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流式细胞术检测细胞内细胞因子方法的建立 被引量:22
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作者 史桂英 石学耕 +1 位作者 胡大伟 陈顺乐 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1999年第6期522-525,共4页
目的建立流式细胞术检测细胞内细胞因子的方法。方法运用荧光标记的抗细胞表面抗原单抗及抗细胞因子单抗,结合固定、破膜处理技术,检测产生IFN-γ、IL-4的CD4+、CD8+细胞以及产生IL-10的CD3+细胞。同时以相应... 目的建立流式细胞术检测细胞内细胞因子的方法。方法运用荧光标记的抗细胞表面抗原单抗及抗细胞因子单抗,结合固定、破膜处理技术,检测产生IFN-γ、IL-4的CD4+、CD8+细胞以及产生IL-10的CD3+细胞。同时以相应同种型IgG染色细胞作为阴性对照,以确定细胞团于染色的特异性。结果产生IFN-γ的CD4+及CD8+细胞明显多于产生IL-4的细胞,并且产生IFN-γ的CD8+细胞百分比较CD4+细胞相对增多;同时产生IFN-γ/IL-4的CD4+、CD8+细胞以及产生IL-10的CD3+细胞都较少。结论该方法可从单个细胞水平直接检测全血标本中T细胞亚群和单核细胞等细胞因子的分泌。 展开更多
关键词 流式细胞术 细胞因子 细胞表型分析
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流式细胞术检测细胞内活性氧的方法 被引量:21
2
作者 史桂英 高飞 +1 位作者 石学耕 汤雪明 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2001年第2期122-124,共3页
目的流式细胞术检测NB4和U93 7细胞内活性氧 (reactiveoxygenspecies,ROS)的水平。 方法双氢罗丹明 12 3 (DHR)以不同的时间孵育细胞 ( 1、6、2 4h) ,DHR可被细胞内ROS氧化为罗丹明 12 3 ,通过流式细胞仪来检测细胞内罗丹明 12 3的荧... 目的流式细胞术检测NB4和U93 7细胞内活性氧 (reactiveoxygenspecies,ROS)的水平。 方法双氢罗丹明 12 3 (DHR)以不同的时间孵育细胞 ( 1、6、2 4h) ,DHR可被细胞内ROS氧化为罗丹明 12 3 ,通过流式细胞仪来检测细胞内罗丹明 12 3的荧光 ,同时设立阴性及阳性对照。 结果 1μmol/LDHR孵育细胞 ,1~ 2 4hNB4和U93 7细胞内的平均荧光强度分别从 19.2 0增加到 3 84 .3 8和 12 .3 1增加到 97.15。 结论适当延长DHR孵育时间可检测不同细胞系ROS基准水平的差异。 展开更多
关键词 流式细胞术 活性氧 双氢罗丹明1233
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半导体激光(650nm,5mW)血管内照射对人外周血淋巴细胞凋亡的影响 被引量:3
3
作者 史桂英 徐清 +5 位作者 许松林 成柏华 王如瑶 俞庆宪 朱雅芬 吴之畏 《激光生物学报》 CAS CSCD 1998年第1期8-10,共3页
本文报道了用半导体激光进行血管内照射(ILIB)对十三例患者外周血淋巴细胞凋亡的影响。发现照射前PCD为5.47±3.65%,第一次照射后为7.1±3.16%,第五次照射后为16.71±9.5%。二者均有... 本文报道了用半导体激光进行血管内照射(ILIB)对十三例患者外周血淋巴细胞凋亡的影响。发现照射前PCD为5.47±3.65%,第一次照射后为7.1±3.16%,第五次照射后为16.71±9.5%。二者均有非常显著性差异(p<0.01)。 展开更多
关键词 血管内照射 凋亡细胞 外周血 淋巴细胞 激光疗法
