精氨酸甲基转移酶1调控铁死亡在肺癌细胞恶性生物学中的分子机制

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作者 卢天龙 杨启英 +1 位作者 杨世闻 宋小龙 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第9期1098-1104,共7页

目的探讨精氨酸甲基转移酶1(CARM1)调控铁死亡在肺癌细胞恶性生物学中的分子机制。方法通过免疫印迹检测正常人支气管上皮细胞(HBE4)和肺癌系中(A549、H1299、H1640、HCC827)中CARM1的表达情况。将CARM1序列或载体对照(Vector)以及针对C... 目的探讨精氨酸甲基转移酶1(CARM1)调控铁死亡在肺癌细胞恶性生物学中的分子机制。方法通过免疫印迹检测正常人支气管上皮细胞(HBE4)和肺癌系中(A549、H1299、H1640、HCC827)中CARM1的表达情况。将CARM1序列或载体对照(Vector)以及针对CARM1(shCARM1)、Notch同源物2(shNotch2)的shRNA序列或阴性对照shRNA(shNC)转染到肺癌细胞中。分别通过CCK⁃8试验、Transwell试验测定细胞增殖、迁移和侵袭。利用RIP⁃PCR和MeRIP⁃qPCR分析探讨了CARM1的作用机制。采用经典的铁死亡诱导剂Erastin处理肺癌细胞以确定CARM1是否能影响细胞对铁死亡的敏感性。结果与人正常气道上皮细胞HBE4相比,CARM1在肺癌系中(A549、H1299、H1640、HCC827)显著上调(P<0.05)。与Vector组相比,CARM1过表达组A549细胞增殖、迁移和侵袭能力显著增加(P<0.001),而shCARM1组HCC827细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著低于shNC组(P<0.001)。MeRIP⁃qPCR分析显示当CARM1过表达时Notch2 mRNA的m6A丰度显著增加(P<0.05)。RIP分析显示CARM1过表达显著促进CARM1和Notch2 mRNA之间的结合(P<0.05)。Notch2敲低减弱了CARM1上调的A549细胞的增殖、侵袭和迁移能力(P<0.001)。结论CARM1在肺癌中显著升高,并通过激活Notch2发挥其致癌功能。此外,CARM1可以通过稳定Notch2使肺癌细胞对铁死亡不敏感。 展开更多

关键词 精氨酸甲基转移酶1 铁死亡 肺癌细胞 Notch同源物2 恶性生物学

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150例青海地区非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体突变状态分析 被引量：4

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作者 卢天龙 杨启英 《检验医学与临床》 CAS 2016年第1期31-32,共2页

目的探讨青海地区非小细胞肺癌(NSCLC)治疗过程中表皮生长因子受体(EGFR)突变状态。方法利用实时荧光Taqman探针法,采用PCR体外扩增,回顾性分析150例晚期NSCLC患者的临床特征、EGFR突变状态。结果 150例NSCLC患者标本检测发现EGFR(exon... 目的探讨青海地区非小细胞肺癌(NSCLC)治疗过程中表皮生长因子受体(EGFR)突变状态。方法利用实时荧光Taqman探针法,采用PCR体外扩增,回顾性分析150例晚期NSCLC患者的临床特征、EGFR突变状态。结果 150例NSCLC患者标本检测发现EGFR(exon18)突变2例,突变率1.3%;EGFR(exon19)突变18例,突变率12.0%;EGFR(exon20)未检测出;EGFR(exon21)突变27例,突变率18.0%。结论青海地区NSCLC患者EGFR基因外显子19和21的突变(体细胞突变)率较高,可接受EGFR-TKIs治疗。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 表皮生长因子受体 突变

