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α-磷酸甘油脱氢酶的提纯及性质的研究 被引量：6
1
作者 卞祖宁 徐景娣 +1 位作者 周金耀 熊振平 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第6期241-244,共4页
应用液-液双水相提取、DEAE-纤维素层析及SIPI-I红色染料配基层析等方法提纯兔肌匀浆粗提取液中的α-磷酸甘油脱氢酶,其比活15u/mg蛋白,为原酶的50倍,总收率约50％。并对其分子量、米氏常数、酶作用的最适pH、最适温度,对pH和热的稳定... 应用液-液双水相提取、DEAE-纤维素层析及SIPI-I红色染料配基层析等方法提纯兔肌匀浆粗提取液中的α-磷酸甘油脱氢酶,其比活15u/mg蛋白,为原酶的50倍,总收率约50％。并对其分子量、米氏常数、酶作用的最适pH、最适温度,对pH和热的稳定性等性质作了测定。 展开更多
关键词 磷酸甘油 脱氢酶 兔肌 提纯
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大肠杆菌碱性磷酸单酯酶的纯化研究 被引量：2
2
作者 周金耀 徐伟军 +3 位作者 徐景娣 卞祖宁 熊立民 熊振平 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第6期241-244,共4页
大肠杆菌的粗提取液经正丁醇提取、酸沉淀、硫酸铵沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析和交联葡聚糖 G-200凝胶过滤,所得碱性磷酸单酯酶,比活106u/mg 蛋白,酶活力的总回收率为54.3%,纯化倍数为18.8倍,以 SDS-PAGE 鉴定呈单带。对其分子量和... 大肠杆菌的粗提取液经正丁醇提取、酸沉淀、硫酸铵沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析和交联葡聚糖 G-200凝胶过滤,所得碱性磷酸单酯酶,比活106u/mg 蛋白,酶活力的总回收率为54.3%,纯化倍数为18.8倍,以 SDS-PAGE 鉴定呈单带。对其分子量和亚基分子量、酶作用最佳 pH 和温度、米氏常数等进行了测定。 展开更多
关键词 磷酸单酯酶 提纯 ELISA
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甘油激酶的纯化与性质的研究 被引量：2
3
作者 卞祖宁 周金耀 +3 位作者 宛敏 徐景娣 莫尔品 熊振平 《医药工业》 CAS 1988年第1期1-3,共3页
由嗜热脂肪芽胞杆菌(Bacillus stearothermophilus SIPI1.687)的粗提取液,经液-液双相抽提、DEAE-Toyopearl 650 M 离子交换柱层析及 SIPI-Ⅱ蓝色(?)料配基层析等分离提纯,可得甘油激酶(81U/mg),PAGE 鉴定为单带。用 Sephacryl 400凝胶... 由嗜热脂肪芽胞杆菌(Bacillus stearothermophilus SIPI1.687)的粗提取液,经液-液双相抽提、DEAE-Toyopearl 650 M 离子交换柱层析及 SIPI-Ⅱ蓝色(?)料配基层析等分离提纯,可得甘油激酶(81U/mg),PAGE 鉴定为单带。用 Sephacryl 400凝胶过滤测得分子量为209,000道尔顿,SDS-PAGE 测定结果表明该酶由四个分子量均为50,000道尔顿的相似亚基组成。酶作用最佳 pH 9.4,pH 5.8~11.2时稳定;最佳温度为50℃,有较好的热稳定性。以甘油为底物时米氏常数为6.25×10M。 展开更多
关键词 嗜热脂肪芽胞杆菌 甘油激酶 液-液双相抽提 DEAE-Toyopearl 650 M离子交换层析 SIPI-Ⅱ蓝色染料配基层析
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国产染料配基层析介质分离纯化甘油激酶α-磷酸甘油脱氢酶和心肌黄酶 被引量：1
4
作者 周金耀 卞祖宁 +2 位作者 徐景娣 赵玉秀 熊振平 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第5期193-196,共4页
以国产Sepharose 4 B和活性染料制备的YS一Ⅱ染料配基层析介质,分离提纯了甘油激酶、α-磷酸甘油脱氢酶和心肌黄酶,可使纯度分别提高6.6、2.9和3.3倍,收率为83.3、43.6和81.9%,所含的NADH 氧化酶和乳酸脱氢酶几乎全部可除去,各酶冻干后... 以国产Sepharose 4 B和活性染料制备的YS一Ⅱ染料配基层析介质,分离提纯了甘油激酶、α-磷酸甘油脱氢酶和心肌黄酶,可使纯度分别提高6.6、2.9和3.3倍,收率为83.3、43.6和81.9%,所含的NADH 氧化酶和乳酸脱氢酶几乎全部可除去,各酶冻干后在10℃存放可稳定半年以上。所得的上述三个酶与自制的脂酶可组成血清甘油三酯酶联试剂盒。 展开更多
关键词 甘油激酶 心肌黄酶 染料配基层析
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甘油激酶纯化工艺的改进研究 被引量：1
5
作者 周金耀 卞祖宁 +1 位作者 赵玉秀 熊振平 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 1992年第1期1-4,共4页
由嗜热脂肪芽胞杆菌(BacillusStearothermophilus SIPl1.687)的菌体,经细胞破壁,酸沉淀,DEAE-Toyopearl 650M离子交换层析及ys-Ⅱ染料配基层析等分离提纯,酶的回收率为35.5％,比活30.8u/mg蛋白,纯化倍数16.5倍,SDS-PAGE鉴定为单带,并除... 由嗜热脂肪芽胞杆菌(BacillusStearothermophilus SIPl1.687)的菌体,经细胞破壁,酸沉淀,DEAE-Toyopearl 650M离子交换层析及ys-Ⅱ染料配基层析等分离提纯,酶的回收率为35.5％,比活30.8u/mg蛋白,纯化倍数16.5倍,SDS-PAGE鉴定为单带,并除去了几乎所有的NADH氧化酶,由此纯化的酶经冷冻干燥后,10℃存放11个月活力未见明显损失,与其它自制的三个酶可组成测定血清甘油三酯酶联试剂盒,甘油三酯浓度在60—960mg/dl内呈直线并过原点。 展开更多
关键词 甘油激酶 纯化
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