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激素型肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组与能量代谢相关性 被引量:37
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作者 卢德赵 沃兴德 +2 位作者 施孟如 李毅 唐利华 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期807-814,共8页
应用凝胶内差异显示电泳技术研究肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组,并从肝线粒体蛋白质组角度阐述肾阳虚与能量代谢的关系.8个分别来自于肾阳虚大鼠和正常大鼠的肝线粒体蛋白质样品(各4个)分别用荧光染料Cy3、Cy5标记,以及8个样品等量混合物... 应用凝胶内差异显示电泳技术研究肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组,并从肝线粒体蛋白质组角度阐述肾阳虚与能量代谢的关系.8个分别来自于肾阳虚大鼠和正常大鼠的肝线粒体蛋白质样品(各4个)分别用荧光染料Cy3、Cy5标记,以及8个样品等量混合物用Cy2标记作为内标,每一Cy3、Cy5标记样品与Cy2标记的内标等量混合后在同一胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱.经DeCyder软件结合内标分析,以肾阳虚组动物与正常组动物肝线粒体蛋白质相差1.2倍以上的蛋白作为差异蛋白,实验共获得16个差异蛋白质,经质谱测定和与蛋白质文库比对,鉴定11个蛋白质.其中,肾阳虚动物热休克蛋白60和70、肌氨酸脱氢酶、氨甲酰磷酸合成酶、亚硫酸盐氧化酶、ATP合酶、醛脱氢酶和NADH脱氢酶表达量增加,而丙酮酸脱氢酶、α酮戊二酸脱氢酶、脂酰辅酶A脱氢酶和鸟氨酸氨基转移酶表达量降低.实验表明,肾阳虚动物能量代谢相关酶的变化与肾阳虚的临床虚寒症状有关. 展开更多
关键词 蛋白质组 肾阳虚 肝线粒体 能量代谢
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温补肾阳药对丙基硫氧嘧啶引起肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响 被引量:27
2
作者 卢德赵 沃兴德 +4 位作者 李毅 唐利华 沃立科 施孟如 杨贞 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期102-107,共6页
目的:应用凝胶内差异显示电泳技术研究温补肾阳药对药物性肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组的影响。方法:正常大鼠、通过喂饲丙基硫氧嘧啶造成肾阳虚模型大鼠和温补肾阳药治疗大鼠的肝线粒体蛋白质经荧光染料Cy2、Cy3、Cy5标记,等量混合后在... 目的:应用凝胶内差异显示电泳技术研究温补肾阳药对药物性肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组的影响。方法:正常大鼠、通过喂饲丙基硫氧嘧啶造成肾阳虚模型大鼠和温补肾阳药治疗大鼠的肝线粒体蛋白质经荧光染料Cy2、Cy3、Cy5标记,等量混合后在同一胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。经DeCyder软件进行差异蛋白质组分析,筛选出16个差异蛋白质。经质谱测定及数据库比对,其中10个蛋白质得到鉴定。结果:肾阳虚时氨甲酰磷酸合成酶1、二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、泛醇-细胞色素C还原酶核心蛋白I、异戊酰辅酶A脱氢酶、热休克蛋白60、琥珀酰CoA合成酶、羟氨基辅酶A脱氢酶/酮脂酰辅酶乙酰辅酶A脱氢酶α亚基、鸟氨酸转氨甲酰酶、谷胱甘肽过氧化物酶表达量均增加,而鸟氨酸氨基转移酶表达量降低。应用温补肾阳药治疗后,上述蛋白质的表达量均有不同程度的纠正。结论:喂饲温补肾阳药的肾阳虚模型大鼠糖、脂类和蛋白质代谢均得以改善,可能与温补肾阳药维护线粒体膜稳定性有关。 展开更多
