不同非病毒载体对原代肌腱细胞转染效率和毒性作用研究

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作者 金静 杨纤纤 周友浪 《交通医学》 2023年第3期221-225,234,共6页

目的:研究并比较非病毒载体纳米球和脂质体对原代肌腱细胞的转染效率以及毒性作用。方法:制备不同N/P比例的PLGA纳米球,原代培养鸡、大鼠、小鼠肌腱细胞,将低、中、高不同剂量的pEGFP-N1质粒负载于纳米球和脂质体,对三种肌腱细胞进行转... 目的:研究并比较非病毒载体纳米球和脂质体对原代肌腱细胞的转染效率以及毒性作用。方法:制备不同N/P比例的PLGA纳米球,原代培养鸡、大鼠、小鼠肌腱细胞,将低、中、高不同剂量的pEGFP-N1质粒负载于纳米球和脂质体,对三种肌腱细胞进行转染。通过荧光拍照和流式细胞分析,检测质粒在24、48、72、96 h的转染效率,Western Blot法检测GFP表达水平,CCK8法检测转染24、48、72 h细胞活力。结果:对于鸡肌腱细胞,纳米球的转染效率显著高于脂质体,尤其是NP10的GFP表达最明显,且对细胞无毒性作用。对于大鼠肌腱细胞,NP10的转染效率最佳,其次是NP6和脂质体,但脂质体降低了细胞活性。对于小鼠肌腱细胞,纳米球和脂质体的转染效率均较低,且随着时间与剂量的增加,细胞毒性作用越来越明显。结论:NP10是鸡和大鼠肌腱细胞转染质粒的最佳试剂,但小鼠肌腱细胞最合适的转染试剂还需进一步探索。 展开更多

关键词 非病毒载体 纳米球 脂质体 质粒 原代肌腱细胞

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Nanog与CD44在胃癌细胞株MKN45球体细胞中的表达及其意义 被引量：5

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作者 刘建明 周友浪 +2 位作者 马利林 徐骏飞 章建国 《天津医药》 CAS 2015年第1期30-33,I0001,共5页

目的检测与干细胞相关的2种因子胚胎干细胞相关转录因子4(Nanog)和分化抗原簇44(CD44)在胃癌细胞株MKN45悬浮球体细胞中的表达。方法选择人胃癌细胞株MKN45,在含有表皮生长因子(EGF)及成纤维生长因子(b FGF)无血清培养液中培养,观察球... 目的检测与干细胞相关的2种因子胚胎干细胞相关转录因子4(Nanog)和分化抗原簇44(CD44)在胃癌细胞株MKN45悬浮球体细胞中的表达。方法选择人胃癌细胞株MKN45,在含有表皮生长因子(EGF)及成纤维生长因子(b FGF)无血清培养液中培养,观察球体形成情况;采用免疫印迹(Western blot)、免疫荧光与实时定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测干细胞相关基因Nanog和CD44在球体细胞及原代贴壁细胞中的表达差异。结果胃癌细胞株MKN45在无血清培养条件下能形成悬浮球体,球体细胞中的Nanog和CD44的m RNA相对表达量分别为2.34±0.22和1.18±0.04,明显高于贴壁细胞中的Nanog和CD44的m RNA相对表达量1.00±0.00和1.00±0.05;球体细胞中的Nanog和CD44的蛋白质相对表达量分别为0.18±0.02和0.24±0.04,明显高于贴壁细胞中的相对表达量0.07±0.02和0.18±0.01(P<0.05)。球体细胞中Nanog主要分布在细胞核周围及细胞质中,而CD44主要在细胞膜上表达,且同一个球体细胞中的Nanog与CD44大多同时表达。结论胃癌细胞株MKN45在无血清培养条件下形成的球体细胞具有肿瘤干细胞的特性。Nanog/CD44共表达细胞可能是胃癌干细胞的一种表型。 展开更多

关键词 胃肿瘤 肿瘤干细胞 抗原 CD44 悬浮培养法 NANOG

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木犀草素通过调控ATAD2蛋白表达抑制结肠癌生长作用的研究 被引量：9

