以胜任力为导向的BOPPPS教学模式在临床血液学检验技术实验教学中的应用探索

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作者 毕清华 吴韦铷 +2 位作者 张晓丽 杨忠 冯馨锐 《医学研究杂志》 2024年第8期186-189,共4页

目的探究以胜任力为导向的BOPPPS教学模式在临床血液学检验技术实验教学中的应用效果。方法以血栓与止血检验实验章节为例,采取类实验研究设计,选择笔者学校医学检验技术专业2018、2019级本科生为对照组,采用传统教学方式;2020级本科生... 目的探究以胜任力为导向的BOPPPS教学模式在临床血液学检验技术实验教学中的应用效果。方法以血栓与止血检验实验章节为例,采取类实验研究设计,选择笔者学校医学检验技术专业2018、2019级本科生为对照组,采用传统教学方式;2020级本科生为实验组,采用以胜任力为导向的BOPPPS教学方式。以知识技能测试和学生填写调查问卷的方式进行教学评价。结果实验组学生的理论知识和实践技能成绩显著高于对照组(P<0.05),调查评价指标的评分结果高于对照组。结论以胜任力为导向的BOPPPS教学模式可以提高临床血液学检验技术实验教学的教学质量。 展开更多

关键词 临床血液学检验技术 BOPPPS 胜任力

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热量限制通过AMPK-SIRT1-线粒体通路延缓小鼠骨骼肌衰老 被引量：8

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作者 蒲荣喜 白川川 +3 位作者 解栋梁 吴韦铷 舒彬 杨忠 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期548-552,共5页

目的观察热量限制对老化进程中小鼠骨骼肌线粒体等生物学性状的影响,探讨热量限制生物效应的分子机制。方法 13月龄C57BL/6雄性小鼠30只,按照简单随机抽样法分为自由进食组和热量限制组,每周按照自由进食组前1周平均摄食量的60%饲养热... 目的观察热量限制对老化进程中小鼠骨骼肌线粒体等生物学性状的影响,探讨热量限制生物效应的分子机制。方法 13月龄C57BL/6雄性小鼠30只,按照简单随机抽样法分为自由进食组和热量限制组,每周按照自由进食组前1周平均摄食量的60%饲养热量限制小鼠。热量限制12周后,测量骨骼肌衰减指数、胫前肌等肌纤维密度及相对横截面积,透射电镜观察骨骼肌线粒体变化,Western blot检测PGC1α、AMPKα、p-AMPKα及SIRT1等的表达,并比较老年鼠与成年鼠的表达差异。结果 1与自由进食组比较,热量限制组骨骼肌衰减指数变化不明显,胫前肌等肌纤维密度显著升高(P<0.01),相对横截面积降低(P<0.01);2电镜观察显示:与自由进食组比较,热量限制组骨骼肌线粒体长度和宽度均增加(P<0.05,P<0.01),相对密度增加(P<0.01),PGC1α表达升高(P<0.05);3与自由进食组比较,热量限制组骨骼肌AMPK的磷酸化水平升高(P<0.01),同时SIRT1表达也升高(P<0.05);4与成年鼠比较,老年鼠骨骼肌AMPK磷酸化水平下降(P<0.05),SIRT1和PGC1α的表达也均下降(P<0.05)。结论热量限制能显著促进老化进程中骨骼肌线粒体的生成及活性,这一作用可能通过激活AMPK信号途径实现。 展开更多

关键词 热量限制 骨骼肌 线粒体 衰老

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甘蓝KAPP编码基因的克隆与序列分析 被引量：1

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作者 吴韦铷 朱利泉 +4 位作者 李成琼 杨昆 唐章林 任雪松 王小佳 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1067-1074,共8页

