食品微生物学实验课程教学改革初探

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作者 唐成程 袁兆栋 +2 位作者 邹庆剑 徐巨才 周小青 《科技风》 2024年第4期100-102,共3页

食品微生物学实验是食品科学与工程专业开设的一门传统专业课程,也是不可替代的专业核心课程,与食品行业密不可分,在食品专业课程中占有举足轻重的地位。如何让传统课程与时俱进,如何让培养的学生能够适应社会发展的需求,是我们教育工... 食品微生物学实验是食品科学与工程专业开设的一门传统专业课程,也是不可替代的专业核心课程,与食品行业密不可分,在食品专业课程中占有举足轻重的地位。如何让传统课程与时俱进,如何让培养的学生能够适应社会发展的需求,是我们教育工作者应该仔细思考的问题。本文从实际教学出发,探讨该门课程实验教学中遇到的相关问题,并初步探讨相关的解决方案。 展开更多

关键词 食品微生物学 实验教学 改革

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Lesch-Nyhan综合征家兔模型的建立及其表型分析

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作者 资崯 郑淑文 +6 位作者 宁丽 蔺紫怡 鹿璇 席嘉慧 高月 周小青 唐成程 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期408-420,共13页

Lesch-Nyhan综合征(Lesch-Nyhan syndrome,LNS)是一种先天性的嘌呤代谢缺陷病,次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine phosphoribosyltransferase,HPRT)是其主要致病基因,临床特征表现为尿酸分泌过多、痛风、肾结石及肾脏损伤等,... Lesch-Nyhan综合征(Lesch-Nyhan syndrome,LNS)是一种先天性的嘌呤代谢缺陷病,次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine phosphoribosyltransferase,HPRT)是其主要致病基因,临床特征表现为尿酸分泌过多、痛风、肾结石及肾脏损伤等,目前致病机制尚未被完全阐明且无有效治愈手段。动物模型在疾病致病机理研究和治疗方式探索中发挥着重要功能。本研究采用高效的CRISPR/Cas9基因编辑技术和显微注射的方式敲除家兔(Oryctolagus cuniculus)HPRT基因建立了LNS家兔模型,以期能更好的模拟该疾病的表型。首先针对兔HPRT基因第3外显子设计一条sgRNA,将体外转录的sgRNA和Cas9 mRNA共注射到兔受精卵中,注射后的胚胎移植到代孕母兔子宫中,待仔兔出生后对其基因型及表型进行鉴定与分析。共出生4只仔兔(分别编号为R1、R2、R3和R4),测序结果显示4只仔兔都产生了不同程度的基因修饰,基因编辑效率达100%,其中R4仔兔T载体测序结果在基因编辑靶点未检测到野生型序列。通过6-硫代鸟嘌呤(6-Thioguanine,6-TG)药物测试,证明R4仔兔HPRT酶活性缺失;肾组织HE染色发现4只仔兔表现出肾小球炎细胞浸润、集合管脱落等肾脏损失。本研究成功设计了1条能够敲除家兔HPRT基因的sgRNA,并采用CRISPR/Cas9基因编辑技术和显微注射方式成功构建了HPRT基因修饰家兔,为研究LNS综合征致病机制和治疗方式提供了新的非啮齿类动物模型。 展开更多

关键词 Lesch-Nyhan综合征 HPRT 家兔

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应用TALEN技术对兔CCR5基因进行靶向修饰 被引量：6

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作者 唐成程 张全军 +4 位作者 李小平 樊娜娜 杨翌 全龙泉 赖良学 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期360-368,共9页