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作者 赵喜 李虎 +1 位作者 范晓博 周友浪 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS 北大核心 2018年第4期21-25,29,共6页

采用MTS法研究木犀草素(LUT)对人结肠癌细胞LS174T增殖的影响,构建人结肠癌LS174T细胞裸小鼠移植瘤模型,观察LUT对结肠癌生长及移植瘤中三磷酸腺苷酶家族蛋白2(ATAD2)表达的影响;构建ATAD2siRNA质粒并转染LS174T细胞,检测LUT对肿瘤细胞... 采用MTS法研究木犀草素(LUT)对人结肠癌细胞LS174T增殖的影响,构建人结肠癌LS174T细胞裸小鼠移植瘤模型,观察LUT对结肠癌生长及移植瘤中三磷酸腺苷酶家族蛋白2(ATAD2)表达的影响;构建ATAD2siRNA质粒并转染LS174T细胞,检测LUT对肿瘤细胞侵袭的影响,并测定细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)及总NF-κB(t-NF-κB)蛋白的表达。结果表明:LUT对肿瘤细胞增殖及体内生长具有明显的抑制作用,并能降低移植瘤组织中ATAD2蛋白的表达。干扰ATAD2后,LUT抑制肿瘤细胞侵袭的作用明显减弱,同时LUT降低MMP-2、MMP-9和p-NF-κB蛋白表达的作用亦明显减弱或消失。这一研究提示木犀草素通过抑制肿瘤细胞增殖和侵袭,从而抑制结肠癌生长,且其作用依赖于ATAD2蛋白。 展开更多

关键词 木犀草素 结肠癌 ATAD2 侵袭

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自体富血小板血浆联合高压氧治疗老年糖尿病足溃疡的疗效 被引量：2

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作者 崔亚萍 张巧云 +3 位作者 沈娟 倪启迪 周友浪 钱忠卫 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第19期4721-4724,共4页

目的 探究自体富血小板血浆(PRP)联合高压氧(HBO)治疗老年糖尿病足溃疡(DFU)患者对创面修复及血管内皮细胞活力的影响。方法 160例老年DFU患者随机分为对照组和观察组各80例。对照组予以HBO治疗,观察组予以PRP联合HBO治疗。比较两组临... 目的 探究自体富血小板血浆(PRP)联合高压氧(HBO)治疗老年糖尿病足溃疡(DFU)患者对创面修复及血管内皮细胞活力的影响。方法 160例老年DFU患者随机分为对照组和观察组各80例。对照组予以HBO治疗,观察组予以PRP联合HBO治疗。比较两组临床疗效、创面修复情况、腘动脉及足背动脉血流速度和血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、C反应蛋白(CRP)水平。结果 观察组临床总有效率明显高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,治疗4、8 w时,观察组创面面积明显减小、创面愈合率明显升高,且创面愈合时间明显缩短(P<0.05)。观察组治疗8 w时血清IL-6、TNF-α、CRP水平均明显低于对照组,血清VEGF、bFGF水平及腘动脉及足背动脉血流速度均明显高于对照组(均P<0.05)。结论 自体PRP联合HBO治疗老年DFU疗效显著,可促进患者创面修复,缩短愈合时间,降低炎症因子水平,提高血管内皮细胞活力,改善足部微循环。 展开更多

关键词 富血小板血浆 高压氧 糖尿病足溃疡 创面修复 血管内皮细胞

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CD44在胃癌细胞株MKN45悬浮球体细胞中的表达及意义 被引量：2