采用PCR、RT-PCR及其他分子生物学方法,以甘蓝基因组DNA、花蕾RNA和叶片RNA为模板,分别对甘蓝KAPP gDNA和KAPP cDNA进行扩增,分别获得3247bp的KAPP gDNA片段、1699bp的KAPP cDNA片段、1578bp的花蕾KAPP2 cDNA片段和1581bp的叶片KAPP2cDN... 采用PCR、RT-PCR及其他分子生物学方法,以甘蓝基因组DNA、花蕾RNA和叶片RNA为模板,分别对甘蓝KAPP gDNA和KAPP cDNA进行扩增,分别获得3247bp的KAPP gDNA片段、1699bp的KAPP cDNA片段、1578bp的花蕾KAPP2 cDNA片段和1581bp的叶片KAPP2cDNA片段。对克隆的甘蓝KAPP gDNA和cDNA(结合报道的KAPPcDNA)进行比对表明,甘蓝KAPP基因包含11个内含子,均符合"GU-AG"剪接规则,并且克隆得到的KAPP cDNA序列与报道的KAPP cDNA序列有6处单个碱基的差异,但两者的氨基酸序列完全一致。然而花蕾KAPP2 cDNA、叶片KAPP2 cDNA片段与报道的KAPP cDNA序列相似性分别为85.2%和85.0%。这两个序列分别在590bp和593bp处较早出现一个无义突变引起的终止密码子。Blast分析表明,两基因编码的氨基酸序列与拟南芥KAPP氨基酸序列相似性最高,其次为甘蓝KAPP氨基酸序列。以已报道的8种植物KAPP的CDS及本实验所克隆的两个KAPP2序列构建分子进化树,获得序列与甘蓝KAPP序列聚为一支。结合比较作图及分子进化树,推测KAPP基因在甘蓝基因组上有两个拷贝,而笔者克隆到的KAPP2 cDNA序列是其中一个拷贝,是KAPP进化过程中突变失活的拟基因。 展开更多

关键词 自交不亲和性 信号转导 KAPP基因 甘蓝

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临床血液学实验教学的形成性评价与思考 被引量：2

4

作者 蒲荣喜 吴韦铷 +4 位作者 胡蝶 张晓丽 姚璇 冯馨锐 杨忠 《基础医学教育》 2023年第7期604-607,共4页

临床血液学检验是医学检验技术本科专业核心课程之一。针对该课程检测细胞形态复杂、检验方法多的特点,在当今强调能力与素质培养的大背景下,临床血液学教研室教学团队结合课程实验教学重难点内容,充分利用数码显微互动系统和虚拟仿真平... 临床血液学检验是医学检验技术本科专业核心课程之一。针对该课程检测细胞形态复杂、检验方法多的特点,在当今强调能力与素质培养的大背景下,临床血液学教研室教学团队结合课程实验教学重难点内容,充分利用数码显微互动系统和虚拟仿真平台,探索创新实验教学评价体系,制定了一系列针对细胞形态辨识和技能操作的形成性评价措施,旨在弥补现有评价体系的不足,提高实验教学实效,同时也为其他院校相关专业的实验教学提供借鉴。 展开更多

关键词 临床血液学 医学检验技术 实验教学 形成性评价 数码显微互动系统 虚拟仿真

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聚凝胺增强Ror2重组腺病毒感染K562细胞效应的研究 被引量：3

5

作者 高爱君 司维柯 +1 位作者 赵宸 吴韦铷 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期976-980,共5页

目的探索应用聚凝胺（polybrene）试剂增强Ror2重组腺病毒对K562细胞转染效率的技术。方法在K562细胞中分别加入0～12μl Ror2重组腺病毒,摸索最佳重组腺病毒用量;同时加入0～5μg/ml polybrene和最佳重组腺病毒用量,培养1～3d后,在荧... 目的探索应用聚凝胺（polybrene）试剂增强Ror2重组腺病毒对K562细胞转染效率的技术。方法在K562细胞中分别加入0～12μl Ror2重组腺病毒,摸索最佳重组腺病毒用量;同时加入0～5μg/ml polybrene和最佳重组腺病毒用量,培养1～3d后,在荧光显微镜下计数,对比加入polybrene前后被感染的细胞数。台盼蓝染色观察重组腺病毒引起K562细胞死亡的情况。采用RT-PCR和Western blotting检测Ror2基因的表达情况。结果 Polybrene浓度为3μg/ml和重组腺病毒8μl时,感染效果最佳,对细胞生长影响较小,实验组感染效果是对照组的17倍;加入polybrene后,外源性Ror2m RNA和蛋白表达水平均明显增高。结论 Polybrene能显著增强重组腺病毒感染K562细胞的作用,并能高效表达外源性Ror2基因,该法简便、价廉、有效,是血液疾病分子生物学研究的一个良好策略。 展开更多

关键词 聚凝胺 腺病毒科 K562细胞 基因 ror2

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钴原卟啉诱导HO-1表达增加对老龄小鼠骨骼肌组织氧化应激和炎症反应的影响 被引量：1

6

作者 李亚楠 吴志彬 +3 位作者 吴韦铷 司维柯 舒彬 杨忠 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期863-868,共6页

