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创新研究群体:黄跃生 蒋建新 粟永萍 刘良明 周元国 吴军 陈林 周继红 彭毅志 研究方向:严重创伤早期损害的分子机制与创面修复的新策略研究
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作者 黄跃生 蒋建新 +6 位作者 粟永萍 刘良明 周元国 吴军 陈林 周继红 彭毅志 《科技和产业》 2003年第7期48-60,共13页
研究群体的构成 (一)群体的研究方向 严重创伤早期全身性损害与创伤修复。主要研究内容: 1.创伤早期缺血缺氧损害和炎症的细胞及分子机制与防治。 2.缺血缺氧和感染时细胞的内源性保护机制。 3.创伤愈合与组织修复。
关键词 创伤愈合 严重创伤 早期损害 分子机制 创面修复 研究方向 创新研究
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G蛋白及其研究进展 被引量:17
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作者 周元国 王正国 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期280-286,共7页
G蛋白及其研究进展周元国,王正国(第三军医大学野战外科研究所,重庆630042)目录一、G蛋白的结构与分类(一)α亚基(二)β亚基(三)γ亚基二、G蛋白发挥生物学功能与作用的机制(一)传递信息的方式(二)βγ二聚体的... G蛋白及其研究进展周元国,王正国(第三军医大学野战外科研究所,重庆630042)目录一、G蛋白的结构与分类(一)α亚基(二)β亚基(三)γ亚基二、G蛋白发挥生物学功能与作用的机制(一)传递信息的方式(二)βγ二聚体的作用(三)与G蛋白偶联的受体(四)... 展开更多
关键词 蛋白 G蛋白 分类 结构 功能
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G蛋白在心血管功能调节及急性肺损伤中的作用研究 被引量:3
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作者 周元国 王正国 朱佩芳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期159-160,共2页
G蛋白在心血管功能调节及急性肺损伤中的作用研究StudyoftheroleofGproteinontheregulationofcardiovascularsystemfunctionsandacutelunginj... G蛋白在心血管功能调节及急性肺损伤中的作用研究StudyoftheroleofGproteinontheregulationofcardiovascularsystemfunctionsandacutelunginjury周元国王正国朱佩芳(第三军医... 展开更多
关键词 心血管功能 肺损伤 G蛋白
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油酸型呼吸窘迫综合征早期肺微血管通透性变化与前列腺素的关系 被引量:1
4
作者 周元国 王正国 +2 位作者 周宝桐 朱佩芳 尹友国 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第1期48-51,共4页
成人呼吸窘迫综合征以肺微血管通透性增加,肺水肿形成为特征。本实验发现用油酸复制的家兔呼吸窘迫综合征模型在30分钟内主要是油酸毒性直接作用引起的通透性增加,在这以后则以化学介质介导的间接损伤为主,而这种间接损伤与前列腺素类... 成人呼吸窘迫综合征以肺微血管通透性增加,肺水肿形成为特征。本实验发现用油酸复制的家兔呼吸窘迫综合征模型在30分钟内主要是油酸毒性直接作用引起的通透性增加,在这以后则以化学介质介导的间接损伤为主,而这种间接损伤与前列腺素类物质有关,特别是与血栓素和前列环素的比值有关。另外,实验还发现早期的直接损伤有部分在外源性前列环素作用下是可复性的。 展开更多
关键词 呼吸窘迫 肺水肿 前列腺素 渗透性
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G蛋白在大鼠心血管对去甲肾上腺素脱敏反应中的作用 被引量:1
5
作者 周元国 王正国 +1 位作者 朱佩芳 熊仁平 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期117-122,共6页
