PCR技术检测金黄色葡萄球菌进展 被引量：32

1

作者 姜延龙 张宇 +1 位作者 田波 霍贵成 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第5期265-269,共5页

金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,S.aureus)是引起食物中毒的主要致病菌之一,其传统方法包括选择性培养、生化鉴定等步骤,耗时长、灵敏性差,很难满足食品安全快速检测要求。PCR技术是近年来广泛应用于食品中致病微生物快速检测的... 金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,S.aureus)是引起食物中毒的主要致病菌之一,其传统方法包括选择性培养、生化鉴定等步骤,耗时长、灵敏性差,很难满足食品安全快速检测要求。PCR技术是近年来广泛应用于食品中致病微生物快速检测的现代方法之一,其目的基因多种多样,主要包括耐药性相关基因、毒素基因、酶基因及多种特异性鉴别基因。本文综述了PCR技术应用于金黄色葡萄球菌检测的各种目的基因,并简要介绍了多重PCR及实时定量PCR等新技术的应用。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 PCR 基因

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乳酸菌抗噬菌体机制研究进展 被引量：9

2

作者 姜延龙 霍贵成 田波 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2005年第8期30-33,共4页

本文首先对乳酸噬菌体的种类、侵入过程进行总结,针对噬菌体的侵入过程介绍了已发现的一些乳酸菌自身防御系统,尤其是与现代生物技术密切相关的控制基因的发现;最终归纳出现阶段一些可行的防治噬菌体手段,包括质粒遗传控制、基因重组技... 本文首先对乳酸噬菌体的种类、侵入过程进行总结,针对噬菌体的侵入过程介绍了已发现的一些乳酸菌自身防御系统,尤其是与现代生物技术密切相关的控制基因的发现;最终归纳出现阶段一些可行的防治噬菌体手段,包括质粒遗传控制、基因重组技术、反义RNA技术等。 展开更多

关键词 乳酸菌 噬菌体 基因工程

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Nisin生物合成相关基因分析 被引量：1

3

作者 姜延龙 霍贵成 《生物技术》 CAS CSCD 2005年第2期79-81,共3页

Nisin是乳酸乳球菌某些菌株产生的一种对细菌芽孢和多种革兰氏阳性菌有较好杀伤作用的小肽,广泛用于食品加工、医疗保健等诸多领域。合成Nisin的基因位于染色体上一可接合型蔗糖转座子,由三个启动子nisA、nisR、nisF控制的nisA/ZBT CIPR... Nisin是乳酸乳球菌某些菌株产生的一种对细菌芽孢和多种革兰氏阳性菌有较好杀伤作用的小肽,广泛用于食品加工、医疗保健等诸多领域。合成Nisin的基因位于染色体上一可接合型蔗糖转座子,由三个启动子nisA、nisR、nisF控制的nisA/ZBT CIPRKFEG构成,其中nisA因具有更强的启动强度,且表达诱导物和宿主菌均为食品级,方便、经济、安全,应用最为广泛。其他基因分别在Nisin合成、调控过程中起不同作用:自身保护性基因ninI、nisF、nisE、nisG的表达,使菌体获得对Nisin较好的耐受性;NisB和NisC与翻译后修饰有关;NisT可促进乳链菌肽前体转移至胞外;NisP则与nisin前体信号肽的切除有关。 展开更多

关键词 Nisin启动子 基因簇 功能

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动物医学专业分子生物学教学改革的初步探讨

4

作者 姜延龙 王春凤 杨桂莲 《畜牧兽医科学（电子版）》 2017年第10期19-19,共1页

分子生物学是研究核酸,蛋白质等生物大分子的结构与功能,并从分子水平上阐明蛋白质与蛋白质,蛋白质与核酸之间的相互作用及其基因表达调控机理的学科。笔者结合近年来的分子生物学教学经验,就如何让动物医学专业本科生更好的理解和掌握... 分子生物学是研究核酸,蛋白质等生物大分子的结构与功能,并从分子水平上阐明蛋白质与蛋白质,蛋白质与核酸之间的相互作用及其基因表达调控机理的学科。笔者结合近年来的分子生物学教学经验,就如何让动物医学专业本科生更好的理解和掌握分子生物学知识进行了简单探索。 展开更多

