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衰老动物模型及其研究进展 被引量：12
1
作者 卢延华 管博文 孟爱民 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第9期109-113,共5页
衰老是生物体的必然结局。延缓衰老延长寿命、减少老年病改善老年人生活质量一直是人们的研究热点。构建衰老动物模型,使实验动物呈现与人类相似的衰老表型,是研究人类衰老机制和研发抗衰老药物的重要手段。目前广泛应用的衰老模型,涵... 衰老是生物体的必然结局。延缓衰老延长寿命、减少老年病改善老年人生活质量一直是人们的研究热点。构建衰老动物模型,使实验动物呈现与人类相似的衰老表型,是研究人类衰老机制和研发抗衰老药物的重要手段。目前广泛应用的衰老模型,涵盖了从果蝇、线虫等无脊椎动物,到小型鱼类、啮齿动物和非人灵长类等等。近年来,各种基因修饰小鼠在研究衰老发生、发展及干预评价中起到重要作用;另外在常规模式动物之外,选用寿命不同的生物以及寿命差异较大的同一物种,进行寿命相关生物学分析也为研究衰老提供了新的手段。由于衰老是复杂的生物学过程,影响因素多,只有充分进行比较医学研究才能更好地将研究成果转化,为人类健康老年提供保障。 展开更多
关键词 衰老 动物模型 比较医学
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模拟衰老大鼠星形胶质细胞条件培养基对神经干细胞增殖能力的影响 被引量：2
2
作者 卢延华 管博文 +4 位作者 刘旭 吕颖 王卫 魏强 孟爱民 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期153-160,共8页
目的建立大鼠星形胶质细胞衰老模型,模拟老年大鼠体内星形胶质细胞衰老,探讨衰老的星形胶质细胞条件培养基对神经干细胞增殖能力的影响。方法采用胰酶消化法分离新生1 d大鼠皮层星形胶质细胞和15 d胎鼠端脑神经干细胞,200μmol/L H2O2... 目的建立大鼠星形胶质细胞衰老模型,模拟老年大鼠体内星形胶质细胞衰老,探讨衰老的星形胶质细胞条件培养基对神经干细胞增殖能力的影响。方法采用胰酶消化法分离新生1 d大鼠皮层星形胶质细胞和15 d胎鼠端脑神经干细胞,200μmol/L H2O2诱导星型胶质细胞4 h建立衰老模型;收取培养3 d和7 d衰老细胞上清作为条件培养基,以1∶3或1∶2的比例加入神经干细胞增殖培养基中,通过神经干细胞及神经球计数观察对增殖功能的影响,以正常星型胶质细胞条件培养基作为对照。结果3 d正常条件培养基对神经干细胞短期增殖无影响,对长期增殖有抑制作用;3 d衰老条件培养基抑制神经干细胞的增殖;7 d正常条件培养基促进神经干细胞短期增殖,对长期增殖有抑制作用;7 d衰老条件培养基抑制神经干细胞的增殖,抑制作用大于正常条件培养基。结论H2O2诱导衰老的星形胶质细胞抑制神经干细胞的增殖,对长期增殖的抑制作用大于正常星形胶质细胞。 展开更多
关键词 衰老星形胶质细胞 神经干细胞 增殖能力
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亚致死剂量γ-射线全身照射对小鼠造血免疫功能远期影响 被引量：6
3
作者 管博文 卢延华 +6 位作者 苏路路 李程程 荆学双 董银萍 王月英 李德冠 孟爱民 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第11期50-57,64,共9页
目的 观察4 Gy、6 Gy全身照射后6个月C57BL/6 J小鼠的造血和免疫等功能指标变化。方法对8~12周的C57BL/6 J小鼠分别进行4 Gy和6 Gy全身照射,照射6个月后检测外周血细胞计数及分类、胸腺系数及脾系数、外周血及脾免疫细胞分型、脾T细胞p1... 目的 观察4 Gy、6 Gy全身照射后6个月C57BL/6 J小鼠的造血和免疫等功能指标变化。方法对8~12周的C57BL/6 J小鼠分别进行4 Gy和6 Gy全身照射,照射6个月后检测外周血细胞计数及分类、胸腺系数及脾系数、外周血及脾免疫细胞分型、脾T细胞p16表达水平。