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新型主动配电网智能规划与决策技术研究综述
1
作者 吴雪琼 夏栋 《综合智慧能源》 CAS 2023年第11期20-26,共7页
随着新型电力系统加速构建,主动可再生分布式能源日益普及,无源配电网正迅速转变为有源配电网,但可再生电源具有间歇性和不可控性,大量可再生能源的渗透给网络的安全可靠运行带来了严重问题。主动配电网作为解决大规模分布式能源接入及... 随着新型电力系统加速构建,主动可再生分布式能源日益普及,无源配电网正迅速转变为有源配电网,但可再生电源具有间歇性和不可控性,大量可再生能源的渗透给网络的安全可靠运行带来了严重问题。主动配电网作为解决大规模分布式能源接入及配网优化运行问题的有效解决方案,为了保持电网的最佳运行状态,大量学者围绕主动配电网管理这一主题进行了广泛研究。从主动配电网智能规划技术、主动配电网智能决策与控制技术、主动配电网供电恢复技术与主动配电网负荷管理技术等相关重点领域出发,分析了主动配电网关键技术的研究现状,阐述了国内外主动配电网的研究进展,指出未来的研究方向主要是考虑各种不确定性及其时间和空间相关性的鲁棒规划等。 展开更多
关键词 新型电力系统 分布式能源 主动配电网技术 智能控制技术 可再生能源 分布式储能系统 鲁棒优化 微电网
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基于改进A*算法的机器人路径规划与避障技术
2
作者 黄宸希 韩韬 +1 位作者 吴雪琼 冯荣强 《电子设计工程》 2024年第1期24-28,共5页
移动机器人在作业过程中内存消耗大、行进路径不平滑且极易与障碍物发生碰撞,而传统的A*算法无法较好地解决此类问题。针对上述情况,文中通过考虑栅格点精度处理、关键点选取及转折点平滑处理等多种因素,并结合传统的A*算法提出了一种... 移动机器人在作业过程中内存消耗大、行进路径不平滑且极易与障碍物发生碰撞,而传统的A*算法无法较好地解决此类问题。针对上述情况,文中通过考虑栅格点精度处理、关键点选取及转折点平滑处理等多种因素,并结合传统的A*算法提出了一种新的移动机器人路径规划与避障方法。在相同测试场地下的仿真实验结果表明,与传统A*算法相比,当α取0.75时,文中算法的路径长度降低了1.80%,机器人的转折数量减少了40%,运动时间则下降了10.78%。由此可知,考虑多种因素的路径规划方法所得到的路径较短且距离障碍物较远,同时转折点数量显著减少,路径也更为平滑。 展开更多
关键词 A*算法 关键点 路径平滑 碰撞
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基于最优经济效益的虚拟电厂平台优化调度模型
3
作者 黄宸希 吴雪琼 +3 位作者 冯荣强 黄晓铭 唐伟 夏栋 《水力发电》 CAS 2024年第2期90-93,113,共5页
为了解决多种分布式资源的协调调度并提高负荷聚合商的经济效益,提出了一种考虑分布式储能、风电、及需求侧响应的虚拟电厂调度模型。基于对不同种类分布式资源的日前出力基础上,对虚拟电厂调度策略进行实时优化,并通过协调多种需求侧... 为了解决多种分布式资源的协调调度并提高负荷聚合商的经济效益,提出了一种考虑分布式储能、风电、及需求侧响应的虚拟电厂调度模型。基于对不同种类分布式资源的日前出力基础上,对虚拟电厂调度策略进行实时优化,并通过协调多种需求侧资源的出力预测情况,降低分布式资源的实际出力与预测值之间的偏差,使得虚拟电厂偏离日前计划安排最小,实现虚拟电厂经济效益最优。仿真实验结果表明,含有多种不同种类分布式资源的虚拟电厂经济效益高于只含有单一分布式资源的虚拟电厂,并且当分布式资源的预测出力越接近于实际出力时所构建的虚拟电厂调度模型经济效益最优。 展开更多
关键词 虚拟电厂 优化调度方法 预测 分布式资源 最优经济效益 调度策略
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结核分枝杆菌耐乙胺丁醇分子机制的研究 被引量：15
4
作者 吴雪琼 梁建琴 +5 位作者 李洪敏 张俊仙 由昆 金关甫 刘佳文 闫国蕊 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期49-54,共6页