5

作者 刘建明 马利林 +4 位作者 周友浪 陈瑞新 徐骏飞 章建国 刘杰 《交通医学》 2013年第6期601-603,606,共4页

目的:检测干细胞相关因子CD44在胃癌细胞株MKN45悬浮球体细胞中的表达。方法:选择人胃癌细胞株MKN45,在含有纤维生长因子-2及表皮生长因子无血清培养液中培养,观察球体形成情况;采用逆转录聚合酶链反应和免疫印迹分析法,检测干细胞相关... 目的:检测干细胞相关因子CD44在胃癌细胞株MKN45悬浮球体细胞中的表达。方法:选择人胃癌细胞株MKN45,在含有纤维生长因子-2及表皮生长因子无血清培养液中培养,观察球体形成情况;采用逆转录聚合酶链反应和免疫印迹分析法,检测干细胞相关基因CD44在球体细胞及原代贴壁细胞两组细胞中的表达差异。结果:胃癌细胞株MKN45在无血清培养条件下能形成悬浮球体,球体细胞中CD44的相对表达量高于原代贴壁细胞(P<0.05)。结论:悬浮球培养法在胃癌细胞株MKN45中培养形成的球体细胞富集类肿瘤干细胞。该方法是分选和鉴定肿瘤干细胞的行之有效的方法。 展开更多

关键词 胃癌 肿瘤干细胞 CD44 逆转录聚合酶链反应 免疫印迹分析法

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微小RNA-29a-3p靶向Serpinh1调控人胃癌细胞系BGC823增殖和侵袭的分子机制

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作者 严晓娣 薛强 +5 位作者 王斐然 顾红梅 唐翀 刘睿祺 周友浪 刘贤称 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期607-612,共6页

目的探讨微小RNA(miR)-29a-3p影响Serpinh1对胃癌细胞的增殖与侵袭,并分析其相关的分子机制。方法检测miR-29a-3p在胃癌BGC823细胞中的表达水平,并评估miR-29a-3p在胃癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用。通过Western blotting和荧光素酶... 目的探讨微小RNA(miR)-29a-3p影响Serpinh1对胃癌细胞的增殖与侵袭,并分析其相关的分子机制。方法检测miR-29a-3p在胃癌BGC823细胞中的表达水平,并评估miR-29a-3p在胃癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用。通过Western blotting和荧光素酶分析证明,miR-29a-3p与Serpinh13’UTR直接结合。此外,采用MTT法、集落形成法和Transwell法在体外检测miR-29a-3p/Serpinh1轴对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果转染后miR-29a-3p模拟物(mimic)组中miR-29a-3p的表达明显高于miR-29a-3p阴性对照和空白组,转染miR-29a-3p mimic后BGC823细胞增殖能力显著降低。荧光素酶分析显示,miR-29a-3p通过靶向Serpinh13’-非翻译区(3’UTR)抑制Serpinh1的表达。此外,miR-29a-3p的过表达通过靶向Serpinh1显著抑制胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移。结论MiR-29a-3p可靶向作用于Serpinh1,从而调控胃癌细胞的增殖与侵袭。 展开更多

关键词 微小RNA-29a-3p Serpinh1 胃癌 增殖 侵袭 免疫印迹法

原文传递

胃癌细胞株MKN45球体细胞中Sox2的表达研究

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作者 刘建明 马利林 +4 位作者 周友浪 陈瑞新 徐骏飞 章建国 刘杰 《南通大学学报（医学版）》 2013年第6期513-516,共4页

目的:检测干细胞相关因子Sox2在胃癌细胞株MKN45悬浮球体细胞中的表达。方法 :选择人胃癌细胞株MKN45,在含有表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)及基本的成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)无血清培养液... 目的:检测干细胞相关因子Sox2在胃癌细胞株MKN45悬浮球体细胞中的表达。方法 :选择人胃癌细胞株MKN45,在含有表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)及基本的成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)无血清培养液中培养,观察球体形成情况,并检测球体细胞对化疗药物顺铂(cisplatin,DDP)的耐受性;采用RT-PCR与免疫印迹分析检测干细胞相关基因Sox2在球体细胞及原代贴壁细胞两组细胞中的表达差异。结果:胃癌细胞株MKN45在无血清培养条件下能形成悬浮球体,球体细胞中Sox2的相对表达量明显高于原代贴壁细胞(P=0.000)。结论:悬浮球培养法在胃癌细胞株MKN45中培养形成的球体细胞具有肿瘤干细胞特性。该方法是分离和鉴定肿瘤干细胞的实用而有效的方法。 展开更多

关键词 胃癌 肿瘤干细胞 SOX2 SOX2

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年轻外科医生成长过程中自信心培养的研究

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作者 徐骏飞 陈锦鹏 +2 位作者 何志贤 王华 周友浪 《卫生职业教育》 2015年第13期133-135,共3页

