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弓形虫GRA6-GRA2蛋白表达及检测应用
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作者 张宁 刘伟 +5 位作者 吴铭洁 夏霖亚 王蕾 殷玉和 石晶 吴丛梅 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第3期91-98,共8页
为建立一种敏感性好、特异性强、方便快捷的检测猫弓形虫抗体的方法,本研究通过分子生物学方法、优化合成了GRA1-GRA7、SAG1和GRA6-GRA2基因,采用大肠杆菌ER2566表达了GRA1-GRA7、SAG1和GRA6-GRA2三种蛋白;表达产物利用His亲和层析柱纯... 为建立一种敏感性好、特异性强、方便快捷的检测猫弓形虫抗体的方法,本研究通过分子生物学方法、优化合成了GRA1-GRA7、SAG1和GRA6-GRA2基因,采用大肠杆菌ER2566表达了GRA1-GRA7、SAG1和GRA6-GRA2三种蛋白;表达产物利用His亲和层析柱纯化后,经Western blot鉴定三种蛋白表达产物都有较好的抗原特异性;通过ELISA方法进行检测比较,确定GRA6-GRA2蛋白敏感性最高;以GRA6-GRA2蛋白作为标记抗原,制备弓形虫抗体检测试纸条,分别对敏感性对照阳性血清、特异性对照血清进行检测,并与弓形虫抗体间接血凝法对289份临床血清进行对比检测。结果表明:检测敏感性对照阳性血清可检测至1∶256,检测临床常见的猫细小病毒阳性血清、猫杯状病毒阳性血清和猫疱疹病毒阳性血清结果均为阴性;在弓形虫抗体检测试纸条和弓形虫抗体间接血凝法对289份临床血清的对比检测中,阳性率分别为2.42%和2.07%,符合率为99.5%。通过以上结果可知,采用GRA6-GRA2蛋白作为诊断抗原制备的胶体金试纸,具有良好的敏感性和特异性,为弓形虫病的快速诊断提供了切实可行的检测手段。 展开更多
关键词 弓形虫 抗原 GRA6-GRA2蛋白
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UPLC-Q Exactive Plus-MS分析高粱壳化学成分及黄嘌呤氧化酶体外抑制活性筛选
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作者 张瀚水 龚本义 +4 位作者 南敏伦 赫玉芳 赵昱玮 吴丛梅 殷玉和 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1587-1594,共8页
采用高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱质谱对高粱壳中的化学成分进行分析鉴定,并通过高效液相色谱法筛选抑制黄嘌呤氧化酶活性成分。该实验使用Hypersil GOLD C_(18)色谱柱(2.1 nm×30 nm,3μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)进行梯... 采用高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱质谱对高粱壳中的化学成分进行分析鉴定,并通过高效液相色谱法筛选抑制黄嘌呤氧化酶活性成分。该实验使用Hypersil GOLD C_(18)色谱柱(2.1 nm×30 nm,3μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)进行梯度洗脱,流速1.0 m L/min,进样量10μL。质谱分析采用ESI离子源,在正离子模式下采集数据,利用Xcalibur 4.1软件结合数据库对所得数据进行分析,共鉴定出27种化学成分。对刺槐素、葛根素、芹菜素、根皮苷、异鼠李素和3,3’,4’,7-四羟基黄酮6种化学成分进行活性筛选,发现芹菜素和3,3’,4’,7-四羟基黄酮对黄嘌呤氧化酶(XO)表现出较强的抑制活性,IC_(50)分别为18.11和34.59μmol/L。 展开更多
关键词 高粱壳 化学成分鉴定 质谱碎裂机理 黄嘌呤氧化酶 抑制活性成分
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异柠檬酸裂解酶肽类抑制剂的优化筛选 被引量:3