关键词 分子生物学 多媒体教学 新兴疫苗技术

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乳酸菌作为DNA疫苗载体的研究进展 被引量：8

5

作者 刘晶 杨桂连 +1 位作者 王春凤 姜延龙 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第7期67-69,共3页

乳酸菌（lactic acid bacteria,LAB）属于革兰阳性、兼性厌氧菌,其基因组中GC含量较低,是一类可以利用碳水化合物发酵产生乳酸的一类菌的总称,包括肠球菌、乳杆菌、乳球菌、明串珠菌、片球菌、链球菌和双歧杆菌等众多种属,被广泛地应用... 乳酸菌（lactic acid bacteria,LAB）属于革兰阳性、兼性厌氧菌,其基因组中GC含量较低,是一类可以利用碳水化合物发酵产生乳酸的一类菌的总称,包括肠球菌、乳杆菌、乳球菌、明串珠菌、片球菌、链球菌和双歧杆菌等众多种属,被广泛地应用于食品发酵、医药生产、保健药物及饲料添加剂等工业,美国食品和药品监督管理局（FDA）将乳酸菌认定为安全的食品级微生物[1]。 展开更多

关键词 DNA疫苗载体 乳酸菌 食品发酵 兼性厌氧菌 碳水化合物 饲料添加剂 GC含量 明串珠菌

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创新性人才培养模式下的动物微生物学课程改革与实践 被引量：3

6

作者 张蕾 胡静涛 +7 位作者 徐凤宇 王建忠 康元环 姜延龙 胡桂学 李影 王好 钱爱东 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第13期130-133,共4页

动物微生物学是吉林农业大学动物科学技术学院-动物医学学院的一门重要专业基础课,面向动物生产类本科生开展教学活动。动物微生物学理论知识和实验技术广泛渗透于其他相关专业课程,对动物疾病的预防、诊断、治疗及控制人畜共患传染病... 动物微生物学是吉林农业大学动物科学技术学院-动物医学学院的一门重要专业基础课,面向动物生产类本科生开展教学活动。动物微生物学理论知识和实验技术广泛渗透于其他相关专业课程,对动物疾病的预防、诊断、治疗及控制人畜共患传染病的传播具有极其重要的意义。笔者在吉林农业大学"卓越人才培养计划"基础上,结合实际,通过教学资源全方位多角度整合、双线教学相融合、创新性研究实践、课程思政的教学探索、重视评价导向等五个维度的改革,着力提升学生的创新意识、创新能力和科研素养,为培养德才兼备、善于创新、适应经济社会发展需要的高素质人才提供助力。 展开更多

关键词 动物微生物学 创新性人才培养 双线教学 研究实践 思政教育

原文传递

基于“长江学者”团队模式下的兽医免疫学基础课程改革与实践 被引量：2

7

作者 胡静涛 杨文涛 +2 位作者 康元环 姜延龙 王春凤 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第23期147-150,共4页

基于教育部卓越农林人才培养计划中"培养拔尖创新人才"的要求,围绕"两性一度"的建设标准和"立德树人""以本为本"的根本任务,吉林农业大学动物科学技术学院充分整合"长江学者"团队平... 基于教育部卓越农林人才培养计划中"培养拔尖创新人才"的要求,围绕"两性一度"的建设标准和"立德树人""以本为本"的根本任务,吉林农业大学动物科学技术学院充分整合"长江学者"团队平台资源优势,针对动物医学专业英才班兽医免疫学基础课程,从目标梳理、教学内容设计与教学策略实施及课程考核改革等方面展开了尝试性的探索,学生自主学习和创新实践能力都有较为明显的提高。笔者对吉林农业大学动物科学技术学院针对兽医免疫学基础课程的具体改革措施进行了梳理,供同行参考。 展开更多