外科医生是现代医学的重要参与者,培养优秀的年轻外科医生对于国家医学及卫生事业发展至关重要。通常在年轻外科医生培养过程中,注重其基础理论知识及实践操作能力,忽视了自信心培养。

关键词 外科医生 培养方式 自信心

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鞘内注射肿瘤坏死因子-α单克隆抗体缓解大鼠骨癌痛的机制 被引量：4

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作者 陆向荣 王枫 +4 位作者 魏金荣 周友浪 缪秀华 肖颖 徐为袁 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2015年第1期33-37,共5页

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)单克隆抗体对胫骨癌痛模型大鼠痛觉过敏的影响及其可能的机制。方法:选取180~200 g健康雌性SD大鼠32只,随机分成4组(n=8):假手术组、骨癌痛组、TNF-α单克隆抗体组、肿瘤对照组。于左侧胫骨近端骨髓腔... 目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)单克隆抗体对胫骨癌痛模型大鼠痛觉过敏的影响及其可能的机制。方法:选取180~200 g健康雌性SD大鼠32只,随机分成4组(n=8):假手术组、骨癌痛组、TNF-α单克隆抗体组、肿瘤对照组。于左侧胫骨近端骨髓腔注射Walker256肿瘤细胞悬液10μL(2×109)制备大鼠骨癌痛模型,假手术组注射10μL生理盐水。建模后第11天,TNF-α单克隆抗体组连续7 d鞘内注射TNF-α单克隆抗体依那西普8μL,肿瘤对照组连续7 d鞘内注射生理盐水8μL,其余两组不进行鞘内注射。分别于注射肿瘤细胞前,注射后第1、4、7、10、14、17天时测定假手术组和骨癌痛组的机械痛阈。于接种细胞后第17天取大鼠左侧背根神经节(dorsal root ganglion,DRG,腰2-腰5段)测定电压门控钠离子通道1.8(NaV1.8)的蛋白表达。结果:与假手术组相比,骨癌痛组种瘤后第7天,机械痛阈开始下降,第10天出现明显下降(P<0.05),第17天骨癌痛组DRG NaV1.8表达较假手术组明显升高(P<0.05);第11天TNF-α单克隆抗体组大鼠鞘内给药后机械痛阈明显升高,2 h达最高峰,8 h后恢复到给药前水平(P<0.01);重复给药7 d,行为学变化类似一次给药,但机械痛阈值升高程度较单次给药降低。第17天TNF-α单克隆抗体组DRG NaV1.8的表达较肿瘤对照组明显降低(P<0.01)。结论:TNF-α单克隆抗体可能通过抑制DRG神经元上的NaV1.8的高表达从而抑制骨癌疼痛。 展开更多

关键词 骨癌痛 背根神经节 肿瘤坏死因子-Α 电压门控钠离子通道1.8

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大鼠初级感觉神经元内PKA/CREB通路在骨癌痛中的作用 被引量：2

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作者 王枫 李萌 +3 位作者 魏金荣 陆向荣 周友浪 徐卫袁 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2015年第2期114-118,共5页