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作者 吴丛梅 赵韫慧 +2 位作者 李莹莹 孙宝娲 殷玉和 《吉林大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期581-586,共6页
利用噬菌体肽库筛选与计算机模拟分子对接技术,优化异柠檬酸裂解酶肽类抑制剂的筛选.先通过噬菌体肽库筛选出与异柠檬酸裂解酶(ICL)具有高亲和力的结合肽,再利用Discovery Studio 2.1模拟多肽与ICL蛋白晶体(1F8I)的分子对接,最后用Fmoc... 利用噬菌体肽库筛选与计算机模拟分子对接技术,优化异柠檬酸裂解酶肽类抑制剂的筛选.先通过噬菌体肽库筛选出与异柠檬酸裂解酶(ICL)具有高亲和力的结合肽,再利用Discovery Studio 2.1模拟多肽与ICL蛋白晶体(1F8I)的分子对接,最后用Fmoc固相合成法合成多肽,并对其生物活性进行检测.实验结果表明,通过噬菌体肽库筛选得到了29条七肽序列,其中12条可与ICL蛋白晶体成功对接.体外生物活性检测结果显示,得到的12条七肽均对ICL的活性有明显抑制作用(抑制率均超过50%). 展开更多
关键词 异柠檬酸裂解酶 肽类抑制剂 噬菌体肽库 虚拟筛选 分子对接
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pEgr-P16重组质粒的构建及其在EC9706细胞中的辐射诱导表达 被引量:3
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作者 吴丛梅 黄天华 +2 位作者 吴德生 谢庆东 徐小虎 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2003年第4期203-205,共3页
目的 :构建 pEgr-P16重组质粒并检测其在人食管癌细胞系EC9706中的辐射诱导表达。 方法 :人P16cDNA基因连接到Egr-1启动子的下游构建成 pEgr-P16重组质粒 ,利用脂质体介导转染人EC9706细胞 ,用Westernblot方法检测不同剂量γ射线照射后... 目的 :构建 pEgr-P16重组质粒并检测其在人食管癌细胞系EC9706中的辐射诱导表达。 方法 :人P16cDNA基因连接到Egr-1启动子的下游构建成 pEgr-P16重组质粒 ,利用脂质体介导转染人EC9706细胞 ,用Westernblot方法检测不同剂量γ射线照射后被转染细胞中P16的表达。结果 :酶切鉴定证实 pEgr-P16重组质粒构建正确。被 pEgr-P16重组质粒转染的人食管癌EC9706细胞经不同剂量γ射线照射后 ,P16基因表达均高于未照射组。 结论 展开更多
关键词 EGR-1启动子 Γ射线 P16表达 食管癌细胞系 WESTERNBLOT
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响应面法优化文冠果油脱色工艺的研究 被引量:6
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作者 吴丛梅 赵先花 +1 位作者 杨爽 高冷 《化学与生物工程》 CAS 2013年第1期79-83,共5页
探讨了文冠果油用复合脱色剂(活性白土/活性炭)脱色的工艺条件。在单因素实验的基础上,以脱色温度、脱色时间、脱色剂用量和搅拌速率为自变量,脱色率为响应值,采用Box-Behnken实验设计方法,考察各变量及其交互作用对脱色率的影响,利用De... 探讨了文冠果油用复合脱色剂(活性白土/活性炭)脱色的工艺条件。在单因素实验的基础上,以脱色温度、脱色时间、脱色剂用量和搅拌速率为自变量,脱色率为响应值,采用Box-Behnken实验设计方法,考察各变量及其交互作用对脱色率的影响,利用Design Expert软件模拟得到回归方程的预测模型。确定文冠果油的最佳脱色条件为:脱色温度50℃、脱色时间31min、脱色剂用量4%、搅拌速率19r.min-1,在此条件下,脱色率为90.38%。 展开更多
关键词 文冠果油 脱色 响应面法
