PROC基因N355S、G392E、T314A突变致蛋白C缺陷的分子机制研究

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作者 李天逸 江淼 +4 位作者 黄璐璐 韩晶晶 马珍妮 白霞 夏利军 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1834-1840,共7页

目的:研究人蛋白C基因(PROC)N355S、G392E、T314A点突变致蛋白C(PC)功能缺陷的分子机制。方法:构建PROC基因野生型和突变型质粒(PCWT、PCN355S、PCG392E、PCT314A)并瞬时转染至HEK293细胞,进行突变蛋白的体外表达试验,用实时荧光PCR检... 目的:研究人蛋白C基因(PROC)N355S、G392E、T314A点突变致蛋白C(PC)功能缺陷的分子机制。方法:构建PROC基因野生型和突变型质粒(PCWT、PCN355S、PCG392E、PCT314A)并瞬时转染至HEK293细胞,进行突变蛋白的体外表达试验,用实时荧光PCR检测野生型和突变型PC转染24 h后的mRNA水平变化。Western blot和ELISA分别检测野生型及突变PC细胞内外蛋白水平变化。将转染24-48 h的细胞上清液进行超滤浓缩,对浓缩液中的蛋白进行定量,并进行PC的激活和酶动力学试验。Clustal Omega多序列比对分析氨基酸突变位点的保守性。利用PyMOL软件分析突变对PC蛋白质结构造成的影响。结果:PCN355S、PCG392E、PCT314A组PROC mRNA相对表达量分别为1.14±0.46、0.96±0.08和1.08±0.17,与PCWT组的1.02±0.24相比均无显著差异(P>0.05)。转染细胞裂解物的Western blot分析结果显示,PCT314A重组蛋白的含量略降低,条带相对较浅。浓缩细胞培养上清液的ELISA结果显示,PCN355S、PCG392E的PC:Ag水平分别为98.8%±2.4%、101.4%±3.1%,与PCWT相比无明显差异,而PCT314A的PC:Ag水平(88.6%±3.2%)则较PCWT有所下降(P<0.05)。酶动力学试验的结果表明,APCN355S(Km=338.3±43.2,V_(max)=2.015±0.12)、APCG392E(Km=292.2±28.4,V_(max)=1.893±0.07)和APCT314A(Km=299.5±24.6,V_(max)=1.775±0.06)与APCWT(Km=238.2±4.58,Vmax=3.205±0.06)相比,均表现为Km值的升高和Vmax的下降。多序列比对提示,3种突变在不同物种中均具有高度保守性。结构模型提示,N355S、G392E、T314A突变的氨基酸替换与周围的氨基酸基团产生碰撞,使周围的结构产生扭曲,对PC的折叠和发挥生物学功能产生不利影响。结论:PROC基因的N355S、G392E和T314A突变通过减弱PC与底物间的结合导致PC的功能缺陷。这3种突变在蛋白结构上产生了严重的空间碰撞,影响了PC的折叠和活性位点的反应性。 展开更多

关键词 蛋白C 蛋白C缺陷 基因突变 结构分析

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Bionano-DNA全长光学图谱技术在血友病A携带者基因诊断中的应用

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作者 牛思颖 刘梦艳 +7 位作者 丁子轩 解珺丹 江艾蕊 余自强 王兆钺 阮长耿 夏利军 江淼 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1211-1216,共6页

