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家蚕抗菌肽基因的克隆及重组蛋白的自诱导表达 被引量：2
1
作者 谢昆 王靖 +4 位作者 王丽仙 朱灵明 尹建华 叶青霞 孙艳 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期33-38,共6页
抗菌肽是生物体内具有抗菌活性的一种小分子物质,在昆虫细胞抵御外源微生物的感染过程中发挥着重要作用。为研究家蚕抗菌肽基因克隆、重组抗菌肽的表达和纯化方法,以家蚕中肠组织总RNA为模板,设计4对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增BmCec... 抗菌肽是生物体内具有抗菌活性的一种小分子物质,在昆虫细胞抵御外源微生物的感染过程中发挥着重要作用。为研究家蚕抗菌肽基因克隆、重组抗菌肽的表达和纯化方法,以家蚕中肠组织总RNA为模板,设计4对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增BmCecropin、BmCecropin B6、BmCecropin D和Bmmoricin这4种抗菌肽基因,通过自诱导方式原核表达4种抗菌肽重组蛋白,并对4种抗菌肽重组蛋白进行Ni-NTA亲和层析和超滤纯化。结果表明,克隆的BmCecropin、BmCecropin B6、BmCecropin D和Bmmoricin这4种抗菌肽的基因大小分别为198,108,105,129 bp,通过自诱导方式表达的BmCecropin、BmCecropin B6、BmCecropin D和Bmmoricin这4种抗菌肽重组蛋白,经SDS-PAGE电泳检测,大小分别为24,21,20,22 ku,经Ni-NTA亲和层析和超滤纯化后的4种抗菌肽重组蛋白条带单一。结果可为4种抗菌肽重组蛋白后续的抑菌试验和在抑菌剂、化妆品和防腐剂等方面的进一步应用奠定基础。 展开更多
关键词 家蚕 抗菌肽 重组蛋白 自诱导表达 纯化
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草地贪夜蛾Sf9细胞对饥饿诱导自噬的响应 被引量：1
2
作者 谢昆 王丽仙 +4 位作者 王靖 朱灵明 尹建华 叶青霞 孙艳 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2017年第3期91-95,共5页
为研究草地贪夜蛾对饥饿诱导自噬的响应。从草地贪夜蛾EST数据库中筛选到一段核苷酸序列,设计特异性引物,RT-PCR技术从草地贪夜蛾Sf9细胞中扩增该核苷酸序列,经过生物信息学分析该序列与昆虫自噬相关基因ATG8同源性最高,命名为SfATG8基... 为研究草地贪夜蛾对饥饿诱导自噬的响应。从草地贪夜蛾EST数据库中筛选到一段核苷酸序列,设计特异性引物,RT-PCR技术从草地贪夜蛾Sf9细胞中扩增该核苷酸序列,经过生物信息学分析该序列与昆虫自噬相关基因ATG8同源性最高,命名为SfATG8基因,并构建了pIEX-4-mCherry-EGFP-SfATG8载体转染Sf9细胞。Sf9细胞经饥饿(PBS)诱导4 h后,Lyso-Tracker染色、Western Blotting、共聚焦显微镜检测细胞对自噬的响应程度。结果表明,经饥饿(PBS)诱导4 h的Sf9细胞中出现Sf Atg8-PE的表达,共聚焦显微镜检测到Sf9细胞膜上的自噬小体。以上证据证实饥饿(PBS)能诱导Sf9细胞发生自噬,为深入研究Sf9细胞对自噬的响应奠定了基础。 展开更多
关键词 草地贪夜蛾 Sf9 饥饿 自噬
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家蚕抗菌肽基因BmMoricin的克隆及重组蛋白的自诱导表达
3
作者 谢昆 王丽仙 +4 位作者 王靖 朱灵明 尹建华 叶青霞 孙艳 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第21期52-54,共3页
抗菌肽是构成昆虫体液免疫的主要方式,BmMoricin是家蚕免疫系统中1种重要的抗菌肽,具有极强的抑菌活性。以家蚕中肠组织总RNA为模板,设计1对特异性引物,通过RT-PCR技术扩增BmMoricin,构建pET32aBmMoricin原核表达载体,采用自诱导表达系... 抗菌肽是构成昆虫体液免疫的主要方式,BmMoricin是家蚕免疫系统中1种重要的抗菌肽,具有极强的抑菌活性。以家蚕中肠组织总RNA为模板,设计1对特异性引物,通过RT-PCR技术扩增BmMoricin,构建pET32aBmMoricin原核表达载体,采用自诱导表达系统表达BmMoricin重组蛋白。结果表明,BmMoricin基因片段的大小为201 bp,编码66个氨基酸,自诱导表达的BmMoricin重组蛋白大小约为19 ku,表达产率比异丙基-β-D-疏基半乳糖苷(IPTG)诱导的重组蛋白表达产率高,为BmMoricin抗菌肽的生物学活性鉴定及应用奠定了基础。 展开更多