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小鼠 Egr-1启动子的克隆及其辐射诱导特性的研究 被引量:2
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作者 吴丛梅 李修义 刘树铮 《白求恩医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期6-8,共3页
目的 :扩增 Egr- 1启动子并构建 Egr- PGL重组质粒 ,探讨不同剂量 X射线诱导被转染的NIH3T3细胞荧光素酶表达活性。方法 :利用 PCR方法扩增 Egr- 1p与 PGL3- E表达载体连接 ,用发光仪测定荧光素酶与底物反应的发光值 ,分析 X射线诱导荧... 目的 :扩增 Egr- 1启动子并构建 Egr- PGL重组质粒 ,探讨不同剂量 X射线诱导被转染的NIH3T3细胞荧光素酶表达活性。方法 :利用 PCR方法扩增 Egr- 1p与 PGL3- E表达载体连接 ,用发光仪测定荧光素酶与底物反应的发光值 ,分析 X射线诱导荧光素酶表达。结果 :对 PCR产物进行测序 ,序列基本正确 ;电泳检测重组质粒 ,有正确的特异性片段 ;重组质粒转染小鼠 NIH3T3细胞鉴定 Egr- 1p的辐射调节特性 ,发现照射组发光值均高于假照组 ,75m Gy照射组的表达量约为假照组的 5倍 ,2、4、6、8和 10 Gy照射组的表达量分别约为假照组的 5~ 7.5倍。结论 :扩增得到的 Egr- 1启动子在不同剂量 X射线照射下均具有诱导下游基因表达增强作用 ;低剂量照射诱导 Egr- 1启动子下游基因表达增强作用的发现可能在肿瘤基因治疗中更具有实用价值。 展开更多
关键词 小鼠 EGR-1启动子 克隆 X射线诱导 低剂量辐射 荧光素酶表达 肿瘤 治疗
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pcEgr-IFNγ重组质粒的构建与体外X射线诱导表达特性 被引量:5
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作者 吴丛梅 李修义 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2003年第1期1-4,共4页
目的 :扩增小鼠IFNγcDNA全长并构建pcEgr_IFNγ重组质粒 ,研究该重组质粒在不同剂量X射线作用下在B16细胞中的表达及时程。 方法 :利用PCR方法扩增小鼠IFNγcDNA全长 ,插入 pcDNA3.1质粒的多克隆位点 ,用Egr_1的启动子替代pcDNA3.1质粒... 目的 :扩增小鼠IFNγcDNA全长并构建pcEgr_IFNγ重组质粒 ,研究该重组质粒在不同剂量X射线作用下在B16细胞中的表达及时程。 方法 :利用PCR方法扩增小鼠IFNγcDNA全长 ,插入 pcDNA3.1质粒的多克隆位点 ,用Egr_1的启动子替代pcDNA3.1质粒的CMV启动子 ,构建成 pcEgr_IFNγ重组质粒 ;通过脂质体转染法将重组质粒转染入B16细胞 ,利用ELISA试剂盒检测在不同剂量X射线作用下 ,重组质粒的表达量及表达时程。 结果 :IFNγcDNA的扩增产物经测序 ,结果基本与已知序列相符 ,重组质粒经酶切鉴定 ,得出相应的特异带。不同剂量X射线照射后 ,pcEgr_IFNγ在B16细胞中表达量为77.73~94.60pg/ml ,明显高于对照组(P<0.05~P<0.01) ;2GyX射线照射后6h ,pcEgr_IFNγ表达量最高 ,为90.00pg/ml,明显高于对照组(P<0.001)。 结论 :用本实验克隆的IFNγcDNA所构建的 pcEgr_IFNγ重组质粒 ,经X射线的诱导 ,在被转染的B16细胞中表达量明显增高。对重组质粒X射线诱导表达的剂量时程的检测 ,为将来pcEgr_IFNγ基因治疗合并放疗的体内研究奠定了基础。 展开更多
关键词 IFNγ表达 PCR 质粒构建 X射线照射 时程 剂量效应
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肽类化合物对H_(37)Ra抑制的优化筛选 被引量:1
