超极化激活环化核苷酸门控通道基因转染猪骨髓间充质干细胞 被引量：5

1

作者 姚颖龙 张浩 +2 位作者 龚德军 宋智刚 徐志云 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第49期9673-9676,共4页

背景:研究证实超极化激活环化核苷酸门控通道(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated,HCN)电流在调控心脏的自发搏动中起着非常重要的作用。目的:观察HCN2基因重组腺病毒转染后猪骨髓间充质干细胞目的基因的表达及电生... 背景:研究证实超极化激活环化核苷酸门控通道(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated,HCN)电流在调控心脏的自发搏动中起着非常重要的作用。目的:观察HCN2基因重组腺病毒转染后猪骨髓间充质干细胞目的基因的表达及电生理特征。设计、时间及地点:细胞-基因学体外观察,于2007-07/2008-03在解放军第二军医大学胸心外科实验室完成。材料:Yorkshire猪由解放军第二军医大学动物所提供,HCN2质粒由意大利Dario DiFrancesco教授惠赠,重组腺病毒Ad.HCN2由本实验室采用Ad5系统构建并保存。方法:Percoll密度梯度离心+贴壁法体外分离纯化猪骨髓间充质干细胞,以感染复数=50进行Ad.HCN2转染,同时设立未转染组和转染Ad.Null组。主要观察指标:通过RT-PCR、免疫荧光染色检测各组细胞HCN2 mRNA和蛋白的表达,用全细胞膜片钳检测各组细胞电生理学变化。结果:未转染组和转染Ad.Null组均未见扩增片段,而Ad.HCN2扩增后在250～500bp可见扩增片段,与携带HCN2基因的质粒扩增出的片段位置相同。转染后细胞核染色强度明显弱于胞膜和胞浆,与HCN2蛋白的分布相符合,未转染组及转染Ad.Null组无HCN2蛋白阳性表达。全细胞膜片钳可记录到起搏电流,其激活电位约为-60mV,完全激活电位-140mV,呈电压依赖性,当给予4mmol/LCsCl后,内向的起搏电流即被明显抑制;未转染组及转染Ad.Null组细胞均无起搏电流。结论:通过起搏基因HCN2重组腺病毒载体可成功转染猪骨髓间充质干细胞,使其能够表达HCN2通道蛋白,全细胞膜片钳可检测到起搏电流。 展开更多

关键词 HCN2 骨髓间充质干细胞 重组腺病毒 基因 起搏电流

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成人脂肪干细胞的生物学特性 被引量：7

2

作者 段炼 宋智钢 +1 位作者 徐志云 姚颖龙 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期448-450,共3页

目的：培养成人脂肪干细胞（ADSCs）并进行生物学特性的研究。方法：取成人脂肪组织分离得到ADSCs并进行体外培养，对培养细胞进行形态学观察并绘制细胞生长曲线，检测细胞表面标志并进行核型分析。结果：根据培养细胞形态结构与生物学... 目的：培养成人脂肪干细胞（ADSCs）并进行生物学特性的研究。方法：取成人脂肪组织分离得到ADSCs并进行体外培养，对培养细胞进行形态学观察并绘制细胞生长曲线，检测细胞表面标志并进行核型分析。结果：根据培养细胞形态结构与生物学特性，长梭形细胞符合ADSCs的特点。结论：从脂肪组织中可分离得到ADSCs，具有干细胞特性。 展开更多

关键词 成人 脂肪干细胞 生物学特性

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猪心窦房结的形态学特点 被引量：3

3

作者 段炼 宋智钢 +2 位作者 徐志云 张浩 姚颖龙 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期792-794,798,共4页