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PCR技术应用在乙型肝炎检验中的价值探析 被引量：4

3

作者 卢天龙 《中国实用医药》 2017年第28期27-28,共2页

目的分析在乙型肝炎检验中应用聚合酶链反应(PCR)技术的效果。方法 200例乙型肝炎患者,根据随机抽签法分为观察和对照组,各100例。对照组通过化学发光法进行检验,观察组选择PCR技术进行检验,比较两种方法的诊断准确率。结果观察组诊断... 目的分析在乙型肝炎检验中应用聚合酶链反应(PCR)技术的效果。方法 200例乙型肝炎患者,根据随机抽签法分为观察和对照组,各100例。对照组通过化学发光法进行检验,观察组选择PCR技术进行检验,比较两种方法的诊断准确率。结果观察组诊断准确率为96%,对照组诊断准确率为81%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PCR技术对于乙型肝炎具有较高的诊断准确率,能够准确检出乙型肝炎病毒,值得广泛应用。 展开更多

关键词 乙型肝炎 聚合酶链反应技术 检验

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探讨血清EB病毒基因、癌胚抗原、铁蛋白联合检测在鼻咽癌诊断中的临床应用价值 被引量：2

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作者 卢天龙 《临床检验杂志（电子版）》 2018年第1期11-12,共2页

目的探讨在鼻咽癌(NPC)诊断中联合检测血清EB病毒基因(EBV-DNA)、癌胚抗原(CEA)、铁蛋白(SF)的临床价值。方法将我院2016年7月-2017年7月接收的40例NPC患者作为A组,另选同期收治的40例良性鼻炎患者作为B组,再抽取40例健康体检者作为C组... 目的探讨在鼻咽癌(NPC)诊断中联合检测血清EB病毒基因(EBV-DNA)、癌胚抗原(CEA)、铁蛋白(SF)的临床价值。方法将我院2016年7月-2017年7月接收的40例NPC患者作为A组,另选同期收治的40例良性鼻炎患者作为B组,再抽取40例健康体检者作为C组,对三组的EBV-DNA、CEA以及SF进行检测,分析这三项指标联合检测对鼻咽癌的诊断价值。结果 A组的三项指标水平高于B组与C组(P<0.05);三种指标联合检测的敏感度显著高于两种指标联合检测,有统计学差异(P<0.05)。结论对NPC采取血清EB病毒基因、CEA、SF联合检测的敏感度高,值得推广。 展开更多

关键词 鼻咽癌 EBV-DNA CEA SF 诊断价值

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实时荧光PCR在高危型人乳头瘤病毒检验中的诊断价值评价

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作者 卢天龙 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第A01期45-47,共3页

目的评价实时荧光PCR技术应用在高危型人乳头瘤病毒检验中的诊断价值。方法将本院于2016年2月1日至2017年11月1日期间收治的200例高危型人乳头瘤病毒感染患者作为研究对象,依次采用实时荧光PCR技术、第二代杂交捕获法对高危型人乳头瘤... 目的评价实时荧光PCR技术应用在高危型人乳头瘤病毒检验中的诊断价值。方法将本院于2016年2月1日至2017年11月1日期间收治的200例高危型人乳头瘤病毒感染患者作为研究对象,依次采用实时荧光PCR技术、第二代杂交捕获法对高危型人乳头瘤病毒进行检验诊断,对比两者的检验结果。结果实时荧光PCR技术的慢性宫颈炎和鳞状上皮病变检出率(62.77%)、高危型人乳头瘤病毒阳性检出率(74.00%)高于第二代杂交捕获法(P<0.05)。结论实时荧光PCR技术在高危型人乳头瘤病毒检验中具有较高的诊断价值。 展开更多

关键词 实时荧光PCR 高危型 人乳头瘤病毒 检验 诊断价值

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青海地区非小细胞肺癌患者EGFR突变状态分析 被引量：4

6

作者 杨启英 卢天龙 《青海医学院学报》 CAS 2015年第3期145-148,共4页

目的探讨青海地区非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因的突变情况。方法经病理确诊的300例NSCLC患者,采用聚合酶链反应(PCR)扩增方法检测EGFR第18、19、20和21外显子的突变情况,并行相关分析。结果 300例NSCLC患者标本EG... 目的探讨青海地区非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因的突变情况。方法经病理确诊的300例NSCLC患者,采用聚合酶链反应(PCR)扩增方法检测EGFR第18、19、20和21外显子的突变情况,并行相关分析。结果 300例NSCLC患者标本EGFR(exon18)突变4例,突变率1.3%;EGFR(exon19)突变36例,突变率12.0%;EGFR(exon20)未检出;EGFR(exon21)突变54例,突变率18.0%。结论青海地区NSCLC患者EGFR基因外显子19和21的突变(体细胞突变)率较高,可接受EGFR-TKIs治疗。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 表皮生长因子受体 突变 青海地区

