结直肠癌组织中EZH2蛋白阳性表达及意义 被引量：3

1

作者 姚坤厚 魏伦收 +1 位作者 马万里 胡军红 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第8期52-53,56,共3页

目的探讨果蝇zeste基因增强子同源物2（EZH2）蛋白在结直肠癌发生、发展中的作用。方法选择结直肠癌组织52例份（结直肠癌组）及远癌正常肠组织22例份（正常组）,采用免疫组化SP法检测两组EZH2蛋白表达,并分析其阳性表达与结直肠癌患者... 目的探讨果蝇zeste基因增强子同源物2（EZH2）蛋白在结直肠癌发生、发展中的作用。方法选择结直肠癌组织52例份（结直肠癌组）及远癌正常肠组织22例份（正常组）,采用免疫组化SP法检测两组EZH2蛋白表达,并分析其阳性表达与结直肠癌患者临床病理参数及预后的关系。结果结直肠癌组EZH2阳性表达率为69.2%（36/52）,正常组为4.5%（1/22）,二者比较P〈0.05。结直肠癌组EZH2阳性表达与患者性别、年龄、肿瘤部位及临床分型无关（P均〉0.05）,与组织分化程度、Duke分期及肿瘤直径有关（P均〈0.05）。EZH2阳性者3年无疾病进展生存率为49.8%,EZH2阴性者为79.6%,EZH2阳性者疾病进展风险显著高于阴性者（HR=2.91,95%CI为1.23~3.66,P〈0.05）。结论 EZH2蛋白阳性表达变化与结直肠癌发生、发展密切相关,可作为判断预后不良的指标。 展开更多

关键词 结直肠癌 EZH2蛋白 免疫组化 临床病理特征 预后

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老年胃癌患者术后早期奥沙利铂腹腔热灌注化疗的远期疗效及安全性 被引量：3

2

作者 姚坤厚 魏伦收 +1 位作者 马万里 胡军红 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2017年第15期3778-3779,共2页

目的探讨胃癌术后早期奥沙利铂腹腔热灌注化疗对老年患者的远期临床疗效及安全性。方法选取2012年1月至2014年2月河南大学附属淮河医院普通外科收治Ⅲ期胃癌手术老年患者53例为研究对象,分为腹腔热灌注化疗组(试验组)和对照组。两组患... 目的探讨胃癌术后早期奥沙利铂腹腔热灌注化疗对老年患者的远期临床疗效及安全性。方法选取2012年1月至2014年2月河南大学附属淮河医院普通外科收治Ⅲ期胃癌手术老年患者53例为研究对象,分为腹腔热灌注化疗组(试验组)和对照组。两组患者术中均行D2根治术并完成消化道重建,对照组行常规术后抗感染、止疼,静脉营养支持等治疗。试验组术后第1天开始应用热化疗灌注机(RHL-2000A)进行热灌注化疗。灌注奥沙利铂100 mg/m^2+地塞米松10 mg溶于4 000 ml葡萄糖注射液中,进行腹腔灌注,1次/d,连续4 d。观察两组患者围术期不良反及术后肿瘤转移复发时间。结果对照组随访期间发生肿瘤转移或复发14例;试验发生肿瘤转移或复发4例,试验组随访期间肿瘤复发转移风险显著低于对照组[风险比(HR)=0.40,P<0.05];试验组总体不良反应发生率(16.13%)与对照组(13.64%)无统计学差异(P>0.05)。结论胃癌术后早期奥沙利铂腹腔热灌注化疗可显著降低老年患者术后肿瘤转移复发风险,且不增加不良反应发生率。 展开更多

关键词 胃癌 腹腔热灌注化疗 奥沙利铂

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大鼠原位肝移植急性排斥模型的建立 被引量：2

3

作者 姚坤厚 高毅 +3 位作者 潘明新 张会迎 张清军 王琼 《实用医学杂志》 CAS 2008年第8期1304-1306,共3页

目的:通过"Kamada二袖套法"建立稳定的DA-Lewis大鼠同种异体肝移植急性排斥反应模型。方法:实验分两组,同基因组(isogene group),Lewis-Lewis间24只;异基因组(allogene group),DA-Lewis间24例。观察术后一般情况及术后存活时... 目的:通过"Kamada二袖套法"建立稳定的DA-Lewis大鼠同种异体肝移植急性排斥反应模型。方法:实验分两组,同基因组(isogene group),Lewis-Lewis间24只;异基因组(allogene group),DA-Lewis间24例。观察术后一般情况及术后存活时间,两组受体分别于术后3、5、7和10d随机取3只处死取标本,观察肝脏组织病理变化,测定天冬氨酸氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBil)水平变化。结果:同基因组大鼠无急性排斥表现,中位生存时间超过100d,肝组织发生轻度形态学改变。异基因组大鼠术后黄疸明显,中位生存时间为11d,术后第7天肝组织病理表现典型急性排斥反应(Williams标准)。同期相比异基因组AST、TBil水平均明显高于同基因组(P≤0.001)。结论:本实验成功地建立了稳定的同种异体大鼠肝移植急性排斥模型。 展开更多