为了研究鸟嘌呤核苷酸结合蛋白(G蛋白)在慢性输入去甲肾上腺素(NE)所致大鼠心脏和主动脉对NE脱敏反应中的作用,采用大鼠皮下植入微量泵持续输入NE(0.1mg·kg-1·h-1)模型,G蛋白α亚基及其mRNA... 为了研究鸟嘌呤核苷酸结合蛋白(G蛋白)在慢性输入去甲肾上腺素(NE)所致大鼠心脏和主动脉对NE脱敏反应中的作用,采用大鼠皮下植入微量泵持续输入NE(0.1mg·kg-1·h-1)模型,G蛋白α亚基及其mRNA水平用相应的抗体和cDNA探针按Westernblot和Northernblot法测定.结果显示:输注6dNE的大鼠主动脉中Gsα,Giα和Goα均显著下降,但其mRNA无显著改变;心房及心室中Giα显著升高,Gsα,Goα维持不变,而Gi2αmRNA升高,心房中GsαmRNA下降.输入NE3d的大鼠心房及心室Giα,Goα无改变,Gsα45和42kD带显著下降,但52kD带升高;心室中GoαmRNA的3.8和3.4kb带显著升高,而心房中5.4kb带升高,心室Gi3αmRNA下降.上述结果表明输入NE可引起G蛋白的动态变化,提示G蛋白在NE慢性刺激引起的心血管反应性降低中可能起一定的作用,其早期以Gs下降为主。 展开更多
关键词 G蛋白 心血管 去甲肾上腺素 脱敏反应
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加强创伤耐受性差异的分子基础研究,促进分子创伤学的发展 被引量:2
6
作者 周元国 《创伤外科杂志》 2002年第5期257-259,共3页
分子创伤学是近年来随着分子生物学理论与技术不断向创伤学渗透而逐步形成的学科。创伤耐受性的分子基础研究是其重要而有特色的部分 ,它与遗传学的关系已经被国内外众多实验所证实。从分子水平深入开展创伤耐受性差异的研究 ,不仅有助... 分子创伤学是近年来随着分子生物学理论与技术不断向创伤学渗透而逐步形成的学科。创伤耐受性的分子基础研究是其重要而有特色的部分 ,它与遗传学的关系已经被国内外众多实验所证实。从分子水平深入开展创伤耐受性差异的研究 ,不仅有助于阐明其产生的原因和机理 ,同时 ,由此发展的新技术、培养的科研力量也将有助于分子创伤学其他领域的发展。 展开更多
关键词 创伤耐受性 创伤修复 分子创伤学 遗传易感性
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猪高速投射伤后血液溶酶体酶及蛋白酶抑制物变化的意义
7
作者 周元国 周宝桐 +5 位作者 朱佩芳 邹用志 王永钢 周继红 杨军民 李晓炎 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 1995年第3期138-140,共3页
对猪高速投射伤后血液溶酶体酶及蛋白酶抑制物的变化进行观察,并与对照组进行比较。结果显示:致伤组伤后动脉血浆组织蛋白酶D(Cath-D)逐渐升高,8h达高峰;血清酸性磷酸酶(AP)伤后升高较缓,12h达高峰;血清弹性蛋... 对猪高速投射伤后血液溶酶体酶及蛋白酶抑制物的变化进行观察,并与对照组进行比较。结果显示:致伤组伤后动脉血浆组织蛋白酶D(Cath-D)逐渐升高,8h达高峰;血清酸性磷酸酶(AP)伤后升高较缓,12h达高峰;血清弹性蛋白酶(Elastase)与伤前相比无显著改变;血清蛋白酶抑制物α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)伤后先下降,12h后回升,并高于伤前水平。对照组各指标未见显著变化。结果表明:虽然创伤后溶酶体酶增加较晚,但它们的抑制物却下降较早,使二者间的平衡较早就发生破坏,而这种改变可能是导致全身反应和组织破坏的一个重要原因。 展开更多
关键词 创伤 投射伤 溶酶体酶 蛋白酶抑制物
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衰老大鼠心脏与主动脉G蛋白α亚基的变化
8
作者 周元国 熊仁平 王正国 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期209-216,共8页