缺少合适的能够被人免疫缺陷病毒1型（Human immunodeficiency virus 1,HIV-1）感染的动物模型是获得性免疫缺陷综合征/艾滋病（Acquired immunedeficiency syndrome,AIDS）疫苗和药物研发的瓶颈.HIV-1能在野生型兔子中形成持续感染,在... 缺少合适的能够被人免疫缺陷病毒1型（Human immunodeficiency virus 1,HIV-1）感染的动物模型是获得性免疫缺陷综合征/艾滋病（Acquired immunedeficiency syndrome,AIDS）疫苗和药物研发的瓶颈.HIV-1能在野生型兔子中形成持续感染,在共表达人CD4和CCR5的兔细胞系中,HIV-1能高效复制,并形成合胞体.若在家兔中高表达人CD4和CCR5,就可能获得研究AIDS的理想动物模型.文章采用高效基因打靶技术—类转录激活因子效应物核酸酶（Transcription activator-like effector nuclease,TALEN）,探讨在家兔CCR5基因位点定点敲入人CD4和CCR5,获得能够感染HIV-1家兔模型的可能性.针对家兔CCR5基因,设计了两对TALENs和一个同源打靶载体,TALEN mRNAs和DNA同源片段显微注射到家兔受精卵中,体外培养3～5 d后,收集24枚胚胎,对胚胎的基因突变情况进行PCR和测序分析.结果显示,在家兔CCR5位点,24枚胚胎均发生了基因敲除,5枚胚胎还发生了人CD4和CCR5基因敲入.该结果为建立艾滋病研究新动物模型奠定了基础. 展开更多

关键词 类转录激活因子效应物核酸酶(TALEN) 家兔 CCR5基因 基因修饰

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浅谈高校青年教师教育教学改革

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作者 周小青 陈敏 +2 位作者 陈静 徐巨才 唐成程 《科技风》 2024年第27期46-48,共3页

面对日新月异的时代变革,高等教育的教育教学改革显得尤为重要。高校青年教师作为教育战线的生力军,肩负着培养未来人才和接班人的重任。本文旨在梳理和分析当前高校青年教师在教育教学过程中面临的问题,提出了加强高校青年教师培养的... 面对日新月异的时代变革,高等教育的教育教学改革显得尤为重要。高校青年教师作为教育战线的生力军,肩负着培养未来人才和接班人的重任。本文旨在梳理和分析当前高校青年教师在教育教学过程中面临的问题,提出了加强高校青年教师培养的必要性,在师德师风、专业素养和教学观念等方面提出相应的改革途径,以促进高校建设良好的培养机制,促进青年教师队伍与学校共同发展。 展开更多

关键词 青年教师 高等教育 人才培养 教育教学改革

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“食品专业工程设计”课程教学改革与思考

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作者 徐巨才 陈雅君 +3 位作者 唐成程 周小青 邹庆剑 徐学涛 《科技风》 2024年第31期118-120,共3页

“食品专业工程设计”是高等院校食品科学与工程专业学生的专业必修课程,主要就工厂规划、工艺设计、车间布局等内容开展学习和综合实践。随着现代食品产业的快速发展,社会对工程型人才的需求也不断增长,同时,对人才的现代化知识、能力... “食品专业工程设计”是高等院校食品科学与工程专业学生的专业必修课程,主要就工厂规划、工艺设计、车间布局等内容开展学习和综合实践。随着现代食品产业的快速发展,社会对工程型人才的需求也不断增长,同时,对人才的现代化知识、能力和技术水平亦提出了新要求,人才培养的任务更加艰巨,综合素质要求更高。本文主要根据当前产业发展新形势,对课程教学中存在的主要问题、可行的改革举措和人才培养要点进行了分析和探讨,强调了基于全局和未来视野的工程型高素质本科人才的培养,以期为食品本科教育教学提供一些理论指导与新思路。 展开更多

关键词 食品专业工程设计 教学改革 高等教育

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产气荚膜梭菌α毒素分子生物学研究进展 被引量：9

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作者 张艳平 唐成程 许崇波 《生物技术通讯》 CAS 2013年第1期113-117,共5页

α毒素是产气荚膜梭菌主要的毒力因子,具有磷脂酶C和鞘磷脂酶等2种酶的活性,能同时水解细胞膜上的磷脂酰胆碱和鞘磷脂,导致细胞裂解,因而具有细胞毒性、溶血活性、致死性和血小板聚集等特性。我们对产气荚膜梭菌α毒素的生物学特性、基... α毒素是产气荚膜梭菌主要的毒力因子,具有磷脂酶C和鞘磷脂酶等2种酶的活性,能同时水解细胞膜上的磷脂酰胆碱和鞘磷脂,导致细胞裂解,因而具有细胞毒性、溶血活性、致死性和血小板聚集等特性。我们对产气荚膜梭菌α毒素的生物学特性、基因克隆与转录调控、基因表达与基因融合、基因定点突变与结构分析、N端和C端的结构与功能等方面的研究进展进行简要综述。 展开更多