目的:尝试将Bionano Saphyr可视化全长DNA光学图谱技术应用于血友病A携带者的精准基因诊断。方法:针对2例应用常规二代测序技术无法诊断的可疑F8基因缺陷女性携带者,采用DNA全长光学图谱技术,检测扫描获得样本X染色体全长可视化单倍型... 目的:尝试将Bionano Saphyr可视化全长DNA光学图谱技术应用于血友病A携带者的精准基因诊断。方法:针对2例应用常规二代测序技术无法诊断的可疑F8基因缺陷女性携带者,采用DNA全长光学图谱技术,检测扫描获得样本X染色体全长可视化单倍型特征性图谱,与正常人群DNA图谱库进行比对,获得待测样本的基因结构变异信息。结果:2例检测样本F8基因的X染色体DNA分子平均荧光标记长度大于2.5 Mbp,平均拷贝数大于20×。经比对分析,其中1例样本为F8基因22号内含子近端倒位,1例为22号内含子倒位同时伴有多处大片段缺失。结论:Bionano技术对于长度大、变异复杂的基因缺陷有很好的检出率。在无先证者或缺少先证者精准基因诊断结果的情况下,应用该技术检出F8基因的杂合复杂变异对血友病携带者的优生优育、孕前诊断有重要意义。 展开更多

关键词 Bionano技术 血友病A 内含子倒位 基因诊断

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纤维蛋白原结构与血栓形成 被引量：3

3

作者 夏利军 阮长耿 《血栓与止血学》 1996年第2期86-87,95,共3页

纤维蛋白原(简称纤原)是最早发现的人体内与凝血有关的重要因子。在血栓形成过程中它在凝血酶作用下先转化为纤维蛋白单体,然后相互以非共价键形式聚合起来,并在第ⅩⅢ凝血因子的作用下交联,成为血栓的基质骨架。对纤原的结构和功能的... 纤维蛋白原(简称纤原)是最早发现的人体内与凝血有关的重要因子。在血栓形成过程中它在凝血酶作用下先转化为纤维蛋白单体,然后相互以非共价键形式聚合起来,并在第ⅩⅢ凝血因子的作用下交联,成为血栓的基质骨架。对纤原的结构和功能的研究不仅有助于了解它在血栓形成过程的作用,更重要的是可为血栓性疾病的防治提供理论依据。 展开更多

关键词 异常纤维蛋白原血症 血栓形成 纤溶酶原 纤维蛋白单体 氨基酸 结合位点 凝血因子 血栓性疾病 基质骨架 多聚体

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溶栓药物现状与展望 被引量：1

4

作者 夏利军 周泉生 阮长耿 《血栓与止血学》 1994年第2期85-88,共4页

血栓性疾病的致死率、致残率很高,对人类健康危害极大。溶栓是治疗血栓疾病的有效方法。目前临床使用的溶栓剂有第一代链激酶(SK)、尿激酶(UK)及第二代酰化纤溶酶原链激酶激活剂(APSAC),组织型纤溶酶原激活物(t—PA)及单链尿激酶(SCU—P... 血栓性疾病的致死率、致残率很高,对人类健康危害极大。溶栓是治疗血栓疾病的有效方法。目前临床使用的溶栓剂有第一代链激酶(SK)、尿激酶(UK)及第二代酰化纤溶酶原链激酶激活剂(APSAC),组织型纤溶酶原激活物(t—PA)及单链尿激酶(SCU—PA,Pro—UK)。近年来在应用上述药物纤溶栓治疗方面取得了较大成功。 展开更多

关键词 溶栓药物 溶栓效果 单链尿激酶 链激酶 血栓性疾病 纤溶酶原 抗纤维蛋白单抗 双抗体 血栓疾病 特异性

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基于自适应光学的大气光通信波前校正实验 被引量：5

5

作者 夏利军 李晓峰 《信息与电子工程》 2010年第3期331-335,共5页

为了缓解大气光通信中由于大气湍流的影响而产生的波前畸变、反射等严重影响通信质量的现象,文章采用了自适应光学技术,即对畸变波前进行重构后再利用反射变形镜进行修正的方法,从理论分析、实验研究方面开展了自适应光学修正传输波前... 为了缓解大气光通信中由于大气湍流的影响而产生的波前畸变、反射等严重影响通信质量的现象,文章采用了自适应光学技术,即对畸变波前进行重构后再利用反射变形镜进行修正的方法,从理论分析、实验研究方面开展了自适应光学修正传输波前的研究工作。研究结果表明:在相同实验条件下,在保持链路误码率定量为(1×10-6)时,使用自适应光学技术比不使用时系统发射功率减小了50%。在近地大气激光通信中,自适应光学技术在增加系统增益,减小系统误码率方面效果显著。 展开更多