关键词 肝移植 移植物排斥 模型 动物

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胃癌根治术后患者生活质量评价 被引量：3

4

作者 姚坤厚 孟继明 《新乡医学院学报》 CAS 2016年第8期710-711,715,共3页

目的评价胃癌根治术后患者远期生活质量。方法选择2009年1月至2010年1月河南大学淮河医院收治的行胃癌根治术患者53例作为研究对象。采用生命质量指标(QL-Index)量表对患者术后1、3、6、12和24个月生活质量进行评分,并记录各时间点患者... 目的评价胃癌根治术后患者远期生活质量。方法选择2009年1月至2010年1月河南大学淮河医院收治的行胃癌根治术患者53例作为研究对象。采用生命质量指标(QL-Index)量表对患者术后1、3、6、12和24个月生活质量进行评分,并记录各时间点患者并发症发生情况。结果 42例患者获得完整随访资料,胃癌根治术后患者总体生活质量随时间的延长逐渐提高,其中活动、日常生活、健康及精神评分随时间延长明显增加(P<0.05);而支持评分随时间推移明显下降(P<0.05)。术后各时间点患者食欲下降、腹胀、反流及倾倒综合征等并发症发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论胃癌根治术患者术后生活质量随时间增加逐步提高。 展开更多

关键词 胃癌 根治术 生活质量

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原纤维蛋白1基因在胃癌组织中的表达、功能富集及信号通路生物信息学分析

5

作者 姚坤厚 李昊 +2 位作者 王晨宇 张军杰 李兴旺 《新乡医学院学报》 CAS 2022年第7期669-672,共4页

目的探讨原纤维蛋白1(FBN1)基因在胃癌组织中的表达、相关生物学功能和信号通路以及FBN1表达与胃癌患者生存期的关系。方法应用生物信息大数据挖掘技术分析癌症基因组图谱数据库(TCGA)中人胃癌癌组织和癌旁正常组织中FBN1 mRNA表达水平... 目的探讨原纤维蛋白1(FBN1)基因在胃癌组织中的表达、相关生物学功能和信号通路以及FBN1表达与胃癌患者生存期的关系。方法应用生物信息大数据挖掘技术分析癌症基因组图谱数据库(TCGA)中人胃癌癌组织和癌旁正常组织中FBN1 mRNA表达水平。应用蛋白相互作用数据库STRING构建FBN1基因相关蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络并对蛋白网络中的编码基因进行功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路分析。根据胃癌组织中FBN1 mRNA表达水平的中位数将胃癌患者分为高表达组(n=126)和低表达组(n=118),采用Cox回归模型比较FBN1高表达组与低表达组患者总生存期(OS)和无疾病进展生存期(DFS)。结果FBN1 mRNA在胃癌癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织(P<0.05)。FBN1基因PPI网络中共有21个蛋白和143个相互作用关系,各蛋白平均相互作用指数为0.816,网络中各个蛋白功能富集明显(P<0.05)。FBN1基因生物学过程主要富集于翻译后蛋白质修饰、解剖结构发育等;细胞组分主要富集于内质网内腔、细胞外基质和内质网等;分子功能主要富集于细胞黏附分子结合和整合素结合等;KEGG分析显示,FBN1基因KEGG主要富集于细胞外基质受体相互作用、黏着及胃肠道肿瘤等。FBN1 mRNA表达与CD8^(+)T细胞、CD4^(+)T细胞、巨噬细胞、中性粒细胞及树突状细胞浸润呈正相关(r=0.248、0.412、0.665、0.353、0.412,P<0.05)。FBN1高表达组患者的OS和DFS均显著短于低表达组(P<0.05)。结论FBN1基因在胃癌组织中表达水平显著升高,且高表达患者的OS和DFS显著短于低表达患者。FBN1基因编码蛋白功能富集明显。 展开更多

关键词 胃癌 原纤维蛋白1 信号通路

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人骨髓间充质干细胞体外分化为肝样细胞的实验研究 被引量：9

6

作者 谢金敏 陈建锋 +1 位作者 高毅 姚坤厚 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1439-1442,共4页