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血清营养素对妊娠妇女及其胎儿健康影响的研究进展 被引量：3

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作者 赵玲莉 张翔 +1 位作者 卢天龙 李建华 《实用检验医师杂志》 2018年第2期126-128,F0003,共4页

血清营养素水平对预测和诊断妊娠期妇女健康,以及胎儿和新生儿的正常生长发育方面具有重要价值,是目前临床产科学的一个研究热点。通过查阅大量国内外文献,本文对近几年妊娠妇女血清营养素方面的最新研究进展进行分析、归纳和总结,并从... 血清营养素水平对预测和诊断妊娠期妇女健康,以及胎儿和新生儿的正常生长发育方面具有重要价值,是目前临床产科学的一个研究热点。通过查阅大量国内外文献,本文对近几年妊娠妇女血清营养素方面的最新研究进展进行分析、归纳和总结,并从叶酸(FA)、维生素B12、矿物元素3个方面探讨血清营养素对妊娠妇女健康,以及胎儿和新生儿出生缺陷的影响,为今后深入研究血清营养素水平异常与妊娠合并症和出生缺陷的关系提供新思路。 展开更多

关键词 血清营养素 妊娠 叶酸 维生素B12 矿物元素 白蛋白 铁蛋白

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抗菌肽Dermaseptin S4及其突变体基因在大肠杆菌中的表达

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作者 张庆华 韩跃武 +3 位作者 谢俊秋 卢天龙 任惠子 冯惟萍 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期269-272,共4页

目的构建表达抗菌肽Dermaseptin S4(DS4)及其突变体K4-S4的工程菌,并表达目的蛋白。方法采用重叠延伸PCR法设计和扩增抗菌肽DS4及K4-S4基因,定向克隆入载体pUC-18中,经酶切、测序鉴定,重组至表达载体pGEX-4T-1中,构建抗菌肽DS4及K4-S4... 目的构建表达抗菌肽Dermaseptin S4(DS4)及其突变体K4-S4的工程菌,并表达目的蛋白。方法采用重叠延伸PCR法设计和扩增抗菌肽DS4及K4-S4基因,定向克隆入载体pUC-18中,经酶切、测序鉴定,重组至表达载体pGEX-4T-1中,构建抗菌肽DS4及K4-S4基因表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)plyS,经IPTG诱导表达,12%SDS-PAGE鉴定。结果构建的抗菌肽DS4及K4-S4基因工程菌所表达的目的蛋白,经SDS-PAGE鉴定可见相对分子质量34 000的特异性目的条带,37℃诱导5 h的蛋白表达量最高,且多数以包涵体形式存在。结论已成功构建抗菌肽DS4及K4-S4工程菌,并表达目的蛋白,为进一步研究其功能和应用奠定了基础。 展开更多

关键词 抗菌肽 DERMASEPTIN S4 突变体 大肠杆菌 表达

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天蚕素A-蛙皮素杂合肽突变体的构建、表达及其抗菌活性 被引量：3

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作者 冯惟萍 韩跃武 +3 位作者 任慧子 陈建国 张庆华 卢天龙 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第9期752-755,共4页