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高血压患者服用丹芎通脉颗粒后的血小板活化水平 被引量:2
4
作者 史桂英 石学耕 +5 位作者 龚艳春 金慧芳 于金荣 陈芳 曾真 郭翼珍 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2004年第10期822-825,共4页
目的 用流式细胞仪测定高血压病人服用丹芎通脉颗粒前后血小板活化水平。方法 在服药前后,采用双注射器采集外周静脉血,3 8%枸掾酸钠抗凝,加入三种荧光素标记的单克隆抗体。分别加入FITC-PACl,PE-CD62P及PerCP-CD61单抗,室温避光孵育,... 目的 用流式细胞仪测定高血压病人服用丹芎通脉颗粒前后血小板活化水平。方法 在服药前后,采用双注射器采集外周静脉血,3 8%枸掾酸钠抗凝,加入三种荧光素标记的单克隆抗体。分别加入FITC-PACl,PE-CD62P及PerCP-CD61单抗,室温避光孵育,1%多聚甲醛固定,上机检测。 结果 16例病人服药前后PACl+%从(12.61±3.15)%下降到(2.83±0.71)%(P<0.0001)。34例病人服药前后CD62P+%从(5.49±3.64)%下降到(2.31±1.54)%(P<0.0001)。结论 服用丹芎通脉颗粒后,病人的血小板活化水平都有显著性下降。 展开更多
关键词 通脉颗粒 血小板活化 服用 病人 服药 CD62P 高血压患者 水平 结论 显著性
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流式细胞仪三标记法检测白细胞介素-10对人树突状细胞表型的影响 被引量:1
5
作者 史桂英 孙桂芝 +4 位作者 周同 金慧芳 张玉梅 赵亚鹏 陈楠 《中国微循环》 北大核心 2005年第3期185-188,F002,共5页
目的观察白细胞介素(IL)10对体外培养人树突状细胞(DC)表型的影响,探讨流式细胞术三色荧光标记抗体检测细胞表面抗原的方法及意义。方法通过SCF、GMCSF、TGFβ1、Flt3和TNFα体外培养体系,将脐血CD34+造血干细胞诱导扩增获得DC,并于成... 目的观察白细胞介素(IL)10对体外培养人树突状细胞(DC)表型的影响,探讨流式细胞术三色荧光标记抗体检测细胞表面抗原的方法及意义。方法通过SCF、GMCSF、TGFβ1、Flt3和TNFα体外培养体系,将脐血CD34+造血干细胞诱导扩增获得DC,并于成熟过程中用重组人IL10进行干预。采用流式细胞术的三色荧光标记(FITC、PE、CY)单克隆抗体直接检测技术,分析细胞表型CD1a、CD11c、CD83、CD80、CD86和HLADR。结果IL10可下调成熟中DC表面CD11c、CD83、CD80和CD86的表达。结论IL10通过抑制DC表面黏附共刺激分子表达,可调节DC的递呈抗原功能;此外,采用流式细胞仪的三色荧光标记检测方法,不仅可以节约DC细胞用量,而且具有快速和准确的优点,值得推广应用。 展开更多
关键词 流式细胞术 树突状细胞 细胞表型 白细胞介素-10
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半导体激光(650 nm,5 mW)血管内照射对人外周血淋巴细胞凋亡的影响
6
作者 史桂英 徐清 +5 位作者 许松林 成柏华 王如瑶 俞庆宪 朱雅芬 吴之畏 《上海交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 1997年第10期88-90,共3页
报道了用半导体激光进行血管内照射(ILIB)治疗13例患者外周血淋巴细胞凋亡的影响.发现照射前PCD为(5.47±3.65)%,第一次照射后为(7.1±3.16)%,第五次照射后为(16.71±9.5)%... 报道了用半导体激光进行血管内照射(ILIB)治疗13例患者外周血淋巴细胞凋亡的影响.发现照射前PCD为(5.47±3.65)%,第一次照射后为(7.1±3.16)%,第五次照射后为(16.71±9.5)%.两者均有非常显著性差异(P<0.01). 展开更多