随着年龄的增长,心血管系统鸟苷酸结合蛋白(简称G蛋白)耦联受体介导的反应性也发生了改变。本文用WesternBlot和核酸杂交技术分别观察了6,24月龄的Fischer344大鼠主动脉、心房、心室及脑组织中Gsα,G... 随着年龄的增长,心血管系统鸟苷酸结合蛋白(简称G蛋白)耦联受体介导的反应性也发生了改变。本文用WesternBlot和核酸杂交技术分别观察了6,24月龄的Fischer344大鼠主动脉、心房、心室及脑组织中Gsα,Goα,Giα及其相应的mRNA的变化。结果显示,主动脉Gsα含4个带(38,42,45和52kD),其中42kD带在24月龄大鼠显著下降(P<0.05),Goα和Giα各为单一带(39kD和41kD),两者24月龄也有显著下降(P<0.05),但它们的mRNA水平未见显著改变;心房、心室中Gsα有三个带(52,45和42kD),Goα和Giα各为一个带,在24月龄大鼠三者均未见显著改变,但Gi2α和Gi3αmRNA的含量显著增加(P<0.05)。上述结果提示:Giα、Goα的表达水平下降可能是衰老血管组织受体反应性下降的分子基础之一。 展开更多
关键词 衰老 G蛋白 Α亚基 心脏 主动脉
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去甲肾上腺素对培养兔主动脉平滑肌细胞G蛋白mRNA的影响
9
作者 周元国 王正国 熊仁平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期424-427,共4页
目的和方法:去甲肾上腺素(NE)的脱敏感与G蛋白的变化有关。本实验将NE同家兔主动脉平滑肌细胞共同培养,用NorthernBlot杂交定量分析观察NE的作用与G蛋白表达的关系。结果:Gsα在NE处理24h后显著升高,... 目的和方法:去甲肾上腺素(NE)的脱敏感与G蛋白的变化有关。本实验将NE同家兔主动脉平滑肌细胞共同培养,用NorthernBlot杂交定量分析观察NE的作用与G蛋白表达的关系。结果:Gsα在NE处理24h后显著升高,48h降至对照水平;Gi2α24h亦显著升高,但48h下降并略低于对照。Goα24、48h均高于对照;Gi3α未能检测到。 展开更多
关键词 去甲肾上腺素 平滑肌细胞 G蛋白 MRNA 家兔
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p73基因对人肺腺癌细胞H1299化疗敏感性的影响 被引量:11
10
作者 何勇 范士志 +4 位作者 蒋耀光 陈建明 李志平 周萍 周元国 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第6期645-649,共5页
背景与目的:实验证明野生型p53基因能增强大多数非小细胞肺癌的化疗敏感性。p53基因的同源体p73与其在结构和功能上都具有高度的相似性。本研究拟探讨p73基因对人肺腺癌细胞株H1299化疗敏感性的影响。方法:通过脂质体介导将p73α基因导... 背景与目的:实验证明野生型p53基因能增强大多数非小细胞肺癌的化疗敏感性。p53基因的同源体p73与其在结构和功能上都具有高度的相似性。本研究拟探讨p73基因对人肺腺癌细胞株H1299化疗敏感性的影响。方法:通过脂质体介导将p73α基因导入人肺腺癌细胞株H1299,G418筛选获得稳定表达P73α的阳性细胞克隆。Westernblot检测转染细胞中P73α蛋白的表达;MTT法检测细胞存活率,观察转染细胞对阿霉素、顺铂的敏感性变化;采用流式细胞仪和TUNEL法检测.p73646化疗药诱导前后转染细胞凋亡的变化;克隆形成实验观察细胞生物学性状的变化。结果:转染p73α基因的H1299细胞可以稳定高表达P73α蛋白。MTT实验提示顺铂和阿霉素的IC50值分别减少了86.2%和99.2%,转染细胞在原本没有明显抑制和杀伤作用的药物浓度(1.25μmol/L的顺铂或0.05μmol/L的阿霉素)作用下生长明显受到抑制。流式细胞术显示p73α基因转染后顺铂诱导的细胞凋亡率从10.1%升高到38.4%(P<0.01),阿霉素诱导的细胞凋亡率从12.1%升高到49.3%(P<0.01)。克隆形成实验显示p73α基因转染能明显降低化疗后H1299细胞的克隆形成数(P<0.01),对顺铂和阿霉素的化疗增效倍数分别为1.8和2.6倍。结论:转染p73基因可以提高H1299细胞对阿霉素、顺铂等化疗药的敏感性。该作用可? 展开更多
关键词 P73 人肺腺癌细胞 基因疗法 化疗敏感性
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重度子痫前期胎盘合体滋养细胞微绒毛膜脱落与Rho/ROCK分子表达的关系 被引量:14
11
作者 杨博萍 韩健 +4 位作者 韩新美 俞丽丽 颜耀华 周元国 李力 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期190-194,共5页