目的:通过光、电镜观测猪心窦房结组织形态学结构特点。方法:通过心内多电极电生理标测等方法初步定位猪窦房结位置,取新鲜猪心窦房结组织,切片、染色后光镜下观察。确定窦房结位置后,再次取材、脱水、固定后超薄切片,并用透射电镜观察... 目的:通过光、电镜观测猪心窦房结组织形态学结构特点。方法:通过心内多电极电生理标测等方法初步定位猪窦房结位置,取新鲜猪心窦房结组织,切片、染色后光镜下观察。确定窦房结位置后,再次取材、脱水、固定后超薄切片,并用透射电镜观察并拍照。结果:猪心窦房结位于上腔静脉和右心房交界处的界沟上端,起搏细胞、移行细胞等都有其特有的形态和分布。结论:猪心窦房结有着不同于其他心肌组织的形态和结构,其细胞组成和功能与窦房结本身功能相一致。 展开更多

关键词 窦房结 形态学 光镜 电镜 猪

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兔静脉血管内皮及平滑肌细胞原代培养方法的改进及鉴定 被引量：2

4

作者 黄健兵 龚德军 +3 位作者 胡丰庆 姚颖龙 黄盛东 邹良建 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第27期35-36,共2页

取新西兰大白兔后腔静脉，拟行内皮细胞培养的静脉，使用RPMI 1640完全培养基直接通过贴块方法培养；拟行平滑肌细胞培养的静脉血管，先将其翻转后置于0．1％Ⅰ型胶原酶中消化去内皮细胞，使用M199完全培养基通过贴块方法培养。获得的... 取新西兰大白兔后腔静脉，拟行内皮细胞培养的静脉，使用RPMI 1640完全培养基直接通过贴块方法培养；拟行平滑肌细胞培养的静脉血管，先将其翻转后置于0．1％Ⅰ型胶原酶中消化去内皮细胞，使用M199完全培养基通过贴块方法培养。获得的细胞通过形态学及免疫组化方法鉴定。发现原代培养出的纯化的兔静脉内皮及平滑肌细胞，10～12d可第1次传代，形态学及免疫组化鉴定来源准确，可连续传代，满足体外实验需要。认为本方法简单易行，成功率高，且可避免细胞分离纯化的过程。 展开更多

关键词 冠状动脉疾病 原代培养 肝素

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开胸经导管植入带瓣膜主动脉瓣支架置换犬主动脉瓣膜的短期疗效观察 被引量：1

5

作者 顾明标 陈翔 +6 位作者 白元 宗刚军 朱玉峰 姚颖龙 赵仙先 吴弘 秦永文 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1150-1153,共4页

目的:探讨开胸经导管植入带瓣膜支架置换主动脉瓣膜的可行性及术后短期疗效。方法:新鲜猪心包以0.6%戊二醛浸泡36h后缝合在瓣膜环上,并将其固定在哑铃型镍钛记忆合金自膨胀支架上,制成带瓣膜主动脉瓣支架。选择健康杂种犬8只,通过开胸... 目的:探讨开胸经导管植入带瓣膜支架置换主动脉瓣膜的可行性及术后短期疗效。方法:新鲜猪心包以0.6%戊二醛浸泡36h后缝合在瓣膜环上,并将其固定在哑铃型镍钛记忆合金自膨胀支架上,制成带瓣膜主动脉瓣支架。选择健康杂种犬8只,通过开胸穿刺左心室心尖部,超声引导下将带瓣膜支架经导管植入至主动脉瓣处,置换犬自身主动脉瓣膜,术后定期行心电图、心脏彩超、CT及DSA造影检查,随访3个月,观察治疗效果。结果:成功制作带瓣膜主动脉瓣支架,经导管植入置换主动脉瓣膜后5只犬成活;心脏彩超及DSA造影检查证实术后支架位置及瓣膜功能良好,冠脉血流未受影响,术后3个月CT检查未发现支架移位,无明显并发症发生。结论:开胸经导管途径植入自制带瓣膜主动脉瓣支架可有效置换犬主动脉瓣膜,短期随访疗效理想。 展开更多

关键词 主动脉瓣 心脏导管插入术 心脏瓣膜假体植入 支架

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经导管主动脉瓣及肺动脉瓣置换的应用解剖

6

作者 宗刚军 白元 +2 位作者 秦永文 张浩 姚颖龙 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2008年第3期252-254,共3页