关键词 半导体激光 血管内照射 外周血 淋巴细胞
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人参皂甙Rg3在体外对胃癌细胞生长和凋亡的影响 被引量:19
7
作者 王吉 史桂英 +4 位作者 袁耀宗 乔敏敏 章永平 孙颖 胡梅洁 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1336-1340,共5页
目的研究人参皂甙Rg3在体外对低、中分化胃腺癌细胞株MKN-45和SGC-7901生长及凋亡的影响。方法取处于对数生长期的MKN-45和SGC-7901细胞,加入不同终浓度(20、30、40、50μg/mL)的人参皂甙Rg3分别培养24、48h或24、48和72h,以不加药细胞... 目的研究人参皂甙Rg3在体外对低、中分化胃腺癌细胞株MKN-45和SGC-7901生长及凋亡的影响。方法取处于对数生长期的MKN-45和SGC-7901细胞,加入不同终浓度(20、30、40、50μg/mL)的人参皂甙Rg3分别培养24、48h或24、48和72h,以不加药细胞作为阴性对照。MTT法检测MKN-45和SGC-7901细胞生长抑制率;流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测SGC-7901细胞凋亡率;流式细胞仪分析SGC-7901细胞周期;透射电子显微镜观察50μg/mL人参皂甙Rg3处理组SGC-7901细胞的形态学改变。结果人参皂甙Rg3各处理组SGC-7901和MKN-45细胞生长抑制率均明显高于对照组(P<0.05),且随药物浓度的增加和作用时间的延长而上升(P<0.05)。与对照组比较,人参皂甙Rg3各处理组SGC-7901细胞凋亡率和G0/G1期细胞百分比均明显上升,且呈浓度和时间依赖性。透射电子显微镜观察50μg/mL人参皂甙Rg3处理组SGC-7901细胞,可见典型的凋亡细胞结构。结论人参皂甙Rg3在体外对胃癌细胞生长具有抑制作用,且呈现一定的时效和量效关系,其机制可能与诱导胃癌细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 人参皂甙RG3 胃癌细胞株 细胞凋亡 细胞生长 抑制
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SLE患者CD45RA^+和CD45RO^+T细胞亚群的变化 被引量:13
8
作者 周同 江永梯 +4 位作者 姚建 董德长 石学耕 史桂英 汤雪明 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第6期374-376,共3页
利用流式细胞术及免疫双荧光染色法,检测35例系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD45RA ̄+和CD45RO ̄+T细胞亚群。结果表明,SLE患者CD4 ̄+细胞降低,CD8 ̄+细胞增高,CD4 ̄+/CD8 ̄+降低;CD... 利用流式细胞术及免疫双荧光染色法,检测35例系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD45RA ̄+和CD45RO ̄+T细胞亚群。结果表明,SLE患者CD4 ̄+细胞降低,CD8 ̄+细胞增高,CD4 ̄+/CD8 ̄+降低;CD4 ̄+CD45RA ̄+细胞在病情活动期降低,在稳定期回升;CD4 ̄+CD45RO ̄+细胞则在活动期有增高倾向,在稳定期下降;CD8 ̄+CD45RA ̄+及CD8 ̄+CD45RO ̄+细胞均在活动期增高,又均在稳定期降至正常水平。提示CD45RA ̄+和CD45RO ̄+T细胞在SLE发病机理中可能占有重要意义。 展开更多
关键词 SLE CD45 流式细胞术 红斑狼疮 T淋巴细胞亚群
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苦参碱体外对胃癌细胞的杀伤作用 被引量:35
9