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作者 吴丛梅 李玲玲 +3 位作者 关晓侠 刘新涛 陈吉 殷玉和 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期196-201,共6页
通过抑菌试验,确定不同培养基条件下多肽化合物的抑菌效果,并测定其最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)。加入Vc,比较抑菌效果,进一步优化筛选H37Ra抑制剂。先根据ELISA试验结果进行噬菌体肽库筛选,然后利用分子对接... 通过抑菌试验,确定不同培养基条件下多肽化合物的抑菌效果,并测定其最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)。加入Vc,比较抑菌效果,进一步优化筛选H37Ra抑制剂。先根据ELISA试验结果进行噬菌体肽库筛选,然后利用分子对接软件模拟多肽与ICL蛋白晶体(1F8I)的分子对接,将成功对接的多肽采用Fmoc固相合成法合成,并对其生物活性进行检测。用制备型反相高效液相色谱仪对合成的多肽进行纯化并进行质谱检测。共筛选得到4条多肽且均有抑菌效果,并与剂量相关。结果显示,浓度为800-1 500μg/mL时,各组多肽均抑菌。浓度为500μg/mL时,正常培养基中只有一种肽有抑菌作用,而限制碳源培养基中均不能抑菌。2号肽抑菌效果最好,正常培养基中MIC为200μg/mL,限制碳源中为500μg/mL。阳性对照组,两种培养基抑菌效果一致,利福平MIC为0.8μg/mL,异烟肼MIC为0.5μg/mL。根据MIC结果,在正常培养基中加入Vc,检测到多肽、利福平和异烟肼的抑菌效果呈剂量依赖性升高。 展开更多
关键词 肽类化合物 MIC 噬菌体肽库 分子对接 Fmoc固相合成
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Egr-IFNγ重组质粒的构建和在B16细胞中的辐射诱导表达 被引量:1
9
作者 吴丛梅 李修义 +1 位作者 田梅 刘树铮 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期268-271,共4页
小鼠IFNγ cDNA基因连接到Egr-1启动子的下游构建成Egr-IFNγ重组质粒,利用质脂体介导转染B16细胞,用ELISA方法检测x射线照射后IFNγ表达的剂量效应和时程。结果表明,实验组的表达水平明显高于对照组,其中20Gy和2Gy照射组高于其它实验组... 小鼠IFNγ cDNA基因连接到Egr-1启动子的下游构建成Egr-IFNγ重组质粒,利用质脂体介导转染B16细胞,用ELISA方法检测x射线照射后IFNγ表达的剂量效应和时程。结果表明,实验组的表达水平明显高于对照组,其中20Gy和2Gy照射组高于其它实验组(p<0.01)。26y照射后6h IFNγ表达量最高(p<0.01)。转染后的B16细胞每隔24h接受2Gy x射线照射,结果显示第一次照射后表达量最高(p<0.01),然后逐渐降低。结果提示电离辐射可激活Egr-IFNγ重组质粒,并调节IFNγ基因表达,这项研究可能对肿瘤治疗的研究有一定的意义。 展开更多
关键词 辐射诱导 IFNγ表达 ELISA检测 X射线照射 细胞转染 肿瘤治疗
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pEgr-TNFα基因联合放疗抑制食管癌细胞生长的实验研究 被引量:1
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作者 吴丛梅 黄天华 +4 位作者 吴德生 谢庆东 李德锐 陈秀如 徐小虎 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2006年第1期6-8,共3页