目的:为经导管瓣膜置换提供正常人主动脉瓣膜及肺动脉瓣膜的相关应用解剖。方法:解剖测量40例(男28,女12)外形大小正常的成年人心标本。结果:测得主动脉瓣、肺动脉瓣周径分别为(63.25±8.43)mm、(66.52±11.25)mm;瓣膜游离缘长... 目的:为经导管瓣膜置换提供正常人主动脉瓣膜及肺动脉瓣膜的相关应用解剖。方法:解剖测量40例(男28,女12)外形大小正常的成年人心标本。结果:测得主动脉瓣、肺动脉瓣周径分别为(63.25±8.43)mm、(66.52±11.25)mm;瓣膜游离缘长度分别为(26.25±3.84)mm、(27.51±5.15)mm;瓣膜附着缘长度分别为(20.36±3.51)mm、(21.27±4.64)mm;游离缘距窦底的距离分别为(15.15±2.67)mm、(16.54±4.33)mm。左、右冠状动脉开口距主动脉根部距离分别为(16.59±4.16)mm、(17.23±3.26)mm。主肺动脉长度(33.54±8.15)mm。结论:带瓣膜支架的大小和形状的设计应根据主动脉以及主肺动脉开口的大小及与周边结构的关系来选择。 展开更多

关键词 经导管 瓣膜 置换 应用解剖

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军队离休干部营养与健康状况调查分析 被引量：3

7

作者 黄燹 姚颖龙 王文净 《实用医药杂志》 2015年第1期87-88,共2页

军队离退休干部是国家的宝贵财富,其身体健康状况是各级组织十分关注的重点,也是落实为军服务保障的实质性体现。因此,军队老干部保健工作是现阶段我军保健工作中一项重要政治任务。近年来,面对我国生活水平的不断提高,老干部的“双高... 军队离退休干部是国家的宝贵财富,其身体健康状况是各级组织十分关注的重点,也是落实为军服务保障的实质性体现。因此,军队老干部保健工作是现阶段我军保健工作中一项重要政治任务。近年来,面对我国生活水平的不断提高,老干部的“双高期”即高龄化、高发病期的到来也相应加快,为了解军队老干部的健康状况,笔者对驻地干休所336名老干部进行了膳食营养素摄入调查、分析和评价,对老干部合理补充营养、平衡饮食提出了建议，为军队老干部慢性病的防治提供科学依据。 展开更多

关键词 军队老干部 营养 膳食 健康调查

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火神山医院新型冠状病毒肺炎患者心脏损害的超声影像学研究

8

作者 李珂 李顺飞 +5 位作者 何伟华 张明德 姚颖龙 张振华 朱贤胜 郭栋 《实用医药杂志》 2021年第3期197-200,208,共5页

目的对比观察新型冠状病毒肺炎(COVID-19)不同临床分型患者的心脏损伤情况。方法选取2020年2月—3月火神山医院收治的COVID-19感染患者62例,区分研究组(已确诊重型、危重型)和对照组(轻型、普通型),运用彩超仪器分别测量2组患者的心脏... 目的对比观察新型冠状病毒肺炎(COVID-19)不同临床分型患者的心脏损伤情况。方法选取2020年2月—3月火神山医院收治的COVID-19感染患者62例,区分研究组(已确诊重型、危重型)和对照组(轻型、普通型),运用彩超仪器分别测量2组患者的心脏结构、室壁运动、左心功能(EF值)、瓣膜反流、肺动脉压、心包积液等各项指标数据或情况。结果研究组各项指标数据均高于对照组,其中瓣膜反流、心包积液差异有统计学意义,且瓣膜反流是肺动脉增高相关的三尖瓣反流为主。结论该研究对于筛选重型、危重型COVID-19患者指标以及进行评估具有一定意义。 展开更多

关键词 新型冠状病毒肺炎 COVID-19 心脏损伤 超声

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自体窦房结细胞异位移植治疗缓慢型心律失常的实验研究 被引量：4

9

作者 张浩 姚颖龙 +4 位作者 段炼 宋智钢 邹毅清 宗刚军 徐志云 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第45期3208-3212,共5页