目的构建天蚕素A(1～8)-蛙皮素(1～12)杂合基因抗菌肽(CA-MA杂合肽)突变体,在大肠杆菌中融合表达,并进行抗菌活性检测。方法采用PCR体外定点突变技术,设计1对方向相反的引物,其中1个引物引入突变点,应用高保真的PolybestDNA多聚酶进行... 目的构建天蚕素A(1～8)-蛙皮素(1～12)杂合基因抗菌肽(CA-MA杂合肽)突变体,在大肠杆菌中融合表达,并进行抗菌活性检测。方法采用PCR体外定点突变技术,设计1对方向相反的引物,其中1个引物引入突变点,应用高保真的PolybestDNA多聚酶进行重组表达质粒pGEX-4T-1-CA-MA的PCR扩增,使CA-MA杂合肽第16位密码子由AGT突变为TGG。将扩增片段自身连接,构建CA-MA杂合肽突变重组表达质粒pGEX-4T-1-W16-CA-MA,转化E.coliBL21,IPTG诱导表达突变体蛋白W16-CA-MA,并对表达产物进行纯化。分离GST融合蛋白后,进行抗菌活性检测。结果重组突变表达质粒DNA测序结果表明,在预期位点发生了突变;突变蛋白在大肠杆菌中的表达量约占菌体总蛋白的18%;纯化后蛋白纯度可达75%以上,并具有一定的抗菌活性。结论已成功获得了具有抗菌活性的杂合肽突变体W16-CA-MA。 展开更多

关键词 天蚕素A-蛙皮素杂合肽 突变体 融合表达 抗菌活性

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BAG-1、Bcl-2双靶区反义RNA重组载体诱导SGC-7901细胞凋亡 被引量：2

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作者 陈建国 卢天龙 +2 位作者 韩跃武 冯惟萍 任慧子 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期132-135,共4页

目的构建BAG-1、Bcl-2双靶区反义RNA重组载体并初步探讨其对SGC-7901细胞增殖活性的影响。方法从SGC-7901细胞总RNA中逆转录扩增包括全部编码序列的BAG-1和Bcl-2 cDNA,利用生物工程技术,反向插入真核细胞双表达载体pVITRO2的多克隆位点... 目的构建BAG-1、Bcl-2双靶区反义RNA重组载体并初步探讨其对SGC-7901细胞增殖活性的影响。方法从SGC-7901细胞总RNA中逆转录扩增包括全部编码序列的BAG-1和Bcl-2 cDNA,利用生物工程技术,反向插入真核细胞双表达载体pVITRO2的多克隆位点中,转染SGC-7901细胞,MTT法检测对细胞增殖的影响,RT-PCR法观察对细胞BAG-1和Bcl-2 mRNA表达水平的变化,流式细胞术检测对细胞周期的影响。结果限制性内切酶和测序分析表明,双表达质粒pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2构建成功。MTT法检测显示pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2载体抑制SGC-7901细胞增殖,并呈时间依赖性,其中以72 h转染组抑制作用最显著(P<0.01);与对照组比较,pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2组BAG-1和Bcl-2mRNA表达水平下降(P<0.05),细胞凋亡比例升高(P<0.01)。结论成功构建反义双靶区重组载体pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2,并发现其能抑制SGC-7901细胞增殖并引起细胞凋亡。 展开更多

关键词 BAG-1 BCL-2 双表达质粒 反义RNA 胃癌

原文传递

丽蝇抗病毒肽Alloferon1基因串联体的构建和表达 被引量：1

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作者 任慧子 韩跃武 +3 位作者 冯惟萍 张庆华 陈建国 卢天龙 《第四军医大学学报》 北大核心 2008年第8期734-736,共3页

目的:克隆和表达Alloferon1基因2串联体.方法:利用同尾酶法基因同向串联方案,在人工合成Alloferon1全基因的基础上,将Alloferon1基因由单体连接成2串联体,继而将获得的正确Alloferon1基因2串联体插入pGEX-4T-1表达载体诱导表达.结果:构... 目的:克隆和表达Alloferon1基因2串联体.方法:利用同尾酶法基因同向串联方案,在人工合成Alloferon1全基因的基础上,将Alloferon1基因由单体连接成2串联体,继而将获得的正确Alloferon1基因2串联体插入pGEX-4T-1表达载体诱导表达.结果:构建的Alloferon1基因2串联体经酶切和DNA测序分析,结果表明该基因串联体的序列与设计的序列完全相同.Alloferon1基因2串联体插入pGEX-4T-1载体后,重组菌经37℃诱导4h,SDS-PAGE分析结果显示,该串联体得到较高水平的表达.结论:Alloferon1基因2串联体的构建与表达均获得了成功. 展开更多