目的探索肝细胞生长因子(HGF)联合成纤维细胞生长因子-4(FGF-4)诱导人骨髓间充质干细胞(HMSCs)向肝细胞方向分化的能力,为生物人工肝及肝细胞移植等找到新的种子细胞来源。方法分别用HGF、FGF-4、HGF+FGF-4诱导HMSCs分化为肝样细胞;以... 目的探索肝细胞生长因子(HGF)联合成纤维细胞生长因子-4(FGF-4)诱导人骨髓间充质干细胞(HMSCs)向肝细胞方向分化的能力,为生物人工肝及肝细胞移植等找到新的种子细胞来源。方法分别用HGF、FGF-4、HGF+FGF-4诱导HMSCs分化为肝样细胞;以未加诱导因素的HMSCs、L-02人肝细胞株为阴、阳性对照组。相差显微镜观察细胞形态的变化;在不同诱导分化阶段免疫细胞化学染色检测AFP和CK18,并用图像分析法计算HMSCs的分化比率;免疫荧光细胞化学染色法检测AFP、ALB的表达;RT-PCR检测AFP和ALBmRNA表达的情况。结果HMSCs经诱导向肝样细胞转化,变成纺锤形、不规则圆形或多角形细胞。免疫细胞化学染色各诱导组均可检测出AFP和CK18表达,图像分析表明HGF+FGF-4联合诱导分化的AFP、CK18阳性率最高,HGF次之,FGF-4则较弱;免疫荧光细胞化学染色发现各诱导组AFP、ALB均为阳性表达,而阴性对照组则为阴性表达;各诱导组RT-PCR均可检测出AFP和ALBmRNA的表达,而阴性对照组则没有表达。结论HGF、FGF-4、HGF+FGF-4均能诱导HMSCs分化为肝样细胞,分化的肝样细胞能分泌肝细胞特异性产物AFP、ALB、CK18等。以HGF+FGF-4诱导HMSCs分化为肝样细胞的阳性率最高,HGF次之,FGF-4则较弱。 展开更多

关键词 人骨髓间充质干细胞 细胞分化 肝样细胞

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非转流小型猪原位肝移植模型的建立及评价 被引量：7

7

作者 谢金敏 潘明新 +4 位作者 张会迎 孔凡东 姚坤厚 王琼 高毅 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期613-616,共4页

目的:建立标准化程度高、重复性和稳定性好的小型猪原位肝移植模型。方法:实验于2004-06/2006-02在南方医科大学南方医院动物研究所完成。选用健康中国版纳小型猪36只,按随机数字表法分为供、受体各18只,施行非转流小型猪原位肝移植手... 目的:建立标准化程度高、重复性和稳定性好的小型猪原位肝移植模型。方法:实验于2004-06/2006-02在南方医科大学南方医院动物研究所完成。选用健康中国版纳小型猪36只,按随机数字表法分为供、受体各18只,施行非转流小型猪原位肝移植手术18例。在非体外静脉转流的条件下行同种异体原位肝移植术,严格控制动物无肝期时间,应用套管法吻合胆总管,另外加强围手术期的处理,使无肝期的血压维持在满意水平。监测动物无肝期时间、手术时间、失血量、输血量及动物存活期;术中监测动物的血液动力学及动脉血气分析、生化指标变化;猪死后当天行尸体解剖明确死亡原因。结果:成功建立非转流小型猪原位肝移植模型18只,均纳入结果分析,无脱失。①实验动物无术中死亡,术后当天死亡1只,死亡原因为急性肺水肿;术后第2天死亡1只,死亡原因为胆总管吻合口胆瘘。术后7d存活率为88.9%。②手术时间、无肝期时间、术中失血量及输血量分别为(179.61±14.27)min,(27.28±3.43)min,(422.22±66.91)mL及(444.44±51.13)mL。③与无肝前期相比,实验动物无肝期平均动脉压、中心静脉压、pH值及碱剩余明显下降(P<0.05￣0.01),心率及血清钾水平显著升高(P<0.01);手术结束时平均动脉压及中心静脉压恢复,经药物调整后血清钾水平下降,pH值逐渐恢复。结论:非转流条件下的小型猪原位肝移植模型是肝移植实验的理想动物模型。 展开更多

关键词 肝移植 猪 雏型 疾病模型 动物

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对比分析腹腔镜胆道探查术与传统开腹手术治疗胆囊结石合并胆总管结石的临床效果 被引量：22

8

作者 华龙 王晨宇 +3 位作者 张军杰 陈江涛 姚坤厚 马万里 《中国实用医药》 2016年第1期61-63,共3页

目的对比分析传统开腹手术与腹腔镜胆道探查术治疗胆总管合并胆囊结石的临床效果。方法 100例胆总管合并胆囊结石患者,将其分为对照组及试验组,各50例。对照组采用传统开腹手术治疗,试验组采用腹腔镜胆道探查术治疗,对比两组患者临床疗... 目的对比分析传统开腹手术与腹腔镜胆道探查术治疗胆总管合并胆囊结石的临床效果。方法 100例胆总管合并胆囊结石患者,将其分为对照组及试验组,各50例。对照组采用传统开腹手术治疗,试验组采用腹腔镜胆道探查术治疗,对比两组患者临床疗效及相关指标。结果治疗后试验组总有效率为94.00%,对照组总有效率为66.00%,差异具有统计学意义(P<0.05);试验组患者的手术时间、腹腔引流时间、术后输液量以及术后住院时间均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用腹腔镜胆道探查术治疗胆总管合并胆囊结石效果显著,患者恢复快,安全可靠,值得推广。 展开更多