目的探讨重度子痫前期(sPE)患者合体滋养细胞表面微绒毛膜(STBM)脱落水平与胎盘组织Rho/ROCK分子表达的关系。方法收集sPE产妇(sPE组)和正常产妇(对照组)胎盘组织各20例,透射电镜下观察胎盘合体滋养细胞表面微绒毛结构变化,应用体视学... 目的探讨重度子痫前期(sPE)患者合体滋养细胞表面微绒毛膜(STBM)脱落水平与胎盘组织Rho/ROCK分子表达的关系。方法收集sPE产妇(sPE组)和正常产妇(对照组)胎盘组织各20例,透射电镜下观察胎盘合体滋养细胞表面微绒毛结构变化,应用体视学方法分析细胞表面微绒毛数密度(Nv)、表面积密度(Sv)和体积密度(Vv),通过Western blotting和免疫组化检测胎盘组织中Rho亚家族蛋白成员(RhoA、RhoB、RhoC)及Rho激酶(ROCKI、ROCKⅡ)的表达水平。应用Spearman等级相关分析法检验Rho、ROCK蛋白表达水平与STBM脱落水平的相关性。结果 sPE组患者胎盘合体滋养细胞表面微绒毛的Nv、Sv、Vv均显著小于对照组(P<0.05),胎盘组织中RhoA、RhoB、ROCKI、ROCKⅡ蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.05)。sPE组患者胎盘组织中RhoB、ROCKI、ROCKⅡ的表达水平与STBM的脱落水平均呈正相关(r=0.631,r=0.826,r=0.865,P<0.05)。结论 RhoB及其与下游分子ROCKI、ROCKⅡ构成的信号通路可能在sPE时胎盘STBM脱落过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 RHO因子 合体滋养细胞表面微绒毛膜 先兆子痫
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糖皮质激素非基因组效应及其信号转导机制 被引量:15
12
作者 王霞 李萍 +1 位作者 周元国 陈星云 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第3期205-209,共5页
糖皮质激素具有多种重要的生理和药理作用,其经典作用途径为“基因组机制”,通过调节基因转录发挥作用.近年来,其“非基因组机制”在生理和药理学方面的作用越来越受重视.在这一作用途径中,可能有多种受体、激酶、信号分子的参与,“基... 糖皮质激素具有多种重要的生理和药理作用,其经典作用途径为“基因组机制”,通过调节基因转录发挥作用.近年来,其“非基因组机制”在生理和药理学方面的作用越来越受重视.在这一作用途径中,可能有多种受体、激酶、信号分子的参与,“基因组机制”和“非基因组机制”间还可能存在交互调节,对非基因组机制进行深入研究有利于糖皮质激素的临床合理应用. 展开更多
关键词 糖皮质激素 糖皮质激素受体 非基因组效应
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miR-30b对大鼠糖氧剥夺性视网膜神经节细胞损伤的保护作用 被引量:7
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作者 黄婵娟 霍妍 +3 位作者 陈琛 艾李倩玉 周元国 叶剑 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期396-401,共6页
背景缺血缺氧损伤是引起大部分视觉系统损害的主要原因,目前尚无有效药物从根本上缓解缺血缺氧带来的损害。研究发现,微小RNA(miR)-30b有助于减轻缺血缺氧导致的心肌损伤,但其对糖氧剥夺的视网膜神经节细胞(RGCs)生存是否有类似... 背景缺血缺氧损伤是引起大部分视觉系统损害的主要原因,目前尚无有效药物从根本上缓解缺血缺氧带来的损害。研究发现,微小RNA(miR)-30b有助于减轻缺血缺氧导致的心肌损伤,但其对糖氧剥夺的视网膜神经节细胞(RGCs)生存是否有类似的保护作用鲜有文献报道。目的研究重组腺相关病毒介导的miR-30b转染对糖氧剥夺RGCs的保护作用。方法取出生后24h的8只sD大鼠眼球,剥离出视网膜组织以进行RGCs的原代培养,将原代培养的细胞分为重组腺相关病毒(rAAV)-miR对照组、rAAV—miR.30b拟似物组、rAAV—miR-30b抑制物组和PBS组,分别在培养液中添加rAAV—miRNA、rAAV—miR-30b拟似物、rAAV—miR-30b抑制物或PBS培养细胞6d,RGCs:AAV为1:10000。