关键词 蛋白质组 肾阳虚 温补肾阳药 线粒体
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甲状腺切除的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的研究 被引量:19
3
作者 卢德赵 沃兴德 +3 位作者 沃立科 唐利华 李毅 杨贞 《中医药学报》 CAS 2008年第4期11-15,共5页
目的:应用差异蛋白质组学技术研究肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组。方法:正常大鼠和甲状腺切除的肾阳虚模型大鼠的肝线粒体蛋白质经荧光染料Cy3、Cy5标记,与等量Cy2标记的内标混合后在同一胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样... 目的:应用差异蛋白质组学技术研究肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组。方法:正常大鼠和甲状腺切除的肾阳虚模型大鼠的肝线粒体蛋白质经荧光染料Cy3、Cy5标记,与等量Cy2标记的内标混合后在同一胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。经DeCyder6.5软件进行差异蛋白质组分析,并对差异蛋白质进行质谱鉴定。结果:在肾阳虚大鼠肝线粒体中,氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ、乳铁传递蛋白、热休克蛋白60、过氧化氢酶、甲基丙二酸半醛脱氢酶、类钙激活中性蛋白酶、电子传递黄素蛋白、酯酶同工酶ES1、谷胱甘肽过氧化物、ATP合成酶和ATP酶质子通道蛋白表达量均增加,而二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、脂酰辅酶A脱氢酶、鸟氨酸转氨酶和鸟苷酸结合调节蛋白表达量降低。结论:肾阳虚大鼠可能因糖类和脂类物质分解代谢受抑以及细胞内信号转导异常而出现虚寒症状。 展开更多
关键词 肾阳虚 蛋白质组 线粒体 甲状腺
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丹参酮ⅡA对泡沫细胞胆固醇平衡的影响 被引量:9
4
作者 卢德赵 林韬琦 +2 位作者 王萍儿 杨贞 沃兴德 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期402-406,共5页
目的通过体外细胞实验阐明丹参酮ⅡA对泡沫细胞胆固醇平衡的影响。方法体外培养小鼠RAW264.7细胞,以氧化型低密度脂蛋白诱导为泡沫细胞模型,并用不同浓度的丹参酮ⅡA进行处理,通过油红O染色观察细胞内脂质堆积情况,酶比色法定量检测细... 目的通过体外细胞实验阐明丹参酮ⅡA对泡沫细胞胆固醇平衡的影响。方法体外培养小鼠RAW264.7细胞,以氧化型低密度脂蛋白诱导为泡沫细胞模型,并用不同浓度的丹参酮ⅡA进行处理,通过油红O染色观察细胞内脂质堆积情况,酶比色法定量检测细胞内总胆固醇和胆固醇酯的变化,荧光定量PCR和WesternBlot检测细胞中CD36、三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、肝脏X受体α(LXRα)、过氧化体增殖物激活型受体α(PPARα)及PPARγ的mRNA和蛋白表达。结果 0~20 mg/L的丹参酮ⅡA对泡沫细胞增殖活力无明显影响,20 mg/L丹参酮ⅡA干预后,泡沫细胞内胆固醇酯与总胆固醇的比值显著降低,细胞内脂质累积减少,并上调AB-CA1、LXRα和PPARα的mRNA和蛋白表达,但对CD36表达无明显作用。结论丹参酮ⅡA能抑制泡沫细胞的形成,其机制可能是通过诱导PPARα、LXRα和ABCA1表达,促进胆固醇的外排。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 胆固醇平衡 泡沫细胞 氧化型低密度脂蛋白
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中医不同证型乳腺增生患者血清蛋白质组的研究 被引量:8
5