作者 曾晖 胡梅洁 +4 位作者 张曙 乔敏敏 章永平 史桂英 吴云林 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2004年第1期38-40,共3页
目的 研究苦参碱对不同分化程度的胃癌细胞株在体外的杀伤作用及其机制。方法 用不同剂量的苦参碱分别作用于中、低分化胃癌细胞株SGC-7901和AGS 24、48、72h,以MTT法检测药物对肿瘤细胞的杀伤作用;透射电镜和流式细胞术检测苦参碱诱导S... 目的 研究苦参碱对不同分化程度的胃癌细胞株在体外的杀伤作用及其机制。方法 用不同剂量的苦参碱分别作用于中、低分化胃癌细胞株SGC-7901和AGS 24、48、72h,以MTT法检测药物对肿瘤细胞的杀伤作用;透射电镜和流式细胞术检测苦参碱诱导SGC-7901凋亡的作用。结果 随药物浓度的增加和作用时间的延长,苦参碱对胃癌细胞的杀伤作用逐渐增强(P<0.01);低分化的AGS较中分化的SGC-7901更为敏感。透射电镜、流式细胞术检测均显示苦参碱能够诱导胃癌细胞凋亡。结论苦参碱在体外对胃癌细胞具有杀伤作用,且呈明显的量效和时效关系;低分化的胃癌细胞株AGS对苦参碱更为敏感;苦参碱对胃癌细胞株的体外杀伤作用与其诱导胃癌细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 苦参碱 体外 胃癌 杀伤作用 癌细胞
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喘可治注射液治疗儿童支气管哮喘随机、双盲、安慰剂对照的临床和实验研究 被引量:13
10
作者 赵建琴 邵洁 +5 位作者 钟文伟 罗海燕 李云珠 俞善昌 史桂英 石学耕 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期161-164,共4页
目的研究喘可治注射液对儿童哮喘的临床疗效和对Th1/Th2平衡的调节。方法随机、双盲,安慰剂、平行对照研究68名5~14岁哮喘或哮喘合并过敏性鼻炎儿童,随机分为治疗组和对照组,分别接受喘可治或银杏注射液治疗。观察两组每日症状评分,早... 目的研究喘可治注射液对儿童哮喘的临床疗效和对Th1/Th2平衡的调节。方法随机、双盲,安慰剂、平行对照研究68名5~14岁哮喘或哮喘合并过敏性鼻炎儿童,随机分为治疗组和对照组,分别接受喘可治或银杏注射液治疗。观察两组每日症状评分,早、晚最大呼气峰流速测定(PEF),肺功能检查(FEV1)。实验室检测细胞内细胞因子IFN-γ/IL-4的表达率。结果治疗后症状评分治疗组中位数为6.0(P25~P75为4.9~21.5),对照组为10.0(P25~P75为6.19~27.5),两组比较差异有显著性;PEF变异率治疗组为4.3%±5.1%,对照组为5.9%±6.7%,两组变异率趋势曲线差异有显著性;治疗组FEV1增加值(△FEV1)较对照组显著改善;治疗后治疗组CD4+淋巴细胞内表达IFN-γ与对照组比较有显著升高。结论喘可治治疗有助于改善哮喘患儿临床症状,降低PEF变异率,改善肺功能,并且对Th1/Th2细胞的平衡具有积极的调节作用,促进Th1细胞的优势表达,有利于哮喘症状的改善和长期稳定。 展开更多
关键词 支气管哮喘 随机、双盲、安慰剂对照 喘可治注射液 TH1/TH2
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三氧化二砷对人食管癌细胞株凋亡的诱导作用 被引量:22
11
作者 谭立军 史桂英 +1 位作者 石学耕 汤雪明 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 1999年第2期85-87,共3页
目的研究三氧化二砷对人食管癌细胞株凋亡的诱导作用。方法癌细胞株E8712和EC171贴壁生长,在电镜观察的基础上,用碘化丙啶(PI)染色和TUNEL将凋亡细胞反映在流式细胞仪(FCM)上。结果经三氧化二砷2μmol... 目的研究三氧化二砷对人食管癌细胞株凋亡的诱导作用。方法癌细胞株E8712和EC171贴壁生长,在电镜观察的基础上,用碘化丙啶(PI)染色和TUNEL将凋亡细胞反映在流式细胞仪(FCM)上。结果经三氧化二砷2μmol/L作用后,电镜下见部分细胞核染色质凝聚,呈半月形;FCM细胞DNA检得亚G1细胞峰;部分G1期细胞TUNEL标记呈阳性。结论结果表明,三氧化二砷能诱人食管癌细胞株的凋亡,此药对食管癌等实体瘤的治疗有诱入的应用前景。同时表明,FCM具有敏感。 展开更多