目的　了解结核分枝杆菌耐乙胺丁醇分子机制 ,建立快速分子药敏试验方法。方法　通过聚合酶链反应 (PCR) -单链构象多态性 (SSCP)、PCR-限制性片段长度多态性 (RFL P)和 PCR-直接测序 (DS)技术分析 10 7株结核分枝杆菌临床分离株 emb B... 目的　了解结核分枝杆菌耐乙胺丁醇分子机制 ,建立快速分子药敏试验方法。方法　通过聚合酶链反应 (PCR) -单链构象多态性 (SSCP)、PCR-限制性片段长度多态性 (RFL P)和 PCR-直接测序 (DS)技术分析 10 7株结核分枝杆菌临床分离株 emb B基因。结果　以 H3 7Rv标准株为对照 ,10 7株结核分枝杆菌临床分离株的 16 S r DNA SSCP电泳图谱均与结核分枝杆菌标准相同。 38株药物敏感株的 emb B基因、SSCP均泳动正常 ,RFL P和 DS分析与对照株相同。 6 9株耐乙胺丁醇 (EMB)分离株中 ,2 5株 (36 .2 % ) emb B基因 SSCP泳动异常 ;8株 RFL P分析异常 ;DS分析 2 5株均为 30 6位密码子突变 ,其中 1株合并有 2 74位 CGC→ CCC突变 ,其 EMB MICs均≥ 2 0 μg/ml;8株为 30 6位 ATG→ATA或 ATT突变 ,17株为 ATG→GTG或 CTG突变 ,后者 EMB MICs均≥ 30μg/ml。结论　部分结核分枝杆菌耐乙胺丁醇是由于其 emb B基因 (尤其是 30 6位密码子 )突变所致 ,PCR- SSCP技术可能成为测定部分结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药基因型的简便。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 药物耐受性 聚合酶链反应 单链构象多态性 DNA序列分析 乙胺丁醇
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结核分支杆菌Ag85A DNA疫苗免疫治疗作用的研究 被引量：21
5
作者 吴雪琼 张俊仙 +5 位作者 李洪敏 史迎昌 张灵霞 梁建琴 金关甫 由昆 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期17-19,22,共4页
目的:研究结核分支杆菌Ag85A DNA疫苗的免疫治疗作用。方法:用结核分支杆菌H37Rv腹腔内注射BALB/c小鼠 2个月后,将小鼠随机分为 5组,分别用生理盐水(A)、载体质粒(B)、卡介苗(C)、维卡菌苗(D)和 Ag85A DNA疫苗(E)免疫小鼠;用ELISA法检... 目的:研究结核分支杆菌Ag85A DNA疫苗的免疫治疗作用。方法:用结核分支杆菌H37Rv腹腔内注射BALB/c小鼠 2个月后,将小鼠随机分为 5组,分别用生理盐水(A)、载体质粒(B)、卡介苗(C)、维卡菌苗(D)和 Ag85A DNA疫苗(E)免疫小鼠;用ELISA法检测血清抗体;免疫治疗2月和5月时,分别取肺、肝和脾脏观察病理改变、称取重量、作菌落计数、肺组织涂片及脾淋巴细胞转化试验。结果:DNA疫苗组抗原特异性抗体不同程度升高。免疫治疗2月时,各组鼠脾淋巴细胞转化率无显著差异;各治疗组肺组织涂片细菌数和肺菌落计数均比对照组不同程度地减少;C和B组的肺病变程度较轻。免疫治疗5月时,各治疗组鼠脾淋巴细胞转化率均显著增高;各组肺、脾细菌数无显著差别比和D组的肺未见明显病变。结论:DNA疫苗似乎具有一定的免疫治疗效果。 展开更多
关键词 DNA疫苗 结核分支杆菌 结核病 免疫治疗
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应用基因芯片分析结核分枝杆菌常见耐药基因型的研究 被引量：29
6
作者 吴雪琼 张琼 +9 位作者 张俊仙 梁建琴 鲁红丽 李洪敏 张洪恩 陆阳 荣利 吕翠环 张广宇 邢婉丽 《中国防痨杂志》 CAS 2006年第1期4-10,共7页
目的应用基因芯片快速检测结核分枝杆菌耐药基因型,建立一种新的分子药敏试验方法。方法以传统药敏试验和PCR-直接测序方法为对照,应用基因芯片快速检测157株结核分枝杆菌临床分离株异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)和乙胺丁醇(EMB... 目的应用基因芯片快速检测结核分枝杆菌耐药基因型,建立一种新的分子药敏试验方法。方法以传统药敏试验和PCR-直接测序方法为对照,应用基因芯片快速检测157株结核分枝杆菌临床分离株异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)和乙胺丁醇(EMB)耐药基因(katGr、poB、rp-sLr、rs和embB)的带荧光素标记的PCR产物。结果PCR-直接测序和基因芯片检测36株结核分枝杆菌药物敏感株的5种耐药基因均为野生型。