结果 照射后6个月外周血白细胞、红细胞计数仍然明显低于对照组。血小板与对照组无明显差异。外周血细胞分类结果显示照射组小鼠中性粒细胞比例升高、淋巴细胞比例下降,呈现细胞分化偏移现象。与对照组相比,6 Gy照射后6个月,胸腺系数明显降低(P<0. 05)。脾系数无差异。外周血流式分析,结果显示4 Gy、6 Gy照射后,B淋巴细胞、NK细胞仍然低于对照组,提示受照后6个月未完全恢复。受照组CD4比例高于对照组。CD8、单核细胞与对照组未见差异。脾免疫细胞进行流式分析,结果显示4 Gy和6 Gy照射后6个月,B220对于对照组均有明显下降,均具极显著性差异(P<0. 01)。相比于对照组,6 Gy组脾T细胞p16表达有升高的趋势,但无显著性差异。结论 亚致死剂量照射后6个月各项检测基本恢复,但是外周血分类中性粒持续升高,胸腺系数及外周血、脾B淋巴细胞比例仍低于对照组。提示可能有远期损伤。本项实验数据为中高剂量照射后造血免疫功能长期损伤研究提供了基础数据。 展开更多
关键词 亚致死剂量照射 远期 外周血细胞计数 免疫脏器 免疫分型 小鼠
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老年和青年C57BL/6J小鼠外周血及免疫细胞分型测定分析 被引量：6
4
作者 管博文 卢延华 +3 位作者 苏路路 王玉全 李德冠 孟爱民 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第7期24-28,共5页
目的比较观察老年C57BL/6J小鼠与年轻C57BL/6J小鼠外周血及免疫系统相关指标的差异。方法19月龄和2月龄的C57BL/6J小鼠分别取材检测外周血细胞计数、免疫脏器指数和外周血免疫细胞分型。结果与年轻小鼠比较,老年小鼠外周血中红细胞和血... 目的比较观察老年C57BL/6J小鼠与年轻C57BL/6J小鼠外周血及免疫系统相关指标的差异。方法19月龄和2月龄的C57BL/6J小鼠分别取材检测外周血细胞计数、免疫脏器指数和外周血免疫细胞分型。结果与年轻小鼠比较,老年小鼠外周血中红细胞和血小板计数升高,中性粒细胞比例升高,淋巴细胞比例下降(P<0.001),CD4^+细胞比例明显降低(P<0.001),胸腺指数明显降低(P<0.001)。结论老年小鼠血细胞发生分化偏移,辅助性T细胞数量下降,与年轻小鼠有明显差异,与人造血免疫老龄化改变类似。本项研究为免疫衰老相关问题研究提供基础数据。 展开更多
关键词 C57BL/6J小鼠 外周血细胞计数 免疫脏器系数 外周血免疫分型
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X线全身照射对2型糖尿病KKAy小鼠造血免疫系统功能的影响 被引量：2
5
作者 党女 卢延华 +5 位作者 管博文 苏路路 李程程 荣利 王小春 孟爱民 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期298-304,共7页
目的观察X线全身照射对2型糖尿病模型KKAy小鼠的造血免疫系统功能的损伤作用,并与对照C57小鼠进行比较。方法KKAy小鼠,分为对照组和照射组,照射组小鼠经X线全身照射,剂量4Gy,C57小鼠作为对照。照射后15d检测小鼠的外周血常规,流式细胞... 目的观察X线全身照射对2型糖尿病模型KKAy小鼠的造血免疫系统功能的损伤作用,并与对照C57小鼠进行比较。方法KKAy小鼠,分为对照组和照射组,照射组小鼠经X线全身照射,剂量4Gy,C57小鼠作为对照。照射后15d检测小鼠的外周血常规,流式细胞术检测骨髓中造血祖细胞、造血干细胞和长期造血干细胞的比例,脾中B细胞和T细胞的比例,胸腺中CD4CD8双阳性T细胞、CD4单阳性T细胞和CD8单阳性T细胞的比例。通过粒细胞集落形成能力实验评价小鼠造血祖细胞的功能。结果照射前KKAy小鼠的HSC和LT-HSC的比例低于C57小鼠。4Gy全身照射后,KKAy小鼠的外周血WBC、RBC、PLT、HGB和LYM%分别下降了68.42%、12.17%、8.78%、30.12%、70.84%;骨髓中HPC、HSC和LT-HSC的比例分别下降了34.02%、29.49%、35.74%;脾B细胞和T细胞的比例分别下降了57.85%、58.81%;胸腺CD4CD8双阳性细胞的比例下降了51.70%。KKAy小鼠的骨髓HSC、LT-HSC、外周血RBC和HGB的降低幅度显著低于C57小鼠。结论4Gy全身照射损伤KKAy小鼠的造血免疫系统功能,KKAy小鼠可能比C57小鼠表现出对电离辐射较强的耐受性。 展开更多