各组细胞分别进行低氧培养箱(37℃,体积分数5%CO2、17%N2、3%O2)联合低糖(葡萄糖质量浓度为1.0g/L)培养液进行培养以建立原代糖氧剥夺RGCs模型,并与正常培养(37℃、5%CO2)的细胞进行对照。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组细胞活力,采用免疫荧光染色法检测各组细胞中神经元特异性标志物TubulinⅢ的表达,并计算存活RGCs数目。采用Hoechst/PI染色法检测各组细胞的凋亡和坏死情况。结果培养7d的正常成熟RGCs可见1—3条完整的细长神经元突起及其分支。糖氧剥夺后随着时间延长,培养的RGCs逐渐减少和破坏,突起的主干结构破碎。rAAV·miR-30b拟似物组细胞相对活性分别为3.310±0.162,明显高于rAAV—miR-30b抑制物组和rAAV—miR对照组的0.949±0.141和0.900±0.181,差异均有统计学意义(t=10.508、10.296,均P〈0.001)。存活的RGCs可表达Tubulinm,呈红色荧光。rAAV—miR-30b拟似物组TubulinlI阳性细胞数量为(13.800±1.924)/视野,明显多于rAAV—miR-30b抑制物组的(0.600±0.548)/视野和rAAV—miR对照组的(0.800±1.304)/视野,差异均有统计学意义(t=15.141、14.912,均P〈0.001)。rAAV—miR-30b拟似物组、rAAV—miR对照组和PBS组细胞凋亡率和死亡率的总体比较差异均有统计学意义(F=10.851,P=0.002;F=6.378,P=0.013),rAAV—miR-30b拟似物组细胞凋亡率和死亡率均明显低于rAAV—miR对照组和PBS组,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。结论低氧培养箱联合低糖培养液建立稳定的原代RGCs糖氧剥夺模型;rAAV介导的miR-30b转染可抵抗糖氧剥夺对RGCs的损伤。 展开更多
关键词 微小RNA/代谢 视网膜神经节细胞 细胞缺氧/生理病理 糖/生理 RNA干扰 细胞保护/药物 SD大鼠 糖氧剥夺
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MTT法与BrdU ELISA法检测成纤维细胞增殖的可靠性比较 被引量:12
14
作者 刘苹 李平 +1 位作者 熊仁平 周元国 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1262-1263,共2页
目的比较MTT法与B rdU ELISA法检测成纤维细胞增殖的可靠性。方法原代培养大鼠成纤维细胞,分别在细胞60%汇合和80%汇合时,以250 pg/m lTGF-β刺激细胞增殖,48 h后分别用MTT法和B rdU ELISA法,以及免疫组化方法检测细胞增殖情况。结果细... 目的比较MTT法与B rdU ELISA法检测成纤维细胞增殖的可靠性。方法原代培养大鼠成纤维细胞,分别在细胞60%汇合和80%汇合时,以250 pg/m lTGF-β刺激细胞增殖,48 h后分别用MTT法和B rdU ELISA法,以及免疫组化方法检测细胞增殖情况。结果细胞60%汇合时MTT检测组和B rdU ELISA检测组与各自的对照组比较,比值分别为1.46和1.70,检测值近似;细胞80%汇合时二者分别为1.0和2.5,免疫组化结果显示TGF-β刺激组蓝染的增殖细胞明显高于对照组。结论与MTT法相比,B rdU ELISA更能客观地反映细胞增殖情况。 展开更多
关键词 MTT法 BRDU ELISA法 细胞增殖
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印迹基因H19对人绒毛膜上皮癌细胞JEG-3基因表达谱的影响 被引量:5
15
作者 俞丽丽 李力 +5 位作者 赵丹 卢林杉 郑英如 陈星云 李平 周元国 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第29期3468-3471,共4页
