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东亚三角涡虫胰蛋白酶Djtry的表达和酶活分析
被引量:
2
1
作者
周鲁明
刘殿辰
+1 位作者
孙欢欢
赵博生
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期609-614,共6页
通过对东亚三角涡虫胰蛋白酶Djtry氨基酸序列比对分析,发现保守的催化三联体结构中第一位的His被Lys所取代。为了探究这种突变是否会对胰蛋白酶的活性有影响,文章构建了原核表达重组质粒pET-28a-Djtry,转化到E.coli BL21中,利用IPTG诱...
通过对东亚三角涡虫胰蛋白酶Djtry氨基酸序列比对分析,发现保守的催化三联体结构中第一位的His被Lys所取代。为了探究这种突变是否会对胰蛋白酶的活性有影响,文章构建了原核表达重组质粒pET-28a-Djtry,转化到E.coli BL21中,利用IPTG诱导表达,对表达的重组蛋白进行变性、复性、纯化以及Westernblotting鉴定,获得成分均一的活性蛋白。利用牛胰蛋白酶为标准品,胰蛋白酶特异性底物BAEE,检测Djtry酶活力与比活力。SDS-PAGE电泳表明诱导表达的融合蛋白为包涵体,分子量约为26 kDa,Western blotting结果显示为目的蛋白,对复性纯化的目的蛋白进行酶活检测发现,突变型胰蛋白酶Djtry仍然保持了胰蛋白酶催化性质,但是催化活性相对较弱。
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关键词
东亚三角涡虫
胰蛋白酶
蛋白表达
酶活
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职称材料
p53同系物Djp53在涡虫胚基早期发育阶段的组织特异性表达及其在再生中的作用
被引量:
2
2
作者
吴素格
杨武
+1 位作者
周鲁明
赵博生
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期561-567,共7页
为了探索东亚三角涡虫Djp53基因在涡虫组织中的表达和功能,利用整体原位杂交、RT-PCR技术,检测了涡虫Djp53基因在组织中的表达分布特点,结果表明,Djp53基因在再生1、3、5天的胚基中具有较强的阳性信号,且3天的表达量最高;而在再生7、10...
为了探索东亚三角涡虫Djp53基因在涡虫组织中的表达和功能,利用整体原位杂交、RT-PCR技术,检测了涡虫Djp53基因在组织中的表达分布特点,结果表明,Djp53基因在再生1、3、5天的胚基中具有较强的阳性信号,且3天的表达量最高;而在再生7、10天和成虫的实质组织中表达较弱.RNA干扰后的RT-PCR检测显示,Djp53表达量显著下降,涡虫不能正常再生或出现眼点缺陷.由此推断,东亚三角涡虫Djp53基因在早期胚基发育阶段,通过调节多功能干细胞的迁移和增殖分化影响早期胚基的形成,是涡虫早期胚基发育必不可少的一个基因,并且在涡虫成体和再生后期对多功能干细胞的维持具有重要的作用.
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关键词
东亚三角涡虫
Djp53基因
整体原位杂交技术
RT-PCR技术
原文传递
SRA的RNA和蛋白质均有转录辅激活功能
3
作者
孙欢欢
孙乐乐
+1 位作者
周鲁明
庞秋香
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第1期11-16,共6页
类固醇受体激活物(steroid receptor activator,SRA)是一种类固醇受体辅激活物.最初的研究认为,SRA只存在RNA形式,不存在蛋白质形式.但是后来的研究发现,SRA是在RNA和蛋白质两个水平上发挥功能的分子,其cDNA序列存在687 bp保守的核心区...
类固醇受体激活物(steroid receptor activator,SRA)是一种类固醇受体辅激活物.最初的研究认为,SRA只存在RNA形式,不存在蛋白质形式.但是后来的研究发现,SRA是在RNA和蛋白质两个水平上发挥功能的分子,其cDNA序列存在687 bp保守的核心区域,该核心区域对其发挥转录共激活活性是必需的.SRA的RNA形式主要参与核受体的转录共激活作用,其表达与乳腺癌的发生有很大关系,SRA的蛋白质形式(steroid receptor activator protein,SRAP)也具有类似的功能.但是不同于RNA形式,SRAP可结合到特定基因的启动子区域,并起到阻遏物的作用.本文对SRA的特点、表达及功能等方面的最新研究进展及其可能的作用机制与作用形式进行概述.
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关键词
类固醇受体激活物(SRA)
类固醇受体辅激活物
SRA蛋白质形式(SRAP)
机制
作用形式
原文传递
东亚三角涡虫Djtraf3基因的时空表达模式
被引量:
1
4
作者
范晓静
周鲁明
+1 位作者
刘殿辰
赵博生
《生物加工过程》
CAS
2015年第2期47-52,共6页
肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)作为TRAF家族的成员之一,通过介导TLRs信号通路,参与动物的免疫反应。通过构建东亚三角涡虫Djtraf3的cDNA文库获得Djtraf3基因并分析基因结构。结果发现,该最大开放阅读框为564bp,编码的蛋白质含187个...
肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)作为TRAF家族的成员之一,通过介导TLRs信号通路,参与动物的免疫反应。通过构建东亚三角涡虫Djtraf3的cDNA文库获得Djtraf3基因并分析基因结构。结果发现,该最大开放阅读框为564bp,编码的蛋白质含187个氨基酸,含有1个TRAF结构域。进化分析表明,DjTRAF3和果蝇的TRAF3聚群,位于进化树的基部;整体原位杂交结果显示,在涡虫成体及不同再生阶段,Djtraf3在整个肠部表达。这些结果为进一步探究其功能提供了依据和方向。
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关键词
东亚三角涡虫
Djtraf3
DIG-labeling
RNA探针
原位杂交
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职称材料
泛素-蛋白酶体通路与药物研发
5
作者
陈禹杉
姜天霞
+2 位作者
周鲁明
冯仁田
邱小波
《中国生化药物杂志》
CAS
2016年第12期1-6,共6页
泛素-蛋白酶体通路控制着真核细胞内大多数蛋白质的降解,调控几乎所有的生命活动,包括细胞增殖、分化、凋亡、转录、DNA修复等。该通路异常会导致癌症、神经退行性疾病等多种人类疾病。目前上市的蛋白酶体抑制剂已成功用于治疗多发性骨...
泛素-蛋白酶体通路控制着真核细胞内大多数蛋白质的降解,调控几乎所有的生命活动,包括细胞增殖、分化、凋亡、转录、DNA修复等。该通路异常会导致癌症、神经退行性疾病等多种人类疾病。目前上市的蛋白酶体抑制剂已成功用于治疗多发性骨髓瘤和套细胞淋巴瘤等癌症,在研的多个靶向泛素-蛋白酶体通路不同组分的新型药物均显示出很有希望的体内治疗效果。本文将简要介绍与泛素-蛋白酶体通路相关药物研发的进展。
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关键词
泛素-蛋白酶体通路
神经退行性疾病
癌症
药物研发
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职称材料
题名
东亚三角涡虫胰蛋白酶Djtry的表达和酶活分析
被引量:
2
1
作者
周鲁明
刘殿辰
孙欢欢
赵博生
机构
山东理工大学生命科学学院发育与进化生物学实验室
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期609-614,共6页
基金
国家自然科学基金项目(编号:31172074)
山东省自然科学基金项目(编号:ZR2009DM029)资助
文摘
通过对东亚三角涡虫胰蛋白酶Djtry氨基酸序列比对分析,发现保守的催化三联体结构中第一位的His被Lys所取代。为了探究这种突变是否会对胰蛋白酶的活性有影响,文章构建了原核表达重组质粒pET-28a-Djtry,转化到E.coli BL21中,利用IPTG诱导表达,对表达的重组蛋白进行变性、复性、纯化以及Westernblotting鉴定,获得成分均一的活性蛋白。利用牛胰蛋白酶为标准品,胰蛋白酶特异性底物BAEE,检测Djtry酶活力与比活力。SDS-PAGE电泳表明诱导表达的融合蛋白为包涵体,分子量约为26 kDa,Western blotting结果显示为目的蛋白,对复性纯化的目的蛋白进行酶活检测发现,突变型胰蛋白酶Djtry仍然保持了胰蛋白酶催化性质,但是催化活性相对较弱。
关键词
东亚三角涡虫
胰蛋白酶
蛋白表达
酶活
Keywords
Dugesia japonica
trysin
protein expression
enzyme activity
分类号
Q55 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
p53同系物Djp53在涡虫胚基早期发育阶段的组织特异性表达及其在再生中的作用
被引量:
2
2
作者
吴素格
杨武
周鲁明
赵博生
机构
山东理工大学生命科学学院发育与进化生物学实验室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期561-567,共7页
基金
山东省自然科学基金(ZR2009DM029)资助~~
文摘
为了探索东亚三角涡虫Djp53基因在涡虫组织中的表达和功能,利用整体原位杂交、RT-PCR技术,检测了涡虫Djp53基因在组织中的表达分布特点,结果表明,Djp53基因在再生1、3、5天的胚基中具有较强的阳性信号,且3天的表达量最高;而在再生7、10天和成虫的实质组织中表达较弱.RNA干扰后的RT-PCR检测显示,Djp53表达量显著下降,涡虫不能正常再生或出现眼点缺陷.由此推断,东亚三角涡虫Djp53基因在早期胚基发育阶段,通过调节多功能干细胞的迁移和增殖分化影响早期胚基的形成,是涡虫早期胚基发育必不可少的一个基因,并且在涡虫成体和再生后期对多功能干细胞的维持具有重要的作用.