关键词 电离辐射 X线 全身照射 KKAY小鼠 2型糖尿病 放疗
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老年和青年SD大鼠外周血及免疫细胞分型测定分析 被引量：3
6
作者 管博文 卢延华 +6 位作者 石桂英 苏路路 王玉全 王卫 魏强 白琳 孟爱民 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第2期64-70,共7页
目的比较老年SD大鼠和青年SD大鼠外周血和免疫细胞分型指标差异。方法12月龄和8周龄的SD大鼠进行外周血细胞计数、白细胞分类、免疫脏器系数、外周血免疫细胞分型、脾免疫细胞分型和脾T细胞P16表达量的检测。结果与青年大鼠相比,老年大... 目的比较老年SD大鼠和青年SD大鼠外周血和免疫细胞分型指标差异。方法12月龄和8周龄的SD大鼠进行外周血细胞计数、白细胞分类、免疫脏器系数、外周血免疫细胞分型、脾免疫细胞分型和脾T细胞P16表达量的检测。结果与青年大鼠相比,老年大鼠外周血白细胞计数,淋巴细胞百分比下降;红细胞,血红蛋白,中性粒细胞百分比,嗜酸性粒细胞百分比和嗜碱性粒细胞百分比升高;血小板和单核细胞百分比未见差异。胸腺系数、脾系数,老年大鼠与青年大鼠未见差异。外周血免疫细胞分型中,老年大鼠辅助T细胞、调节性T细胞、自然杀伤细胞和单核细胞比例升高,B细胞比例降低;脾淋巴细胞分型检测结果显示,老年组大鼠B细胞(CD45RA)低于青年组大鼠(P<0.01),两组CD3未见差异。老年雄性大鼠脾T细胞P16 mRNA表达量与青年雄性大鼠相比有明显升高(P<0.05)。结论老年大鼠外周血细胞及免疫细胞分型改变。脾T细胞P16表达可能作为免疫衰老的生物学标志。文中对检测结果进行了比较分析,将为研究老年疾病及衰老动物模型提供基础数据。 展开更多
关键词 老年SD大鼠 外周血细胞计数及分型 免疫脏器 P16
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SD大鼠老龄化过程中外周血及免疫细胞表型的性别差异研究 被引量：2
7
作者 管博文 卢延华 +6 位作者 白琳 石桂英 苏路路 王玉全 魏强 王卫 孟爱民 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第12期57-63,共7页
目的比较分析不同月龄SD大鼠外周血和免疫器官的免疫细胞分型指标性别差异。方法选用12月龄SD大鼠和2月龄SD大鼠,雌雄各半,检测外周血细胞计数及分类、脏器指数、外周血和脾免疫细胞分型、脾T细胞P16表达量,并对结果进行性别差异比较。... 目的比较分析不同月龄SD大鼠外周血和免疫器官的免疫细胞分型指标性别差异。方法选用12月龄SD大鼠和2月龄SD大鼠,雌雄各半,检测外周血细胞计数及分类、脏器指数、外周血和脾免疫细胞分型、脾T细胞P16表达量,并对结果进行性别差异比较。结果年轻大鼠的各项检测指标未见性别差异。外周血计数与分类结果显示,与青年大鼠比较,老年雌性大鼠白细胞下降;老年雄性大鼠和老年雌性大鼠红细胞上升,两项指标均具有性别差异;老年雄性大鼠和老年雌性大鼠均表现为中性粒百分比上升、淋巴细胞百分比下降、嗜酸性粒细胞百分比升高,未见性别差异;外周血其他指标未见明显改变。老年雌性大鼠胸腺指数低于老年雄性大鼠;老年雄性大鼠脾指数升高,并高于老年雌性大鼠。外周血免疫细胞流式分析结果显示,老年雌性大鼠辅助T细胞、调节T细胞和细胞毒性T细胞上升;老年雌性大鼠B细胞下降;老年雄性大鼠自然杀伤细胞升高;这几项指标均具有性别差异。脾淋巴细胞分型结果显示,老年雌性大鼠CD3+升高,CD45RA+下降。脾T细胞P16表达量老年大鼠P16均升高,未见性别差异。结论本研究各项指标在青年组大鼠未见性别差异,老年大鼠在外周血白细胞、红细胞计数,中性粒、单核细胞百分比;免疫脏器指数;免疫细胞分型分析中调节T细胞,细胞毒T细胞,自然杀伤细胞,B细胞,CD3阳性细胞等指标改变均存在性别差异。提示老年大鼠的免疫系统的内稳态(homeostasis)平衡失调,在老年性改变中的一些指标出现性别差异。本研究结果为研究老年疾病及衰老动物模型提供了性别对老龄化影响的基础数据。 展开更多