关键词 自适应光学 波前畸变 波前校正 发射功率 误码率

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骨髓液涂片结合骨髓组织印片及切片对血液病的诊断意义 被引量：4

6

作者 张永聚 夏利军 《新医学》 1996年第11期579-580,共2页

本文比较骨髓液涂片，骨髓组织印片或切片３种标本在诊断２３１例血液病病人方面的价值。结果骨髓液涂片的诊断符合率８４．０％；结合骨髓印片可使诊断符合率提高到８９．２％；结合骨髓组织切片诊断符合率为９４．３％。骨髓组织印片... 本文比较骨髓液涂片，骨髓组织印片或切片３种标本在诊断２３１例血液病病人方面的价值。结果骨髓液涂片的诊断符合率８４．０％；结合骨髓印片可使诊断符合率提高到８９．２％；结合骨髓组织切片诊断符合率为９４．３％。骨髓组织印片较骨髓涂片更能准确反映骨髓增生程度，因其操作简便，与切片相比更具有实用价值。应用活检针行髓穿检查，可减少干抽的发生率，故本文提倡用骨髓活检针行髓穿，１次取好３样标本，综合分析，可提高诊断符合率。 展开更多

关键词 骨髓检查 血液病 诊断

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如何引导学生做好物理实验 被引量：2

7

作者 夏利军 《承德职业学院学报》 2003年第2期15-15,共1页

物理课是一门以实验为基础的自然科学 ,通过实验教学 ,培养学生的动手能力、观察能力以及运用所学知识解决实际问题的能力 。

关键词 教师 学生 实验 效果

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藻酸双酯钠不同服药时间及方法对伴有缺血性中风危险因素患者血液流变学指标影响的动态观察

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作者 夏利军 秦培森 +6 位作者 席克明 韩敬礼 张晶娃 郑世彬 熊玲 李太华 时延同 《山东医学高等专科学校学报》 1992年第4期277-281,共5页

检测11例正常人及20例伴有缺血性中风危险因素(RFIS)患者的血液流变学指标动态变化,并观察不同时间及方法服用藻酸双酯钠(PSS)对20例RFIS患者血液流变学指标的影响。发现20例RFIS病人治疗前各项血液流变学指标明显异常于11例正常人,数... 检测11例正常人及20例伴有缺血性中风危险因素(RFIS)患者的血液流变学指标动态变化,并观察不同时间及方法服用藻酸双酯钠(PSS)对20例RFIS患者血液流变学指标的影响。发现20例RFIS病人治疗前各项血液流变学指标明显异常于11例正常人,数值呈动态变化,4时～8时达高峰值。动态检测发现白天服用PSS后病人晨起血粘度等指标较服药前无明显变化,将服药时间改为午夜一次顿服后病人晨起血粘度等指标较服药前明显降低,在顿服PSS同时饮水500～800ml可增加PSS降低晨起血粘度之作用. 展开更多

关键词 藻酸双酯钠 流变学 血液 脑缺血

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塑造教师内在素质和外在形象的和谐美 被引量：1

9

作者 夏利军 《承德职业学院学报》 2001年第4期21-22,共2页

教师在注重自身内在素质的同时 ,也应注重良好的形象 ,做到二者的和谐统一。

关键词 教师 素质 形象

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国际工程EPC项目成本管理研究——以拉伊铁路为例

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作者 夏利军 《工程机械与维修》 2023年第4期122-125,共4页