关键词 家蚕 抗菌肽 BmMoricin 重组蛋白 自诱导
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钱币清点与分类系统的设计 被引量：2
4
作者 叶青霞 林奕奕 周志豪 《价值工程》 2017年第25期106-107,共2页
在当今社会,大面值货币电子化,小面值货币硬币化,使得硬币成为货币的发行趋势,由于硬币的大量需求,使得硬币的回收、批量处理等问题出现。为了使硬币的处理更加便捷,解决现今社会硬币逐步增大的流通量以及硬币的处理不便的问题,本文设... 在当今社会,大面值货币电子化,小面值货币硬币化,使得硬币成为货币的发行趋势,由于硬币的大量需求,使得硬币的回收、批量处理等问题出现。为了使硬币的处理更加便捷,解决现今社会硬币逐步增大的流通量以及硬币的处理不便的问题,本文设计一种能够自动分拣、清点及包装硬币的机械装置,使得硬币的回收更加轻松和便捷。 展开更多
关键词 清点 分类 模块化
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家蚕抗菌肽基因BmCecropinB6的克隆及重组蛋白的自诱导表达
5
作者 王靖 王丽仙 +4 位作者 朱灵明 尹建华 叶青霞 孙艳 谢昆 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2017年第5期818-822,共5页
【目的】家蚕CecropinB6(BmCecropinB6)是家蚕免疫防疫系统中1种重要的抗菌肽,对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌具有极强的抗菌作用,但对该重组抗菌肽的自诱导表达还未见报道。【方法】以家蚕中肠组织总RNA为模板,设计特异性引物,通过RT-PC... 【目的】家蚕CecropinB6(BmCecropinB6)是家蚕免疫防疫系统中1种重要的抗菌肽,对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌具有极强的抗菌作用,但对该重组抗菌肽的自诱导表达还未见报道。【方法】以家蚕中肠组织总RNA为模板,设计特异性引物,通过RT-PCR技术扩增BmCecropinB6基因,构建pET32a-BmCecropinB6原核表达载体,通过自诱导表达系统表达BmCecropinB6重组蛋白,并对表达产率进行分析。【结果】克隆的BmCecropinB6基因大小192 bp,编码63个氨基酸,自诱导表达的重组蛋白大小为27 ku,表达产率高达41%。【结论】该研究为BmCecropinB6抗菌肽的进一步应用奠定基础。 展开更多
关键词 家蚕 抗菌肽 自诱导 BmCecropinB6
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二苯基甲烷二异氰酸酯对废旧ABS塑料的再生改性
6
作者 叶青霞 李真 刘瑾 《安徽化工》 CAS 2020年第4期33-37,共5页
为了提高废旧丙烯腈-丁二烯-苯乙烯(wABS)的利用效率,研究了wABS和二苯基甲烷二异氰酸酯(MDI)的流变性、耐热性、动态力学性能、断面形貌和力学性能.MDI含量分别为0 wt%、0.3 wt%、0.6 wt%、0.9 wt%、1.2 wt%和1.5 wt%,通过化学反应制备... 为了提高废旧丙烯腈-丁二烯-苯乙烯(wABS)的利用效率,研究了wABS和二苯基甲烷二异氰酸酯(MDI)的流变性、耐热性、动态力学性能、断面形貌和力学性能.MDI含量分别为0 wt%、0.3 wt%、0.6 wt%、0.9 wt%、1.2 wt%和1.5 wt%,通过化学反应制备wABS/MDI共混物.流变学结果表明,MDI的引入导致了分子链的缠结,提高了改性样品的粘度和分子量.动态力学分析(DMTA)的储存模量和玻璃化温度(Tg)升高,这与流变学分析的结果一致,说明改性后的样品中wABS中断链得到修复,且只有一个Tg峰,说明MDI与wABS的相容性较好.热重分析(TG)表明,添加MDI后,wABS的热稳定性得到了改善.扫描电镜(SEM)表明,改性后样品两相界面更模糊.随着MDI含量的不断增加,拉伸性能显著提高,6#比1#提高了9.8%,但冲击强度受到影响,这是由于MDI和wABS在熔融混合后发生的化学反应导致. 展开更多
关键词 废旧丙烯腈-丁二烯-苯乙烯(wABS) 二苯基甲烷二异氰酸酯(MDI) 化学反应
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