目的探讨注射钴原卟啉(cobalt protoporphyrin,Co PP)诱导血红素加氧酶-1(heme oxygenase 1,HO-1)表达增加在老龄小鼠骨骼肌微环境包括氧化应激、炎症反应的调节作用。方法分别将正常成年(2月龄)和老年(18月龄)C57BL/6雄性小鼠按照简单... 目的探讨注射钴原卟啉(cobalt protoporphyrin,Co PP)诱导血红素加氧酶-1(heme oxygenase 1,HO-1)表达增加在老龄小鼠骨骼肌微环境包括氧化应激、炎症反应的调节作用。方法分别将正常成年(2月龄)和老年(18月龄)C57BL/6雄性小鼠按照简单随机抽样法分为对照组及注射Co PP组;Co PP组小鼠连续3 d腹腔注射Co PP溶液[5 mg/(kg·d)],对照组注射同体积生理盐水。在3、7、14 d后取新鲜腓肠肌组织,Western blot检测HO-1(3 d组)的表达,ELISA检测过氧化标志分子丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)含量及抗氧化酶类Cu Zn-超氧歧化酶(SOD)等活性变化。用老年C57BL/6小鼠建立腓肠肌损伤模型,采用简单随机抽样法分为Co PP处理组和对照组,分别在3、7、14 d后检测中性粒细胞和M2型巨噬细胞浸润。结果正常老年组HO-1表达量高于成年组,老年组注射Co PP后HO-1表达升幅显著低于成年组(P<0.05);注射Co PP后,成年和老年组MDA、H2O2含量均下降,SOD、Cu Zn-SOD、GSH-Px和CAT酶活性升高,且老年Co PP组过氧化标志分子含量高于成年Co PP组,抗氧化酶活性较低(P<0.05)。骨骼肌损伤后3、7 d,Co PP处理组中性粒细胞浸润均低于对照组;CD163阳性M2型巨噬细胞浸润出现较晚,且注射Co PP后,M2型巨噬细胞的浸润显著高于对照组。结论老年骨骼肌对Co PP的反应性下降,抗氧化应激能力下降。损伤后诱导HO-1表达增加能够降低早期中性粒细胞、促进M2型巨噬细胞的浸润,可能有助于骨骼肌损伤修复。 展开更多

关键词 血红素加氧酶1 骨骼肌 老化 氧化应激 炎症反应

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孤儿受体ROR2诱导慢性髓细胞白血病细胞株K562凋亡的研究 被引量：1

7

作者 高爱君 司维柯 +1 位作者 赵宸 吴韦铷 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期726-730,共5页

目的研究ROR2抑制慢性髓细胞白血病细胞株K562增殖并诱导其凋亡的作用,初步探讨可能的机制。方法采用重组ROR2腺病毒(AdROR2)感染K562细胞为实验组,重组RFP腺病毒(AdRFP)感染K562细胞为对照组。采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测... 目的研究ROR2抑制慢性髓细胞白血病细胞株K562增殖并诱导其凋亡的作用,初步探讨可能的机制。方法采用重组ROR2腺病毒(AdROR2)感染K562细胞为实验组,重组RFP腺病毒(AdRFP)感染K562细胞为对照组。采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期变化和细胞凋亡。Western blot检测实验组和对照组促凋亡基因caspase3和抗凋亡基因survivin的表达。结果与对照组比较,实验组ROR2感染K562细胞48 h后,细胞增殖明显受抑(P<0.05),细胞周期主要阻滞在G2/M期(P<0.05),细胞凋亡增多,48 h凋亡显著(P<0.05),同时促凋亡蛋白caspase3表达升高(P<0.05),抗凋亡蛋白survivin表达下降(P<0.05)。结论过表达ROR2能够抑制K562细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制可能与上调了促凋亡蛋白caspase3和下调了抗凋亡蛋白survivin表达有关。 展开更多

关键词 ROR2 K562细胞 细胞周期 细胞凋亡

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《临床血液学检验》实验教学改革初探 被引量：9

8

作者 吴韦铷 赵宸 +3 位作者 潘静 张晓丽 司维柯 杨忠 《国际检验医学杂志》 CAS 2015年第18期2761-2762,共2页

临床血液学检验是本科检验教学中的一门重要的专业课程,它是以血液学的理论为知识体系,以检验的实验方法为手段,重点针对血液病检验诊断的理论与实践联系密切的学科[1]。作为一门实践性很强的课程,本门课程的实验课教学在整个教学中也... 临床血液学检验是本科检验教学中的一门重要的专业课程,它是以血液学的理论为知识体系,以检验的实验方法为手段,重点针对血液病检验诊断的理论与实践联系密切的学科[1]。作为一门实践性很强的课程,本门课程的实验课教学在整个教学中也就成为了学生掌握专业理论知识,提高实践技能,培养创新能力的重要基础。 展开更多