目的获得印迹基因H19对滋养细胞株人绒毛膜上皮癌细胞系(JEG-3)细胞基因表达谱的影响,以期探讨H19对滋养细胞生物学行为的调控机制。方法含人全长H19cDNA重组真核表达质粒pRc/CMV经测序鉴定正确后,转染JEG-3细胞,采用Affymetrix的U133pl... 目的获得印迹基因H19对滋养细胞株人绒毛膜上皮癌细胞系(JEG-3)细胞基因表达谱的影响,以期探讨H19对滋养细胞生物学行为的调控机制。方法含人全长H19cDNA重组真核表达质粒pRc/CMV经测序鉴定正确后,转染JEG-3细胞,采用Affymetrix的U133plus 2.0Array基因表达谱芯片检测基因表达谱的变化。结果转染后H19mRNA表达显著升高,JEG-3细胞基因表达谱明显改变,共筛选出96条差异基因,其中上调基因19条,下调基因77条。选择其中一种差异表达基因HES1,采用荧光定量PCR检测发现重度子痫前期胎盘组织HES1mRNA的表达水平较正常晚孕胎盘组织中HES1mRNA的表达水平明显降低。结论高通量基因芯片筛选出了H19调控滋养细胞的相关基因,为进一步探讨H19对滋养细胞生物学行为的调控机制提供了实验基础。 展开更多
关键词 H19 滋养细胞 基因芯片 子痫前期 HES1
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β-地中海贫血与先天性软骨发育不全诊断性基因芯片的构建 被引量:5
16
作者 胡章雪 李力 +4 位作者 肖梦 周元国 李华强 顾大勇 易萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期210-212,共3页
目的建立一种能同时快速、准确地检测β-地中海贫血与先天性软骨发育不全常见基因突变的技术。方法将针对2种疾病常见突变的特异性氨基修饰寡核苷酸探针点样于醛基修饰的玻片上,制成基因芯片,对β-地中海贫血、先天性软骨发育不全的病... 目的建立一种能同时快速、准确地检测β-地中海贫血与先天性软骨发育不全常见基因突变的技术。方法将针对2种疾病常见突变的特异性氨基修饰寡核苷酸探针点样于醛基修饰的玻片上,制成基因芯片,对β-地中海贫血、先天性软骨发育不全的病例和正常样本进行基因诊断。结果该基因芯片成功检测到相应的突变位点。结论该芯片制作成本低,重复性好,特异性高,能满足临床标本检测的要求,具有良好的临床应用前景。 展开更多
关键词 DNA芯片 基因芯片 Β-地中海贫血 先天性软骨发育不全 生物素
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纳米金基因芯片结合通用引物1次PCR法同时检测多个病原菌的研究 被引量:6
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作者 顾大勇 鲁卫平 +1 位作者 王华 周元国 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期29-32,共4页
目的基于基因分型技术构建通用引物1次PCR法的样品制备技术,并结合纳米金基因芯片检测系统实现1次对多个病原菌的检测分析。方法针对rDNA保守序列设计通用引物,实现1次PCR完成对各靶细菌ISR序列的扩增;设计针对各靶细菌的特异探针,构建... 目的基于基因分型技术构建通用引物1次PCR法的样品制备技术,并结合纳米金基因芯片检测系统实现1次对多个病原菌的检测分析。方法针对rDNA保守序列设计通用引物,实现1次PCR完成对各靶细菌ISR序列的扩增;设计针对各靶细菌的特异探针,构建纳米金新型基因芯片,并用芯片进行实际检测。结果设计的通用引物可实现对12种待检靶细菌的正确扩增;选用的各探针特异性强、可靠性好;芯片具有较好的灵敏度、特异性及可靠性;检测敏感性达到50 fmol/L;临床检测显示本方法准确可靠。结论与多重PCR样品制备法芯片比较,本芯片检测的步骤和复杂性大为减低,且有较好的检测性能,可用于各靶病原菌的检测。 展开更多
关键词 纳米金 基因芯片 病原菌 16S-23S rDNA区间
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奇异变形杆菌、洛菲氏不动杆菌16s rRNA3’-23s rRNA 5’间序列的克隆及测序 被引量:5
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作者 石磊 沈宜 +2 位作者 顾大勇 王华 周元国 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2006年第6期783-786,835,共5页