从设计环节因素、采购环节因素以及施工环节因素,建立了国际工程E P C项目成本影响因素评价指标体系。通过对拉伊铁路项目的调研,采用AHP法获取了国际工程EPC项目成本影响因素权重。在权重计算的基础上,运用模糊综合评价法对拉伊铁路项... 从设计环节因素、采购环节因素以及施工环节因素,建立了国际工程E P C项目成本影响因素评价指标体系。通过对拉伊铁路项目的调研,采用AHP法获取了国际工程EPC项目成本影响因素权重。在权重计算的基础上,运用模糊综合评价法对拉伊铁路项目成本进行了评价。研究结果显示:设计环节因素对国际工程项目成本管理影响最大,影响权重为0.5571;其次是施工环节因素,影响权重为0.3202;对成本影响最小的是采购环节因素,影响权重为0.1226。拉伊铁路项目成本控制的被评价为“中等风险”。最后,根据评价结果,提出了拉伊铁路项目成本控制的具体措施。 展开更多

关键词 国际工程 成本控制 EPC项目

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在生活中发现美——让艺术的梦想在黑土地上翱翔

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作者 夏利军 《农场经济管理》 2015年第7期76-77,共2页

关键词 发现美 雪晴 归巢

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重组人平足蛋白基因在中国仓鼠卵巢细胞的稳定表达 被引量：3

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作者 曲乐 赵星鹏 +4 位作者 傅建新 夏利军 戴兰 阮长耿 赵益明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期25-28,33,共5页

目的构建平足蛋白(PDPN)真核表达质粒PDPN-pEGFP-N1,建立稳定高表达重组人PDPN的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株并对其进行生物学活性研究。方法通过反转录PCR和DNA重组技术从HEK293细胞中克隆PDPN cDNA,插入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标... 目的构建平足蛋白(PDPN)真核表达质粒PDPN-pEGFP-N1,建立稳定高表达重组人PDPN的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株并对其进行生物学活性研究。方法通过反转录PCR和DNA重组技术从HEK293细胞中克隆PDPN cDNA,插入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的真核表达载体pEGFP-N1中。通过PCR、酶切及测序等方法鉴定重组载体;进而将该重组载体转染至CHO细胞中,通过荧光显微镜检测EGFP的表达,Western blot法检测PDPN在CHO细胞中的表达,流式细胞术分选高表达PDPN的CHO细胞,运用血小板聚集实验检测分选后细胞株的生物学活性。结果 DNA测序和酶切鉴定证明PDPN基因正确克隆至pEGFP-N1载体中,重组载体稳定转染CHO细胞后,在荧光显微镜下观察到绿色荧光,流式细胞术分选后的细胞高表达PDPN;Western blot结果显示转染后CHO细胞膜表面表达PDPN蛋白;过表达PDPN的CHO细胞可以诱导人血小板聚集。结论成功构建了稳定高表达PDPN蛋白的CHO细胞株,该细胞株可表达PDPN,并诱导血小板聚集。 展开更多

关键词 平足蛋白 真核表达 PEGFP-N1 CHO细胞 血小板聚集

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环甲膜穿刺用药治疗肺脓肿15例

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作者 郑世彬 夏利军 《临沂医学专科学校学报》 1994年第1期20-20,共1页

环甲膜穿刺用药治疗肺脓肿１５例郑世彬，夏利军（日照市人民医院内一科）关键词肺脓肿；环甲膜；穿刺术自１９８８年１０月，我们在全身用药基础上加环甲膜穿刺滴药治疗急慢性肺脓肿１５例，取得了较好效果。回治疗分组环甲膜穿刺滴药... 环甲膜穿刺用药治疗肺脓肿１５例郑世彬，夏利军（日照市人民医院内一科）关键词肺脓肿；环甲膜；穿刺术自１９８８年１０月，我们在全身用药基础上加环甲膜穿刺滴药治疗急慢性肺脓肿１５例，取得了较好效果。回治疗分组环甲膜穿刺滴药加全身用药组（简称环穿组）１５例，... 展开更多

关键词 肺脓肿 环甲膜 穿刺术

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班主任工作十“忌”

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作者 夏利军 《承德职业学院学报》 2001年第2期68-69,共2页

