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玉米低聚肽和小麦低聚肽及其金属螯合物的抗氧化和抗过敏活性 被引量：1
1
作者 卢知浩 赵晓涵 +5 位作者 裴晨皓 冯晓文 程青丽 谷瑞增 李国明 刘文颖 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第14期35-40,共6页
以分析玉米低聚肽和小麦低聚肽理化性质为基础,对2种低聚肽及玉米低聚肽-Ca螯合物与小麦低聚肽-Fe螯合物2种金属螯合物的抗氧化能力和抗过敏活性进行研究。利用DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力及还原能力测试3种方法评价样品的抗... 以分析玉米低聚肽和小麦低聚肽理化性质为基础,对2种低聚肽及玉米低聚肽-Ca螯合物与小麦低聚肽-Fe螯合物2种金属螯合物的抗氧化能力和抗过敏活性进行研究。利用DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力及还原能力测试3种方法评价样品的抗氧化能力,并选择透明质酸酶抑制法评价样品的抗过敏活性。抗氧化能力分析表明,4种样品均有较强的抗氧化能力,且在羟自由基清除能力测试中,2种金属螯合物的羟自由基清除率明显高于对应的低聚肽。抗过敏活性分析表明,在质量浓度<20 mg/mL时,低聚肽金属螯合物的透明质酸酶抑制率远高于对应的低聚肽。这与羟自由基测试的结果类似,可见该条件下样品的抗氧化能力和抗过敏活性存在一定的正相关联系。而质量浓度为20~100 mg/mL时低聚肽的抑制率随浓度明显增大,螯合物的抑制率增长则趋于平缓。螯合物在质量浓度<20 mg/mL条件下同时具有较强的抗氧化能力和抗过敏活性,可在食品药品方向进一步应用发展。 展开更多
关键词 玉米低聚肽 小麦低聚肽 铁 钙 螯合物 抗氧化 抗过敏
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牡蛎多糖结构特征、理化特性及抗氧化活性研究 被引量：4
2
作者 刘良伟 任杰 +5 位作者 侯俊财 李亚楠 卢知浩 韩爽 刘飞 刘文颖 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期57-63,共7页
该文研究了牡蛎多糖(oyster polysaccharide,OPS)的结构特征、热稳定性、流变特性和体外抗氧化活性,采用酶解法和Sevage法除蛋白提取牡蛎多糖,通过苯酚-硫酸法、考马斯亮蓝法、高效液相凝胶渗透色谱法(high performance liquid gel perm... 该文研究了牡蛎多糖(oyster polysaccharide,OPS)的结构特征、热稳定性、流变特性和体外抗氧化活性,采用酶解法和Sevage法除蛋白提取牡蛎多糖,通过苯酚-硫酸法、考马斯亮蓝法、高效液相凝胶渗透色谱法(high performance liquid gel permeation chromatography,HAGPC)、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP)衍生化多糖水解物法、扫描电镜及紫外可见光谱和红外光谱分析等方法对其总糖含量、分子质量、单糖组成、基团构成、微观结构、流变特性和抗氧化活性进行研究。结果表明OPS是一种杂多糖,分子质量为623.24 kDa,由葡萄糖、甘露糖、核糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖和岩藻糖组成,主要是葡萄糖,其含量为95.35%,是通过β-糖苷键将葡萄糖连接而成的多聚糖。OPS微观表面比较疏松,呈珊瑚状结构。OPS存在糖类特征基团,具有吡喃环和3股螺旋结构。经热重分析得出OPS具有较好的热稳定性。多糖溶液是剪切变稀的假塑性流体,且0.5%(质量分数)的OPS溶液具有良好的黏度。OPS对DPPH自由基、ABTS阳离子自由基、亚铁离子螯合能力和羟自由基的半数抑制浓度(IC_(50)值)分别为0.36、2.71、4.15、1.21 mg/mL。研究结果为进一步开发牡蛎多糖的利用价值,特别是在增稠剂和抗氧化剂方面的应用提供依据,为牡蛎资源的综合开发利用,促进牡蛎的高值高效加工提供参考。 展开更多