作者 卢德赵 沃立科 +4 位作者 赵虹 楼丽华 沃兴德 唐利华 李毅 《中华中医药学刊》 CAS 2010年第8期1613-1616,共4页
目的:应用凝胶内差异显示电泳和质谱技术研究不同证型乳腺增生病患者血清蛋白质组。方法:收集正常人及不同证型乳腺增生病患者血清,去除高丰度蛋白质后分别用Cy3或Cy5标记,每一对Cy3和Cy5标记样品都与一个Cy2标记的内标等量混合,上样于... 目的:应用凝胶内差异显示电泳和质谱技术研究不同证型乳腺增生病患者血清蛋白质组。方法:收集正常人及不同证型乳腺增生病患者血清,去除高丰度蛋白质后分别用Cy3或Cy5标记,每一对Cy3和Cy5标记样品都与一个Cy2标记的内标等量混合,上样于同一胶中进行电泳分离,经不同光激发下扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。所获得的图谱经DeCyder6.5软件进行分析,筛选表达量有显著差异的蛋白质进行质谱鉴定。结果:与正常人相比,在乳腺增生患者血清中抗凝血酶lii、富含亮氨酸的α-2糖蛋白、HCCR结合蛋白2、结合珠蛋白2和转甲状腺蛋白及其变异体表达量增加。而SP40,40、Ras association and pleckstrin homology domains 1 iso-form3表达量下降。在不同证型乳腺增生患者血清中,抗凝血酶lii和SP40,40在肝郁气滞型表达量最高,痰瘀互结型次之,而冲任失调型表达量少;HCCRBP2在痰瘀互结型中表达量最高,在肝郁气滞型中表达量最低;转甲状腺素蛋白变异体在肝郁气滞型、冲任失调型和痰瘀互结型中表达依次降低。结论:这些蛋白质可能与乳腺增生病不同证型相关,可以作为乳腺增生病临床中医辨证论治的候选客观指标。 展开更多
关键词 乳腺增生 蛋白质组 凝胶内差异显示电泳 证型
原文传递
温补肾阳药对肾上腺切除的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响 被引量:6
6
作者 卢德赵 沃兴德 +4 位作者 唐利华 李毅 施孟如 沃立科 杨贞 《中华中医药学刊》 CAS 2008年第4期744-747,共4页
目的:应用凝胶内差异显示电泳技术和质谱技术研究温补肾阳药对肾上腺切除的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响。方法:通过切除两侧肾上腺造成肾阳虚模型大鼠和温补肾阳药治疗大鼠肝线粒体蛋白质经荧光染料Cy3、Cy5标记,与等量Cy2标记的... 目的:应用凝胶内差异显示电泳技术和质谱技术研究温补肾阳药对肾上腺切除的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响。方法:通过切除两侧肾上腺造成肾阳虚模型大鼠和温补肾阳药治疗大鼠肝线粒体蛋白质经荧光染料Cy3、Cy5标记,与等量Cy2标记的内标混合后在同一胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。利用DeCyder软件进行差异蛋白质组分析,筛选出18个差异蛋白质进行质谱鉴定,其中15个蛋白质得到鉴定。结果:经温补肾阳药治疗后,肾阳虚动物氨甲酰磷酸合成酶、过氧化氢酶、二氢硫辛酸脱氢酶、热休克蛋白60、亚硫酸氧化酶、ATP合成酶、醛脱氢酶、丙酮酸脱氢酶、3-巯基丙酮酸转硫酶、腺苷酸激酶同工酶5、谷胱甘肽过氧化物酶表达均增高。结论:温补肾阳药可能通过加快糖、脂类、蛋白质和核酸分解代谢,加快ATP合成以及清除自由基和过氧化物,维持线粒体膜稳定性,从而起到治疗肾阳虚的作用。 展开更多
关键词 肾阳虚 线粒体 蛋白质组 温补肾阳药
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转甜菜碱醛脱氢酶基因水稻的获得及其耐盐性研究 被引量:11
7
作者 卢德赵 王慧中 +3 位作者 华志华 颜美仙 钱前 黄大年 《科技通报》 北大核心 2003年第3期179-182,共4页
利用农杆菌介导法和基因枪法将来源于山菠菜的甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)转入水稻基因组,并获得了具有一定耐盐性状的转基因植株,在0.5%NaCl盐浓度下生长良好,同时对Kan和G418的筛选效果及两种转化方法进行了比较.