班主任工作在学生管理工作中占有十分重要的地位。做好班主任工作要做到“十忌”。

关键词 班主任工作 班级 学校 抵触情绪 个人威信 学生管理工作 十忌

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家族性蛋白C与蛋白S基因联合杂合突变家系的基因变异特点与临床特征分析 被引量：2

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作者 王杏 盛广影 +3 位作者 张威 赵贇霄 夏利军 江淼 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期591-595,共5页

目的:对1个蛋白C和蛋白S基因联合杂合突变的家系进行各项抗凝功能检测、基因诊断及临床特征分析。序法(Sanger测序法)检测基因突变。结果:在该家系中发现多人为遗传性蛋白C与蛋白S联合杂合突变,其中6位家族成员伴有深静脉血栓症状。结... 目的:对1个蛋白C和蛋白S基因联合杂合突变的家系进行各项抗凝功能检测、基因诊断及临床特征分析。序法(Sanger测序法)检测基因突变。结果:在该家系中发现多人为遗传性蛋白C与蛋白S联合杂合突变,其中6位家族成员伴有深静脉血栓症状。结合家族中各成员的相关基因变异特点和临床表现,分析了遗传因素和继发性因素对该家系成员静脉血栓发病的影响。结果显示该家系中,蛋白C与蛋白S基因联合缺陷携带者有更高的静脉血栓发生率,但后天继发性因素仍对其最终是否出现血栓症状起重要作用。结论:静脉血栓形成是多因素导致的疾病,蛋白C合并蛋白S基因联合杂合突变是重要的遗传因素,临床上具有较大的异质性,继发性因素使静脉血栓栓塞症的发生率提高。 展开更多

关键词 蛋白C 蛋白S 易栓症

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微量元素与人体健康 被引量：5

16

作者 姜淑霞 夏利军 +1 位作者 李万华 张文艳 《承德职业学院学报》 2006年第3期103-104,共2页

微量元素包括铁、锌、铜、碘、氟、硒、钼、钒、钴、铬、锰、硅、镍、锡14种元素。是构成人体内某些酶、活性蛋白、维生素和激素的不可缺少的重要成份,对机体的代谢和生存有着极其重要的生物学作用。人体需要一定量的微量元素,主要通过... 微量元素包括铁、锌、铜、碘、氟、硒、钼、钒、钴、铬、锰、硅、镍、锡14种元素。是构成人体内某些酶、活性蛋白、维生素和激素的不可缺少的重要成份,对机体的代谢和生存有着极其重要的生物学作用。人体需要一定量的微量元素,主要通过正常的饮食获得,一旦缺乏机体将不能进行正常代谢活动,严重时会引起各种疾病,影响健康。 展开更多

关键词 微量元素 人体 健康 缺乏症 食物

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治疗血友病的新策略:抑制抗凝系统 被引量：1

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作者 李天逸 江淼 夏利军 《血栓与止血学》 CAS 2022年第5期1181-1186,共6页

血友病(hemophilia)是一种X染色体连锁的罕见隐性遗传性出血性疾病,分为血友病A和血友病B,分别由FⅧ基因和FⅨ基因突变所致。主要表现为出血所致的肌肉和关节血肿,长期的关节出血还会导致退行性关节疾病,严重影响患者的生存质量,重型患... 血友病(hemophilia)是一种X染色体连锁的罕见隐性遗传性出血性疾病,分为血友病A和血友病B,分别由FⅧ基因和FⅨ基因突变所致。主要表现为出血所致的肌肉和关节血肿,长期的关节出血还会导致退行性关节疾病,严重影响患者的生存质量,重型患者可发生危及生命的出血。尽管近年来新的治疗方式不断涌现,但主要是通过促进患者的凝血功能来改善出血症状。受到血友病患者合并FV莱顿(FV_Leiden)突变出血表型得到改善这一现象的启发,通过抑制活化蛋白C(APC)的抗凝活性重新恢复凝血系统和抗凝系统之间的动态平衡而止血的新策略近年来受到了关注,为血友病的治疗提供了新的有效方法,本文综述了近年来相关研究进展。 展开更多