关键词 腹腔镜胆道探查术 开腹手术 胆总管结石 胆囊结石

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腹腔镜微创手术与传统开腹手术治疗急性阑尾炎临床疗效比较 被引量：26

9

作者 张军杰 姚坤厚 +2 位作者 华龙 陈江涛 王晨宇 《中国实用医药》 2016年第10期53-54,共2页

目的对比和分析腹腔镜微创手术与传统开腹手术治疗急性阑尾炎的临床疗效。方法 70例急性阑尾炎患者,随机分为观察组与对照组,各35例。对照组患者给予传统开腹手术,观察组患者则给予腹腔镜微创手术,对比两组患者临床疗效。结果观察组经... 目的对比和分析腹腔镜微创手术与传统开腹手术治疗急性阑尾炎的临床疗效。方法 70例急性阑尾炎患者,随机分为观察组与对照组,各35例。对照组患者给予传统开腹手术,观察组患者则给予腹腔镜微创手术,对比两组患者临床疗效。结果观察组经手术治疗后1例患者临床症状无改善,治疗总有效率为97.1%,优于对照组的77.1%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组在住院时间、疼痛评分以及术后排气时间中均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论腹腔镜微创手术能够显著提高临床疗效,减少住院时间,在临床中值得推广。 展开更多

关键词 急性阑尾炎 腹腔镜微创手术 传统开腹手术

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苦参碱联合DMSO大规模冻存人胎肝细胞的实验研究 被引量：4

10

作者 龚独辉 潘明新 +4 位作者 姚坤厚 夏武政 康玉占 汪艳 高毅 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期512-514,共3页

目的观察苦参碱对大规模低温冻存人胎肝细胞功能的影响。方法改良肝细胞获取方法分离人胎肝细胞,经过1h预培养后。将5种不同浓度(1×107,2.5×107,5×107,7.5×107,10×107.mL-1)的胎肝细胞以6mg/L苦参碱+5%DMSO为... 目的观察苦参碱对大规模低温冻存人胎肝细胞功能的影响。方法改良肝细胞获取方法分离人胎肝细胞,经过1h预培养后。将5种不同浓度(1×107,2.5×107,5×107,7.5×107,10×107.mL-1)的胎肝细胞以6mg/L苦参碱+5%DMSO为冻存保护液置于骨髓干细胞冻存袋在液氮中冷冻保存1个月。1个月后复苏,进行活率、形态学及功能检测。结果5种不同浓度的细胞冻存1个月后,细胞浓度为2.5×107·mL-1组复苏后存活率与其余四组相比差异有显著性(P<0.05),且明显高于其余四组。复苏后细胞存活率和24h贴壁率分别为73%,69%,经过短期培养后,细胞功能逐渐恢复。结论(1)苦参碱对低温冻存的人胎肝细胞有保护作用,与二甲基亚砜联用可降低DMSO的浓度;(2)以5%DMSO+6mg/L苦参碱作为冻存保护剂,细胞浓度在2.5×107·mL-1冻存效果最佳。该大规模冻存方法基本上可以满足生物人工肝肝细胞应用的需求。 展开更多

关键词 生物人工肝 人胎肝细胞 冷冻保存 苦参碱

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同期输注供者骨髓间充质干细胞对肝移植大鼠免疫的影响 被引量：5

11

作者 张清军 高毅 +2 位作者 潘明新 姚坤厚 汪艳 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1401-1403,共3页

目的探讨肝移植同时输注供者骨髓间充质干细胞对受体肝移植免疫的影响。方法实验分为空白对照组(A组)、移植组(B组)和输注供者骨髓间充质干细胞组(C组)。A组SD大鼠5只,只行剖腹探查,B,C组Wistar和SD大鼠各10只。行Wistar-SD大鼠肝移植同... 目的探讨肝移植同时输注供者骨髓间充质干细胞对受体肝移植免疫的影响。方法实验分为空白对照组(A组)、移植组(B组)和输注供者骨髓间充质干细胞组(C组)。A组SD大鼠5只,只行剖腹探查,B,C组Wistar和SD大鼠各10只。行Wistar-SD大鼠肝移植同时,C组提取供体骨髓间质干细胞同期输注给受者,B组给予输注生理盐水。观察术后第7天肝功能的变化、病理改变和受体生存期。结果肝移植同时输注供者骨髓间充质干细胞,ALT,AST,TBIL,ALB较B组显著降低,生存期明显延长,病理改变仅呈急性轻度排斥反应,而单纯移植组呈急性重度排斥反应。结论肝移植同时输注骨髓间充质干细胞促进受体对移植肝的免疫耐受。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 肝移植 免疫耐受