关键词 抗病毒肽 基因 Alloferonl 同尾酶 同向串联 大肠杆菌

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扫气口角度和涡流比对船用柴油机性能的影响

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作者 刘梦雨 鲁祯 +1 位作者 朱峰 卢天龙 《内燃机与动力装置》 2023年第6期1-9,51,共10页

利用Converge软件建立某大缸径低速二冲程船用柴油机的三维数值仿真模型,仿真研究扫气口水平倾角对柴油机性能的影响,并解耦涡流比的单独影响机理。结果表明:扫气口水平倾角过大或过小均导致缸内产生回流区及新鲜空气过早溢出,降低扫气... 利用Converge软件建立某大缸径低速二冲程船用柴油机的三维数值仿真模型,仿真研究扫气口水平倾角对柴油机性能的影响,并解耦涡流比的单独影响机理。结果表明:扫气口水平倾角过大或过小均导致缸内产生回流区及新鲜空气过早溢出,降低扫气效率;与原机水平倾角为15°时相比,当扫气口水平倾角为10°时,有效燃油消耗率和NO_(x)排放均降低;在合理范围内增大涡流比可有效改善油气混合均匀性和燃烧过程;与原机涡流比为4.5时相比,涡流比为20.5时燃油消耗率降低5.09%,燃油经济性明显改善;但涡流比过大对燃油消耗率的改善较小,同时导致壁面传热损失较大,因此涡流比应控制在20.5以下。 展开更多

关键词 二冲程船用柴油机 扫气口角度 涡流比 燃烧 排放

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温室辣椒育苗技术及田间管理技术

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作者 卢天龙 《河南农业》 2018年第14期10-11,共2页

辣椒常被作为食物中的调味品出现在餐桌上,其具有驱寒除湿、增强食欲等功能。为了提高产量,辣椒的种植常在温室中完成,因此需要对温室辣椒的培育管理进行研究。本文主要介绍温室辣椒的育苗技术,并对温室辣椒的田间管理技术进行说明,旨... 辣椒常被作为食物中的调味品出现在餐桌上,其具有驱寒除湿、增强食欲等功能。为了提高产量,辣椒的种植常在温室中完成,因此需要对温室辣椒的培育管理进行研究。本文主要介绍温室辣椒的育苗技术,并对温室辣椒的田间管理技术进行说明,旨在为实际种植提供技术支持,提高温室辣椒的产量及质量,创造更高的经济效益。 展开更多

关键词 温室大棚 辣椒 育苗技术 田间管理技术

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无公害大棚辣椒秋延后高产栽培技术

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作者 卢天龙 《江西农业》 2018年第14期7-8,共2页

无公害大棚可以很好地解决辣椒秋延后产量减少的问题,本文通过分析无公害大棚辣椒秋延后高产栽培技术的前期准备和技术要点,以期为相关从业者提供参考。

关键词 无公害大棚 辣椒 高产栽培技术

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反义Ki-67和Bcl-2真核细胞双表达载体的构建及鉴定

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作者 卢天龙 陈建国 +1 位作者 韩跃武 张庆华 《世界科技研究与发展》 CSCD 2008年第2期202-204,共3页