关键词 遗传学 甜菜碱醛脱氢酶基因 基因转化 耐盐性
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肾上腺切除的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的研究 被引量:5
8
作者 卢德赵 沃兴德 +3 位作者 施孟如 沃立科 唐利华 李毅 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期350-353,共4页
关键词 肾阳虚 线粒体 蛋白质组 能量代谢
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肝肾阴虚型甲亢和脾肾阳虚型甲减患者血清蛋白质组的比较分析 被引量:2
9
作者 卢德赵 宋俊玲 +4 位作者 王萍儿 杨贞 唐利华 李毅 沃兴德 《浙江中医药大学学报》 CAS 2012年第1期23-26,共4页
[目的]通过对肝肾阴虚型甲亢和脾肾阳虚型甲减患者血清蛋白质组的分析,阐述肝肾阴虚和脾肾阳虚的物质基础。[方法]将正常人、甲亢和甲减患者血清用亲和层析法除去其中的高丰度蛋白质,再用双向电泳技术分析不同组样品蛋白质组的变化,所... [目的]通过对肝肾阴虚型甲亢和脾肾阳虚型甲减患者血清蛋白质组的分析,阐述肝肾阴虚和脾肾阳虚的物质基础。[方法]将正常人、甲亢和甲减患者血清用亲和层析法除去其中的高丰度蛋白质,再用双向电泳技术分析不同组样品蛋白质组的变化,所获的差异蛋白质用质谱进行鉴定。[结果]与正常人相比,肝肾阴虚型甲亢患者血清中RBP和TTR的表达量降低,而IGF-2、FDA-C、NF-κB及PTP表达量升高;脾肾阳虚型甲减患者TTR表达量升高,NHE-1、ZAG、UCH、IGF-2和MHC–II蛋白则表达量下降。肝肾阴虚型甲亢和脾肾阳虚型甲减相比,ProapoA-Ⅰ和TTR表达量降低,而NDU、SCDH/SCR、PK、Cyt P450蛋白、IGF-2和IRF-5表达增加。[结论]肝肾阴虚型甲亢患者机体代谢活跃,而脾肾阳虚型甲减患者则机体代谢减低,合成代谢的速度>分解代谢的速度。肝肾阴虚型甲亢血清IGF-2表达升高,脾肾阳虚型甲减则正好相反,说明血清IGF-2具有成为中医辨证肝肾阴虚和脾肾阳虚血清标志物的可能性。 展开更多
关键词 肝肾阴虚 脾肾阳虚 甲亢 甲减 蛋白质组
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肾阳虚证研究的现状与思考 被引量:12
10
作者 卢德赵 沃兴德 《浙江中医药大学学报》 CAS 2007年第3期399-401,共3页
从内分泌功能、免疫功能和能量代谢三个角度对目前肾阳虚证的研究状况作了分析,并提出如何应用基因组和蛋白质组技术进一步探索肾阳虚证的本质。
关键词 肾阳虚证 基因组 蛋白质组
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蛋白质组学技术在中医药研究中的应用 被引量:6
11
作者 卢德赵 沃兴德 《浙江中西医结合杂志》 2007年第4期262-264,共3页
关键词 蛋白质组学技术 中医药 研究应用
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借鉴浙江省大学生生命科学竞赛提高生物化学实验教学质量 被引量:1
12
作者 卢德赵 杨贞 窦晓兵 《教育界(高等教育)》 2018年第9期46-47,共2页
生物化学课程是生物学、医学、农学等学科各专业的共同专业基础课.浙江省大学生生命科学竞赛通过鼓励学生大胆创新,自主学习、思考和设计,提高了大学生实验设计、实验操作和数据分析的能力.文章结合生物化学实验的教学现状,通过与生命... 生物化学课程是生物学、医学、农学等学科各专业的共同专业基础课.浙江省大学生生命科学竞赛通过鼓励学生大胆创新,自主学习、思考和设计,提高了大学生实验设计、实验操作和数据分析的能力.文章结合生物化学实验的教学现状,通过与生命科学竞赛相比较,改善教学方法,提高生物化学教学质量. 展开更多