关键词 三氧化二砷 食管癌 细胞凋亡 流式细胞术
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AS_2O_3对消化道肿瘤细胞凋亡作用的研究 被引量:15
12
作者 石熠慧 谭立军 +3 位作者 李慧 史桂英 石学耕 汤雪明 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1999年第3期242-245,共4页
目的研究AS3O3对10种消化道肿瘤细胞株的致凋亡作用。方法采用形态学观察、流式细胞仪检测及DNA电泳分析。结果发现两株细胞经AS2O3作用后有明显凋亡,三株细胞无凋亡,其余有少量凋亡。结论AS2O3对不同的消化道肿瘤细胞有不同的作用,... 目的研究AS3O3对10种消化道肿瘤细胞株的致凋亡作用。方法采用形态学观察、流式细胞仪检测及DNA电泳分析。结果发现两株细胞经AS2O3作用后有明显凋亡,三株细胞无凋亡,其余有少量凋亡。结论AS2O3对不同的消化道肿瘤细胞有不同的作用,提示AS2O3对不同细胞的致凋亡作用可能存在不同的机理。 展开更多
关键词 AS2O3 细胞凋亡 消化道肿瘤 细胞株 治疗 研究
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“益肾清火”方对大鼠牙周炎症和免疫功能的影响 被引量:9
13
作者 罗礼君 束蓉 +3 位作者 宋忠臣 吴安平 俞瑾 史桂英 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2006年第6期605-609,共5页
目的观察中药“益肾清火”方对大鼠牙周炎症和免疫功能的影响。方法选择12个月龄SD大鼠,分为A、B、C、D共4组。A组为空白对照组,B组为牙周炎造模组,C组为造模后灌服中药高剂量组,D组为造模后灌服中药等效剂量组。牙周炎造模成功后,A、B... 目的观察中药“益肾清火”方对大鼠牙周炎症和免疫功能的影响。方法选择12个月龄SD大鼠,分为A、B、C、D共4组。A组为空白对照组,B组为牙周炎造模组,C组为造模后灌服中药高剂量组,D组为造模后灌服中药等效剂量组。牙周炎造模成功后,A、B组动物灌喂生理盐水,C、D组动物灌喂中药3个月。分别采用脱钙骨切片、流式细胞术及ELISA法测定用药前后动物牙周组织、外周血中T细胞的分类及比值、IL-2和IL-1β水平的变化,并采用SAS6.04软件包对数据进行单因素方差分析。结果牙周炎大鼠灌服“益肾清火”方3个月后,与B组相比,C、D组的牙周组织炎症明显改善;各组外周血中CD4+T/CD8+T的比值分别为3.55±0.94、2.42±0.75、3.23±1.14和3.29±0.83,B组比其余3组低(P<0.05);IL-2与IL-1β分别为(36.03±2.63/179.04±17.29)pg/ml、(25.18±3.08/306.09±13.38)pg/ml、(38.44±2.58/176.33±45.38)pg/ml和(36.81±2.45/182.13±43.97)pg/ml。与其余3组相比,B组IL-2水平显著下降,IL-1β显著升高(P<0.01),但以上指标在两用药组之间无显著差别(P>0.05)。结论中药“益肾清火”方能改善实验性牙周炎动物的牙周炎症,对动物机体免疫有一定的调节作用。 展开更多
关键词 牙周炎 中医药 流式细胞术 细胞因子
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宫颈上皮内瘤变及宫颈癌患者外周血Treg/Th17细胞及相关细胞因子的检测与临床意义 被引量:15