目的构建反义Ki-67和Bcl-2双表达载体用于肿瘤基因治疗的研究。方法从SGC-7901细胞总RNA中逆转录扩增Ki-67和Bcl-2 cDNA,T-A克隆到pMD18-T Simple载体。Ki-67经BamHⅠ和ClaⅠ双酶切,Bcl-2经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后,分别反向插入pVITRO2... 目的构建反义Ki-67和Bcl-2双表达载体用于肿瘤基因治疗的研究。方法从SGC-7901细胞总RNA中逆转录扩增Ki-67和Bcl-2 cDNA,T-A克隆到pMD18-T Simple载体。Ki-67经BamHⅠ和ClaⅠ双酶切,Bcl-2经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后,分别反向插入pVITRO2的多克隆位点1(mcs1)和2(mcs2),构建单表达质粒pVITRO2-AsKi-67和pVITRO2-AsBcl-2,再将Bcl-2EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,反向插入pVITRO2-AsKi-67的mcs2,构建pVITRO2-AsKi-67-AsBcl-2双表达质粒。结果限制性内切酶和测序表明单表达质粒pVITRO2-AsKi-67和pVITRO2-AsBcl-2以及双表达质粒pVITRO2-AsKi-67-AsBcl-2构建成功。结论本研究成功构建了pVITRO2-AsKi-67和pVITRO2-AsBcl-2单表达质粒,及pVITRO2-AsKi-67-AsBcl-2双表达质粒。 展开更多

关键词 KI-67 BCL-2 双顺反子载体pVITRO2 反义RNA

原文传递

hTERT启动子调控的双顺反子载体的构建

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作者 卢天龙 张薇薇 《世界科技研究与发展》 CSCD 2009年第3期527-530,共4页

目的构建了人端粒酶逆转录酶(human telomerase reserse transcription,hTERT)基因核心启动子调控的肿瘤细胞特异表达载体。方法提取人SGC-7901细胞的基因组,利用PCR技术克隆hTERT基因核心启动子(hTERTp),并将其插入表达载体pVITRO2中,... 目的构建了人端粒酶逆转录酶(human telomerase reserse transcription,hTERT)基因核心启动子调控的肿瘤细胞特异表达载体。方法提取人SGC-7901细胞的基因组,利用PCR技术克隆hTERT基因核心启动子(hTERTp),并将其插入表达载体pVITRO2中,以bTERTp替换hFerL启动子和hFerH启动子构建hTERTp1-hTERTp2-pVITRO2。用酶切法和测序法鉴定重组载体,RT-PCR法估计载体活性。结果经酶切和测序鉴定,以hTERT基因核心启动子调控的真核表达载体hTERTp1-hTERTp2-pVITRO2构建成功,且只在肿瘤细胞中具有表达活性。结论 hTRET基因核心启动子具有肿瘤特异性,构建hTERT基因核心启动子的载体可能是一种新型和有希望肿瘤治疗的途径。 展开更多

关键词 端粒酶逆转录酶核心启动子 双顺反子载体pVITRO2 基因治疗

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高原地区887株金黄色葡萄球菌分布及耐药性分析

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作者 吉雪蓉 赵玲莉 +2 位作者 何轶群 黄文辉 卢天龙 《青海医药杂志》 2015年第3期58-60,共3页

目的:探讨高原地区887株金黄色葡萄球菌的分布特性及耐药性,为高原地区医院提供最新的流行病学资料以指导临床合理使用抗生素。方法:应用回顾性分析法和WHONET5.6软件,分析2011年1月—2014年6月分离自临床各科室的887株金黄色葡萄球菌... 目的:探讨高原地区887株金黄色葡萄球菌的分布特性及耐药性,为高原地区医院提供最新的流行病学资料以指导临床合理使用抗生素。方法:应用回顾性分析法和WHONET5.6软件,分析2011年1月—2014年6月分离自临床各科室的887株金黄色葡萄球菌的分布情况及耐药性。结果:887株金黄色葡萄球菌中MRSA占596株,所占比例为67.19%。887株金黄色葡萄球菌主要来自痰标本,其次为分泌物和血液。痰标本365株占总分离株的41.15%,其中MRSA占有率为78.36%。分泌物标本282株占31.79%,其中MRSA占有率为71.99%。血液标本66株占7.44%,其中MRSA占有率为72.73%。结论:金黄色葡萄球菌的来源主要来自于痰标本,不同于平原地区医院以脓液和创面分泌物为主。从2011年1月—2014年12月以来MRSA的分离率逐年增加,应引起我们的高度重视。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 MRSA分布 耐药性

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