关键词 牡蛎多糖 化学组成 结构表征 理化特性 抗氧化活性
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玉米低聚肽-维生素D 3和小麦低聚肽-维生素D 3微胶囊的制备与表征
3
作者 卢知浩 刘放 +5 位作者 李嘉兴 刘家生 张新雪 卢素情 刘文颖 李国明 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期108-113,121,共7页
以玉米低聚肽和小麦低聚肽为壁材,维生素D_(3)油为芯材,吐温-20为乳化剂,利用喷雾干燥法成功制备了2种低聚肽包埋维生素D_(3)微胶囊,对比分析了两类微胶囊单因素条件差异原因,并利用正交试验法筛选出玉米肽微胶囊和小麦肽微胶囊的最佳... 以玉米低聚肽和小麦低聚肽为壁材,维生素D_(3)油为芯材,吐温-20为乳化剂,利用喷雾干燥法成功制备了2种低聚肽包埋维生素D_(3)微胶囊,对比分析了两类微胶囊单因素条件差异原因,并利用正交试验法筛选出玉米肽微胶囊和小麦肽微胶囊的最佳制备条件均为喷雾干燥温度150℃、芯材壁材比1∶20、固形物质量浓度0.15 g/mL,包埋率分别为75.8%和73.8%。微胶囊稳定性分析表明,两类微胶囊均有较好的热稳定性、溶解性和胃环境缓释作用。 展开更多
关键词 玉米低聚肽 小麦低聚肽 维生素D 微胶囊
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小麦低聚肽螯合铁的制备与结构表征
4
作者 孙传强 张新雪 +6 位作者 刘家生 刘放 卢知浩 付少委 谷瑞增 刘文颖 侯俊财 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期194-200,共7页
以小麦低聚肽和FeCl_(2)为原料,采用单因素试验和响应面中心组合设计法研究了制备小麦低聚肽螯合铁的最佳工艺,结果表明:温度为60℃,肽盐质量比为6∶1,pH为5,螯合反应时间为55.0 min时,螯合率为(62.61±0.84)%,产物得率为(51.13... 以小麦低聚肽和FeCl_(2)为原料,采用单因素试验和响应面中心组合设计法研究了制备小麦低聚肽螯合铁的最佳工艺,结果表明:温度为60℃,肽盐质量比为6∶1,pH为5,螯合反应时间为55.0 min时,螯合率为(62.61±0.84)%,产物得率为(51.13±1.16)%。通过傅里叶变换红外光谱分析小麦低聚肽螯合前后结构特征变化,结果表明:螯合前后物质的结构发生了变化,对光吸收性能发生改变,螯合物中Fe^(2+)与NH_(2)^(+)以及—COO—形成配位键,说明成功生成了一种新型小麦低聚肽铁螯合物,具有营养保健和补铁功能价值。 展开更多
关键词 小麦低聚肽 铁 螯合物 响应面分析 单因素试验 结构表征
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牡蛎蛋白饮料中潜在过敏原蛋白的原核表达及线性表位鉴定
5
作者 卢知浩 程青丽 +5 位作者 冯晓文 赵晓涵 谷瑞增 鲁军 刘文颖 李国明 《饮料工业》 2023年第3期11-18,共8页