关键词 临床血液学检验 实验教学 检验诊断 理论与实践 本门 现代医学 设计性实验课 验证性实验 实验课内容 医学检验

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应用新媒体平台,推进医学检验教学资源建设 被引量：4

9

作者 潘静 张晓丽 +4 位作者 赵宸 吴韦铷 郭鹰 司维柯 杨忠 《国际检验医学杂志》 CAS 2016年第10期1438-1439,共2页

新媒体是指以数字、网络等通讯技术结合电脑、手机等终端,进行多维高通量信息传递的通讯联络平台;它有别于传统报纸、广播电视等媒体,包含了诸如微信、QQ群、论坛（BBS）及博客等多种形式;在社会进步、移动互联网迅速普及的当下,这些媒... 新媒体是指以数字、网络等通讯技术结合电脑、手机等终端,进行多维高通量信息传递的通讯联络平台;它有别于传统报纸、广播电视等媒体,包含了诸如微信、QQ群、论坛（BBS）及博客等多种形式;在社会进步、移动互联网迅速普及的当下,这些媒体形式正展现蓬勃发展的生命力。 展开更多

关键词 新媒体平台 教学资源建设 医学检验 专业医学 医学教育 专业知识 医学专业 通讯联络 广播电视 临床基础

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临床血液学检验技术实验考核试卷分析与评价 被引量：2

10

作者 胡蝶 吴韦铷 +3 位作者 张晓丽 姚璇 蒲荣喜 杨忠 《基础医学教育》 2022年第7期508-511,共4页

为了提高实验教学质量,文章对陆军军医大学2015级-2018级临床血液学检验技术实验考核试卷及学员成绩进行分析,从整体上了解四届学员对知识的掌握能力、失分情况和试卷质量。结果显示四届学员成绩无统计学意义(H=5.781,P=0.123);试卷难... 为了提高实验教学质量,文章对陆军军医大学2015级-2018级临床血液学检验技术实验考核试卷及学员成绩进行分析,从整体上了解四届学员对知识的掌握能力、失分情况和试卷质量。结果显示四届学员成绩无统计学意义(H=5.781,P=0.123);试卷难度适中,但近3年试卷区分度较差。今后临床血液学检验技术实验教学应结合培养要求,针对失分点改善教学方法,同时提高试题质量,完善实验考核机制。 展开更多

关键词 血液学检验 实验考核 试卷分析 教学改革

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DEK基因RNA干扰慢病毒表达载体的构建及其对肝癌细胞生物学行为的影响

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作者 李术华 侯宇 +3 位作者 陈哲 吴韦铷 吴传新 孙航 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期868-875,共8页

目的构建DEK基因的RNA干扰(RNAi)慢病毒表达载体,并探讨其对肝癌细胞生物学行为的影响。方法采用RNAi技术,根据DEK基因的干扰序列,合成Oligo DNA,退火形成双链DNA,将其克隆到酶切后的小干扰RNA表达载体pLKO.1上,构建重组慢病毒载体pLKO.... 目的构建DEK基因的RNA干扰(RNAi)慢病毒表达载体,并探讨其对肝癌细胞生物学行为的影响。方法采用RNAi技术,根据DEK基因的干扰序列,合成Oligo DNA,退火形成双链DNA,将其克隆到酶切后的小干扰RNA表达载体pLKO.1上,构建重组慢病毒载体pLKO.1-sh hDEK,经293T细胞包装,收集病毒上清液,感染细胞。采用实时逆转录PCR(RT-PCR)和免疫蛋白印迹法(Western blot)检测人肝癌细胞Bel-7402、Huh-7、SMMC-7721和HepG2中DEK的表达及感染慢病毒的各组细胞中DEK的敲低效率。分别通过细胞计数试剂盒-8(CCK8)增殖实验、流式细胞术、划痕实验检测细胞增殖能力、克隆形成能力、凋亡及迁移能力。两组间均数比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA)。结果酶切鉴定和DNA测序结果证实,重组慢病毒载体pLKO.1-sh hDEK1及pLKO.1-sh hDEK3构建成功。RT-PCR和Western blot结果显示,肝癌细胞Bel-7402和Huh7中DEK的表达较高,pLKO.1-sh hDEK3能更有效地抑制DEK基因的表达(P<0.05),因此选择pLKO.1-sh hDEK3重组慢病毒感染肝癌细胞Bel-7402和Huh7进行后续的功能实验。CCK8细胞增殖实验结果显示肝癌细胞Bel-7402和Huh7感染重组慢病毒后,细胞增殖能力与空白对照及阴性对照相比减弱(P<0.05);细胞凋亡结果显示敲低组细胞凋亡率高于空白对照及阴性对照组(P<0.05);细胞划痕实验结果显示敲低组划痕愈合率低于空白对照及阴性对照组(P<0.05),差异均有统计学意义;而空白对照及阴性对照组比较,差异无统计学意义。结论靶向沉默肝癌细胞中DEK的表达,能够抑制细胞增殖及迁移能力,并诱导凋亡,为进一步研究DEK基因在肝癌中的作用奠定基础。 展开更多