关键词
东亚三角涡虫
Djp53基因
整体原位杂交技术
RT-PCR技术
Keywords
Dugesia japonica
Djp53
whole-mount in situ hybridization
RT-PCR
分类号
Q52 [生物学—生物化学]
Q71 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
SRA的RNA和蛋白质均有转录辅激活功能
3
作者
孙欢欢
孙乐乐
周鲁明
庞秋香
机构
山东理工大学生命科学学院
山东大学药学院
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第1期11-16,共6页
基金
国家自然科学基金项目(No.30700071)资助~~
文摘
类固醇受体激活物(steroid receptor activator,SRA)是一种类固醇受体辅激活物.最初的研究认为,SRA只存在RNA形式,不存在蛋白质形式.但是后来的研究发现,SRA是在RNA和蛋白质两个水平上发挥功能的分子,其cDNA序列存在687 bp保守的核心区域,该核心区域对其发挥转录共激活活性是必需的.SRA的RNA形式主要参与核受体的转录共激活作用,其表达与乳腺癌的发生有很大关系,SRA的蛋白质形式(steroid receptor activator protein,SRAP)也具有类似的功能.但是不同于RNA形式,SRAP可结合到特定基因的启动子区域,并起到阻遏物的作用.本文对SRA的特点、表达及功能等方面的最新研究进展及其可能的作用机制与作用形式进行概述.
关键词
类固醇受体激活物(SRA)
类固醇受体辅激活物
SRA蛋白质形式(SRAP)
机制
作用形式
Keywords
steroid receptor activator( SRA)
steroid receptor co-activator
steroid receptor activatorprotein (SRAP)
mechanism
action mode
分类号
Q50 [生物学—生物化学]
R73 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
东亚三角涡虫Djtraf3基因的时空表达模式
被引量:
1
4
作者
范晓静
周鲁明
刘殿辰
赵博生
机构
山东理工大学生命科学学院发育与进化生物学实验室
出处
《生物加工过程》
CAS
2015年第2期47-52,共6页
基金
山东省自然科学基金(ZR2013CM011)
文摘
肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)作为TRAF家族的成员之一,通过介导TLRs信号通路,参与动物的免疫反应。通过构建东亚三角涡虫Djtraf3的cDNA文库获得Djtraf3基因并分析基因结构。结果发现,该最大开放阅读框为564bp,编码的蛋白质含187个氨基酸,含有1个TRAF结构域。进化分析表明,DjTRAF3和果蝇的TRAF3聚群,位于进化树的基部;整体原位杂交结果显示,在涡虫成体及不同再生阶段,Djtraf3在整个肠部表达。这些结果为进一步探究其功能提供了依据和方向。
关键词
东亚三角涡虫
Djtraf3
DIG-labeling
RNA探针
原位杂交
Keywords
Dugesia japonica
Djtraf3 gene
DIG-labeling RNA probe
whole-mount in situ hybridization
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
泛素-蛋白酶体通路与药物研发
5
作者
陈禹杉
姜天霞
周鲁明
冯仁田
邱小波
机构
北京师范大学生命科学学院细胞增殖及调控生物学教育部重点实验室
浙江海正药业股份有限公司
出处
《中国生化药物杂志》
CAS
2016年第12期1-6,共6页
基金
国家基金委项目(91319303
31530014)
+1 种基金
中央高校基本科研业务费专项资金资助项目
北京师范大学青年教师基金项目(310421104)
文摘
泛素-蛋白酶体通路控制着真核细胞内大多数蛋白质的降解,调控几乎所有的生命活动,包括细胞增殖、分化、凋亡、转录、DNA修复等。该通路异常会导致癌症、神经退行性疾病等多种人类疾病。目前上市的蛋白酶体抑制剂已成功用于治疗多发性骨髓瘤和套细胞淋巴瘤等癌症,在研的多个靶向泛素-蛋白酶体通路不同组分的新型药物均显示出很有希望的体内治疗效果。本文将简要介绍与泛素-蛋白酶体通路相关药物研发的进展。
关键词
泛素-蛋白酶体通路
神经退行性疾病
癌症
药物研发
Keywords
ubiquitin-proteasome pathway
neurodegenerative disease
cancer
drug development
分类号
R341 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
东亚三角涡虫胰蛋白酶Djtry的表达和酶活分析
周鲁明
刘殿辰
孙欢欢
赵博生
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2012
2
下载PDF
职称材料
2
p53同系物Djp53在涡虫胚基早期发育阶段的组织特异性表达及其在再生中的作用
吴素格
杨武
周鲁明
赵博生
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
原文传递
3
SRA的RNA和蛋白质均有转录辅激活功能
孙欢欢
孙乐乐
周鲁明
庞秋香
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
原文传递
4
东亚三角涡虫Djtraf3基因的时空表达模式
范晓静
周鲁明
刘殿辰
赵博生
《生物加工过程》
CAS
2015
1
下载PDF
职称材料
5
泛素-蛋白酶体通路与药物研发
陈禹杉
姜天霞
周鲁明
冯仁田
邱小波
《中国生化药物杂志》
CAS
2016
0
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职称材料
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