关键词 产气荚膜梭菌α毒素 转录调控 基因表达 定点突变 结构与功能

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基于计算机技术的科技管理模式的现代化应用 被引量：5

7

作者 唐成程 《科技视界》 2014年第2期187-187,185,共2页

进入二十一世纪以来,我国的计算机技术以及互联网技术都得到了飞速的发展,企业在发展管理的过程中,对于计算机技术的应用已经逐渐受到了广大生产企业的欢迎,尤其是基于计算机技术所发展起来的科技管理模式应用也越发的广泛。包括企业本... 进入二十一世纪以来,我国的计算机技术以及互联网技术都得到了飞速的发展,企业在发展管理的过程中,对于计算机技术的应用已经逐渐受到了广大生产企业的欢迎,尤其是基于计算机技术所发展起来的科技管理模式应用也越发的广泛。包括企业本身的信息安全管理、生产管理等方面,都能够明显看到基于计算机技术所执行的科技管理模式。计算机科技管理模式在企业生产发展的过程中,有着无可代替的作用,不仅仅是由于较低的管理成本和稳定的管理系统,更是由于计算机科技管理模式应用,对于企业本身发展所带来推动效果。本篇文章主要针对基于计算机技术的科技管理模式的现代化应用进行了全面详细的探讨,以期为我国的企业发展做出贡献。 展开更多

关键词 企业管理 计算机技术 技术应用

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骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ转基因猪胚胎成纤维细胞克隆的构建与鉴定

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作者 袁婷 刘帅 +4 位作者 李小平 唐成程 韩晓蕾 逄大欣 欧阳红生 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期192-196,共5页

目的:构建骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ真核表达载体,转染猪胚胎成纤维细胞并筛选整合有FSⅠ-Ⅰ基因的细胞克隆,为研究FSⅠ-Ⅰ对猪骨骼肌的影响奠定基础。方法:通过RT-PCR方法从猪骨骼肌中扩增FS A(包含FS N端和结构域FSⅠ)和结构域FSⅠ;... 目的:构建骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ真核表达载体,转染猪胚胎成纤维细胞并筛选整合有FSⅠ-Ⅰ基因的细胞克隆,为研究FSⅠ-Ⅰ对猪骨骼肌的影响奠定基础。方法:通过RT-PCR方法从猪骨骼肌中扩增FS A(包含FS N端和结构域FSⅠ)和结构域FSⅠ;利用PCR方法分别从鼠基因组、人血液基因组和pcDNA3.1(+)载体上扩增出MCK增强子、ACTA 1启动子和BGHpolyA。将上述4个片段分别连接到真核表达载体pGKneotpAlox2上,构建骨骼肌特异性表达FSⅠ-Ⅰ(包含FS N端和2个连续FSⅠ结构域)的载体pGK-MCK-ACTA 1-FSⅠ-Ⅰ-BGHpolyA;用FuGENE○RHD转染猪胚胎成纤维细胞,经药物G418筛选和PCR鉴定阳性克隆。结果:成功构建骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ的表达载体pGK-MCK-ACTA1 promoter-FSⅠ-Ⅰ-BGHpolyA,并成功整合到猪胚胎成纤维细胞的基因组中,获得了整合有目的基因FSⅠ-Ⅰ的猪胚胎成纤维细胞克隆。结论:获得了骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ的猪胚胎成纤维细胞克隆,为通过核移植方法获得表达FSⅠ-Ⅰ转基因猪提供了供体细胞。 展开更多

关键词 卵泡抑素 猪胚胎成纤维细胞 真核表达

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评价白蛋白相关药物动物模型的研究进展

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作者 资崯 宁丽 +1 位作者 周小青 唐成程 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1374-1380,共7页