关键词 生物化学 实验教学 生命科学竞赛 教学改革
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乳腺增生组织蛋白质组的凝胶内差异显示电泳分析
13
作者 卢德赵 沃兴德 +4 位作者 沃立科 唐利华 李毅 楼丽华 赵虹 《现代生物医学进展》 CAS 2006年第10期30-33,共4页
目的:建立具有高分辨率和稳定性的乳腺增生组织蛋白质组的双向电泳图谱,并对其进行差异蛋白质组分析。方法:取乳腺增生病患者增生部位及正常部位乳腺组织,匀浆提取乳腺组织总蛋白,分别用Cy3或Cy5标记,每一对Cy3和Cy5标记样品都与一个... 目的:建立具有高分辨率和稳定性的乳腺增生组织蛋白质组的双向电泳图谱,并对其进行差异蛋白质组分析。方法:取乳腺增生病患者增生部位及正常部位乳腺组织,匀浆提取乳腺组织总蛋白,分别用Cy3或Cy5标记,每一对Cy3和Cy5标记样品都与一个Cy2标记的内标等量混合,上样于同一胶中进行电泳分离,经不同光激发下扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。所获得的图谱经DeCyder软件进行分析。结果:在乳腺增生病增生的组织中,有12个蛋白质表达水平显著增加,另外3个蛋白质表达水平显著下降。结论:利用DIGE技术可以作胶内对比分析,也可以根据内标消除胶与胶之间的差异,提高统计的可信度;分析所得的15个差异蛋白质可能与乳腺增生疾病的发生与发展有关。 展开更多
关键词 乳腺增生 蛋白质组 凝胶内差异显示电泳
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姜黄素对爪蟾卵母细胞表达人低密度脂蛋白受体的影响 被引量:17
14
作者 范春雷 沃兴德 +2 位作者 罗艳 卢德赵 钱颖 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期432-435,共4页
目的在爪蟾卵母细胞中建立人低密度脂蛋白受体(lowdensitylipoproteinreceptor,LDL- R)表达系统,并研究姜黄素降脂作用的分子机理。方法将含人LDL R的表达质粒p3 7LDL导入细胞核中,用免疫荧光、配体荧光以及免疫胶体金标记透射电镜等方... 目的在爪蟾卵母细胞中建立人低密度脂蛋白受体(lowdensitylipoproteinreceptor,LDL- R)表达系统,并研究姜黄素降脂作用的分子机理。方法将含人LDL R的表达质粒p3 7LDL导入细胞核中,用免疫荧光、配体荧光以及免疫胶体金标记透射电镜等方法检测细胞膜上LDL- R的表达情况;用不同浓度的姜黄素对爪蟾卵母细胞人LDL- R基因的表达进行干预,并用酶联免疫吸附分析法测定LDL- R的表达量。结果人LDL -R基因在爪蟾卵母细胞膜上得到表达;姜黄素具有增强其表达的作用,且有明显的量效关系。结论姜黄素降血脂和抗动脉粥样硬化的作用途径之一可以是通过促进LDL- R基因的表达,增加细胞对低密度脂蛋白胆固醇的吸收,从而降低血清胆固醇。 展开更多
关键词 低密度脂蛋白受体 姜黄素 细胞表达 爪蟾卵母细胞 酶联免疫吸附分析法 低密度脂蛋白胆固醇 receptor 抗动脉粥样硬化 LDL 胶体金标记 血清胆固醇 表达系统 分子机理 降脂作用 表达质粒 免疫荧光 表达情况 透射电镜 不同浓度
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1-磷酸甘露醇脱氢酶基因转化水稻的研究 被引量:16
15
