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应用HPLC测定生物制品中甲醛含量的研究 被引量：8
1
作者 辛暨华 邱野 +4 位作者 薛海卿 司杨乐 槐丽萍 蔡岩 李晶 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第5期104-106,共3页
研究了直接用于液相色谱测定甲醛与2,4-二硝基苯肼的反应条件,使反应在菌疫苗类生物制品自身的pH范围内即弱酸性条件下,无需酸碱度调节,反应产物甲醛衍生物不需要有机溶剂萃取,避免损失,可直接用于液相色谱分析.在检出限及精确度方面更... 研究了直接用于液相色谱测定甲醛与2,4-二硝基苯肼的反应条件,使反应在菌疫苗类生物制品自身的pH范围内即弱酸性条件下,无需酸碱度调节,反应产物甲醛衍生物不需要有机溶剂萃取,避免损失,可直接用于液相色谱分析.在检出限及精确度方面更是优越于分光光度法.将样品用2,4-二硝基苯肼溶液衍生后,经C18化学键合硅胶为固定相,以乙睛：水（60：40,体积比）为流动相.紫外检测波长 360 nm进行测定.方法的平均回收率为95.4%（n=5）,两种生物制品 6 次独立测定的相对标准偏差分别为重组乙型肝炎疫苗（CHO）RSD=0.92%,吸附白喉破伤风联合疫苗RSD=3.92%.甲醛（0.6～3.0 μg/mL）范围内,浓度与吸收面积值呈良好的线性关系.结果显示,该研究方法的色谱条件能准确定量、灵敏、准确、重复性好,优于药典的分光光度法,可用于实际检测分析. 展开更多
关键词 甲醛 甲醛衍生物 2 4-二硝基苯肼(DNPH) 高压液相色谱法
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应用酚-硫酸法测定结核菌素纯蛋白衍化物的糖含量 被引量：1
2
作者 全爱顺 辛暨华 +2 位作者 谢欣 司杨乐 宋建宁 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2003年第4期237-238,共2页
目的 分析酚-硫酸法测定结核菌素纯蛋白衍生物糖含量的可行性。方法 利用糖与酚-硫酸试剂反应产生棕黄色,在487nm波长处有最大吸收峰,吸光度与糖浓度呈线性关系,测TB-PPD的糖含量。结果 吸光度与糖含量的线性范围为10～100μg/ml(r=0.99... 目的 分析酚-硫酸法测定结核菌素纯蛋白衍生物糖含量的可行性。方法 利用糖与酚-硫酸试剂反应产生棕黄色,在487nm波长处有最大吸收峰,吸光度与糖浓度呈线性关系,测TB-PPD的糖含量。结果 吸光度与糖含量的线性范围为10～100μg/ml(r=0.9998),相对标准差为1.4％,平均回收率为98％。结论 该方法简便、快速、准确,适用于TB-PPD糖含量测定。 展开更多
关键词 酚-硫酸法 测定 结核菌素纯蛋白衍化物 糖含量
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乙型脑炎灭活疫苗细菌内毒素检查方法的研究 被引量：1
3
作者 郑晓丽 曾艳 +6 位作者 兰燕 杜晶 刘丽敏 刘延文 齐凤艳 司杨乐 曾繁启 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期43-45,共3页
将细菌内毒素检查法 (凝胶法 )扩大应用于乙脑灭活疫苗的质量控制及其内毒素的检测。按《中国药典》及《中国生物制品规程方法》方法 ,复核鲎试剂灵敏度、确定疫苗的L值、计算MVD、进行干扰试验及内毒素的检测。疫苗L值确定为 30 0EU/mL... 将细菌内毒素检查法 (凝胶法 )扩大应用于乙脑灭活疫苗的质量控制及其内毒素的检测。按《中国药典》及《中国生物制品规程方法》方法 ,复核鲎试剂灵敏度、确定疫苗的L值、计算MVD、进行干扰试验及内毒素的检测。疫苗L值确定为 30 0EU/mL ,MVD为 12 0 0倍。用灵敏度 0 .2 5EU/mL的鲎试剂 ,疫苗的最大非干扰浓度为将其稀释 30倍 ,将此疫苗稀释 12 0倍进行干扰试验 ,对内毒素的检测无干扰作用。以此法对 15批疫苗进行内毒素检查均呈阴性反应。结果显示 。 展开更多
关键词 细菌内毒素 检查法 鲎试剂 乙脑灭活疫苗
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已二酰肼及溴化氰检测方法重复性研究
4
作者 杨丽华 谢欣 +3 位作者 吴梅 司杨乐 孙慧军 杨忠辉 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第5期98-100,共3页
测定已二酰肼含量及溴化氰残余量。应用TNBS法测定已二酰肼含量,应用吡啶联苯胺法测定溴化氰残余量,同时对检测方法的精密度、重复性进行试验和分析。已二酰肼残余量测定平均相对标准差为2.2%,重复性精密度小于0.01μg。溴化氰残余量测... 测定已二酰肼含量及溴化氰残余量。应用TNBS法测定已二酰肼含量,应用吡啶联苯胺法测定溴化氰残余量,同时对检测方法的精密度、重复性进行试验和分析。已二酰肼残余量测定平均相对标准差为2.2%,重复性精密度小于0.01μg。溴化氰残余量测定平均相对标准差为6%,重复性精密度小于0.71 ng。TNBS法和吡啶联苯胺法分别是检测己二酰肼含量和溴化氰残余量较为理想的方法。 展开更多