121株结核分枝杆菌耐药分离株中,56株耐INH分离株,katG基因突变率为62.5%,其中katG缺失率为7.5%,315位密码子突变率为55.4%,279位密码子突变率为1.8%;104株耐RFP株,rpoB基因突变率为94.2%,最常见的突变位点为531位和526位密码子(突变率分别为60.6%、15.4%),双位点突变率为5.8%,还发现511、513、515、516、517、518和533位密码子突变;62株耐SM分离株,rpsL和rrs总突变率为88.7%(两者分别为82.3%、6.5%),rpsL突变位于43位和88位密码子(突变率分别为77.4%、4.8%),rrs突变位于513位和516位碱基(突变分别为4.8%、1.6%);57株为耐EMB株,embB基因突变率为61.4%,均为306位密码子突变,最常见的突变为ATG→GTG或ATA(突变率分别为35.1%、15.8%),还发现306位密码子ATG→ATC、ATT和CTG突变。通过基因芯片检出的突变与基因测序结果一致。结论应用基因芯片可分析大多数结核分枝杆菌耐药基因型,弥补传统药敏试验方法的不足,指导临床治疗。 展开更多
关键词 基因芯片 耐药基因型 聚合酶链反应 分枝杆菌 结核
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结核分支杆菌ESAT6蛋白的表达、纯化及抗原性研究 被引量：16
7
作者 吴雪琼 张俊仙 +4 位作者 史迎昌 李洪敏 金关甫 夏湘萱 刘军 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2001年第9期14-17,共4页
目的 :获得重组ESAT6蛋白 ,研究其免疫学特性 ,评价其在结核病血清学诊断中的价值。方法 :分别用生理盐水和卡介苗免疫小鼠 8周后 ,以结核分支杆菌接种小鼠。应用基因工程技术表达、纯化ESAT6蛋白 ,分别以结核分支杆菌PPD或纯化的rESAT... 目的 :获得重组ESAT6蛋白 ,研究其免疫学特性 ,评价其在结核病血清学诊断中的价值。方法 :分别用生理盐水和卡介苗免疫小鼠 8周后 ,以结核分支杆菌接种小鼠。应用基因工程技术表达、纯化ESAT6蛋白 ,分别以结核分支杆菌PPD或纯化的rESAT6蛋白为抗原 ,通过ELISA方法及结核病一步法检测小鼠或人血清中抗结核抗体。结果 :重组质粒 pET2 4b -ESAT6在大肠杆菌BL2 (DE3)细胞内以包涵体形式存在 ,分子量约6kDa ,每 10 0ml培养菌可获得约 18mg纯化的重组蛋白。生理盐水和卡介苗免疫小鼠血后血清中抗ESAT6抗体无区别 ;结核分支杆菌攻击后 ,两组小鼠血清中抗ESAT6抗体均明显升高 ,但只有卡介苗组小鼠抗体水平超过平均值 +2标准误。以 33例正常人血清的OD值 +2S为正常界限值 ,33例正常人和 32例结核病人血清一步法和PDD、rESAT6ELISA检测抗结核抗体的特异性和敏感性分别为 :一步法 87.9% (2 9/33)、6 5 .6 %(2 1/32 ) ;PPD 93 .9% (31/33)、6 2 .5 % (2 0 /32 ) ;rESAT6 97% (32 /33)、18.2 % (4/32 )。结论 :pET2 4b -ESAT6大肠杆菌工程菌能以包涵形式高效表达重组ESAT6蛋白 ,卡介苗免疫对血清中抗ESAT6抗体无影响 ,结核病人血清中抗ESAT6抗体阳性率低 ,rESAT6纯化蛋白可作为结核病血清学诊断的混合抗原之一。 展开更多
关键词 ESAT6 基因表达 血清学诊断 分支杆菌 结核
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结核分支杆菌MPT63抗原的表达及其血清学诊断价值的研究 被引量：10
8
作者 吴雪琼 张俊仙 +2 位作者 夏湘萱 刘军 李洪敏 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期8-10,共3页
获得结核分支杆菌重组MPT6 3蛋白 ,研究其免疫学特性 ,评价其在结核病血清学诊断中的价值 ,寻找更有效的结核病诊断试剂。方法 :应用基因工程技术表达、纯化MPT6 3蛋白 ,通过Westernblotting和免疫双扩散试验分析其抗原性 ,通过斑点免... 获得结核分支杆菌重组MPT6 3蛋白 ,研究其免疫学特性 ,评价其在结核病血清学诊断中的价值 ,寻找更有效的结核病诊断试剂。方法 :应用基因工程技术表达、纯化MPT6 3蛋白 ,通过Westernblotting和免疫双扩散试验分析其抗原性 ,通过斑点免疫试验、结明试验和结核病一步法检测血清中抗结核抗体。结果 :重组质粒 pET2 4b -MPT6 3测序表明具有正确的编码序列 ,MPT6 3蛋白在大肠杆菌细胞内以可溶性蛋白的形式高效表达 ,表达量占菌体总蛋白的 40 %左右 ,分子量约 16kDa ,Westernblotting和免疫双扩散试验检测抗结核抗体的阳性率分别为 46 .7%和 5 0 % ,结核病一步法检测的阳性率为 70 % ,结明试验的阳性率为 80 %。在34例正常血清中 ,MPT6 3和PPD斑点免疫试验检测抗结核抗体的阳性率分别为 38.2 %和 35 .3 % ,结核病一步法检测的阳性率为 2 3 .5 %。结论 :pET2 4b -MPT6 3大肠杆菌工程菌能以可溶性蛋白的形式高效表达 ,重组的MPT6 3也许可作为结核病血清学诊断的一组抗原之一。 展开更多