目的:观察蛋白激酶A拮抗剂H-89对骨癌痛大鼠疼痛行为和背根神经节环磷腺苷效应元件结合蛋白(c AMP-response element binding protein,CREB)磷酸化水平的影响。方法:1检测骨癌痛大鼠背根神经节CREB磷酸化水平:将32只雌性SD大鼠随机分为... 目的:观察蛋白激酶A拮抗剂H-89对骨癌痛大鼠疼痛行为和背根神经节环磷腺苷效应元件结合蛋白(c AMP-response element binding protein,CREB)磷酸化水平的影响。方法:1检测骨癌痛大鼠背根神经节CREB磷酸化水平:将32只雌性SD大鼠随机分为假手术组和骨癌痛组(n=16),分组后在大鼠右侧胫骨髓腔内分别注射PBS或乳腺癌Walker 256细胞,肿瘤细胞接种后1,3,7,10,14 d检测大鼠机械痛阈,第14天提取骨癌痛组大鼠第2至第5腰椎右侧的背根神经节,应用免疫印迹法检测磷酸化CREB(p-CREB)的表达量。2检测H-89对大鼠疼痛行为及CREB磷酸化的影响:将32只骨癌大鼠随机均分为DMSO组和H-89组。在肿瘤细胞接种后的第9天至第14天每天鞘内注射DMSO或H-89。分别在给药前、给药后15,30,45和60 min进行疼痛行为测试。在第14天最后一次鞘内给药1 h后,快速提取大鼠右侧背根神经节,应用免疫印迹法检测p-CREB的表达量。结果:与假手术组比较,骨癌痛组大鼠机械痛阈明显降低,背根神经节中CREB磷酸化水平升高(P<0.05)。鞘内注射DMSO或H-89后,H-89组大鼠机械痛阈较DMSO组明显升高。同时H-89组CREB磷酸化水平较DMSO组明显降低(P<0.01)。结论:蛋白激酶A通过CREB磷酸化加剧大鼠骨癌痛。 展开更多

关键词 蛋白激酶A 骨癌痛 背根神经节 环磷腺苷效应元件结合蛋白

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自体富血小板血浆纳米球凝胶缓释系统对兔膝关节软骨损伤的修复效果研究

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作者 缪小兵 周友浪 +1 位作者 居飞 谭军 《交通医学》 2021年第1期5-9,F0002,共6页

目的:建立负载自体富血小板血浆纳米球凝胶缓释系统,观察对兔膝关节软骨损伤的修复效果。方法:建立兔双膝关节股骨内侧髁软骨面缺损模型,随机分成空白组、凝胶组和纳米球凝胶组各9只。兔心脏采血采用二次离心法制备自体富血小板血浆(PR... 目的:建立负载自体富血小板血浆纳米球凝胶缓释系统,观察对兔膝关节软骨损伤的修复效果。方法:建立兔双膝关节股骨内侧髁软骨面缺损模型,随机分成空白组、凝胶组和纳米球凝胶组各9只。兔心脏采血采用二次离心法制备自体富血小板血浆(PRP),将PRP加入透明质酸水凝胶中制成PRP凝胶。将PRP先负载到乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米球中,然后再加入透明质酸水凝胶中,建立PRP纳米球凝胶缓释系统。分别将PRP凝胶、PRP纳米球凝胶缓释系统应用于兔膝关节软骨缺损面。术后4周、8周、12周处死实验动物,对兔膝关节标本进行大体观察,采用国际软骨修复协会(ICRS)宏观修复评价量表进行评价。对损伤区进行组织取材,切片后行HE染色和番红固绿染色,应用O’Driscoll评分标准进行组织学评分。结果:凝胶组在4周、8周、12周时ICRS宏观修复评分分别为5.67±0.52分、8.83±0.75分和9.00±0.63分,纳米球凝胶组分别为5.67±0.52分、9.50±0.55分和10.16±0.75分,均高于空白组的2.50±0.58分、4.00±0.82分和4.25±0.50分,差异均有统计学意义(P<0.05),凝胶组、纳米球凝胶组8周、12周ICRS宏观修复评分高于4周,差异均有统计学意义(P<0.05),但凝胶组与纳米球凝胶组的差异无统计学意义(P>0.05)。空白组在4周、8周、12周时O’Driscoll组织学评分分别为4.00±0.82分、4.25±0.96分和4.00±0.82分,凝胶组分别为9.33±1.03分、11.50±1.05分和10.00±1.79分,纳米球凝胶组分别为10.83±1.17分、15.00±1.41分和13.50±1.87分,三组间差异均有统计学意义(P<0.05),纳米球凝胶组评分最高。结论:自体富血小板血浆凝胶和自体富血小板血浆纳米球凝胶缓释系统均具有软骨修复作用,可以促进局部软骨基质形成和软骨细胞聚集,但超过8周时软骨修复作用减退。 展开更多

关键词 富血小板血浆 纳米球凝胶缓释系统 软骨损伤 兔

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CLIC1在乳腺癌中的表达及预后价值

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作者 夏瑾雯 徐静 +3 位作者 王馨玥 王峰 周友浪 王华 《南通大学学报（医学版）》 2022年第1期1-5,共5页