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作者 熊苗 陆继红 +3 位作者 舒慧敏 赵爱民 史桂英 杨宾烈 《现代妇产科进展》 CSCD 2012年第6期466-469,共4页
目的:探讨Treg/Th17平衡失调在宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌病情进展中的作用及其参与CIN及宫颈癌免疫逃避的具体机制。方法:研究对象分为3组:宫颈癌组(34例),CIN组(47组),对照组(30例)。采用流式细胞术检测CIN及宫颈癌患者外周血单个... 目的:探讨Treg/Th17平衡失调在宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌病情进展中的作用及其参与CIN及宫颈癌免疫逃避的具体机制。方法:研究对象分为3组:宫颈癌组(34例),CIN组(47组),对照组(30例)。采用流式细胞术检测CIN及宫颈癌患者外周血单个核细胞(PBMC)中Th17细胞及Treg细胞的表达频率,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测相关细胞因子(IL-23、IL-10、IL-17、IL-6、TGF-β)的浓度。结果:与对照组相比,Treg细胞及其相关细胞因子(TGF-β、IL-10)在CIN及宫颈癌患者外周血中的表达均明显增高(P<0.05),且宫颈癌组的表达亦明显高于CIN组(P<0.05)。与对照组相比,Th17细胞及其相关细胞因子(IL-23、IL-17、IL-6)在CIN及宫颈癌患者外周血中的表达均明显降低(P<0.05),且宫颈癌组的表达亦明显低于CIN组(P<0.05)。结论:随着CIN向宫颈癌的进展,Treg/Th17平衡向Treg细胞偏离,这一失衡参与了CIN的进展及宫颈癌的免疫逃避,其具体机制可能与二者在肿瘤免疫内环境相关的细胞因子调节有关。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 宫颈上皮内瘤变 T淋巴细胞 抗原 CD4 抗原 CD25 TH17细胞 CD4+CD25+调节性T细胞
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三氧化二砷启动人食管癌细胞凋亡机制研究 被引量:19
15
作者 谭立军 石熠慧 +3 位作者 史桂英 李慧 石学耕 湯雪明 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2000年第1期12-17,共6页
目的探讨三氧化二砷诱导白血病及实体瘤细胞凋亡的机制。方法以三氧化二砷敏感和不敏感人食管癌细胞株为模型,运用RT-PCR和流式细胞术检测三氧化二砷处理的这两类细胞Fas/FasL表达的改变;同时利用荧光探针检测线粒体功... 目的探讨三氧化二砷诱导白血病及实体瘤细胞凋亡的机制。方法以三氧化二砷敏感和不敏感人食管癌细胞株为模型,运用RT-PCR和流式细胞术检测三氧化二砷处理的这两类细胞Fas/FasL表达的改变;同时利用荧光探针检测线粒体功能变化。结果两类细胞有同等水平Fas表达,但均未检测出FasL;三氧化二砷既不能上调Fas也不能诱导FasL表达,但破环线粒体跨膜电势和氧化-还原系统。结论三氧化二砷诱导人食管癌细胞凋亡不依赖Fas/FasL的启动,而直接作用于线粒体,活化Caspase-3导致凋亡。 展开更多
关键词 三氧化二砷 细胞凋亡 FAS/FASL 线粒体 食管肿瘤
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半导体激光血管内照射对人体外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞的调节作用 被引量:11
16
作者 徐清 史桂英 +5 位作者 许松林 成柏华 王如瑶 朱雅芬 俞庆宪 吴之畏 《激光生物学报》 CAS CSCD 1997年第3期1105-1109,共5页