关键词 抗原 MPT63基因表达 血清学诊断 分支杆菌 结核
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结核分枝杆菌katG和inhA基因突变的研究 被引量：8
9
作者 吴雪琼 张俊仙 +3 位作者 庄玉辉 张晓刚 李国利 何秀云 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期362-367,共6页
为了解结核分枝杆菌耐异烟肼（ＩＮＨ）分离株ｋａｔＧ基因和ｉｎｈＡ调节序列的突变情况，探讨其在ＩＮＨ耐药性中的可能作用。应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和ＰＣＲ－单链构象多态性（ＳＳＣＰ）方法对６２株结核分枝杆菌临床分离株的... 为了解结核分枝杆菌耐异烟肼（ＩＮＨ）分离株ｋａｔＧ基因和ｉｎｈＡ调节序列的突变情况，探讨其在ＩＮＨ耐药性中的可能作用。应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和ＰＣＲ－单链构象多态性（ＳＳＣＰ）方法对６２株结核分枝杆菌临床分离株的ｋａｔＧ基因和ｉｎｈＡ调节序列进行分析。ＰＣＲ分析结果显示：ｋａｔＧ基因和ｉｎｈＡ调节序列的敏感性为１～１０ｐｇＤＮＡ；其引物ＰＣＲ扩增都具有较高的特异性。以Ｈ３７Ｒｖ标准株为对照，１３株敏感株中，１２株ｋａｔＧ基因扩增产物ＳＳＣＰ泳动正常，１株ｋａｔＧ异常；２４株耐非ＩＮＨ抗结核药物株中，８株ｋａｔＧＳＳＣＰ异常；上述２７株的ｉｎｈＡ调节序列ＳＳＣＰ均泳动正常。２５株耐ＩＮＨ株中，３株ｋａｔＧ基因ＰＣＲ扩增阴性，２２株ｋａｔＧ扩增阳性，其中１６株ＳＳＣＰ泳动异常；４株ｉｎｈＡ调节序列ＳＳＣＰ泳动异常，其ｋａｔＧ基因ＳＳＣＰ也异常。结果表明，某些结核分枝杆菌ＩＮＨ耐药性可能是由于其ｋａｔＧ基因完全缺失、ｋａｔＧ基因或ｉｎｈＡ调节序列突变所致，但某些菌株也可能与其无关，是其它耐药基因所致或存在多种机制，尚需进一步探讨。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 异烟肼 SSCP 结核分枝杆菌
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结核杆菌分泌蛋白Ag85A基因的克隆、表达及其诊断价值 被引量：7
10
作者 吴雪琼 张俊仙 +5 位作者 王安生 张妍 周文强 郑冬燕 何菊芳 张涛 《广东医学》 CAS CSCD 2002年第12期1258-1259,共2页
目的获得重组抗原85A(rAg85A),研究其免疫学特性,评价其在结核病血清学诊断中的价值。方法应用基因工程技术克隆、表达、纯化Ag85A蛋白,通过Western印迹分析其抗原性。分别以结核分支杆菌纯蛋白衍生物(PPD)或纯化的rAg85A蛋白为抗原,通... 目的获得重组抗原85A(rAg85A),研究其免疫学特性,评价其在结核病血清学诊断中的价值。方法应用基因工程技术克隆、表达、纯化Ag85A蛋白,通过Western印迹分析其抗原性。分别以结核分支杆菌纯蛋白衍生物(PPD)或纯化的rAg85A蛋白为抗原,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)及结核病一步法检测血清中抗结核抗体。结果重组质粒pET30a-Ag85A测序表明与报道的序列相同。它在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的2％左右,Western印迹分析它与抗结核分支杆菌多克隆抗体具有良好的免疫反应性。纯化的rAg85A样品纯度约85％左右,每100 ml培养菌可获得2 mg左右的重组蛋白。以33例正常人血清的OD值+2s为正常界限值,一步法的特异性和敏感性分别为87.9％和65.6％;PPD分别为93.9％和62.5％;rAg85A分别为93.9％和15.6％。结论pET30a-Ag85A大肠杆菌工程菌能以包涵体形式表达rAg85A蛋白,该蛋白具有较高的抗原特异性,但检测抗结核抗体的灵敏度低。 展开更多
关键词 克隆 诊断 抗原 Ag85A基因 结核分支杆菌 基因表达 结核病 酶联免疫吸附试验
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护理标识在手术室护理管理中的应用研究 被引量：32
11
作者 吴雪琼 马继 +2 位作者 陈丽 蔡丽 李向青 《中国医药导报》 CAS 2013年第26期152-153,157,共3页