目的:对奇异变形杆菌、洛菲氏不动杆菌16s rRNA 3’~23s rRNA 5’间序列(16S^23S rRNA intergenic spacer region,ISR)进行克隆测序,为分子探针技术鉴定两菌奠定基础。方法:针对临床常见致病菌16s rRNA 3’~23s rRNA 5’间序列两端的16S... 目的:对奇异变形杆菌、洛菲氏不动杆菌16s rRNA 3’~23s rRNA 5’间序列(16S^23S rRNA intergenic spacer region,ISR)进行克隆测序,为分子探针技术鉴定两菌奠定基础。方法:针对临床常见致病菌16s rRNA 3’~23s rRNA 5’间序列两端的16S及23S rRNA保守序列设计PCR扩增的通用引物,对两菌进行扩增,利用PMD-18TVector质粒对两菌的PCR产物进行T载体克隆构建,测序后申报Genbank。结果:两菌的通用引物扩增产物构建的T载体克隆,测序结果经Blast分析,确定为两菌的ISR序列,申报Genbank获得接收。结论:成功的对奇异变形杆菌、洛菲氏不动杆菌ISR序列进行了克隆测序,该序列可以用于两种菌的通用引物PCR扩增技术鉴定。 展开更多
关键词 奇异变形杆菌 洛菲氏不动杆菌 16s^23s rRNA间区 T载体
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小鼠急性脑损伤后微量脑脊液谷氨酸浓度的测定 被引量:5
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作者 李玮 安建宏 +2 位作者 朱佩芳 熊仁平 周元国 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1290-1291,共2页
目的 建立急性脑损伤后微量脑脊液谷氨酸浓度测定方法。方法 采用邻苯二甲醛柱前衍生,梯度高效液相色谱荧光检测法测定急性脑损伤小鼠脑脊液中谷氨酸(glutamate,GLu)含量。结果谷氨酸的平均加样回收率为84.26%~125.6%(n=3)... 目的 建立急性脑损伤后微量脑脊液谷氨酸浓度测定方法。方法 采用邻苯二甲醛柱前衍生,梯度高效液相色谱荧光检测法测定急性脑损伤小鼠脑脊液中谷氨酸(glutamate,GLu)含量。结果谷氨酸的平均加样回收率为84.26%~125.6%(n=3),日内相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于4.94%(n=3),日间相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于0.78%(n=3)。急性脑损伤后6h小鼠脑脊液谷氨酸含量相对于假手术组有明显升高(P〈0.01)。结论 本方法准确、快速,可用于微量脑脊液谷氨酸含量的测定。 展开更多
关键词 急性脑损伤 微量 脑脊液 谷氨酸
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c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞生物学行为的影响 被引量:4
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作者 刘霞 李平 +2 位作者 张恩 刘苹 周元国 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期173-176,共4页
目的研究原癌基因c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞活力、肌成纤维细胞分化、型胶原分泌等生物学行为的影响。方法免疫组化检测皮肤成纤维细胞内c-Ski蛋白的表达,并在转染c-ski基因后,利用MTT法检测皮肤成纤维细胞增殖活力、免疫组化和RT-PCR... 目的研究原癌基因c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞活力、肌成纤维细胞分化、型胶原分泌等生物学行为的影响。方法免疫组化检测皮肤成纤维细胞内c-Ski蛋白的表达,并在转染c-ski基因后,利用MTT法检测皮肤成纤维细胞增殖活力、免疫组化和RT-PCR检测型胶原分泌、α-SMA细胞免疫组化检测肌成纤维细胞分化的改变。结果大鼠皮肤成纤维细胞内有c-Ski蛋白的表达,且主要表达在细胞核内,c-ski可以以剂量依赖的方式增加皮肤成纤维细胞的增殖活力,并可降低型胶原蛋白和mRNA的水平,但不改变皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化过程。结论c-ski促进细胞增殖但降低胶原分泌的作用可能对促进创伤愈合、降低瘢痕形成有着重要的意义。 展开更多
关键词 c-ski 成纤维细胞 胶原 分化
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