背景与目的:研究pEgr-TNFα重组质粒在稳定转染的食管癌细胞中的辐射诱导表达,及其联合放射治疗抑制食管癌细胞生长的效果。材料与方法:将脂质体包裹的pEgr-TNFα重组质粒,转染食管癌细胞系EC9706中,经G418筛选,获得稳定表达的细... 背景与目的:研究pEgr-TNFα重组质粒在稳定转染的食管癌细胞中的辐射诱导表达,及其联合放射治疗抑制食管癌细胞生长的效果。材料与方法:将脂质体包裹的pEgr-TNFα重组质粒,转染食管癌细胞系EC9706中,经G418筛选,获得稳定表达的细胞;采用ELISA方法检测0.075Gy和2Gy剂量x射线诱导后TNFα的表达;观察该工种剂量X射线照射后,EC9706细胞的增长情况。结果:pEgr-TNFα重组质粒转染EC9706细胞,并获得稳定转染的细胞;大剂量x射线照射和低剂量X射线照射均可诱导TNFα表达增强,为对照组的6~6.3倍(P〈0.01);稳定转染的细胞经0.075Gy和2GyX射线照射,8d后细胞数明显低于未转染细胞组(P〈0.01)和稳定转染的假照射组(P〈0.01)。结论:体外pEgr-TNFα基因.放射联合治疗有明显的抑制食管癌细胞生长的作用。 展开更多
关键词 pEg-TNFα质粒 X射线照射 食管癌细胞 低剂量照射
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重组质粒pEgr-P16在EC9706细胞中的辐射诱导凋亡作用 被引量:1
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作者 吴丛梅 黄天华 +4 位作者 谢庆东 李德锐 陈秀如 吴德生 徐小虎 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2004年第3期129-131,F003,共4页
背景与目的 :研究pEgr_P16重组质粒在食管癌细胞系EC9706中的辐射诱导凋亡作用。 材料与方法 :pEgr_P16重组质粒通过脂质体介导转染人食管癌EC9706细胞 ,定量RT -PCR检测2Gyγ射线照射后被转染细胞中P16的表达和细胞凋亡率的变化。结果 ... 背景与目的 :研究pEgr_P16重组质粒在食管癌细胞系EC9706中的辐射诱导凋亡作用。 材料与方法 :pEgr_P16重组质粒通过脂质体介导转染人食管癌EC9706细胞 ,定量RT -PCR检测2Gyγ射线照射后被转染细胞中P16的表达和细胞凋亡率的变化。结果 :对照组无P16蛋白表达 ,转染质粒组细胞接受2Gyγ射线照射后2~24hP16表达量与时间呈曲线关系 ,在22h时P16的mRNA水平最高 ;P16基因联合放射可诱导食管癌细胞凋亡 ,凋亡率高于单纯照射组和单纯基因诱导组。结论 :γ射线可诱导 pEgr_P16重组质粒在人EC9706细胞中表达并显著提高EC9706细胞的凋亡率。本研究结果为食管癌基因 展开更多
关键词 EGR-1启动子 Γ射线 P16表达 凋亡
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浅谈基础医学研究生综合素质的培养 被引量:5
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作者 吴丛梅 李建宏 黄天华 《山西医科大学学报(基础医学教育版)》 2004年第4期419-420,共2页
基础医学研究生的培养应该紧跟时代要求,改进教学模式,重视基础知识、实验技能、科研素质和创新意识的培养,培养出真正有创造力的适合社会发展需要的人才.
关键词 基础医学 研究生 综合素质 素质培养 科研素质 实验技能
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低剂量辐射联合pEgr-P16基因治疗诱导食管癌细胞凋亡的研究 被引量:2
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作者 吴丛梅 黄天华 +4 位作者 吴德生 谢庆东 李德锐 陈秀如 徐小虎 《汕头大学医学院学报》 2005年第2期68-70,F002,共4页
目的:研究大剂量(2Gy)和低剂量(0.075Gy)X射线诱导pEgr P16重组质粒稳定转染的食管癌细胞株EC9706凋亡的作用。方法:将脂质体包裹的pEgr P16重组质粒,转染食管癌细胞系EC9706中,经G418筛选,获得稳定表达的细胞;采用Westernblot方法检测... 目的:研究大剂量(2Gy)和低剂量(0.075Gy)X射线诱导pEgr P16重组质粒稳定转染的食管癌细胞株EC9706凋亡的作用。方法:将脂质体包裹的pEgr P16重组质粒,转染食管癌细胞系EC9706中,经G418筛选,获得稳定表达的细胞;采用Westernblot方法检测不同剂量X射线诱导后P16的表达;观察不同剂量X射线照射后,EC9706细胞凋亡率的变化。结果:pEgr P16重组质粒转染EC9706细胞,并获得稳定转染的细胞;2Gy和0.075GyX射线照射均可诱导P16表达增强;稳定转染的细胞经2Gy和0.075GyX射线照射,细胞凋亡率明显高于假照射(0Gy)组(P<0.05~0.01)。结论:0.075GyX射线照射可诱导稳定转染的EC9706细胞中P16表达增强,使诱导细胞凋亡率提高。 展开更多