目的 研究手术室护理标识在手术时风险管理中的应用.方法 2012年1月～2012年12月以四川省简阳市人民医院手术室为单位,将5～8号手术室作为A组（23例）,将9～12号手术室作为B组（23例）,A组患者在常规护理的基础上实施护理标识管理,B组... 目的 研究手术室护理标识在手术时风险管理中的应用.方法 2012年1月～2012年12月以四川省简阳市人民医院手术室为单位,将5～8号手术室作为A组（23例）,将9～12号手术室作为B组（23例）,A组患者在常规护理的基础上实施护理标识管理,B组患者全部实施常规的护理风险管理.采用问卷调查的方式对A组的护士工作压力进行分析,并将其与B组护理人员的压力进行对比.比较患者的投诉率和满意度、医生的满意度、护理用药过程中出现的差错率,以及护理人员的主要压力源.结果 A组患者的满意度得分[（72.9±23.6）分]显著低于B组[（86.2±25.1）分],A组患者满意度及医生满意度（96.3％,87.4％）显著高于B组（74.8％,66.7％）.A组投诉率与差错率（0.2％,0.2％）显著低于B组（0.9％,0.6％）.B组护理人员对时间分配、工作量大小等方面的工作问题感到紧张,B组手术室护理人员压力较A组大（P＜0.05）.结论 手术室采用护理标识进行风险管理,可以有效提高患者满意度,减少护理人员的压力源,减轻护理人员工作紧张感,减少差错率,提高效率. 展开更多
关键词 手术室 护理标识 管理
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PCR-SSCP分支杆菌菌种初步鉴定方法的建立及其应用 被引量：46
12
作者 吴雪琼 张俊仙 +2 位作者 刘佳文 黄海南 王晋洪 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2000年第7期25-26,共2页
建立一种简便、快速、灵敏和特异的分支杆菌菌种鉴定方法。方法 :通过聚合酶链反应 (PolymeraseChainReaction ,PCR) -单链构象多态性 (Single -strndedConformationPolymorphism ,SSCP)方法分析分支杆菌 16SrRNA ,根据其电泳图谱与标... 建立一种简便、快速、灵敏和特异的分支杆菌菌种鉴定方法。方法 :通过聚合酶链反应 (PolymeraseChainReaction ,PCR) -单链构象多态性 (Single -strndedConformationPolymorphism ,SSCP)方法分析分支杆菌 16SrRNA ,根据其电泳图谱与标准株的相似性进行菌种初步鉴定。结果 :2 9种分支杆菌标准株中 ,除结核分支杆菌、牛结核分支杆菌和卡介苗之间及堪萨斯分支杆菌和胃分支杆菌之间SSCP电泳图谱相似外 ,其余各种分支杆之间电泳图谱均有显著差异。 70株BACTECTB4 60初步鉴定为结核分支杆菌复合群的临床分离株中 ,55株显示与结核分支杆菌SSCP电泳图谱相似 ,15例 (2 1.4 % )显示出与结核分支杆菌完全不同的电泳图谱 ;10株经传统方法鉴定为结核分支杆菌的分离株中 ,仅 1株显示出与结核分支杆菌不同的电泳图谱。结论 :PCR -SSCP有可能成为一种快速、有效的分支杆菌菌种初步鉴定方法。 展开更多
关键词 菌种鉴定 分支杆菌 PCR-SSCP
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结核杆菌分泌蛋白katG基因的克隆、表达及其诊断价值 被引量：5
13
作者 吴雪琼 张俊仙 +3 位作者 张翠英 张妍 王安生 金关甫 《广东医学》 CAS CSCD 2004年第1期41-43,共3页
目的　获得重组katG(简称rkatG)蛋白 ,研究其免疫学特性 ,评价其在结核病血清学诊断中的价值。方法　应用基因工程技术表达、纯化katG蛋白 ,通过Westernblotting分析其抗原性 ,分别以结核分支杆菌PPD或纯化的rkatG蛋白为抗原 ,通过ELIS... 目的　获得重组katG(简称rkatG)蛋白 ,研究其免疫学特性 ,评价其在结核病血清学诊断中的价值。方法　应用基因工程技术表达、纯化katG蛋白 ,通过Westernblotting分析其抗原性 ,分别以结核分支杆菌PPD或纯化的rkatG蛋白为抗原 ,通过ELISA方法及结核病一步法检测血清中抗结核抗体。结果　重组质粒pET2 4b -katG在大肠杆菌BL2 1 (DE3)细胞内以包涵体形式表达 ,表达量占菌体总蛋白的 2 8 2 %～ 56 3 %左右 ,分子质量约为80 0 0 0 ,Westernblotting分析与抗结核分支杆菌多克隆抗体具有良好的免疫反应性。纯化后的rkatG样品经SDS -PAGE和光密度扫描分析表明其纯度约为 92 75 %,每 1 0 0ml培养菌可获得 2 8mg左右的重组蛋白。以 33例正常人血清的OD值 +2s为正常界限值 ,一步法的特异性和敏感性分别为 87 9%(2 9/ 33) ,65 6 %(2 1 / 32 ) ;PPD分别为93 9%(31 / 33) ,62 5 %(2 0 / 32 ) ;rkatG分别为 97 0 %(32 / 33) ,1 5 2 %(5/ 33)。结论　pET2 4b -katG大肠杆菌工程菌能以包涵体形式表达rkatG蛋白 ,该蛋白具有较高的抗原特异性 ,但检测抗结核抗体的灵敏度低。 展开更多