目的:牡蛎存在致敏性是影响其作为饮料原料发展的主要原因,牡蛎中的肌浆钙结合蛋白(sarcoplasmic calcium-binding protein,SCP)在细胞和肌肉功能中起着至关重要的作用,已被确定为牡蛎中的过敏原。为研究该类过敏原的具体致敏性原理,对... 目的:牡蛎存在致敏性是影响其作为饮料原料发展的主要原因,牡蛎中的肌浆钙结合蛋白(sarcoplasmic calcium-binding protein,SCP)在细胞和肌肉功能中起着至关重要的作用,已被确定为牡蛎中的过敏原。为研究该类过敏原的具体致敏性原理,对其线性表位进行鉴定。方法:以太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)的SCP氨基酸序列为基础,制备并鉴定了分子量为21 kDa的重组SCP(rSCP),并作为后续实验材料,建立了动物致敏模型进行实验。结果:rSCP与大鼠血清具有较强的IgE结合活性,过敏反应能引起大鼠脏器发生病变。最重要的是,五个表位肽首次通过间接竞争酶联免疫吸附实验(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,icELISA)鉴定为线性免疫显性表位。结论:线性表位研究对于理解人类对牡蛎的超敏反应具有重要意义,可为判断牡蛎蛋白饮料的致敏性奠定理论基础,并有助于提供有效的预防措施和治疗方案,促进该类饮料产品的发展。 展开更多
关键词 太平洋牡蛎 重组肌浆钙结合蛋白 线性表位 过敏原
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玉米低聚肽螯合铁(Ⅱ)的制备和结构表征 被引量：1
6
作者 张新雪 卢知浩 +3 位作者 刘家生 刘放 付少委 刘文颖 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第4期243-251,共9页
以玉米低聚肽和氯化亚铁为原料制备玉米低聚肽螯合铁(Ⅱ),以得率和螯合率评价螯合效果,通过单因素实验、响应面中心组合设计和验证实验确定最佳工艺。通过高效液相色谱仪(HPLC)测定玉米低聚肽螯合铁(Ⅱ)的氨基酸组成,并通过傅里叶变换... 以玉米低聚肽和氯化亚铁为原料制备玉米低聚肽螯合铁(Ⅱ),以得率和螯合率评价螯合效果,通过单因素实验、响应面中心组合设计和验证实验确定最佳工艺。通过高效液相色谱仪(HPLC)测定玉米低聚肽螯合铁(Ⅱ)的氨基酸组成,并通过傅里叶变换红外光谱(FTIR)和扫描电镜(SEM)对玉米低聚肽螯合铁(Ⅱ)的结构进行表征。结果表明,玉米低聚肽螯合铁(Ⅱ)的最佳制备工艺为肽盐比5:1,pH7.0,螯合时间35 min,螯合温度65℃。此条件下,玉米低聚肽螯合铁(Ⅱ)的得率为46.59%±1.69%,铁(Ⅱ)的螯合率为51.75%±2.10%。玉米低聚肽螯合铁(Ⅱ)中必需氨基酸含量占比25.58%,相对分子质量小于1000 u的组分占比高达89.77%。FTIR结果表明,铁(Ⅱ)与玉米低聚肽末端羧基或氨基中的氮原子、氧原子形成配位键,从而形成螯合物;SEM结果显示,螯合后分子发生聚集,圆球状结构消失,说明成功生成了一种新型玉米低聚肽铁螯合物。 展开更多
关键词 玉米低聚肽 铁(Ⅱ) 螯合工艺 响应面试验 结构表征
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牡蛎过敏原肌浆钙结合蛋白的分离纯化和鉴定 被引量：3
7
作者 程青丽 李国明 +5 位作者 赵晓涵 冯晓文 卢知浩 谷瑞增 鲁军 刘文颖 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第16期15-21,共7页
利用质谱鉴定从太平洋牡蛎肌浆里提取的单一蛋白,通过免疫印迹分析诱导表达的重组蛋白和之前已鉴定的天然蛋白的分子质量一致性,利用圆二色光谱分析两蛋白在二级结构上的一致性,鉴定牡蛎肌浆钙结合蛋白(sarcoplasmic calcium-binding pr... 利用质谱鉴定从太平洋牡蛎肌浆里提取的单一蛋白,通过免疫印迹分析诱导表达的重组蛋白和之前已鉴定的天然蛋白的分子质量一致性,利用圆二色光谱分析两蛋白在二级结构上的一致性,鉴定牡蛎肌浆钙结合蛋白(sarcoplasmic calcium-binding protein,SCP)糖蛋白类型并测定其多糖含量。结果表明,从牡蛎粗提物中纯化20 kDa蛋白,经LC-MS/MS证实为牡蛎肌浆钙结合蛋白SCP;电泳得到天然SCP和重组SCP分别为20 kDa和22 kDa的条带;测定二者α螺旋和β折叠含量分别为13.5%、18.9%以及14.5%、18.2%;SCP蛋白含O-糖苷键型糖多糖,含量为7.89%。重组SCP与天然SCP除分子质量稍有差异外,二者空间结构近乎相同,是太平洋牡蛎中新型潜在致敏原。该研究为今后用重组SCP替代天然SCP进行致敏性和致敏机制研究奠定了基础。 展开更多
