虾类十足目虹彩病毒1(DIV1)LAMP-HNB快检方法的建立

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作者 王雯琼 葛明峰 +4 位作者 卢先东 刘艳红 斯烈钢 申屠基康 徐胜威 《安徽农业科学》 CAS 2024年第15期192-196,共5页

[目的]建立一种操作简便、快速、可视化的虾类病原检测方法,实现基层养殖户自检。[方法]针对十足目虹彩病毒1(DIV1),设计环介导等温扩增(LAMP)特异性引物,对反应试剂用量、温度、反应时间等条件进行优化,建立LAMP与羟基萘酚蓝(HNB)结合... [目的]建立一种操作简便、快速、可视化的虾类病原检测方法,实现基层养殖户自检。[方法]针对十足目虹彩病毒1(DIV1),设计环介导等温扩增(LAMP)特异性引物,对反应试剂用量、温度、反应时间等条件进行优化,建立LAMP与羟基萘酚蓝(HNB)结合的LAMP-HNB可视化快速检测方法。[结果]在LAMP反应体系中添加12 mmol/L Mg^(2+)和250μmol/L HNB,65℃恒温条件下反应60 min最佳;DIV1病原质粒最低检出限为102 copies/μL,稳定性和特异性较好,通过带有靶标基因的阳性质粒进行16次重复性试验结果均较为稳定,多种模板扩增试验均未发生假阳性情况,符合试验要求。[结论]该研究建立的LAMP-HNB可视化快速检测方法,适用于上述对虾DIV1的现场快速检测。 展开更多

关键词 南美白对虾 LAMP HNB 十足目虹彩病毒1 快速检测

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微流控芯片技术检测虾四种病原微生物方法的建立 被引量：1

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作者 刘洋 陈本龙 +6 位作者 吴冬雪 黄晨 王乃福 李丹丹 王绥家 卢先东 刘艳红 《水产学杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期23-28,37,共7页

针对虾的白斑综合征病毒、桃拉综合征病毒、黄头病毒和十足目虹彩病毒1的基因保守序列设计LAMP引物,将引物包被于芯片反应槽中,将微流控芯片技术与LAMP等温扩增技术相结合,建立针对这四种病毒的高效准确检测方法。用不同浓度的病毒阳性... 针对虾的白斑综合征病毒、桃拉综合征病毒、黄头病毒和十足目虹彩病毒1的基因保守序列设计LAMP引物,将引物包被于芯片反应槽中,将微流控芯片技术与LAMP等温扩增技术相结合,建立针对这四种病毒的高效准确检测方法。用不同浓度的病毒阳性模板检测了建立的检测方法对4种虾病毒与另1种常见虾病毒的特异性,并对20份阳性和30份阴性虾组织样本的特异性、敏感性和重复性进行了临床对比验证实验。结果表明:本研究方法灵敏度高,特异性强,重复性好,各病毒间无交叉反应,为同时快速检测虾的四种病毒提供了技术手段。 展开更多

关键词 白斑综合征病毒 桃拉综合症病毒 黄头病毒 十足目虹彩病毒1 微流控芯片

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微流控芯片技术检测虾肝肠胞虫及其在浙江省对虾流行病学调查中的应用

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作者 孙福英 白斐 +2 位作者 祝波 卢先东 钱冬 《南方农业》 2023年第6期200-205,共6页

南美白对虾是浙江省养殖的主要虾类,虾肝肠胞虫感染(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)是南美白对虾养殖中危害最大的疾病,引起严重的生长迟缓,造成极大的损失。虾肝肠胞虫个体微小,给显微镜检测造成较大的困难,因此尝试建立快速、灵敏... 南美白对虾是浙江省养殖的主要虾类,虾肝肠胞虫感染(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)是南美白对虾养殖中危害最大的疾病,引起严重的生长迟缓,造成极大的损失。虾肝肠胞虫个体微小,给显微镜检测造成较大的困难,因此尝试建立快速、灵敏的定量检测微流控芯片检测技术。结果表明,所建立的微流控芯片检测方法特异性良好,重复性良好,扩增结果稳定可靠,最低检出限为3.23×100 copies·μL^(-1)。将该检测技术应用于浙江省对虾流行病学特点分析中,发现三门县和舟山市对虾肠胞虫感染率比较高,除嘉兴市未出现对虾通用型传染皮下及造血组织坏死病毒感染,其他地方均有感染。试验证明,微流控芯片快速检测技术有望应用于对虾规模化养殖中虾肝肠胞虫感染的快速检测。 展开更多