关键词 结核杆菌 分泌 蛋白katG基因 克隆 表达 诊断 结核病
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不同剂量结核病DNA疫苗及细胞因子联合免疫的研究 被引量：5
14
作者 吴雪琼 郑越 +8 位作者 徐燕杰 张俊仙 陆阳 张灵霞 史迎昌 李洪敏 韩永 曹立雪 李忠明 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期883-888,894,共7页
目的：评价结核分枝杆菌MPT64（简称M64）和ESAT6（简称E6）DNA疫苗不同剂量联合免疫、与细胞因子联合免疫的保护效力，以及Ag85A（简称85A）和Ag5B（简称85B）DNA疫苗的保护效力。方法：将C57BL／6小鼠随机分为14组免疫：①生理盐水；... 目的：评价结核分枝杆菌MPT64（简称M64）和ESAT6（简称E6）DNA疫苗不同剂量联合免疫、与细胞因子联合免疫的保护效力，以及Ag85A（简称85A）和Ag5B（简称85B）DNA疫苗的保护效力。方法：将C57BL／6小鼠随机分为14组免疫：①生理盐水；②载体pVAX1 100μg；③卡介苗；④M64100μg＋E6100μg；⑤M6450μg＋E650μg；⑥M6475μg＋E625μg；⑦M6425μg＋E675μg；⑧M6425μg＋E625μg；⑨M64100μg＋IFN-γ 100μg；⑩E6100μg＋IFN-γ100μg；（11）M64100μg＋IL-12 100μg；（12）E6100μg＋IL-12 100μg；（13）85A100μg；逼（14）5B100μg。用ELISA法检测血清抗体，结核分枝杆菌通过尾静脉攻击小鼠，动态观察小鼠体重变化；攻击4周后，取肺、肝和脾观察病理改变、称重量、做菌落计数。结果：不同剂量的M64和E6DNA联合免疫、85A和85BDNA分别免疫均能诱导小鼠产生特异性抗体，但M64或E6与IFN-γ或IL-12质粒DNA共同免疫后特异性抗体水平与对照组无显著性差异；各组血清抗体亚型IgG2a均无显著升高，IgG2b均显著高于IgGI。第2、3A、8、9、11、12组在感染后4周体重明显增加，而第1、14、5、6组体重下降；第3、11、9、7组的肺菌落指数较少。第10、13组肺肉眼未见明显病变；第2～4、7、9～13组肺组织主要为不同程度的增殖性反应，第1、6、8、14组肺组织为增殖性反应与渗出性反应并存，第5组为渗出性反应。结论：DNA免疫的量需100μg才能诱导产生强的保护效力；M64和E6DNA各100μg混合免疫、85ADNA疫苗的保护效力与卡介苗相当；b164和E6DNA与IFN-γ或IL-12质粒DNA共同免疫后，明显增强其保护效力。 展开更多
关键词 DNA疫苗 DNA免疫 细胞因子 结核分枝杆菌
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人型结核杆菌全染色体DNA探针鉴别结核杆菌和其它分枝杆菌的研究 被引量：5
15
作者 吴雪琼 庄玉辉 +3 位作者 黄蓉蓉 梁厚勤 黄培堂 李丰生 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期234-237,共4页
诊断结核病和其他分枝杆菌病的许多细菌免疫学传统方法敏感性低,而且烦琐费时。随着分子生物学和基因工程技术的发展,DNA 探针已成为结核病快速诊断和分枝杆菌分类、鉴定的一种敏感方法。目前全染色体 DNA 探针已能够鉴别非同源性和同... 诊断结核病和其他分枝杆菌病的许多细菌免疫学传统方法敏感性低,而且烦琐费时。随着分子生物学和基因工程技术的发展,DNA 探针已成为结核病快速诊断和分枝杆菌分类、鉴定的一种敏感方法。目前全染色体 DNA 探针已能够鉴别非同源性和同源性低的菌种。本文介绍在不同杂交温度下应用 DNA 斑点杂交技术鉴别人型结核杆菌(Mycobacterium tuberculosis) 展开更多
关键词 结核杆菌 分枝杆菌 DNA探针
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结核分支杆菌Ag85B蛋白在大肠杆菌中的高效表达 被引量：6