作者 王慧中 刘俊君 +6 位作者 卢德赵 赵艳 颜美仙 钱前 彭学贤 陈受宜 黄大年 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期6-10,共5页
PCR和 Southern blotting检测表明 ,来自大肠杆菌的 mtl D基因已通过农杆菌介导整合进水稻基因组。mtl D基因在 T1代出现分离 ,T2 代出现纯系。在 0 .75% Na Cl胁迫下 ,7个转基因 T3 代株系都能检测到 mtl D酶活性 ,与对照相比细胞膜的... PCR和 Southern blotting检测表明 ,来自大肠杆菌的 mtl D基因已通过农杆菌介导整合进水稻基因组。mtl D基因在 T1代出现分离 ,T2 代出现纯系。在 0 .75% Na Cl胁迫下 ,7个转基因 T3 代株系都能检测到 mtl D酶活性 ,与对照相比细胞膜的相对电导率和大分子渗漏值明显降低。部分转基因株系能在 1 .0 % Na Cl浓度下正常生长 ,而对照在 0 .5% Na Cl浓度下已不能存活。通过有性杂交途径实现了 mtl D和 gut D两个基因的聚合 ,部分杂交后代株系能在 1 .2 5% Na Cl胁迫下正常生长结实。 展开更多
关键词 水稻 1-磷酸甘露醇脱氢酶基因 6-磷酸山梨醇脱氢酶基因 转基因植株 耐盐性 产量性性 有性杂交 农艺性状
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转基因与常规杂交相结合改良水稻耐盐性 被引量:21
16
作者 郭龙彪 薛大伟 +7 位作者 王慧中 陈受宜 卢德赵 曾大力 高振宇 颜美仙 黄大年 钱前 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期141-146,共6页
通过农杆菌介导法和基因枪法将CMO、BADH、muD、gutD和SAMDC基因以单价或双价的形式导入水稻常规品种中,再结合常规杂交育种,选育5价强耐盐性的转基因水稻植株。1~5价9类组合的水稻品系,经PCR分子检测.在转基因后代中多价目的基因... 通过农杆菌介导法和基因枪法将CMO、BADH、muD、gutD和SAMDC基因以单价或双价的形式导入水稻常规品种中,再结合常规杂交育种,选育5价强耐盐性的转基因水稻植株。1~5价9类组合的水稻品系,经PCR分子检测.在转基因后代中多价目的基因聚合,遗传稳定,且分子检测与田间耐盐性的表现一致。转基因植株在盐碱地中能正常生长,拓展了水稻常规品种耐盐性。并已获得耐0.5%~1.0%NaCI的T秀水11——品3、品6和品7等9份优良株系或中间材料。 展开更多
关键词 耐盐相关基因 遗传转化 常规杂交 新种质 水稻
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温补肾阳药对激素依赖性肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组影响的研究 被引量:14
17
作者 唐利华 沃兴德 +3 位作者 卢德赵 施孟如 李毅 沃立科 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期169-175,共7页
目的利用双向凝胶内差异显示电泳技术,分析温补肾阳药对激素依赖性肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组影响。方法正常大鼠、肾阳虚大鼠及温补肾阳药治疗大鼠肝线粒体蛋白质样品分别用荧光染料Cy2,Cy3,Cy5标记,经双向电泳后用不同波长光激发扫... 目的利用双向凝胶内差异显示电泳技术,分析温补肾阳药对激素依赖性肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组影响。