目的探索自体窦房结细胞异位移植,构建心室异位起搏灶治疗缓慢型心律失常的可行性。方法将健康成年犬16只随机分为移植组和对照组(每组8只)。移植组切取窦房结组织并制成细胞悬液后,注射到自体右心室近心尖部心肌内,对照组切取窦房结后... 目的探索自体窦房结细胞异位移植,构建心室异位起搏灶治疗缓慢型心律失常的可行性。方法将健康成年犬16只随机分为移植组和对照组(每组8只)。移植组切取窦房结组织并制成细胞悬液后,注射到自体右心室近心尖部心肌内,对照组切取窦房结后,于右心室相同部位注射等量培养液。2周后建立完全性房室传导阻滞动物模型并进行电生理检查。对移植组犬经股静脉注射异丙肾上腺素和阿托品,研究心率变化。免疫荧光染色观察移植的细胞存活状况及其与心室肌细胞形成的缝隙连接结构。结果消化分离成年犬窦房结得到的自主搏动的细胞结构和活性保持良好。建立完全性房室传导阻滞模型1 h 后,移植组犬心率(91±14)次/min 高于对照组(49±11)次/min(t=6.672,P<0.01),且此室性心律起源于细胞移植部位。注射异丙肾上腺素后,移植组室性心率由(95±11)次/min 增加至(118±15)次/min(t=3.497,P<0.01),而注射阿托品后室性心律无明显改变[分别为(95±11)次/min 和(101±17)次/min](t=0.838,P>0.05)。免疫荧光染色法证实,移植的细胞在移植部位存活,且细胞间有缝隙连接蛋白形成。结论成年犬窦房结细胞移植到自体右心室壁,能够提高完全性房室传导阻滞后的心室率,且对异丙肾上腺素反应良好,对阿托品无明显反应。移植的细胞可与周围细胞形成缝隙连接。 展开更多

关键词 窦房结 细胞移植 移植 自体 心动过缓

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开胸经导管植入带瓣膜支架置换肺动脉瓣的实验观察 被引量：2

10

作者 宗刚军 白元 +7 位作者 秦永文 姜海滨 张浩 姚颖龙 邹毅清 赵仙先 吴弘 黄新苗 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期151-155,共5页

目的探讨开胸经导管植入带瓣膜支架置换肺动脉瓣的可行性以及6个月的实验效果。方法以新鲜的羊心包为材料，给予0．6％戊二醛浸泡36h后缝合在瓣膜环上，并将其固定在镍钛记忆合金自膨胀支架上，制成带瓣膜肺动脉支架。选择体重为（23．5... 目的探讨开胸经导管植入带瓣膜支架置换肺动脉瓣的可行性以及6个月的实验效果。方法以新鲜的羊心包为材料，给予0．6％戊二醛浸泡36h后缝合在瓣膜环上，并将其固定在镍钛记忆合金自膨胀支架上，制成带瓣膜肺动脉支架。选择体重为（23．5±3．1）kg的健康羊，通过开胸、穿刺右心室前壁，将带瓣膜支架经导管植入至肺动脉瓣处，置换自身肺动脉瓣膜，随访6个月，观察实验效果。结果1只羊术后4个月死于肺动脉支架内血栓形成，4只羊随访6个月，心脏彩色超声、右心室以及肺动脉瓣上造影证实支架的位置及瓣膜功能良好，64排CT检查发现支架无移位。结论开胸经导管植入带瓣膜支架置换肺动脉瓣方法可行，随访6个月效果理想。 展开更多