关键词 太平洋牡蛎 肌浆钙结合蛋白 重组表达 分离纯化 糖蛋白
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牡蛎精氨酸激酶过敏原小鼠过敏模型的建立与分析
8
作者 赵晓涵 李国明 +6 位作者 程青丽 冯晓文 卢知浩 张新雪 谷瑞增 刘文颖 唐艳斌 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期41-46,共6页
食物引起的过敏反应发病率正在增加,这对人们的健康构成了极大的威胁。为了评价牡蛎精氨酸激酶(arginine kinase, AK)过敏原的致敏性,利用AK口服灌胃和腹腔注射2种方式使BALB/c小鼠致敏。观察所有BALB/c小鼠的过敏反应、体重及血项指标... 食物引起的过敏反应发病率正在增加,这对人们的健康构成了极大的威胁。为了评价牡蛎精氨酸激酶(arginine kinase, AK)过敏原的致敏性,利用AK口服灌胃和腹腔注射2种方式使BALB/c小鼠致敏。观察所有BALB/c小鼠的过敏反应、体重及血项指标情况,利用酶联免疫吸附法检测免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)的变化,使用苏木精-伊红及甲苯胺蓝染色观察脏器病变。结果表明,实验组小鼠都产生过敏反应,对照组无明显症状,实验组小鼠体重低于对照组,血液中细胞含量增加。此外,免疫期间实验组IgE含量都比对照组高,染色切片说明实验组小鼠组织出现较严重的损伤,空肠肥大细胞脱颗粒情况严重。该实验获得了牡蛎AK致敏血清,而且成功构建牡蛎AK的BALB/c小鼠过敏模型,为贝类过敏机制和临床免疫治疗提供了有意义的研究基础。 展开更多
关键词 牡蛎精氨酸激酶 小鼠过敏模型 IGE 组织病变 肥大细胞
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重组人铁蛋白及牡蛎铁蛋白最佳表达条件探究
9
作者 程青丽 裴晨皓 +3 位作者 冯晓文 卢知浩 李国明 刘文颖 《食品科技》 CAS 北大核心 2021年第9期1-7,共7页
目的:探究铁蛋白最佳表达条件,用于开发具有靶向药物传递功能或者高效包被疫苗、营养物质等的纳米载体。方法:该实验对人体铁蛋白和牡蛎铁蛋白基因进行合成,分别通过单质粒表达和共转表达,结合前期经验选择特定培养条件,筛选出具有活性... 目的:探究铁蛋白最佳表达条件,用于开发具有靶向药物传递功能或者高效包被疫苗、营养物质等的纳米载体。方法:该实验对人体铁蛋白和牡蛎铁蛋白基因进行合成,分别通过单质粒表达和共转表达,结合前期经验选择特定培养条件,筛选出具有活性的目标蛋白。结果:人体重链铁蛋白及轻链铁蛋白在单转表达和共转表达系统下的最佳表达条件都分别是15℃诱导16 h和37℃诱导4 h,共转表达效果都不如单转表达。而牡蛎铁蛋白2种系统的最佳表达条件均为37℃诱导4 h,相比单转,共转的表达水平稍有下降但可溶性大幅上升,表达效果需要进一步纯化来评估。结论:对于人体重链铁蛋白及轻链铁蛋白,选择单转表达系统15℃诱导16 h生产所需蛋白较好;对于牡蛎铁蛋白,选择共转表达系统37℃诱导4 h生产所需蛋白较好,但具体大规模生产因培养条件、测定方法不同还需进一步考证这2种表达系统。 展开更多
关键词 铁蛋白 纳米材料 大肠杆菌 单表达 共转表达
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