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腹腔镜与开腹右半结肠癌根治术后并发症及影响因素分析 被引量：6

12

作者 贺志宽 刘大晗 +3 位作者 李全营 姚坤厚 秦长江 任学群 《河南大学学报（医学版）》 CAS 2018年第3期185-189,共5页

[目的]对比分析腹腔镜与开腹右半结肠癌根治术的术后并发症发生率,并探讨腹腔镜右半结肠癌术后并发症发生原因及影响因素。[方法]回顾性分析河南大学淮河医院胃肠外科2010年01月至2017年01月由同一组医师收治的右半结肠癌患者521例的临... [目的]对比分析腹腔镜与开腹右半结肠癌根治术的术后并发症发生率,并探讨腹腔镜右半结肠癌术后并发症发生原因及影响因素。[方法]回顾性分析河南大学淮河医院胃肠外科2010年01月至2017年01月由同一组医师收治的右半结肠癌患者521例的临床资料,其中观察组348例接受腹腔镜右半结肠癌根治手术,对照组173例接受常规开腹右半结肠癌根治术。比较2组患者术后2周内手术并发症的发生情况,分析腹腔镜右半结肠癌根治术患者并发症的发生原因及影响因素。[结果]腹腔镜组患者术后并发症发生率与开腹组相比,差异无统计学意义(P=0.95> 0.05),其中患者年龄、术前合并症、手术时间等是右半结肠癌术后并发症发生的影响因素(均P <0.05)。[结论]腹腔镜右半结肠癌根治术并不增加术后并发症的发生率,其术后并发症的发生与多种因素相关,应结合患者的个体情况制定相应的预防和干预策略。 展开更多

关键词 右半结肠肿瘤 腹腔镜 根治术 并发症

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草苁蓉多糖对人肝癌细胞侵袭迁移的影响及机制 被引量：2

13

作者 华龙 王晨宇 +1 位作者 姚坤厚 李小全 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期763-770,共8页

目的探讨草苁蓉多糖(BRPS)对人肝癌细胞侵袭迁移的影响及其可能机制。方法使用不同浓度的BRPS(12.5、25、50、100、200μg/L)干预肝癌HepG2细胞,筛选合适作用浓度。取对数生长期细胞,随机分为对照组(不作处理)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1... 目的探讨草苁蓉多糖(BRPS)对人肝癌细胞侵袭迁移的影响及其可能机制。方法使用不同浓度的BRPS(12.5、25、50、100、200μg/L)干预肝癌HepG2细胞,筛选合适作用浓度。取对数生长期细胞,随机分为对照组(不作处理)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)组(转染LV-HIF-1α)、HIF-1α-NC组(转染LV-HIF-1α-NC)、BRPS组(加入50μg/L BRPS)、BRPS+HIF-1α组(转染LV-HIF-1α,加入50μg/L BRPS),采用Hoechst33258染色观察肝癌细胞凋亡情况,流式细胞术检测肝癌细胞凋亡率,划痕实验检测肝癌细胞迁移能力,Transwell实验检测肝癌细胞侵袭能力,Western blotting检测肝癌细胞中HIF-1α以及上皮-间质转化(EMT)标志物E-钙黏蛋白、波形蛋白的表达水平。结果选取BRPS浓度50μg/L进行实验。Hoechst33258染色结果显示,对照组和HIF-1α-NC组蓝色荧光微弱,HIF-1α组蓝色荧光较弱,BRPS组蓝色荧光较强,BRPS+HIF-1α组蓝色荧光较BRPS组减弱。与对照组[细胞凋亡率:3.89%±1.25%,划痕愈合率:63.35%±3.35%,穿膜细胞数:(122.60±3.29)个]比较,HIF-1α组细胞凋亡率(1.67%±0.86%)降低,划痕愈合率(87.48%±3.92%)增高,穿膜细胞数[(208.60±6.17)个]增多,BRPS组细胞凋亡率(26.58%±1.63%)增高,划痕愈合率(14.82%±3.81%)降低,穿膜细胞数[(68.80±4.25)个]减少,差异有统计学意义(P<0.05);BRPS+HIF-1α组细胞凋亡率(12.14%±1.05%)高于HIF-1α组,低于BRPS组,划痕愈合率(32.59%±3.76%)、穿膜细胞数[(123.40±4.94)个]低于HIF-1α组,高于BRPS组,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,HIF-1α组HIF-1α、波形蛋白表达水平升高,E-钙黏蛋白表达水平降低,BRPS组HIF-1α、波形蛋白表达水平降低,E-钙黏蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);BRPS+HIF-1α组HIF-1α、波形蛋白表达水平低于HIF-1α组,高于BRPS组,E-钙黏蛋白表达水平高于HIF-1α组,低于BRPS组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论BRPS可促进肝癌HepG2细胞凋亡,抑制其迁移和侵袭,其机制可能为通过调控HIF-1α而抑制EMT的发生。 展开更多