本文报道了半导体激光血管内照射对人体外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞的免疫调节作用。实验结果提示:在23例经650nm.5mW的半导体激光血管内照射治疗一次,五次和十次的患者中,CD+3细胞亚群的百分比与照射前(63.... 本文报道了半导体激光血管内照射对人体外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞的免疫调节作用。实验结果提示:在23例经650nm.5mW的半导体激光血管内照射治疗一次,五次和十次的患者中,CD+3细胞亚群的百分比与照射前(63.66%)比较,分别提高到65.86%,69.94%,75.04%。CD+4T辅助细胞在第十次治疗后也有所增加。除此之外,半导体激光血管内照射对NK细胞比例及CD+4/CD+8比值具有双向调控作用,即偏离(即高于或低于)正常值的患者经照射后恢复到正常水平。这种双向调控作用将对临床治疗更有指导意义。 展开更多
关键词 半导体激光 血管内照射 T淋巴细胞 激光疗法
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糖尿病病程对真皮成纤维细胞生物学行为的影响 被引量:5
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作者 王敏骏 陆树良 +4 位作者 青春 花兰女 史桂英 盛昭园 廖镇江 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第5期459-462,466,共5页
目的探讨病程对糖尿病皮肤和真皮成纤维细胞(FB)生物学行为的影响。方法通过制备不同病程糖尿病模型,对皮肤中的组织生化和真皮FB的生物学行为进行检测。结果短程糖尿病皮肤厚度变薄,糖含量升高,且病程至8周有晚期糖基化终末产物(AGEs)... 目的探讨病程对糖尿病皮肤和真皮成纤维细胞(FB)生物学行为的影响。方法通过制备不同病程糖尿病模型,对皮肤中的组织生化和真皮FB的生物学行为进行检测。结果短程糖尿病皮肤厚度变薄,糖含量升高,且病程至8周有晚期糖基化终末产物(AGEs)蓄积,真皮S期细胞比例升高和单位面积皮肤羟脯氨酸含量减少。高糖和AGEHSA导致真皮FB生长抑制和凋亡,呈剂量依赖性。结论糖尿病皮肤随着病程延长,病理生理异常会不断加重;糖尿病真皮FB的生物学改变与皮肤高糖和AGEs蓄积存在直接关系。 展开更多
关键词 细胞生物学行为 糖尿病病程 晚期糖基化终末产物 真皮成纤维细胞 S期细胞比例 糖尿病模型 剂量依赖性 不同病程 皮肤厚度 生长抑制 病程延长 生理异常 AGEs FB 糖含量 酸含量 蓄积 高糖
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人骨髓间充质干细胞表面抗原测定 被引量:4
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作者 董海 陆骅 +3 位作者 周之德 汤亭亭 陈晓东 史桂英 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2004年第15期1161-1165,共5页
目的 :研究体外培养的各代间充质干细胞 (MSCs)及其成骨分化后的部分细胞表面抗原变化。方法 :将体外普通培养的骨髓间充质干细胞 ,每隔 1代在流式细胞仪上检测CD48、CD5 6、CD71和CD90阳性表达率。另外 ,为促进成人MSCs体外成骨性分化 ... 目的 :研究体外培养的各代间充质干细胞 (MSCs)及其成骨分化后的部分细胞表面抗原变化。方法 :将体外普通培养的骨髓间充质干细胞 ,每隔 1代在流式细胞仪上检测CD48、CD5 6、CD71和CD90阳性表达率。另外 ,为促进成人MSCs体外成骨性分化 ,第 1传代培养时加入成骨性添加剂 ,培养第 6、 12、 18、 2 4、 3 0d时 ,也分别用流式细胞仪分析上述MSCs表面抗原的表达 ,并用碱性磷酸酶组化染色和VonKossa染色。结果 :( 1)在普通培养条件下 ( 10 %DMEM ) ,从第 1代起 ,MSC的表面抗原CD48、CD5 6、CD71、CD90都呈阳性表达。 ( 2 )诱导培养的MSCs表面抗原CD48、CD90阳性表达率在诱导第 12、 18、 2 4及 3 0d时 ,分别与第 6d相比都有显著差异。 ( 3 )在成骨诱导条件下 ,MSCs表现出AKP染色增强和VonKossa染色可见钙化的基质沉积。当MSC开始向成骨细胞分化后 ,CD71阳性率下降最明显。结论 :( 1)目前采用的体外普通培养条件下 ,培养、传代方法对MSCs表面抗原CD48,CD5 6,CD71及CD90表达并无明显影响。 ( 2 )诱导成骨培养的MSCs的CD71从高阳性率转变为极低阳性率可能与MSCs向成骨细胞系的分化成熟相对应。 ( 3 ) 展开更多
关键词 间充质干细胞 骨髓 传代培养 骨生成 流式细胞术 表面分子 诱导分化
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体外培养对骨髓间充质干细胞凋亡的影响 被引量:4
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作者 董海 陆骅 +3 位作者 汤亭亭 周之德 陈晓东 史桂英 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2004年第9期686-688,共3页
目的 :研究成人骨髓间充质干细胞在体外培养条件下 ,传代次数与细胞凋亡的关系。方法 :采用An nexinV/PI双染色法 ,在流式细胞仪上检测不同传代数的成人骨髓间充质干细胞的凋亡情况。结果 :传代次数越多 ,骨髓间充质干细胞的凋亡率及死... 目的 :研究成人骨髓间充质干细胞在体外培养条件下 ,传代次数与细胞凋亡的关系。方法 :采用An nexinV/PI双染色法 ,在流式细胞仪上检测不同传代数的成人骨髓间充质干细胞的凋亡情况。结果 :传代次数越多 ,骨髓间充质干细胞的凋亡率及死亡率越高 ,存活的正常细胞越少。结论 :第 4代以内的细胞增殖能力强 ,凋亡率低 。 展开更多
关键词 间充质干细胞 骨髓 细胞培养 细胞凋亡 传代培养 增殖 组织工程
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As_2O_3诱导NB4细胞凋亡的周期选择性与活性氧水平相关 被引量:7
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作者 高飞 易静 +3 位作者 史桂英 金慧芳 石学耕 汤雪明 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2001年第4期296-299,共4页
目的研究三氧化二砷 (As2 O3)诱导NB4细胞凋亡的周期选择性与细胞活性氧 (reactiveoxygenspecies,ROS)水平的关系。  方法以碘化丙啶 (PI)标记DNA ,流式细胞仪检测As2 O3 单独或联用二甲萘醌 (DMNQ)作用后细胞周期的变化 ,以 7-氨基放... 目的研究三氧化二砷 (As2 O3)诱导NB4细胞凋亡的周期选择性与细胞活性氧 (reactiveoxygenspecies,ROS)水平的关系。  方法以碘化丙啶 (PI)标记DNA ,流式细胞仪检测As2 O3 单独或联用二甲萘醌 (DMNQ)作用后细胞周期的变化 ,以 7-氨基放线菌素D(7AAD)标记DNA ,双氢罗丹明 12 3(DHR)或双氢 -乙酰乙酸二氯荧光黄 (DCFH -DA)捕获ROS ,流式细胞仪双参数法检测细胞周期不同阶段ROS水平。 结果 2 μmol/LAs2 O3 可选择性诱导NB4G2 /M期细胞凋亡 ,DMNQ可增强这一效应 ;G2 /M期细胞ROS水平明显高于G1、S期。 结论As2 O3 诱导NB4G2 /M期细胞凋亡与G2 /M期ROS水平较高相关。As2 O3 展开更多
关键词 三氧化二砷 细胞凋亡 细胞周期 活性氧 急性早幼粒细胞白血病
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