关键词 老年SD大鼠 性别差异 免疫细胞分型 免疫脏器 P16
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白消安对2型糖尿病KKA^y小鼠外周血细胞及骨髓细胞的影响 被引量：1
8
作者 党女 卢延华 +1 位作者 管博文 孟爱民 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第1期45-50,共6页
目的观察白消安(busulfan)对2型糖尿病模型KK/upj-Ay/J(KKA^y)小鼠的造血系统功能的损伤作用,并与对照C57BL/6 J(B6)小鼠进行比较。方法雄性KKA^y小鼠,随机分为白消安给药组和溶剂对照组,前者腹腔注射白消安,剂量40 mg/kg,后者注射同等... 目的观察白消安(busulfan)对2型糖尿病模型KK/upj-Ay/J(KKA^y)小鼠的造血系统功能的损伤作用,并与对照C57BL/6 J(B6)小鼠进行比较。方法雄性KKA^y小鼠,随机分为白消安给药组和溶剂对照组,前者腹腔注射白消安,剂量40 mg/kg,后者注射同等剂量的5%的DMSO,B6小鼠进行相同处理分组。给药后15 d称重、计算免疫脏器系数,检测小鼠的外周血计数和分类,流式细胞术检测骨髓中造血祖细胞(hematopoietic progenitor cell,HPC)、造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)和长期造血干细胞(long term-hematopoietic stem cell,LT-HSC)的比例。通过粒细胞巨噬细胞集落形成单位(colony-forming unit-granulocyte and macrophage,CFU-GM)测定实验评价小鼠造血祖细胞的功能。结果白消安给药后15 d,KKA^y小鼠的体重、白细胞(white blood cell,WBC)、红细胞(red blood cell,RBC)、血红蛋白(hemoglobin,HGB)、血小板(blood platelet,PLT)、淋巴细胞(lymphocyte,LYM)、中性粒细胞(neutrophil,NEU)、骨髓中HPC、HSC和LT-HSC的比例均显著降低,CFU-GM数目明显降低,脾和胸腺细胞的比例未见明显变化。白消安给药后,KKA^y小鼠的WBC、RBC、HGB和LYM明显低于B6小鼠,但PLT和HSC的比例明显高于B6小鼠。KKA^y小鼠的PLT和HSC的降低幅度显著低于B6小鼠,而HPC的降低幅度明显高于B6小鼠。结论40 mg/kg白消安给药能损伤小鼠的造血系统功能。白消安给药后,KKA^y小鼠的WBC、RBC、HGB和LYM损伤较重,但PLT和HSC损伤较轻且耐受性更强,而造血祖细胞的耐受性低于B6小鼠。 展开更多
关键词 白消安 KKA^y小鼠 2型糖尿病 造血系统 化疗
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FOXO3A基因敲除小鼠繁殖鉴定及骨髓造血干细胞表型初步分析 被引量：1
9
作者 王玉全 李程程 +4 位作者 苏路路 管博文 卢延华 孟爱民 樊飞跃 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期41-46,共6页