关键词 微流控芯片技术 虾肝肠胞虫 流行病学 浙江省

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磁珠快速核酸提取法在南美白对虾病原检测中的应用及其性能评价

4

作者 徐胜威 葛明峰 +6 位作者 卢先东 刘艳红 黄一哲 王雯琼 王雪磊 王建平 柳海 《宁波大学学报（理工版）》 CAS 2023年第3期10-15,共6页

为实现南美白对虾相关病原核酸快速、便捷提取,并实现原材料国产化,降低成本,建立了一种基于国产磁珠的核酸快速提取方法(以下简称磁珠法).以携带虾肝肠胞虫的南美白对虾为实验样本,通过微流控芯片对3种磁珠提取的核酸进行测试,并对裂... 为实现南美白对虾相关病原核酸快速、便捷提取,并实现原材料国产化,降低成本,建立了一种基于国产磁珠的核酸快速提取方法(以下简称磁珠法).以携带虾肝肠胞虫的南美白对虾为实验样本,通过微流控芯片对3种磁珠提取的核酸进行测试,并对裂解液中盐酸胍浓度及洗涤液2中乙醇浓度进行了优化.通过优选实验确定:奥润磁珠提取效果优于其他两种磁珠;裂解液中盐酸胍的最佳浓度为4 mol·L^(-1);洗涤液2中乙醇的最佳质量分数为75%.在此基础上,分析评价了优化后的磁珠法核酸提取线性范围、灵敏度、精密度、特异性及抗干扰能力等技术性能.结果显示:稀释10^(4)倍后的低浓度病原核酸仍保持较好的扩增效果,变异系数为2.03%,表明建立的磁珠法具有较宽的检测范围,灵敏度高,特异性和抗干扰能力强.本文建立的磁珠法可实现快捷、通用、高纯度、低成本的南美白对虾主要病原的核酸提取. 展开更多

关键词 磁珠法 快速 核酸提取 评价

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微流控芯片法在非洲猪瘟病毒核酸快速检测中的性能分析 被引量：4

5

作者 邵靓 陈弟诗 +6 位作者 陈斌 卢先东 邓飞 张毅 刘艳红 周莉媛 李丽 《畜牧与兽医》 北大核心 2021年第7期107-111,共5页

为评估微流控芯片法在非洲猪瘟病毒(ASFV)核酸快速检测中的各项性能,验证该方法的敏感性、特异性、重复性和临床效果,本研究将ASFV VP72质粒标准物质、猪瘟病毒(CSFV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪圆环病毒2... 为评估微流控芯片法在非洲猪瘟病毒(ASFV)核酸快速检测中的各项性能,验证该方法的敏感性、特异性、重复性和临床效果,本研究将ASFV VP72质粒标准物质、猪瘟病毒(CSFV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和伪狂犬病病毒(PRV)培养物各1份以及临床样本43份进行核酸提取,用ASFV微流控芯片快速检测试剂盒进行测试研究,并与市场上某品牌ASFV荧光定量PCR检测试剂盒进行比对。结果表明:微流控芯片法可以在15~30 min内,实现2.5 copies/μL的最低检出限,与荧光定量PCR具有相同的敏感性和重复性;同时该方法对CSFV、PEDV、TGEV、PCV2和PRV病毒培养物均无交叉反应,特异性良好;通过对43份临床样本测试显示,微流控芯片法与荧光定量PCR的临床符合率为97.67%(42/43)。研究表明,微流控芯片法在ASFV核酸检测上性能良好。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 微流控芯片法 敏感性 重复性 特异性 临床效果

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16层螺旋CT三维重建诊断外伤性肋骨骨折与DR平片对照分析 被引量：47

6

作者 卢先东 张承祥 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第15期1521-1522,共2页