关键词 肝癌 草苁蓉多糖 缺氧诱导因子-1Α 上皮间质转化 侵袭 迁移

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受体骨髓间充质干细胞同期输注对肝移植大鼠免疫状态的影响 被引量：3

14

作者 王琼 高毅 +2 位作者 潘明新 孔凡东 姚坤厚 《实用医学杂志》 CAS 2008年第2期184-186,共3页

目的:观察受体骨髓间充质干细胞(MSCs)术中经门静脉输注对肝移植大鼠肝脏微环境免疫状态的影响。方法:经改良双袖套法建立DA-Lewis大鼠原位肝移植急性排斥反应模型。实验分3组,A组行原位肝移植术;B组行原位肝移植术+术中门静脉输注MSCs;... 目的:观察受体骨髓间充质干细胞(MSCs)术中经门静脉输注对肝移植大鼠肝脏微环境免疫状态的影响。方法:经改良双袖套法建立DA-Lewis大鼠原位肝移植急性排斥反应模型。实验分3组,A组行原位肝移植术;B组行原位肝移植术+术中门静脉输注MSCs;C组行原位肝移植术+肌注环孢素A。术前密度梯度离心法分离与贴壁法富集受体MSCs。观察受鼠术后生存时间和一般情况,于1、7、14d和1个月取受鼠肝组织Luminex检测特异性细胞因子(IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ),同时测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)及总胆红素(TBil)。结果:A组受体12～16d死亡。B、C组大鼠1个月后活动增多,体重增加,B组较A、C组生存时间延长(P<0.05)。术后1、7d各组IL-2、IL-4、IL-10、IFN-"均升高,但B、C组低于A组(P<0.05),术后14d、1个月B组IL-4、IL-10浓度高于C组,IFN-"浓度低于C组。术后7d各组ALT、TBil值均升高,B组明显低于A、C组(P<0.05),术后14d和1个月B组ALT、TBil值明显低于C组(P<0.05〉。结论:术中输注受体MSCs可改善肝功能,延长生存期,效果优于环孢素A。MSCs可以改变T细胞亚群细胞因子的分泌量,有利于免疫耐受的形成。 展开更多

关键词 肝移植 骨髓间充质干细胞 免疫排斥

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毛钩藤碱调控Shh信号通路对结直肠癌荷瘤鼠的抑瘤作用及CD4^(+)、CD8^(+)T细胞的影响 被引量：1

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作者 王晨宇 李兴旺 +3 位作者 张军杰 姚坤厚 华龙 胡军红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第20期2473-2478,共6页

目的:探讨毛钩藤碱对结直肠癌荷瘤鼠的抑瘤作用,并分析其对Shh信号通路关键蛋白及CD4^(+)、CD8^(+)T细胞的影响。方法:采用结肠癌SW480细胞接种于裸鼠右腋部皮下建立结直肠癌荷瘤鼠模型,将40只建模成功的裸鼠分为荷瘤鼠模型组、阳性药... 目的:探讨毛钩藤碱对结直肠癌荷瘤鼠的抑瘤作用,并分析其对Shh信号通路关键蛋白及CD4^(+)、CD8^(+)T细胞的影响。方法:采用结肠癌SW480细胞接种于裸鼠右腋部皮下建立结直肠癌荷瘤鼠模型,将40只建模成功的裸鼠分为荷瘤鼠模型组、阳性药环巴胺(Shh信号通路抑制剂)对照组和毛钩藤碱低、中、高剂量组,每组8只。阳性药给予环巴胺(20μmol/L,0.2 ml),毛钩藤碱干预组分别腹腔注射5、10、20 mg/kg毛钩藤碱,1次/d,连续21 d,留取外周血后处死。观察各组荷瘤小鼠的自主活动次数、体质量及肿瘤体积,计算体质量增长率、相对肿瘤体积增长率和抑瘤率;免疫组化法(IHC)检测荷瘤鼠移植瘤中Glil、Gli2、Shh、Smo和Ptch1表达量;流式细胞术检测荷瘤鼠移植瘤和外周血中CD4^(+)及CD8^(+)T细胞水平。结果:与模型组比较,环巴胺及毛钩藤碱的干预显著改善了裸鼠的自主活动次数,环巴胺组及毛钩藤碱中、高剂量组的瘤质量、相对肿瘤体积增长率及Shh信号通路关键蛋白Glil、Gli2及Shh、Smo和Ptch1表达量均显著降低(P<0.05或P<0.01),移植瘤和外周血中CD4^(+)及CD8^(+)T细胞水平均显著提高(P<0.05或P<0.01),但毛钩藤碱低剂量组上述指标与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与阳性药环巴胺组比较,毛钩藤碱各剂量干预组肿瘤质量、抑瘤率、相对肿瘤体积增长率差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。随着毛钩藤碱剂量的增加,Shh信号通路关键蛋白(Glil、Gli2及Shh、Smo和Ptch1)表达量显著降低(P<0.05或P<0.01),而移植瘤和外周血中CD4^(+)及CD8^(+)T细胞水平均显著增加(P<0.05或P<0.01)。结论:毛钩藤碱可显著改善结肠癌荷瘤鼠的自主活动状态,发挥较好的抑瘤作用,可能与其抑制Shh信号通路,提高CD4^(+)及CD8^(+)T细胞水平有关。 展开更多