目的繁育和鉴定FOXO3A基因敲除小鼠,选育的FOXO3A基因敲除杂合型小鼠用于保种,纯合型小鼠用于实验。初步分析FOXO3A基因敲除对小鼠造血细胞表型的影响,为后续FOXO3A基因对造血细胞损伤的调节研究奠定基础。方法杂合型雌鼠与野生型雄鼠交... 目的繁育和鉴定FOXO3A基因敲除小鼠,选育的FOXO3A基因敲除杂合型小鼠用于保种,纯合型小鼠用于实验。初步分析FOXO3A基因敲除对小鼠造血细胞表型的影响,为后续FOXO3A基因对造血细胞损伤的调节研究奠定基础。方法杂合型雌鼠与野生型雄鼠交配,选育出杂合型雌鼠和杂合型雄鼠,采用一雄一雌或一雄两雌同笼合养方式进行繁育获得纯合型小鼠;繁育的幼鼠剪趾标号,剪尾提取基因组DNA,采用PCR方法进行基因型鉴定,鉴定获得100 bp/186 bp两条条带的为杂合型小鼠(FOXO3A+/-),鉴定获得186 bp条带的为纯合型小鼠(FOXO3A-/-),鉴定获得100 bp条带的为野生型小鼠(FOXO3A+/+,WT);采用流式细胞术对鉴定出的野生型和纯合型小鼠进行骨髓细胞分型分析。结果 FOXO3A基因敲除小鼠已成功繁殖鉴定,子代基因敲除纯合型小鼠与杂合型小鼠长势正常,与野生型FVB/N小鼠相比外观、生长发育未见明显差异;已得到一定数量的纯合型小鼠用于后续实验;骨髓细胞计数结果显示,FOXO3A基因敲除纯合型小鼠骨髓有核细胞计数与野生型小鼠相比[(6. 167±1. 424) vs.(10±1. 732)],未见明显差异(P=0. 1625);流式分析结果显示:FOXO3A基因敲除小鼠骨髓中造血祖细胞(lin-scal-1^-ckit^+,HPC)比例明显升高(P<0. 05),造血干细胞(lin-scal-1^+ckit^+,HSC)比例没有明显差异;造血干细胞和造血祖细胞数目未发现有明显差异(P>0. 05)。结论经基因型鉴定已成功获得FOXO3A基因敲除小鼠。初步探讨FOXO3A基因敲除对小鼠骨髓细胞计数及分型未见明显影响,FOXO3A基因敲除对小鼠造血细胞的影响需要进一步的实验加以证明。 展开更多
关键词 FOXO3A 基因敲除小鼠 PCR 流式细胞术
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FOXO3A对全身照射小鼠造血系统辐射损伤的影响
10
作者 王玉全 李程程 +7 位作者 苏路路 管博文 卢延华 关菲菲 荣利 王小春 孟爱民 樊飞跃 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第9期10-16,共7页
目的利用FOXO3A基因敲除小鼠探讨FOXO3A在造血系统电离辐射(ionizing radiation,IR)损伤中的影响。方法FOXO3A^-/-小鼠和WT小鼠(FVB/N)分为野生型小鼠对照组(WT组),FOXO3A^-/-小鼠对照组(FOXO3A^-/-组),野生型小鼠照射组(WT+IR),FOXO3A^... 目的利用FOXO3A基因敲除小鼠探讨FOXO3A在造血系统电离辐射(ionizing radiation,IR)损伤中的影响。方法FOXO3A^-/-小鼠和WT小鼠(FVB/N)分为野生型小鼠对照组(WT组),FOXO3A^-/-小鼠对照组(FOXO3A^-/-组),野生型小鼠照射组(WT+IR),FOXO3A^-/-小鼠照射组(FOXO3A^-/-+IR)四组,分别接受假照射和4 Gy X射线全身照射(total body irradiation,TBI),剂量率为0.9 Gy/min。接受TBI后14 d检测FOXO3A^-/-小鼠和WT小鼠脏器指数、外周血和骨髓细胞计数,骨髓细胞分型,造血祖细胞(HPCs)粒细胞巨噬细胞集落形成单位(colony forming unit-granulocyte and macrophage,CFU-GM)形成能力,观察FOXO3A基因敲除对造血系统辐射损伤的影响。结果生理情况下,FOXO3A^-/-小鼠骨髓有核细胞计数下降,HPCs比例升高(P<0.05);小鼠接受4 Gy X射线TBI后14 d,FOXO3A基因敲除会加重电离辐射诱导的HPCs和造血干细胞(HSCs)比例下降,但也会抑制辐射诱导的骨髓有核细胞数下降和造血祖细胞CFU-GM形成能力减退。结论FOXO3A基因敲除破坏造血系统稳态维持,加重TBI小鼠HPCs和HSCs的辐射损伤,对造血细胞辐射敏感性产生一定的影响。FOXO3A在造血系统电离辐射损伤中的调节作用以及能否作为防治损伤的靶点还有待进一步研究。 展开更多
关键词 电离辐射 FOXO3A 造血干细胞 造血祖细胞 活性氧 DNA损伤应答 小鼠
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