目的探讨16排螺旋CT的三维重建(VRT)在肋骨骨折中的应用价值。方法对30例胸部外伤患者行16层螺旋CT VRT显示肋骨骨折与DR平片检查显示肋骨骨折进行对照比较,并对确诊肋骨骨折的病例进行回顾性分析比较。结果 16层螺旋CT VRT诊断肋骨骨... 目的探讨16排螺旋CT的三维重建(VRT)在肋骨骨折中的应用价值。方法对30例胸部外伤患者行16层螺旋CT VRT显示肋骨骨折与DR平片检查显示肋骨骨折进行对照比较,并对确诊肋骨骨折的病例进行回顾性分析比较。结果 16层螺旋CT VRT诊断肋骨骨折30例58处;DR平片诊断肋骨骨折24例45处,可疑骨折3例5处。结论 16层螺旋CT肋骨VRT能够直观、立体、清晰、多角度地显示肋骨骨折,在诊断隐匿性肋骨骨折方面,临床应用价值明显优于DR平片。 展开更多

关键词 肋骨骨折 CT三维重建 DR平片 对照分析

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虾肝肠胞虫感染病理特征、18S rRNA基因序列及系统进化树分析

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作者 周颖 祝波 +10 位作者 钱冬 卢先东 李小冰 李政 刘艳红 蔡惠凤 吴仲宁 袁思平 张崇虎 叶乐平 马荣荣 《宁波大学学报（理工版）》 CAS 2022年第2期8-14,共7页

为调查浙江省部分地区虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)暴发来源及与其他宿主来源的微孢子虫进化关系,本研究利用形态学特征和分子鉴定,尝试对引起浙江多地凡纳对虾生长缓慢综合征的病原进行探究.同时基于18S rRNA基因序列... 为调查浙江省部分地区虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)暴发来源及与其他宿主来源的微孢子虫进化关系,本研究利用形态学特征和分子鉴定,尝试对引起浙江多地凡纳对虾生长缓慢综合征的病原进行探究.同时基于18S rRNA基因序列分析该病原与其他地区及其他宿主来源微孢子虫的进化关系.结果显示,所采病虾均为EHP阳性,采样地区EHP 18S rRNA基因具有高度同源性,为98.5%~100%.对国内外EHP基因序列进行同源性分析,其同源性为86.2%~100%,所采EHP与印度EHP聚为一个分支. EHP 18S rRNA基因序列与其他水生生物微孢子虫18S rRNA均处于不同分支,表明18S rRNA可作为EHP的主要鉴别序列.将本研究所采EHP与NCBI中同源性较高的比氏肠胞虫和金头鲷微孢子虫比较分析,结果表明微孢子虫基因序列同源性与宿主进化发育程度有关,宿主之间进化距离越近,则微孢子虫基因序列同源性相聚越近. 展开更多

关键词 虾肝肠胞虫 凡纳对虾 病理特征 18S rRNA 系统进化树

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肝动脉介入化疗栓塞术后甲胎蛋白的应答对进展期肝癌预后的影响 被引量：5

8

作者 卢先东 时国兵 《肝脏》 2018年第8期689-692,共4页

目的评价甲胎蛋白(AFP)应答对进展期肝细胞癌(HCC)患者行肝动脉介入化疗栓塞术(TACE)长期预后的影响。方法回顾性分析我院符合巴塞罗那分期B期的165例进展期HCC患者,根据TACE术后AFP是否下降50%分为两组:AFP应答组(n=80)和AFP未应答组(n... 目的评价甲胎蛋白(AFP)应答对进展期肝细胞癌(HCC)患者行肝动脉介入化疗栓塞术(TACE)长期预后的影响。方法回顾性分析我院符合巴塞罗那分期B期的165例进展期HCC患者,根据TACE术后AFP是否下降50%分为两组:AFP应答组(n=80)和AFP未应答组(n=85)。采用Kaplan-Meier计算总体生存时间,Log-rank检验评估不同组别患者的生存差异,Cox比例风险模型分析影响总体生存的独立危险因素。结果一般临床资料两组比较差异无统计学意义。AFP应答组的1,3,5年总体生存率为68.9%,46.6%和40.8%,AFP未应答组为45.9%,20%和17.5%,经Log-rank检验,差异有统计学意义(P=0.001)。Cox多因素比例风险模型分析发现,AFP>400ng/ml(HR:2.12,P=0.001)、肿瘤直径>5cm(HR:3.33,P<0.001)、肿瘤数目>3(HR:2.06,P=0.001)、以及Child-Pugh B级(HR:1.93,P=0.004)是影响TACE预后独立的危险因素,AFP应答(HR:0.45,P<0.001)是TACE术后生存的保护因素。结论连续AFP测量是TACE术后监测治疗反应的有效方法,AFP应答可提高进展期HCC行TACE后的长期生存。 展开更多