许多肽或蛋白质药物治疗的一个主要挑战是血浆半衰期短。通过将该类药物与白蛋白结合获得的药物称为白蛋白相关药物,有效延长血浆半衰期。动物模型作为研究药物药代动力学的重要工具是药物研究中不可或缺的一部分。本综述概括了两大类... 许多肽或蛋白质药物治疗的一个主要挑战是血浆半衰期短。通过将该类药物与白蛋白结合获得的药物称为白蛋白相关药物,有效延长血浆半衰期。动物模型作为研究药物药代动力学的重要工具是药物研究中不可或缺的一部分。本综述概括了两大类动物模型:啮齿类(野生型小鼠、大鼠模型,基因修饰小鼠模型)与非啮齿(猴)在白蛋白相关药物药代动力学研究中的应用与发展,为其进一步研究发展提供参考。 展开更多

关键词 白蛋白相关药物 血浆半衰期 动物模型

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SARS-CoV-2易感实验动物研究进展 被引量：5

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作者 周小青 唐成程 邹庆剑 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第2期128-134,共7页

由SARS-CoV-2导致的COVID-19从2020年开始在全球蔓延,虽然各国采取了广泛措施以应对疫情,仍然造成了全球大流行,引发了严重的国际公共卫生问题。目前虽然SARS-CoV-2病毒的源头和中间宿主尚不清楚,但是在动物模型的基础上,我国的新冠疫... 由SARS-CoV-2导致的COVID-19从2020年开始在全球蔓延,虽然各国采取了广泛措施以应对疫情,仍然造成了全球大流行,引发了严重的国际公共卫生问题。目前虽然SARS-CoV-2病毒的源头和中间宿主尚不清楚,但是在动物模型的基础上,我国的新冠疫苗研发处于世界领先地位,获得了多种有效疫苗。合适的实验动物对SARS-CoV-2和COVID-19的基础研究和药物研发都具有重要意义,本文就疫情爆发以来各种SARS-CoV-2易感实验动物的感染情况和病理特征进行归纳总结,分析了不同实验动物的应用范围,为选择合适的易感实验动物以开发COVID-19疫苗和药物提供一定的参考依据。 展开更多

关键词 SARS-CoV-2 COVID-19 易感实验动物

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猪肝脏特异性启动子Alb表达载体的构建

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作者 唐成程 全龙泉 +4 位作者 高飞 武蓉 戴祯 欧阳红生 逄大欣 《畜牧与兽医》 北大核心 2012年第S1期319-319,共1页

目前,肝病是威胁我国人民健康的重大疾病之一,传统的治疗方法总体治疗效果不理想,而基因治疗为肝病治疗提供了新的手段。基因治疗的缺陷在于不能限制转录的基因在特定的组织中发挥作用,可能对其他正常组织起到很大的副作用,降低治疗效... 目前,肝病是威胁我国人民健康的重大疾病之一,传统的治疗方法总体治疗效果不理想,而基因治疗为肝病治疗提供了新的手段。基因治疗的缺陷在于不能限制转录的基因在特定的组织中发挥作用,可能对其他正常组织起到很大的副作用,降低治疗效果。因此,采用肝脏特异性启动子是解决基因治疗特异性问题的关键。本研究根据NCBI上公布的Alb基因序列设计引物, 展开更多

关键词 特异性启动子 猪肝脏 ALB 总体治疗 表达载体 基因序列 肝病治疗 人肝癌细胞系 基因治疗 胎儿成纤维细胞

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猪MSTN基因敲除载体的构建及细胞筛选 被引量：3

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作者 高飞 唐成程 +5 位作者 全龙泉 戴祯 苏佰通 赖良学 逄大欣 欧阳红生 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期142-145,160,共5页