关键词 吡啶联苯胺法 TNBS法 已二酰肼 重复性 精密度 多糖-AH衍生物
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冰点下降法测定注射用胸腺肽的渗透压 被引量：3
5
作者 张金岩 邱野 +5 位作者 李帅 姜崴 蔡岩 司杨乐 闫素志 杨琳 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第3期377-379,共3页
目的采用冰点下降法测定注射用胸腺肽的渗透压,并观察其稳定性。方法用制备的0.9%NaCl和5%葡萄糖标准溶液对渗透压摩尔测定仪进行标定后,连续测定5次注射用胸腺肽的渗透压,计算变异系数(CV),验证该方法的精密度;取20批注射用胸腺肽,每... 目的采用冰点下降法测定注射用胸腺肽的渗透压,并观察其稳定性。方法用制备的0.9%NaCl和5%葡萄糖标准溶液对渗透压摩尔测定仪进行标定后,连续测定5次注射用胸腺肽的渗透压,计算变异系数(CV),验证该方法的精密度;取20批注射用胸腺肽,每瓶分别用500 ml和125 ml 0.9%NaCl溶液及5%葡萄糖溶液稀释,测定其渗透压;将注射用胸腺肽分别置(6±2)℃放置12个月,(25±2)℃放置6个月,分别于不同时间取样,稀释后测定渗透压,观察其长期和加速稳定性。结果 5次测得的注射用胸腺肽渗透压的变异系数为0.401%。20批注射用胸腺肽的渗透压在287～347 mOsmol/kg之间,以不同体积的0.9%NaCl和5%葡萄糖稀释样品后测得的渗透压的变异系数均较小,表明样品的渗透压批间差异较小;在稀释液量相同的条件下,5%葡萄糖试验组的渗透压显著高于0.9%NaCl组(P均<0.001)。注射用胸腺肽分别于(6±2)℃下放置12个月和(25±2)℃、相对湿度(60±10)%的条件下放置6个月,其渗透压均无显著变化。结论冰点下降法操作简便、快速,精密度高,可用于注射用胸腺肽渗透压的检测。 展开更多
关键词 胸腺肽 冰点 渗透压
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顶空-气相色谱法测定流感病毒裂解疫苗中游离甲醛的残留量 被引量：2
6
作者 冯雪 李帅 +6 位作者 徐志强 曹宇 张雪楠 张红梅 司杨乐 郑欣 杨红育 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第11期1267-1274,共8页
目的建立流感病毒裂解疫苗中游离甲醛残留量的顶空-气相色谱测定法,并进行优化及验证。方法对顶空-气相色谱法中的顶空平衡温度(70、80、90、100、110、120℃)、顶空平衡时间(30、40、50 min)、色谱柱[HP-5(30 m×0.320 mm,0.25μm)... 目的建立流感病毒裂解疫苗中游离甲醛残留量的顶空-气相色谱测定法,并进行优化及验证。方法对顶空-气相色谱法中的顶空平衡温度(70、80、90、100、110、120℃)、顶空平衡时间(30、40、50 min)、色谱柱[HP-5(30 m×0.320 mm,0.25μm)、HP-FFAP(25 m×0.320 mm,0.50μm)、DB-1301(30 m×0.320 mm,0.25μm)、DB-23(30 m×0.320 mm,0.25μm)及DB-WAX(30 m×0.250 mm,0.25μm)]、分流比(10∶1、20∶1、30∶1、40∶1、50∶1)、不同进样模式(分流模式和脉冲分流模式)进行优化,同时验证方法的系统适用性、检测限、定量限、线性范围、重复性及准确性。采用优化方法检测0.001μg/mL甲醛标准溶液及流感病毒裂解疫苗样品。结果最适检测条件为:顶空平衡温度为100℃,顶空平衡时间为30 min,采用DB-1301(30 m×0.320 mm,0.25μm)色谱柱分离,分流模式,分流比为20∶1。5次检测的理论板数不低于5000,甲醛色谱峰与其相邻色谱峰的分离度均>1.5;检测限及定量限分别为0.0003和0.001μg/mL;甲醛在0.001~0.04μg/mL浓度范围内与其峰面积呈良好的线性关系,获得线性回归方程为y=561.89346 x-0.0444142,r为0.99971;各批流感病毒裂解疫苗连续进样6次检测结果的RSD均<10.0%;加标量0.0025及0.005μg的检测回收率为78.6%~98.6%。0.001μg/mL甲醛标准溶液及流感病毒裂解疫苗的检测结果分别为0.00129730和0.00348097μg/mL。结论建立的方法具有较高的灵敏性、准确性、重复性,有望应用于流感病毒裂解疫苗中游离甲醛残留量的测定。 展开更多
关键词 顶空-气相色谱 流感病毒裂解疫苗 游离甲醛
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