方法正常大鼠、肾阳虚大鼠及温补肾阳药治疗大鼠肝线粒体蛋白质样品分别用荧光染料Cy2,Cy3,Cy5标记,经双向电泳后用不同波长光激发扫描后得到不同样品的蛋白质组图谱,经DeCyder软件分析,以肾阳虚动物与正常动物肝线粒体蛋白质相差1·2倍以上的蛋白作为差异蛋白,共获得16个差异蛋白质,经质谱测定和与蛋白质文库比对,其中11个蛋白质得到鉴定。结果肾阳虚动物由于肾上腺皮质功能受损,引起热休克蛋白60和70含量增加,可能起到调整处于应激状态的细胞存活、保护细胞免受损伤的作用;肾阳虚动物糖代谢和脂代谢功能降低,而蛋白质代谢和核酸代谢功能增强,表现为二氢硫辛酰胺脱氢酶和脂酰辅酶A脱氢酶活性降低,而肌氨酸脱氢酶、氨甲酰磷酸合成酶和亚硫酸氧化酶活性增加;肾阳虚动物由于三羧酸循环和脂肪酸β-氧化功能障碍,引起ATP合酶、醛脱氢酶和NADH脱氢酶活性代偿性增加,试图通过增加ATP的产量以缓解能量代谢的不足;但肾阳虚动物由于鸟氨酸氨基转移酶活性降低,导致储存能量的肌酸合成降低,使产生的ATP大部分通过热能形式消耗掉,从而导致肾阳虚的临床虚寒症状。应用温补肾阳药治疗后使热休克蛋白60更趋增加,可能加强对细胞的保护作用;温补肾阳药增加二氢硫辛酰胺脱氢酶的活性,可通过改善糖代谢和促进三羧酸循环功能使机体的能量代谢增强;温补肾阳药还可以通过增加ATP合酶和醛脱氢酶的含量,使ATP的产量增加,缓解能量代谢功能障碍。结论温补肾阳药可以通过调整线粒体内多种与能量代谢相关蛋白质表达而起到治疗肾阳虚的作用。 展开更多
关键词 蛋白质组 肾阳虚 温补肾阳药 线粒体 能量代谢
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桔梗多糖的分离纯化与含量测定 被引量:11
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作者 贾林 陆金健 +3 位作者 卢德赵 施佳杰 周文雅 沃兴德 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第17期83-86,共4页
利用离子交换凝胶柱层析法分离纯化桔梗多糖,并对纯化组分进行纯度鉴定和糖含量及蛋白质含量测定。桔梗饮片经热水浸提、乙醇分步沉淀得桔梗粗多糖PPS80,Sevage法脱蛋白后,通过DEAE-Sepharose FF离子交换和Sephadex G-75凝胶柱层析进行... 利用离子交换凝胶柱层析法分离纯化桔梗多糖,并对纯化组分进行纯度鉴定和糖含量及蛋白质含量测定。桔梗饮片经热水浸提、乙醇分步沉淀得桔梗粗多糖PPS80,Sevage法脱蛋白后,通过DEAE-Sepharose FF离子交换和Sephadex G-75凝胶柱层析进行纯化鉴定。分别采用苯酚-硫酸法和考马斯亮蓝染色法测定纯化后各组分的糖和蛋白质含量。试验结果表明,从桔梗粗多糖PPS80中分离得到2个均一性组分PPS80-I和PPS80-Ⅱ,糖含量分别为90.32%和86.75%,蛋白质含量分别为0.48%和1.96%。该试验首次采用DEAE-Sepharose FF离子交换柱层析结合Sephadex G-75凝胶柱层析有效分离纯化出桔梗多糖均一性组分,为桔梗多糖的进一步研究提供基础。 展开更多
关键词 多糖 离子交换柱层析 凝胶层析 DEAE-Sepharose FF SEPHADEX G-75
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甲亢型肾阴虚大鼠肝线粒体蛋白质组的研究 被引量:11
19
作者 沃兴德 丁慧登 +4 位作者 卢德赵 龚文君 杨贞 李毅 唐利华 《中华中医药学刊》 CAS 2009年第12期2469-2473,共5页