构建猪肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因的打靶载体并获得敲除MSTN基因的猪胎儿成纤维细胞。以Puro为正筛选基因,白喉毒素-A(DT-A)为负筛选基因。将同源长臂和同源短臂分别插入Puro基因的两侧。同源长短臂分别为4 294bp和1 015bp,定... 构建猪肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因的打靶载体并获得敲除MSTN基因的猪胎儿成纤维细胞。以Puro为正筛选基因,白喉毒素-A(DT-A)为负筛选基因。将同源长臂和同源短臂分别插入Puro基因的两侧。同源长短臂分别为4 294bp和1 015bp,定点敲除MSTN基因的部分内含子2和部分外显子3。采用FugeneHD转染法将打靶载体转入37d的猪胎儿成纤维细胞中,转染后的细胞采用嘌呤霉素筛选。结果显示,成功构建了对猪MSTN基因部分区域进行敲除的打靶载体,共得到48个具有药物抗性的细胞克隆,经PCR检测,获得2个正确同源重组的细胞克隆。 展开更多

关键词 猪 MSTN基因 基因敲除 打靶载体

原文传递

猪MSTN基因敲除载体的构建

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作者 高飞 唐成程 +4 位作者 全龙泉 武蓉 戴祯 欧阳红生 逄大欣 《畜牧与兽医》 北大核心 2012年第S1期316-316,共1页

MSTN基因是TGF-B超家族的一员,又被成为GDF-8,该基因通过调控肌卫星细胞的活化和自我更新来调控肌肉生长发育,该基因失活时表现出双肌症状。MSTN基因共含有3个外显子和2个内含子,外显子3序列及其编码的氨基酸变异程度小,MSTN基因表达产... MSTN基因是TGF-B超家族的一员,又被成为GDF-8,该基因通过调控肌卫星细胞的活化和自我更新来调控肌肉生长发育,该基因失活时表现出双肌症状。MSTN基因共含有3个外显子和2个内含子,外显子3序列及其编码的氨基酸变异程度小,MSTN基因表达产物的功能区主要由109个氨基酸组成,编码这一段氨基酸的核苷酸主要集中在外显子3上。 展开更多

关键词 双肌 氨基酸组成 氨基酸变异 基因敲除 内含子 MSTN基因 肌卫星细胞 基因表达产物 自我更新 超家族

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牛MSTN基因敲除载体的构建

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作者 全龙泉 唐成程 +5 位作者 高飞 武蓉 戴祯 逄大欣 欧阳红生 赖良学 《畜牧与兽医》 北大核心 2012年第S1期321-321,共1页

提高动物胴体瘦肉率一直是动物遗传育种学家、动物繁殖学家和动物营养学家最关注的问题之一。肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)是近年来发现的一种生长分化因子,主要在动物骨骼肌中表达,它对动物肌肉的发生和发育以及再生都有重要调控作... 提高动物胴体瘦肉率一直是动物遗传育种学家、动物繁殖学家和动物营养学家最关注的问题之一。肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)是近年来发现的一种生长分化因子,主要在动物骨骼肌中表达,它对动物肌肉的发生和发育以及再生都有重要调控作用。该基因缺失会导致动物骨骼肌肌纤维数量增多或肌细胞肥大等现象并且引起肉用动物的"双肌"表型。 展开更多

关键词 肉用动物 胴体瘦肉率 动物营养学家 动物繁殖 肌肉生长抑制素 动物遗传育种学 双肌 MSTN基因 基因敲除 生长分化因子

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PIWIL1基因启动子调控的特异表达Cre重组酶的转基因猪的构建

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作者 段新平 高飞 +5 位作者 全龙泉 唐成程 武蓉 戴祯 欧阳红生 逄大欣 《畜牧与兽医》 北大核心 2012年第S1期322-322,共1页

Cre-LoxP重组酶系统是条件性基因打靶、诱导性基因打靶、时空特异性基因打靶策略的主要技术。本实验建立睾丸特异性表达Cre重组酶的转基因猪,为制备人类生殖系统疾病模型猪奠定基础。利用PCR法扩增出猪PIWIL1启动子序列2822 bp,替换本... Cre-LoxP重组酶系统是条件性基因打靶、诱导性基因打靶、时空特异性基因打靶策略的主要技术。本实验建立睾丸特异性表达Cre重组酶的转基因猪,为制备人类生殖系统疾病模型猪奠定基础。利用PCR法扩增出猪PIWIL1启动子序列2822 bp,替换本实验室保存的猪源Cre重组酶的表达载体pET28a-MHC-Cre-BGHpo1yA-FRT2neor的MHC启动子。 展开更多