关键词 肝细胞癌 甲胎蛋白 肝动脉化疗栓塞术 生存

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针刺治疗急性脑梗死的临床疗效观察及磁共振波谱分析 被引量：1

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作者 卢先东 张勇 时国兵 《四川中医》 2018年第8期201-203,共3页

目的:观察针刺治疗急性脑梗死的临床疗效,并进行磁共振波谱分析。方法:将116例确诊为急性脑梗死患者随机分成对照组和针刺组,每组58例。对照组患者给予常规西医治疗;针刺组在上述治疗基础上,加用中医针刺疗法,每日1次,7次为1疗程。完成... 目的:观察针刺治疗急性脑梗死的临床疗效,并进行磁共振波谱分析。方法:将116例确诊为急性脑梗死患者随机分成对照组和针刺组,每组58例。对照组患者给予常规西医治疗;针刺组在上述治疗基础上,加用中医针刺疗法,每日1次,7次为1疗程。完成4个疗程后,比较两组患者NIHSS、FMA及ADL评分改善情况,并首次采用磁共振波谱分析脑组织损伤改善情况,最后评价临床疗效。结果:治疗后,两组患者NIHSS、FMA及ADL评分均有一定程度改善,且针刺组患者改善程度均明显优于对照组(P<0.05)。磁共振波谱分析显示针刺治疗显著降低了患者神经元细胞受损程度,显著缓解了酸中毒状态。针刺组总有效率达91.38%,高于对照组总有效率(70.69%),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:首次借助磁共振波谱分析手段,证实了针刺疗法在急性脑梗死治疗中的优势,奠定了更多的数据支持。 展开更多

关键词 针刺 急性脑梗死 磁共振波谱分析

原文传递

微流控芯片恒温扩增技术快速检测米饭中的蜡样芽孢杆菌 被引量：4

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作者 王珍 贺磊 +4 位作者 肖英平 卢先东 刘艳红 陆雯 王首锋 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期193-202,共10页

为建立米饭中的蜡样芽孢杆菌微流控芯片恒温扩增快速检测方法,利用蜡样芽孢杆菌公开的hblA基因序列设计引物,加入荧光染料SYTO-9,采用微流控芯片通过环介导恒温扩增进行实时荧光读数,并通过24株菌株验证其特异性;分别用阳性质粒和阳性... 为建立米饭中的蜡样芽孢杆菌微流控芯片恒温扩增快速检测方法,利用蜡样芽孢杆菌公开的hblA基因序列设计引物,加入荧光染料SYTO-9,采用微流控芯片通过环介导恒温扩增进行实时荧光读数,并通过24株菌株验证其特异性;分别用阳性质粒和阳性菌株测试其灵敏度、检出限和重复性。结果表明:2株蜡样芽孢杆菌呈阳性,22株非蜡样芽孢杆菌呈阴性;微流控芯片恒温扩增技术检测蜡样芽孢杆菌菌液的灵敏度为170 CFU/mL,检测时间在35 min内;使用合成的蜡样芽孢杆菌阳性质粒样品,其灵敏度为10μL-1,检测时间在15 min内,比传统分离鉴定方法的灵敏度高10倍;人工污染米饭中蜡样芽孢杆菌的检出限为570 CFU/g,并可在45 min内完成结果判定;蜡样芽孢杆菌阳性质粒检测重复性好,其变异系数(coefficient of variation, CV)为2.02%。综上所述,微流控芯片恒温扩增快速检测方法特异性好、灵敏度高、结果准确,可用于米饭类食品中蜡样芽孢杆菌的快速检测。 展开更多

关键词 微流控芯片 环介导恒温扩增 蜡样芽孢杆菌 米饭 检测

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庆元林场千岗坑林区不同群落类型植物物种多样性的比较研究 被引量：2

11

作者 倪荣新 金孝峰 卢先东 《浙江林业科技》 北大核心 1999年第6期11-15,共5页

在中亚热带天然植被保存较完整的庆元林场千岗坑林区选取６个不同群落类型的样地，分乔木层、灌木层和草本层进行植物群落调查，对调查所得到的数据进行物种多样性指数和群落均匀度等的测算和分析。结果表明：常绿阔叶林和杉阔混交林的... 在中亚热带天然植被保存较完整的庆元林场千岗坑林区选取６个不同群落类型的样地，分乔木层、灌木层和草本层进行植物群落调查，对调查所得到的数据进行物种多样性指数和群落均匀度等的测算和分析。结果表明：常绿阔叶林和杉阔混交林的物种多样性程度较高；各层次物种多样性表现为灌木层＞乔木层＞草本层；物种多样性程度直接受到群落类型、优势种类优势度、群落发育阶段及郁闲度等方面的影响；从植物物种多样性保存出发，应大力提倡营造多树种常绿阔叶林或杉阔混交林。 展开更多