关键词 癌细胞凋亡 低剂量辐射 基因治疗 pEgr-P16 EC9706细胞 X射线照射 细胞凋亡率 Western X射线诱导 稳定转染 食管癌细胞株 重组质粒 食管癌细胞系 不同剂量 表达增强 脂质体包裹 稳定表达 blot 0.05 大剂量
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pEgr-Endostatin-EGFP辐射诱导生物学活性的研究 被引量:1
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作者 吴丛梅 田梅 《中国实验诊断学》 2007年第10期1281-1284,共4页
目的构建pEgr-Endostatin-EGFP重组质粒,研究其体内、体外X射线诱导表达特性和对肿瘤生长的抑制作用。方法构建pEgr-Endostatin-EGFP重组质粒,脂质体包裹转染B16细胞系,通过RT-PCR方法检测Endostatin表达特性,流式细胞术法检测EGFP表达... 目的构建pEgr-Endostatin-EGFP重组质粒,研究其体内、体外X射线诱导表达特性和对肿瘤生长的抑制作用。方法构建pEgr-Endostatin-EGFP重组质粒,脂质体包裹转染B16细胞系,通过RT-PCR方法检测Endostatin表达特性,流式细胞术法检测EGFP表达特性。建立荷瘤小鼠模型,给予质粒+5 Gy X射线治疗,共3次,检测18日肿瘤组织重量。结果真核表达载体pEgr-Endostatin-EGFP构建成功并转染B16细胞。被转染的B16细胞经0.05-20 Gy X射线照射,EGFP表达明显增高。2 Gy照射后8 h EGFP表达达到最高值。体内研究证实,pEgr-Endostatin-EGFP基因-放射治疗能够明显抑制肿瘤组织生长。结论pEgr-Endostatin-EGFP重组质粒具有辐射诱导表达增强的特性,pEgr-Endo-statin-EGFP基因-放射治疗具有显著的抗黑色素瘤作用,本实验结果为肿瘤基因-放射治疗研究的发展提供了实验依据。 展开更多
关键词 X射线 Endostafin 肿瘤
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pEgr-MDA7重组质粒辐射诱导特性的检测
15
作者 吴丛梅 黄天华 +2 位作者 吴德生 谢庆东 徐小虎 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2006年第5期381-383,共3页
背景与目的克隆人MDA7cDNA基因,构建pEgr-MDA7重组质粒并检测其在人食管癌细胞系EC9706中经辐射诱导后mRNA水平。材料与方法从人外周血mRNA中克隆人MDA7cDNA基因,连接到Egr-1启动子的下游构建成pEgr-MDA7重组质粒,利用脂质体介导转染人E... 背景与目的克隆人MDA7cDNA基因,构建pEgr-MDA7重组质粒并检测其在人食管癌细胞系EC9706中经辐射诱导后mRNA水平。材料与方法从人外周血mRNA中克隆人MDA7cDNA基因,连接到Egr-1启动子的下游构建成pEgr-MDA7重组质粒,利用脂质体介导转染人EC9706细胞,用定量PCR方法检测不同剂量X射线照射后被转染细胞中MDA7的mRNA水平。结果测序结果证实MDA7cDNA基因序列正确,酶切鉴定证实pEgr-MDA7重组质粒构建正确。被pEgr-MDA7重组质粒转染的人食管癌EC9706细胞经不同剂量X射线照射后,MDA7基因mRNA水平均高于未照射组。结论X射线可诱导pEgr-MDA7重组质粒在人EC9706细胞中表达增强。 展开更多
关键词 MDA-7基因 pEgr-MDA7重组质粒 辐射
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小分子化合物S1诱导PC3细胞凋亡的作用