关键词 CRE重组酶 转基因猪 PIWIL1 基因打靶 启动子调控 时空特异性 表达载体 猪源 替换本 生殖系统疾病

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RNAi的毒性研究进展

16

作者 戴祯 武蓉 +5 位作者 高飞 姚潮刚 韩杨 唐成程 赵致阳 逄大欣 《畜牧与兽医》 北大核心 2012年第S1期60-63,共4页

RNAi是由内源或人为转染进入细胞的小干扰双链RNA诱导产生的一种转录水平的基因沉默(TGS)或转录后水平的基因沉默(PTGS)现象。在随后线虫发育调控基因的研究中,人们又发现一种新的内源性小RNA分子——microRNA(miRNA),与siRNA大小相似,... RNAi是由内源或人为转染进入细胞的小干扰双链RNA诱导产生的一种转录水平的基因沉默(TGS)或转录后水平的基因沉默(PTGS)现象。在随后线虫发育调控基因的研究中,人们又发现一种新的内源性小RNA分子——microRNA(miRNA),与siRNA大小相似,并且它们的产生和功能依赖于相似的细胞机制。 展开更多

关键词 基因沉默 RNA PTGS 转染 干扰素反应 毒性研究 细胞机制 发育调控 基因芯片技术 转基因小鼠

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敲除GGTA1同时表达人白细胞抗原G5的基因修饰猪的构建 被引量：3

17

作者 周小青 刘玉 +7 位作者 唐成程 程令印 郑淑文 郑雨龄 陈敏 杨化强 邹庆剑 赖良学 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期1096-1111,共16页

由于猪的诸多生理和遗传特征与人类近似,猪一直被认为是理想的异种器官移植候选供体动物。但是物种之间严重的免疫不相容是影响猪到灵长类异种器官移植的最关键因素。为了克服物种之间的免疫排斥反应,诸多研究对猪进行了各种各样的基因... 由于猪的诸多生理和遗传特征与人类近似,猪一直被认为是理想的异种器官移植候选供体动物。但是物种之间严重的免疫不相容是影响猪到灵长类异种器官移植的最关键因素。为了克服物种之间的免疫排斥反应,诸多研究对猪进行了各种各样的基因修饰,消除或抑制造成异种器官移植的免疫原,以获得可应用于灵长类移植的供体器官。本研究利用转录激活因子样效应物核酸酶(transcription activator-like effector nuclease,TALEN)对猪的α-1,3-半乳糖苷转移酶(α-1,3-galactosyltransferase,GGTA1)基因进行敲除,该基因编码的酶催化合成α-1,3-半乳糖,这是导致猪到灵长类异种器官移植中产生超急性免疫排斥的关键因子。同时本研究也通过转基因方法导入一种重要的免疫抑制因子,人类白细胞抗原G5(human leukocyte antigen-G5,HLA-G5),来进一步增加猪器官在异种器官移植中的免疫耐受。本研究筛选了GGTA1双等位基因敲除(GGTA1 knockout,GTKO)且HLA-G5转基因导入的猪成纤维细胞,并通过体细胞核移植(somaticcell nuclear transfer,SCNT)构建相应的基因修饰猪模型。本研究获得了20头GGTA1双等位基因敲除的克隆猪,其中10头同时表达HLA-G5蛋白。经检测,α-1,3-半乳糖在GTKO/HLA-G5克隆猪的组织和细胞上完全缺失,Western blotting和免疫荧光染色显示,HLA-G5在克隆猪的组织和细胞上成功表达。功能学分析显示,从GTKO/HLA-G5克隆猪分离的成纤维细胞具有更好的免疫耐受,相比于单一的GTKO猪和未经基因修饰的野生型猪,GTKO/HLA-G5克隆猪的细胞对补体介导的细胞裂解反应具有更强的耐受。GTKO/HLA-G5克隆猪可以为异种器官移植提供一种有用的动物模型。 展开更多

关键词 基因修饰猪 GGTA1 基因敲除 HLA-G5 异种器官移植 TALEN

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