目的:应用双向电泳技术和质谱技术研究甲亢型肾阴虚大鼠肝线粒体蛋白质组,并从肝线粒体蛋白质组角度阐述肾阴虚与能量代谢的关系。方法:双向电泳分离正常大鼠和甲状腺素造成的肾阴虚模型大鼠肝线粒体蛋白质,用银染方法染色,经扫描得到... 目的:应用双向电泳技术和质谱技术研究甲亢型肾阴虚大鼠肝线粒体蛋白质组,并从肝线粒体蛋白质组角度阐述肾阴虚与能量代谢的关系。方法:双向电泳分离正常大鼠和甲状腺素造成的肾阴虚模型大鼠肝线粒体蛋白质,用银染方法染色,经扫描得到蛋白质组图谱,用ImageMaster 2D 6.0软件进行差异蛋白质组分析,筛选差异在2倍以上的蛋白质作为差异蛋白,进行质谱鉴定和生物信息学分析。结果:肾阴虚大鼠氨甲酰磷酸合酶Ⅰ、转甲状腺素蛋白D链表达量降低,短链-3-羟酰辅酶A脱氢酶、线粒体分裂蛋白1、谷胱甘肽硫转移酶Mu1、核有丝分裂器蛋白1、凋亡抑制蛋白3、热休克蛋白60、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶1β亚单位、核转录因子-kB2、BNIP1 protein、鸟氨酸转氨酶表达量均增加。结论:肾阴虚大鼠能量代谢活跃,线粒体内物质氧化分解作用加强,柠檬酸循环和氧化磷酸化加速。肾阴虚大鼠存在以NF-kB过量表达为主的免疫炎性细胞因子紊乱和凋亡抑制状态。这些发现提示肾阴虚证的发病机理和能量代谢亢进、炎性细胞因子紊乱、凋亡抑制状态有相关性。 展开更多
关键词 肾阴虚 线粒体 蛋白质组 能量代谢 NF-KB
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电针对佐剂性关节炎大鼠滑膜蛋白质组的影响 被引量:9
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作者 祝骥 董浙清 +2 位作者 吴敏 许颖龄 卢德赵 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第4期971-975,I0005,共6页
目的:研究电针对佐剂性关节炎大鼠滑膜蛋白质组的影响,分析电针治疗类风湿关节炎的作用机制。方法:在大鼠右后足掌面由掌腱膜向踝关节处皮下注入0.1 m L弗氏完全佐剂,诱发佐剂性关节炎大鼠模型。并用0.25 mm×40 mm针灸针刺入大鼠一... 目的:研究电针对佐剂性关节炎大鼠滑膜蛋白质组的影响,分析电针治疗类风湿关节炎的作用机制。方法:在大鼠右后足掌面由掌腱膜向踝关节处皮下注入0.1 m L弗氏完全佐剂,诱发佐剂性关节炎大鼠模型。并用0.25 mm×40 mm针灸针刺入大鼠一侧"足三里"和"昆仑"穴,深度为5 mm,并连接HANS电针仪进行电针治疗,调节电针仪频率2 Hz,强度2 m A,每天1次,每次30 min,连续针灸28日后,检测各组大鼠足跖肿胀度和痛阈的变化,并分离大鼠滑膜总蛋白质,用双向电泳法建立蛋白质组图谱,经Image Master 2D 6.0软件进行分析后,筛选差异表达的蛋白质进行质谱鉴定。结果:佐剂性关节炎大鼠经电针"足三里"、"昆仑"穴治疗28日后,大鼠足跖肿胀度明显下降,痛阈值增加。蛋白质组学方法分析了电针治疗前后关节炎大鼠滑膜蛋白质组的变化,共筛选并鉴定了20个差异蛋白质,其中表皮生长因子、F-box蛋白、WDR74蛋白、内质网蛋白29、磷酸丙糖异构酶、成纤维细胞生长因子1型受体、醛脱氢酶、酪氨酸激酶、GTP酶、GTP酶、肌球蛋白轻链、尿嘧啶核苷合成酶、ATP合成酶、细胞色素P450、谷胱甘肽巯基转移酶、核苷二磷酸激酶B、半胱氨酸蛋白酶抑制剂B、乙醛脱氢酶表达量降低,而二甲基腺苷转移酶和葡萄糖转运体4表达量增加。结论:电针刺激"足三里"和"昆仑"穴对佐剂性关节炎具有较好的疗效,其机制可能是通过调节滑膜细胞信号传导、下调细胞内能量代谢和核苷酸生物合成,从而抑制滑膜增生。 展开更多
关键词 佐剂性关节炎 滑膜 蛋白质组 电针
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