关键词 毛钩藤碱 结直肠癌 荷瘤鼠 SHH信号通路 CD4^(+) CD8^(+)

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自体骨髓间充质干细胞对异基因猪移植肝的保护作用 被引量：1

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作者 潘明新 孔凡东 +4 位作者 张清军 姚坤厚 龚独辉 王琼 高毅 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1459-1461,共3页

目的研究自体骨髓间充质干细胞术中经门静脉输注对异基因小型猪移植肝脏的保护作用。方法建立异基因猪肝移植急性排斥反应模型,实验分对照组和处理组,对照组只做原位肝移植,处理组在原位肝移植的基础上,术中经门静脉注射一定数量预先制... 目的研究自体骨髓间充质干细胞术中经门静脉输注对异基因小型猪移植肝脏的保护作用。方法建立异基因猪肝移植急性排斥反应模型,实验分对照组和处理组,对照组只做原位肝移植,处理组在原位肝移植的基础上,术中经门静脉注射一定数量预先制备的受体自身骨髓间充质干细胞,术后1,3,6d静脉采血检测肝功能,并做肝组织的病理活检,并观察受体的生存时间。结果①处理组中受体的生存时间明显比对照组的延长(P<0.001);②肝功能变化:术前两组血清AST及ALT比较差异无显著性(P>0.05),术后处理组受体血清中AST及ALT总体变化明显低于对照组,两组比较差异有显著性(P<0.01);③组织病理变化:处理组在术后7d病理活检见:大致呈正常肝脏病理,肝组织轻度瘀血,血管周围少量炎性细胞浸润,少数汇管区小静脉或肝静脉内皮细胞下淋巴细胞浸润,肝细胞点状坏死,中性粒细胞浸润。而对照组在术后3d移植的肝脏中出现汇管区大量炎症细胞聚集,肝细胞浑浊,气球样变性并出现不同程度的点状、灶状坏死。结论自体骨髓间充质干细胞经门静脉输注能够保护移植的肝脏,延长受体的存活时间。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 肝移植 急性排斥反应 门静脉 炎性细胞

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肝硬化门静脉高压症患者行脾大部切除术治疗的远期疗效观察 被引量：3

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作者 张军杰 姚坤厚 +2 位作者 华龙 陈江涛 王晨宇 《中国现代药物应用》 2016年第8期82-83,共2页

目的观察肝硬化门静脉高压症患者行脾大部切除术治疗的远期临床效果。方法 69例肝硬化门静脉高压症患者,均行脾大部切除术治疗,观察患者的远期疗效。结果 4年内,6例患者死亡,生存率为91.30%;11年内,21例患者死亡,生存率为69.57%。术后4... 目的观察肝硬化门静脉高压症患者行脾大部切除术治疗的远期临床效果。方法 69例肝硬化门静脉高压症患者,均行脾大部切除术治疗,观察患者的远期疗效。结果 4年内,6例患者死亡,生存率为91.30%;11年内,21例患者死亡,生存率为69.57%。术后4、11年白细胞和血小板计数升高例数相比,差异有统计学意义(P<0.05)。术后4年,52例患者血清免疫球蛋白A(Ig A)、免疫球蛋白M(Ig M)、免疫球蛋白G(Ig G)、Tuftsin水平与治疗前无明显变化。术后11年,11例患者血清Ig A、Ig M、Ig G、Tuftsin水平与治疗前无明显变化。结论对于肝硬化门静脉高压症患者行脾大部切除术治疗效果明显,能有效减少出血量,保留脾免疫功能,减少远期出血量,临床可推广应用。 展开更多

关键词 肝硬化门静脉高压症 脾大部切除术 远期效果

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异基因小型猪原位肝移植急性排斥反应模型的建立 被引量：1

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作者 潘明新 孔凡东 +4 位作者 张清军 姚坤厚 龚独辉 王琼 高毅 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第31期6019-6022,共4页