目的:评估细胞内氯离子通道1(chloride intracellular channel 1,CLIC1)在乳腺癌中的表达水平及对患者预后的影响。方法:通过免疫组织化学法分析116例乳腺癌组织芯片中CLIC1的表达及与临床病理参数的关系,Kaplan-Meier生存曲线及单因素... 目的:评估细胞内氯离子通道1(chloride intracellular channel 1,CLIC1)在乳腺癌中的表达水平及对患者预后的影响。方法:通过免疫组织化学法分析116例乳腺癌组织芯片中CLIC1的表达及与临床病理参数的关系,Kaplan-Meier生存曲线及单因素与多因素Cox回归分析其对患者预后的影响。结果:免疫组化结果显示,CLIC1在乳腺癌组织中高表达,且与肿瘤大小(P=0.013)、TNM分期(P=0.006)、病理学分级(P<0.001)、淋巴结转移(P=0.025)和Ki67(P=0.011)相关。生存分析显示,CLIC1高表达的患者总体生存期较短(P<0.001),Cox回归分析显示,CLIC1是影响乳腺癌患者预后的独立危险因素。结论:高表达的CLIC1与乳腺癌患者的不良预后密切相关,提示其可能作为乳腺癌潜在的生物学诊断指标。 展开更多

关键词 乳腺癌 细胞内氯离子通道1 临床病理参数 预后

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基因治疗导入微小RNA沉默肌腱细胞转化生长因子基因的体外研究和体内应用

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作者 陈传好 汤锦波 +2 位作者 周友浪 曹怡 吴亚芳 《中华骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期293-298,共6页

目的探讨微小RNA（miRNA）导人肌腱细胞和损伤肌腱沉默转化生长因子（TGF）-β基因的作用及对I、Ⅲ型胶原和结缔组织生长因子（CTGF）基因表达的影响。方法针对鸡TGF-β1基因的mRNA序列，合成4对miRNATGFB1DNA序列和一对不编码序列，分... 目的探讨微小RNA（miRNA）导人肌腱细胞和损伤肌腱沉默转化生长因子（TGF）-β基因的作用及对I、Ⅲ型胶原和结缔组织生长因子（CTGF）基因表达的影响。方法针对鸡TGF-β1基因的mRNA序列，合成4对miRNATGFB1DNA序列和一对不编码序列，分别插入至miRNA质粒载体中，获得5个miRNATGFB1质粒载体，并分别命名为miRNA#1、#2、#3、#4和阴性对照。采用实时PCR技术检测并分析miRNA导入肌腱细胞后TGF-β1、I、Ⅲ型胶原和CTGF基因表达变化。在转基因治疗肌腱1周和6周后，检测TGF-β1、I、Ⅲ型胶原和CTGF基因在体内损伤肌腱中的表达。结果与阴性对照细胞组相比，实时PCR结果分析显示：miRNA#1和舵质粒载体治疗的细胞组TGF-β1基因表达分别下降了68％和43％；在miRNA群1治疗的细胞组，Ⅲ型胶原和CTGF基因表达分别下降70％和68％。使用miRNA#1干扰质粒转基因至体内损伤肌腱结果显示：术后1周，TGFB1基因表达下降67％，而I、Ⅲ型胶原和CTGF基因表达未变化；术后6周，TGF-β1和Ⅲ型胶原基因表达分别下降56％和58％。结论miRNA导入肌腱细胞后TGFB1、Ⅲ型胶原和CTGF基因表达显著下降。导入miRNA至活体损伤肌腱后1周，TGF-β1基因表达显著下降；术后6周，TGF-β1和Ⅲ型胶原基因表达显著下降。 展开更多

关键词 基因沉默 基因表达调控 转化生长因子Β

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载基因纳米球对原代肌腱细胞转染效率优化和生物相容性评价

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作者 杨纤纤 金静 周友浪 《中华手外科杂志》 CSCD 北大核心 2023年第5期474-478,共5页