关键词 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移 DEK RNA干扰 慢病毒载体

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APL伴嗜碱性粒细胞明显增多1例并文献复习

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作者 黄兴琴 白海雁 +6 位作者 杨丽莎 蒋玲琳 姚元友 吴韦铷 孙燕泥 侯宇 陈洁平 《重庆医学》 CAS 2020年第21期3544-3547,3552,共5页

目的探讨急性早幼粒细胞白血病(APL)伴嗜碱性粒细胞增多患者的诊断、治疗及预后。方法回顾性分析该院收治的1例APL伴嗜碱性粒细胞增多患者的临床资料,并对相关文献进行复习。结果该患者以全血细胞减少入院,血常规显示白细胞计数(WBC)1.6... 目的探讨急性早幼粒细胞白血病(APL)伴嗜碱性粒细胞增多患者的诊断、治疗及预后。方法回顾性分析该院收治的1例APL伴嗜碱性粒细胞增多患者的临床资料,并对相关文献进行复习。结果该患者以全血细胞减少入院,血常规显示白细胞计数(WBC)1.69×109/L、红细胞计数(RBC)1.98×1012/L、血红蛋白(Hb)70 g/L、血小板计数(PLT)20×109/L、中性粒细胞(NEU)33.20%,淋巴细胞49.70%,单核细胞11.00%,嗜碱性粒细胞5.30%。凝血相关检查结果显示,D-二聚体(D-Di)18.23 mg/L、纤维蛋白降解产物(FDP)70.20 mg/L,纤维蛋白原(Fib)3.72 g/L。骨髓细胞形态及细胞化学染色显示粒系异常增生,以异常早幼粒细胞为主(46.00%),可见蝴蝶型核,内外浆,偶见柴捆Auer小体,嗜碱性粒细胞明显增多(28.00%);外周血分类异常早幼粒细胞占35.00%,嗜碱性粒细胞占27.00%;过氧化物酶(POX)染色异常早幼粒细胞呈强阳性,嗜碱性粒细胞呈阴性。流式细胞仪检测显示异常表型的早幼粒细胞占全部细胞的56.00%,该群细胞表达CD13、CD33、CD64,部分表达人类白细胞抗原DR(HLA-DR)、CD15dim、CD117、CD56、CD34。染色体核型分析显示异常核型46,XY,t(15;17)(q24;q21)/46,idem,der(12),可见克隆性异常t(15;17),荧光原位杂交(FISH)检测早幼粒细胞白血病-视黄酸受体α(PML-RARα)融合基因阳性,伴融合基因阳性的间期核占78.00%;ASXL1突变频率为46.80%,组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶(KMT2D)突变频率为51.70%。诊断为APL伴嗜碱性粒细胞数量增多,予以亚砷酸、视黄酸及柔红霉素等治疗,至今患者骨髓完全缓解及PML/RARα融合基因持续阴性达11个月。结论伴嗜碱性粒细胞增多的APL的诊断需结合多项实验室检查,本病例中嗜碱性粒细胞可能是从伴t(15;17)易位的早幼粒细胞分化而来,并且与染色体异常相关。 展开更多

关键词 急性早幼粒细胞白血病 嗜碱性粒细胞 流式细胞术 融合基因 治疗结果

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