背景:在大动物肝移植的研究领域,在肝脏解剖结构及生理代谢方面,猪是更接近于人类的哺乳动物。目的:建立异基因中国小型猪原位肝移植急性排斥反应模型,并在此基础上开展免疫学实验,验证建立成熟稳定的异基因原位肝移植急性排斥反应模型... 背景:在大动物肝移植的研究领域,在肝脏解剖结构及生理代谢方面,猪是更接近于人类的哺乳动物。目的:建立异基因中国小型猪原位肝移植急性排斥反应模型,并在此基础上开展免疫学实验,验证建立成熟稳定的异基因原位肝移植急性排斥反应模型的可行性。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-06/2007-02在南方医科大学南方医院实验动物中心完成。材料:选用健康西藏小型猪30只,健康版纳小型猪10只。方法:分别进行西藏猪→西藏猪原位肝移植、版纳猪→西藏猪原位肝移植10对次,非转流条件下行原位肝移植。主要观察指标:移植后观察两组受体的存活时间,移植后1,3,7d检测受体血清中天冬氨酸转氨酶活性及总胆红素含量,并观察肝组织的病理变化。结果:①同基因肝移植组受体生存时间明显长于异基因肝移植组(P<0.01)。②异基因肝移植组受体移植后血清天冬氨酸转氨酶活性及总胆红素含量显著高于同基因肝移植组(P<0.01);移植前两组差异无显著性意义(P>0.05)。③异基因肝移植组受体于移植后7d出现严重的排斥反应;肝组织内见大量的片状坏死,汇管区有大量的炎症细胞浸润。结论:建立了稳定的异基因小型猪原位肝移植急性排斥反应模型。 展开更多

关键词 肝移植 移植物排斥 受体 器官移植

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犬活体肝移植术中的管道处理技巧 被引量：1

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作者 张清军 潘明新 +2 位作者 孔凡东 姚坤厚 高毅 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期425-426,共2页

目的总结非转流条件下犬活体肝移植中各种管道处理技巧,探索建立成熟、稳定的移植模型。方法通过预实验组5例次和实验组11例次非转流条件下犬活体肝移植术,结合其解剖特点,观察手术技术改进对存活率的影响。结果预实验中5例手术均在术... 目的总结非转流条件下犬活体肝移植中各种管道处理技巧,探索建立成熟、稳定的移植模型。方法通过预实验组5例次和实验组11例次非转流条件下犬活体肝移植术,结合其解剖特点,观察手术技术改进对存活率的影响。结果预实验中5例手术均在术中及术后24h内死亡。实验组手术中死亡2例,术后48h存活率77.8%。受体犬手术时间平均(281.3±29.7)min,无肝期0min;失血量为(262.1±27.5)ml,输血量(261.7±41.6)ml。术后第2d正常进食。结论术中各管道的合理处理对非转流条件下犬活体肝移植成功有重要意义。 展开更多

关键词 肝移植 管道处理 动物模型

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犬活体肝移植模型的建立及评价 被引量：1

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作者 张清军 潘明新 +2 位作者 孔凡东 姚坤厚 高毅 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期809-812,共4页

目的:犬活体肝移植接近于临床实际,能模拟临床活体肝移植的全部过程。应用非体外转流和分流方法建立犬活体肝脏移植模型,以期为开展临床活体肝移植提供实验数据。方法:①实验材料:实验于2006-05/2007-04在南方医科大学南方医院动物研究... 目的:犬活体肝移植接近于临床实际,能模拟临床活体肝移植的全部过程。应用非体外转流和分流方法建立犬活体肝脏移植模型,以期为开展临床活体肝移植提供实验数据。方法:①实验材料:实验于2006-05/2007-04在南方医科大学南方医院动物研究所完成,选用健康本地杂种犬36只,动物实验方法符合动物伦理学要求。②实验方法:将36只犬按随机数字表法分为供体组和受体组,共行非转流条件下犬活体肝脏移植手术18对次。活体供肝组行标准Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ叶左半肝切取术。受体组先行左侧Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ叶肝脏组织切除,在新肝植入后,再切除原肝残留Ⅵ,Ⅶ叶肝组织。③实验评估:检测动物手术时间、术中失血量、输血量及存活期;犬死后当天行尸体解剖明确死亡原因。结果:成功建立非转流犬活体肝移植模型14只。①活体供肝组手术结果:供体术中死亡1只,术后第1天因出血死亡1只,术后5d存活率为88.2%。手术时间(183.7±32.4)min,失血量为(78.5±12.8)mL,输血量0mL,供肝的热缺血时间几乎为零,冷缺血时间(146.7±24.4)min。②受体组手术结果:术中死亡4只,其中创面出血2只,左肝静脉吻合口出血1只,1只死于急性肺水肿。术后存活14只,术后5h存活率为85.7%;受体犬手术时间(276.7±34.1)min,无肝期0min;失血量为(242.5±25.6)mL,输血量(230.6±47.3)mL。结论:犬是理想的活体肝移植动物模型,受体肝脏分两步切除,新肝植入期,可有效维持受体血循环稳定,免除了体外转流或门腔分流的操作,为临床开展活体肝移植提供了技术和经验的参考。 展开更多

关键词 肝移植 疾病模型 动物 器官移植

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