关键词 血友病 抗凝系统 新策略

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微管蛋白在巨核细胞发育和血小板数量调控中的作用机制研究进展

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作者 牛思颖 夏利军 江淼 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期323-326,共4页

微管蛋白在巨核祖细胞向血小板发育成熟的过程中通过对有丝分裂的控制和原血小板的形成影响血小板的数量。在血小板中微管蛋白参与维持血小板骨架的完整,并在血小板活化过程中参与血小板形态的改变。一些以细胞有丝分裂为靶向的抗肿瘤... 微管蛋白在巨核祖细胞向血小板发育成熟的过程中通过对有丝分裂的控制和原血小板的形成影响血小板的数量。在血小板中微管蛋白参与维持血小板骨架的完整,并在血小板活化过程中参与血小板形态的改变。一些以细胞有丝分裂为靶向的抗肿瘤新药正试图有针对性地减少对微管蛋白的影响以减轻药物对血小板生成的抑制作用。临床上一些血小板减少症患者由于微管蛋白基因的变异和多态性影响了微管多聚体的结构从而导致血小板生成减少。本文对微管蛋白在巨核细胞发育成熟和血小板生成调控过程中的最新研究进展作一综述。 展开更多

关键词 微管蛋白 TUBB1 巨核细胞 血小板生成 血小板减少

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改良型平板流动小室的研制及其在病理血管条件下血小板黏附功能检测中的应用

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作者 牛思颖 徐嘉婕 +3 位作者 徐梦瑶 张议丹 夏利军 江淼 《临床输血与检验》 CAS 2022年第3期308-314,共7页

目的研制一种合适的体外模型,用以观察病理血管条件(包括狭窄、血流紊乱、静脉瓣膜受损等)下血小板在血管壁的黏附功能。方法本研究设计了一种改良的平板流动小室装置,以不同剪切力、不同血管管腔直径对生理及病理状态下血小板的黏附进... 目的研制一种合适的体外模型,用以观察病理血管条件(包括狭窄、血流紊乱、静脉瓣膜受损等)下血小板在血管壁的黏附功能。方法本研究设计了一种改良的平板流动小室装置,以不同剪切力、不同血管管腔直径对生理及病理状态下血小板的黏附进行了观测,同时对流经小室但未黏附的血小板进行聚集功能检测。结果带有荧光标记血小板的外周血以正常静脉流速流过胶原包被的流动小室,约5~8 min可观察到血小板呈片状黏附于管壁,最大血小板覆盖面积约60%;使用针对血小板黏附功能的抑制剂SZ-2能显著抑制血小板的黏附。同样的血小板在局部狭窄管腔和存在血管分支的管腔中黏附面积增大;流经局部狭窄管腔的血小板聚集率明显高于流经正常管腔的血小板。结论改良型平板流动小室能较好地模拟生理和血管病理条件下的血流状态,对于检测血小板功能、监测抗血栓药物疗效有较高的应用价值。 展开更多

关键词 血小板 黏附 血小板聚集 流动小室

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白血病及MDS患者血浆纤维结合蛋白检测的临床意义

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作者 梁志敏 夏利军 蒋延东 《临沂医学专科学校学报》 1991年第3期251-252,共2页

纤维结合蛋白(FN)是一组高分子糖蛋白,主要分布在血液及细胞基质和疏松结缔组织中,具有促进细胞粘附与扩散,维持内环境稳定和吞噬调理等生物活性。白血病及骨髓增生异常综合征(MDS)血浆FN的含量及临床意义尚无定论。本文观察上述病人4 1... 纤维结合蛋白(FN)是一组高分子糖蛋白,主要分布在血液及细胞基质和疏松结缔组织中,具有促进细胞粘附与扩散,维持内环境稳定和吞噬调理等生物活性。白血病及骨髓增生异常综合征(MDS)血浆FN的含量及临床意义尚无定论。本文观察上述病人4 1例,简要分析如下。 展开更多

关键词 白血病 纤维结合蛋白 MDS

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