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作者 吴雪琼 张俊仙 +1 位作者 郑越 张灵霞 《广东医学》 CAS CSCD 2003年第5期487-488,共2页
目的　通过结核分支杆菌Ag85B基因在大肠杆菌中的表达 ,获得大量纯化的重组Ag85B(rAg85B)蛋白。方法　应用PCR技术扩增结核分支杆菌H3 7RvAg85BDNA序列 ;以质粒pET2 4b为表达载体 ,构建Ag85B重组质粒 ,然后转化大肠杆菌BL2 1(DE3 ) ;以I... 目的　通过结核分支杆菌Ag85B基因在大肠杆菌中的表达 ,获得大量纯化的重组Ag85B(rAg85B)蛋白。方法　应用PCR技术扩增结核分支杆菌H3 7RvAg85BDNA序列 ;以质粒pET2 4b为表达载体 ,构建Ag85B重组质粒 ,然后转化大肠杆菌BL2 1(DE3 ) ;以IPTG诱导转化子 ,通过SDS -PAGE电泳鉴定rAg85B的表达水平 ,采用Novagen公司生产的His .Bind蛋白纯化试剂盒纯化rAg85B蛋白。结果　重组质粒pET2 4b -Ag85B测序表明与报道的序列相同。它在大肠杆菌BL2 1(DE3 )细胞内以包涵体形式存在 ,表达量占菌体总蛋白的 3 0 %左右。纯化后的rAg85B样品经SDS -PAGE和光密度扫描分析表明其纯度约为 95 %左右 ,每 10 0ml培养菌可获得 10mg左右纯化的重组蛋白。结论　pET2 4b -Ag85B大肠杆菌工程菌株能高效表达rAg85B蛋白 。 展开更多
关键词 结核分支杆菌 Ag85B蛋白 大肠杆菌 表达
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结核分支杆菌DNA疫苗抗结核作用的研究 被引量：4
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作者 吴雪琼 李洪敏 +5 位作者 史迎昌 张俊仙 张灵霞 梁建琴 金关甫 由昆 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2002年第6期340-345,共6页
目的 研究结核分支杆菌 MPT64、ESAT6和Ag85A DNA疫苗的抗结核作用。方法 用结核分支杆菌H37 Rv腹腔内注射BALB/c。小鼠2个月后,将小鼠随机分为8组,分别用生理盐水(A)、载体质粒(B)、卡介苗(C)、微卡菌苗(D)、MPT64 DNA疫苗(E)、ESAT6 ... 目的 研究结核分支杆菌 MPT64、ESAT6和Ag85A DNA疫苗的抗结核作用。方法 用结核分支杆菌H37 Rv腹腔内注射BALB/c。小鼠2个月后,将小鼠随机分为8组,分别用生理盐水(A)、载体质粒(B)、卡介苗(C)、微卡菌苗(D)、MPT64 DNA疫苗(E)、ESAT6 DNA疫苗(F)、Ag85A DNA疫苗(G)和联合DNA疫苗(H)免疫小鼠,ELISA法检测血清抗体。免疫治疗2个月和5个月时,分别取肺、肝和脾脏观察病理改变并称取重量,作菌落计数、肺组织涂片及脾淋巴细胞转化试验。结果 各DNA疫苗组抗原特异性抗体均不同程度升高。免疫治疗2月时,各组鼠脾淋巴细胞转化率差异无显著意义,各治疗组肺组织涂片细菌数和肺菌落数均比对照组不同程度地减少,只有D组的肺菌落数和E组脾菌落数显著低于对照组,C、E和B组的肺病变指数较低。免疫治疗5个月时,各治疗组鼠脾淋巴细胞转化率均显著增高,各组肺、脾细菌数无显著差别,G和D组的肺未见明显病变。结论DNA疫苗具有一定的抗结核治疗作用。 展开更多
关键词 结核分支杆菌 DNA疫苗 抗结核作用
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应用4种方法检测结核分枝杆菌临床分离株对链霉素的耐受性(英文) 被引量：3
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作者 吴雪琼 陆阳 +5 位作者 张俊仙 梁建琴 张广宇 李洪敏 吕翠环 丁北川 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第7期655-663,共9页