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作者 吴丛梅 杨清 金顺子 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期361-363,共3页
目的:研究小分子化合物8-氧-8H-苊并[1,2-b]吡咯-9-腈的氨基或卤素取代衍生物(S1)对人雄性激素非依赖型前列腺癌PC3细胞的作用及机制。方法:常规培养PC3细胞,分为10.00、5.00、1.00、0.50、0.10、0.05和0.01μmol·L^-... 目的:研究小分子化合物8-氧-8H-苊并[1,2-b]吡咯-9-腈的氨基或卤素取代衍生物(S1)对人雄性激素非依赖型前列腺癌PC3细胞的作用及机制。方法:常规培养PC3细胞,分为10.00、5.00、1.00、0.50、0.10、0.05和0.01μmol·L^-1 S1化合物组,同时设培养肿瘤细胞对照组和抗癌药物环磷酰胺(5.00 μmol·L^-1)对照组,采用MTT法检测PC3细胞增殖抑制率,流式细胞术检测诱导PC3细胞凋亡作用,Caspase3、8和9试剂盒检测细胞凋亡途径。结果:0.10~10.00μmol·L^-1 S1化合物组,PC3细胞生长抑制率明显高于环磷酰胺对照组(P〈O.01);5.00和10.00μmol·L^-1 S1化合物组PC3细胞凋亡率明显高于培养肿瘤细胞对照组(P〈0.01);10.00μmol·L^-1 S1化合物作用于PC3细胞后不同时间(1、2、4及6h)细胞Caspase 3和Caspase 9活性均显著高于培养肿瘤细胞对照组(P〈0.01),Caspase 8活性未见明显改变。结论:S1化合物能够通过诱导PC3细胞凋亡而导致细胞死亡,其作用机制是线粒体途径,进一步证实S1化合物作为肿瘤治疗药物的可行性。 展开更多
关键词 PC3细胞系 细胞凋亡 机制
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一种新型小分子化合物增强PC3细胞的辐射敏感性
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作者 吴丛梅 殷玉和 吴德生 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期28-30,共3页
目的检测小分子化合物8-氧-8H-苊并[1,2-b]吡咯-9-腈的氨基取代衍生物(S1)对前列腺癌细胞系PC3辐射敏感性的作用。方法采用流式细胞术分别检测不同剂量X射线和不同浓度S1化合物以及两者联合作用后,PC3细胞凋亡率的变化;采用Western blo... 目的检测小分子化合物8-氧-8H-苊并[1,2-b]吡咯-9-腈的氨基取代衍生物(S1)对前列腺癌细胞系PC3辐射敏感性的作用。方法采用流式细胞术分别检测不同剂量X射线和不同浓度S1化合物以及两者联合作用后,PC3细胞凋亡率的变化;采用Western blot方法检测S1作用后不同时间Bcl-2蛋白在PC3细胞中的表达变化。结果X射线诱导PC3细胞凋亡具有剂量依赖特性,2Gy、5GyX射线照射未发现明显的凋亡,10Gy、20Gy照射组有明显的凋亡产生(P<0.01);S1化合物能够显著诱导PC3细胞凋亡,并具有剂量依赖特性,其中5μmol/L和10μmol/L组凋亡率明显高于对照组(P<0.01);S1作用后2~12hPC3细胞中Bcl-2蛋白表达逐渐减低;S1作用后,分别给予PC3细胞2Gy和8GyX射线照射,细胞凋亡率明显高于单独照射组和单独S1作用组(P<0.01)。结论S1能够增强PC3细胞对X射线的敏感性,可望为临床提高前列腺癌放疗效果,降低辐射损伤提供新的治疗方案。 展开更多
关键词 前列腺癌 放疗 增敏
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pEgr-Endostatin-EGFP抑制黑色素瘤生长及血管生成
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作者 吴丛梅 张洁琼 殷玉和 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期905-907,共3页