目的筛选非病毒载体纳米球对原代肌腱细胞的最佳转染效率以及生物相容性评价。方法制备不同剂量PEI修饰的纳米球, 原代培养鸡、大鼠、小鼠肌腱细胞, 转染不同剂量的siRNA, 转染12 h后对细胞进行荧光拍照与流式细胞仪分析, CCK-8检测转... 目的筛选非病毒载体纳米球对原代肌腱细胞的最佳转染效率以及生物相容性评价。方法制备不同剂量PEI修饰的纳米球, 原代培养鸡、大鼠、小鼠肌腱细胞, 转染不同剂量的siRNA, 转染12 h后对细胞进行荧光拍照与流式细胞仪分析, CCK-8检测转染24、48和72 h后细胞的活力情况, WB检测GAPDH蛋白表达水平, 未转染细胞作为阴性对照, 脂质体作为阳性对照。结果对于鸡、大鼠、小鼠三种原代肌腱细胞, 随着转染试剂剂量的增大, 脂质体的转染效率明显提高, 纳米球的转染效率未见显著改变, 但所有纳米球的转染效率均高于脂质体。相较于脂质体, 纳米球对细胞的初期细胞毒性反应较大, 随着时间的推移, 毒性影响逐渐消失。结论与脂质体相比, 纳米球对于鸡、大鼠、小鼠三种肌腱细胞的转染效率都较高, 纳米球是动物肌腱细胞转染siRNA的理想转染试剂。 展开更多

关键词 脂质体 生物相容性 非病毒载体 纳米球 原代肌腱细胞

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悬浮球培养法在人胃癌细胞株MKN45中分离鉴定胃癌干细胞

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作者 刘建明 周友浪 +5 位作者 马利林 徐骏飞 章建国 刘杰 陈瑞新 钱海鑫 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1535-1536,共2页

肿瘤干细胞（CSC）是肿瘤的起源，它决定肿瘤发生、发展和复发转移。CSC的研究，首先是CSC的分离与鉴定。本研究旨探讨悬浮球培养法分离胃癌CSC细胞的可行性。

关键词 人胃癌细胞株 肿瘤干细胞 分离鉴定 培养法 MKN45 悬浮 CSC 肿瘤发生

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鸡模型中三种不同结构的缝合法对屈肌腱愈合强度的影响 被引量：1

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作者 杨纤纤 周友浪 《中华手外科杂志》 CSCD 北大核心 2022年第6期523-527,共5页

目的在鸡肌腱修复模型中评价不同结构的缝合法对屈肌腱愈合强度的影响。方法用以下三种不同结构的缝合法修复鸡的屈肌腱:(1)双股Kessler缝合;(2)带有附加环形修补的双股Kessler缝合;(3)带有三个独立周边缝合的四股Kessler缝合。屈肌腱... 目的在鸡肌腱修复模型中评价不同结构的缝合法对屈肌腱愈合强度的影响。方法用以下三种不同结构的缝合法修复鸡的屈肌腱:(1)双股Kessler缝合;(2)带有附加环形修补的双股Kessler缝合;(3)带有三个独立周边缝合的四股Kessler缝合。屈肌腱的生物力学由生物力学测试仪测量完成,4周后测试26根修复后的活鸡屈肌腱并记录愈合强度,0d测试28根修复后的冻鸡爪屈肌腱并记录最大拉力,并在每组随机选取2根肌腱用来拍摄照片,以观察缝合结构。结果4周后,与双股Kessler缝合修复的肌腱相比,三个独立周边缝合的四股Kessler缝合修复的肌腱明显具有更大的愈合强度。带有附加环形修补的双股Kessler缝合修复的肌腱愈合强度大于双股Kessler缝合,但弱于四股Kessler缝合。在0d,三种修复方法的修复强度非常接近,但三种不同修复方法的肌腱其小载荷下的形变存在明显差异。结论多股修复技术可增强屈肌腱的愈合强度,明显增加术后的愈合,但两股中心缝合的修复不会明显改变肌腱的愈合强度。当采用更稳定的修复结构时,多股修复的强度提高更为明显。 展开更多

关键词 动物实验 鸡 屈肌腱 多股修复技术 愈合强度 间隙形成

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