关键词 物种多样性 植物群落 浙江庆元 生物多样性

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鼻咽癌30例CT影像分析

12

作者 卢先东 田云 《现代医药卫生》 2015年第23期3619-3620,共2页

目的探讨鼻咽癌患者CT影像特征。方法回顾性分析该院2010年5月至2015年5月经临床明确诊断为鼻咽癌患者(30例)的CT扫描影像,利于病灶分析和鼻咽癌的早期诊断。结果 30例患者中,CT检查全部出现咽隐窝变浅或消失,绝大部分病例显示病灶侵犯... 目的探讨鼻咽癌患者CT影像特征。方法回顾性分析该院2010年5月至2015年5月经临床明确诊断为鼻咽癌患者(30例)的CT扫描影像,利于病灶分析和鼻咽癌的早期诊断。结果 30例患者中,CT检查全部出现咽隐窝变浅或消失,绝大部分病例显示病灶侵犯咽旁间隙及邻近组织结构,颈动脉鞘区受累15例,颅底骨质及颅内侵犯12例;颈淋巴结转移10例。增强扫描示病灶出现不同程度强化。结论典型的CT表现具有特征性,在诊断及鉴别诊断中具有重要意义。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤/诊断 体层摄影术 X线计算机 诊断 鉴别 回顾性研究

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肝血管瘤45例CT影像分析

13

作者 卢先东 《现代医药卫生》 2014年第16期2479-2481,共3页

目的通过对45例肝血管瘤的CT影像分析,进一步探讨肝血管瘤CT影像特征。方法回顾性分析该院2010年6月至2012年8月经临床明确诊断的45例肝血管瘤患者的CT平扫及增强扫描影像征象。结果肝血管瘤CT平扫多表现为肝内低密度占位,呈圆形结节状... 目的通过对45例肝血管瘤的CT影像分析,进一步探讨肝血管瘤CT影像特征。方法回顾性分析该院2010年6月至2012年8月经临床明确诊断的45例肝血管瘤患者的CT平扫及增强扫描影像征象。结果肝血管瘤CT平扫多表现为肝内低密度占位,呈圆形结节状或椭圆形占位,边界较清楚,极少数巨大血管瘤病灶边缘可欠清晰,中央可见更低密度区。增强扫描为特征性动脉期边缘性环状强化或结节样明显强化,较小的血管瘤可形成高密度结节状充填;静脉期强化逐渐向病灶中央延伸;延迟期病灶呈与肝实质密度相似的等密度充填影,巨大血管瘤中央可见点片状或裂隙状不充填影。结论肝血管瘤螺旋CT增强扫描影像表现具有特征性,在诊断及鉴别诊断中具有重要的意义。 展开更多

关键词 肝肿瘤 血管瘤 体层摄影术 X线计算机

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肝脏大血管瘤30例CT影像分析

14

作者 卢先东 谭天清 易正新 《现代医药卫生》 2011年第12期1867-1868,共2页

目的:探讨CT影像对提高肝脏大血管瘤的诊断效果。方法:对我院30例直径>5 cm的肝脏血管瘤患者的CT平扫和增强扫描影像资料进行回顾分析。结果:肝脏内直径>5 cm血管瘤CT平扫多表现为肝内大片状低密度占位,边界较清楚;部分患者病灶... 目的:探讨CT影像对提高肝脏大血管瘤的诊断效果。方法:对我院30例直径>5 cm的肝脏血管瘤患者的CT平扫和增强扫描影像资料进行回顾分析。结果:肝脏内直径>5 cm血管瘤CT平扫多表现为肝内大片状低密度占位,边界较清楚;部分患者病灶边界不清,形态不规则;增强扫描除具有肝血管瘤增强一般特性外,延迟扫描主要表现为中心低密度区不强化影。结论:肝脏大血管瘤除具有血管瘤一般CT影像特征外,还具有自身的CT影像特征,这些特点有利于提高诊断水平。 展开更多

关键词 肝脏大血管瘤 CT 影像分析

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