通过DNA测序、SSCP、RFLP和反向斑点杂交技术分析167株结核分枝杆菌临床分离株的耐药基因型,评价结核分枝杆菌rpsL或rrs基因突变与链霉素(SM)耐受性之间的关系,比较4种分子方法检测SM耐受性的临床价值。98株耐SM分离株中,78株(79.6%)rps... 通过DNA测序、SSCP、RFLP和反向斑点杂交技术分析167株结核分枝杆菌临床分离株的耐药基因型,评价结核分枝杆菌rpsL或rrs基因突变与链霉素(SM)耐受性之间的关系,比较4种分子方法检测SM耐受性的临床价值。98株耐SM分离株中,78株(79.6%)rpsL43位或88位密码子错义突变导致赖氨酸置换为精氨酸,6株(6.1%)rrs513位碱基A突变为C或T或516位C突变为T,14株(14.3%)未发现突变;69株SM敏感的分离株未发现这两个基因突变。应用SSCP、RFLP和RDBH方法分析上述突变和野生序列的结果与DNA测序完全一致,RDBH方法可从98株耐SM分离株中正确鉴定出84株(85.7%)分离株的5种突变基因型。结果表明,应用分子技术分析rpsL和rrs基因突变可快速检测大多数结核分枝杆菌对SM的耐受性,反向斑点杂交方法是一个快速、简便和可靠地检测药物耐受性的分子方法。 展开更多
关键词 链霉素 药物耐受性 分子诊断 结核分枝杆菌
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光敏生物素标记人型结核分支杆菌DNA探针的研究 被引量：7
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作者 吴雪琼 庄玉辉 +1 位作者 张晓刚 李国利 《中国防痨杂志》 CAS 1992年第2期79-80,共2页
用国产光敏生物素醋酸盐,对人型结核杆菌(MT)全染色体DNA进行光照标记,然后与不同菌种DNA进行斑点杂交反应和Southern转移杂交,以亲和素-碱性磷酸酶(A-Ap)系统显色。探针的敏感性为1.5ng。探针与MT和卡介苗(BCG)DNA杂交呈强阳性;与其它... 用国产光敏生物素醋酸盐,对人型结核杆菌(MT)全染色体DNA进行光照标记,然后与不同菌种DNA进行斑点杂交反应和Southern转移杂交,以亲和素-碱性磷酸酶(A-Ap)系统显色。探针的敏感性为1.5ng。探针与MT和卡介苗(BCG)DNA杂交呈强阳性;与其它分支杆菌DNA杂交呈弱阳性,与大肠杆菌质粒pUC19DNA杂交呈阴性;但与链霉菌染色体及其质粒p1J486DNA杂交也呈弱阳性。该探针的敏感性和特异性与放射性同位素^(32)p标记的MT探针的结果完全一致,而且适于常规实验室推广应用。 展开更多
关键词 生物素 结核杆菌 DNA探针
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结核分枝杆菌耐药基因检测 被引量：10
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作者 吴雪琼 庄玉辉 +3 位作者 张俊仙 张晓刚 何秀云 李国利 《军医进修学院学报》 CAS 1998年第3期185-188,共4页
目的：研究结核分枝杆菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ，ＭＴ）耐药的分子机制，建立快速检测耐药基因型的分子药敏试验方法。方法：通过聚合酶链反应（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣ... 目的：研究结核分枝杆菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ，ＭＴ）耐药的分子机制，建立快速检测耐药基因型的分子药敏试验方法。方法：通过聚合酶链反应（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）、ＰＣＲ－单链构象多态性（Ｓｉｎ－ｇｌｅ－ｓｔｒａｎｄｅｄｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，ＳＳＣＰ）、ＰＣＲ－限制性片段长度多态性（Ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙ－ｍｏｒｐｈｉｓｍ，ＲＦＬＰ）分析ＭＴ临床分离株的ｒｐｏＢ、ｒｐｓＬ、ＫａｔＧ基因和ｉｎｈＡ调节序列。结果：ＰＣＲ分析耐药基因的敏感性为１～１０ｐｇＤＮＡ；除ｒｐｏＢ引物ＰＣＲ扩增为属特异性外，余耐药基因引物ＰＣＲ扩增都具有较高的种特异性。与传统药敏试验方法相比，ＰＣＲ和ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测６２株ＭＴ分离株利福平（Ｒｉｆａｍｐｉｎ，ＲＦＰ）、链霉素（Ｓｔｒｅｐｔｏ－ｍｙｃｉｎ，ＳＭ）和异烟肼（Ｉｓｏｎｉａｚｉｄ，ＩＮＨ）耐药基因型的灵敏度和特异度分别为９３．８％和９６．２％（ｒｐｏＢ）、８１．６％和９１．７％（ｒｐｓＬ）、７６．０％和７５．７％（ｋａｔＧ）、１６％和１００％（ｉｎｈＡ）。? 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 耐药基因 聚合酶链反应 SSCP
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