关键词 心脏外科手术 心脏导管插入术 肺动脉瓣 支架

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窦房结细胞自体移植治疗完全性房室传导阻滞 被引量：1

11

作者 张浩 宋智钢 +4 位作者 段炼 姚颖龙 李白翎 黄盛东 徐志云 《中华胸心血管外科杂志》 CSCD 北大核心 2008年第6期402-405,共4页

目的探索窦房结细胞自体移植到右室前壁心肌内，治疗心脏术后完全性房室传导阻滞的可行性。方法取健康杂种犬20只，随机分为移植组和对照组，每组10只。安置电子心脏起搏器后，获取移植组犬窦房结组织并制成细胞悬液，经荧光标记后注射... 目的探索窦房结细胞自体移植到右室前壁心肌内，治疗心脏术后完全性房室传导阻滞的可行性。方法取健康杂种犬20只，随机分为移植组和对照组，每组10只。安置电子心脏起搏器后，获取移植组犬窦房结组织并制成细胞悬液，经荧光标记后注射到移植组自体右心室前壁心肌内。对照组窦房结行Van Gieson染色，并与心耳肌组织比较。对照组右心室相同部位注射等量培养液。两周后射频消融希氏束，建立完全性房室传导阻滞动物模型，并进行心脏电生理研究。对移植组犬经股静脉应用异丙肾上腺素，研究心律变化。结果急性分离的成年犬窦房结细胞多为长梭形，细胞活性好。获取的窦房结组织行Van Gieson染色后可见其典型结构特征。建立完全性房室传导阻滞犬模型1h后，移植组心率高于对照组（P〈0．05），且此室性自主心律起源于细胞移植部位。注射异丙肾上腺素后，移植心室律变化明显（P〈0．05）。结论成年犬窦房结细胞移植到自体右室前壁心肌内，能够提高完全性房室传导阻滞后的心室律，并对异丙肾上腺素具有良好的反应性。 展开更多

关键词 窦房结/细胞学 自体移植 心脏 传导阻滞

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成熟猪窦房结起搏细胞的生物学特性

12

作者 段炼 徐志云 +2 位作者 宋智钢 张浩 姚颖龙 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期130-130,共1页

窦房结是心脏传导系统的重要组成部分。将窦房结细胞分离后深入研究其形态与电生理功能已得到很多学者的重视。窦房结起搏细胞在构建生物起搏器领域中具有重要地位。本研究旨在观察成熟猪窦房结细胞中起搏细胞的生物学特性。

关键词 窦房结起搏细胞 生物学特性 成熟 心脏传导系统 猪 电生理功能 生物起搏器 窦房结细胞

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生物起搏与电子起搏“串联”起搏心脏的研究

13

作者 张浩 宋智钢 +5 位作者 姚颖龙 段炼 邹毅清 李白翎 黄盛东 徐志云 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1100-1102,共3页

目的观察自体窦房结细胞移植与电子起搏器“串联”起搏心脏的作用。方法健康成年犬12条，随机分为实验组和对照组（n=6）。所有犬安置电子心脏起搏器以保证存活，然后切取窦房结。将实验组犬窦房结组织消化成细胞悬液后，注射到自体右... 目的观察自体窦房结细胞移植与电子起搏器“串联”起搏心脏的作用。方法健康成年犬12条，随机分为实验组和对照组（n=6）。所有犬安置电子心脏起搏器以保证存活，然后切取窦房结。将实验组犬窦房结组织消化成细胞悬液后，注射到自体右室前壁心肌内，对照组相同部位注射等量培养液。2周后射频消融希氏束，建立完全性房室传导阻滞犬模型，观察并记录犬心律。对实验组犬经股静脉应用异丙肾上腺素，研究心律变化。免疫荧光染色观察移植的细胞存活状况及其与心室肌细胞形成的缝隙连接结构。结果建立完全性房室传导阻滞犬模型1h后，实验组心率高于对照组（P〈0．01）。注射异丙肾上腺素后，实验组心率变化明显（P〈0．01）。实验组心律在14d内保持稳定。免疫荧光染色法证实，移植的细胞在移植部位存活，且细胞间有缝隙连接结构形成。结论自体窦房结细胞移植是一种对儿茶酚胺类物质的调节作用反应敏感的生物起搏技术，并且在与电子起搏技术串联后，其起搏作用在14d内保持稳定。移植的窦房结细胞可与周围细胞形成电一机械耦联的结构基础。 展开更多

关键词 生物起搏 电子起搏 窦房结/细胞学 自体移植 心脏

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