标准 工学结合 校企合作 核心岗位

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