目的检测pEgr-Endostatin-EGFP质粒的表达特性和pEgr-Endostatin-EGFP基因-放射治疗小鼠黑色素瘤的作用。方法pEgr-Endostatin-EGFP重组质粒用脂质体方法转染B16细胞,采用Western blot方法检测Endostatin表达。建立小鼠荷瘤模型,注射质... 目的检测pEgr-Endostatin-EGFP质粒的表达特性和pEgr-Endostatin-EGFP基因-放射治疗小鼠黑色素瘤的作用。方法pEgr-Endostatin-EGFP重组质粒用脂质体方法转染B16细胞,采用Western blot方法检测Endostatin表达。建立小鼠荷瘤模型,注射质粒并给予5GyX射线照射,共3次,18天观察肿瘤生长情况,并采用免疫组织化学方法检测肿瘤血管生成。结果转染了pEgr-Endostatin-EGFP质粒的B16细胞和转染并接受照射的B16细胞组可以检测到Endostatin蛋白表达。C57BL/6J小鼠给予pEgr-Endostatin-EGFP质粒注射并接受肿瘤X射线照射,可以显著抑制肿瘤生长(P<0.01),而且肿瘤局部血管生成明显降低(P<0.01)。结论本研究数据为肿瘤基因-放射治疗提供了新的治疗方案。 展开更多
关键词 ENDOSTATIN X射线 血管生成
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生物工程专业学生新培养模式
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作者 吴丛梅 殷玉和 +1 位作者 高冷 李东风 《吉林省教育学院学报》 2012年第1期125-126,共2页
生物工程产业是目前国家重点支持的领域,新技术的快速发展也带动了生物工程成为最有前途和希望的产业。但是由于我国生物工程方面起步较晚,基础比较薄弱,对毕业生的需求没有形成规模,造成就业形势紧张。在目前情况下,我们根据对人才市... 生物工程产业是目前国家重点支持的领域,新技术的快速发展也带动了生物工程成为最有前途和希望的产业。但是由于我国生物工程方面起步较晚,基础比较薄弱,对毕业生的需求没有形成规模,造成就业形势紧张。在目前情况下,我们根据对人才市场需求的跟踪和了解,改变相关的教学模式,尽力适应行业发展需要,使学生更好掌握专业知识的同时,有更好的发展前景。 展开更多
关键词 生物工程 培养模式 综合能力 分组培养
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心肌营养素-1 ELISA测定法的建立及初步应用 被引量:6
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作者 林楚佳 林少达 +2 位作者 吴丛梅 黄天华 陈伟莹 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期183-185,共3页
目的应用生物素链霉亲和素酶联免疫吸附法(BSA ELISA)建立血浆心肌营养素1(CT1)测定法,并初步应用于冠心病患者血浆CT1水平的检测。方法用鼠抗重组人CT1单抗包被酶标板,加入待测抗原,并依次加入生物素化羊抗重组人CT1多克隆抗体、辣根... 目的应用生物素链霉亲和素酶联免疫吸附法(BSA ELISA)建立血浆心肌营养素1(CT1)测定法,并初步应用于冠心病患者血浆CT1水平的检测。方法用鼠抗重组人CT1单抗包被酶标板,加入待测抗原,并依次加入生物素化羊抗重组人CT1多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记链霉亲合素,用H2O2邻苯二胺显色。检测35名冠心病患者及对照组血浆CT1含量的变化。结果方法的线性范围为10~2000pg/ml,检测下限为10pg/ml,批内变异系数为1.76%~7.64%,批间变异系数为5.96%~9.04%。结论该方法简便、快速,特异性、敏感性、重复性均在临床检测可接受范围内,标准曲线线性良好,适用于基础研究与临床检验。 展开更多
关键词 心肌营养素-1 生物素-链霉亲合素 酶联免疫吸附法 冠心病 实验室检查
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