关键词 “长江学者”团队 资源优势 兽医免疫学基础 课程改革 教学策略 创新人才培养

原文传递

表达鸡柔嫩艾美耳球虫表面抗原TATA4与鸡IL-IL-2的侵入型乳酸菌构建及鉴定 被引量：1

8

作者 刘洋 姜延龙 +4 位作者 刘晶 张赞 高兴 王春凤 杨桂连 《中国家禽》 北大核心 2019年第10期20-25,共6页

为探究鸡柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)表面抗原TA4在植物乳杆菌NC8的表达情况,使用PCR扩增TA4片段,同时使用细胞因子ChIL-2作为免疫佐剂,应用猪圆环病毒2A肽(P2A)序列使抗原与免疫佐剂共表达,连接有金黄色葡萄球菌的纤连蛋白结合蛋白A(Fn... 为探究鸡柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)表面抗原TA4在植物乳杆菌NC8的表达情况,使用PCR扩增TA4片段,同时使用细胞因子ChIL-2作为免疫佐剂,应用猪圆环病毒2A肽(P2A)序列使抗原与免疫佐剂共表达,连接有金黄色葡萄球菌的纤连蛋白结合蛋白A(FnBPA)的409载体,构建两株重组侵入型乳酸菌NC8 pSIP 409-FnBPA-pgsA′-TA4和NC8 pSIP 409-FnBPA-pgsA′-TA4-IL2。使用自制多克隆抗体通过Western blot检测重组菌的蛋白表达情况。结果表明,两种侵入型目的蛋白TA4和IL-2使用多克隆抗体检测均可成功检测到蛋白表达,为后期动物试验及益生菌口服疫苗的制备奠定了基础。 展开更多

关键词 侵入型乳酸菌 鸡柔嫩艾美耳球虫 TA4 ChIL-2

原文传递

兽医免疫学实验的教学改革与探索 被引量：1

9

作者 杨文涛 王春凤 +7 位作者 杨桂连 钱爱东 胡静涛 叶丽萍 姜延龙 王建忠 黄海斌 石春卫 《农村科学实验》 2017年第4期107-108,共2页

兽医免疫学实验教学在培养合格的动物医学专业学生中发挥着极其重要的作用，兽医免疫学实验教学的改革与探索是一项长期、艰巨的任务。我们在分析当前实验教学存在的问题基础上，在实验教学内容，培养学生实验兴趣，有机结合教师先进的... 兽医免疫学实验教学在培养合格的动物医学专业学生中发挥着极其重要的作用，兽医免疫学实验教学的改革与探索是一项长期、艰巨的任务。我们在分析当前实验教学存在的问题基础上，在实验教学内容，培养学生实验兴趣，有机结合教师先进的科研成果与实验教学，考核体系等方面进行探索和改革，旨在提高兽医免疫学实验教学质量，培养合格的兽医专业人才，满足社会的需求。 展开更多

关键词 兽医免疫学 实验教学 教学改革 探索

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共表达基因Ⅱ型新城疫病毒F、HN蛋白mcDNA载体的构建

10

作者 王成宇 姚心茹 +4 位作者 刘晶 胡译文 赵维静 姜延龙 王春凤 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第23期1-5,263,共6页

为了构建共表达基因Ⅱ型新城疫病毒(NDV)F、HN蛋白的mcDNA载体,试验采用融合PCR技术将合成的Ⅱ型NDV的F基因片段与HN基因片段融合并携带Flag标签,构建pUC-F-HN-Flag基因片段,然后与mcDNA载体MN512A连接构建重组质粒MN512A-pUC-F-HN-opt-... 为了构建共表达基因Ⅱ型新城疫病毒(NDV)F、HN蛋白的mcDNA载体,试验采用融合PCR技术将合成的Ⅱ型NDV的F基因片段与HN基因片段融合并携带Flag标签,构建pUC-F-HN-Flag基因片段,然后与mcDNA载体MN512A连接构建重组质粒MN512A-pUC-F-HN-opt-Flag,采用菌落PCR扩增与酶切方法对重组质粒进行鉴定;利用阿拉伯糖诱导剂诱导重组质粒产生mcDNA;将重组质粒转染至HEK-293T细胞中,收集细胞总蛋白并通过Western-blot与间接免疫荧光试验检测蛋白表达情况。结果表明:通过F、HN基因片段的扩增与融合成功构建pUC-F-HN-Flag基因片段,菌落PCR扩增与酶切结果证明重组质粒连接成功,经诱导剂诱导重组质粒成功产生mcDNA,Western-blot及间接免疫荧光试验均检测到目的蛋白。说明重组质粒MN512A-pUC-F-HN-opt-Flag构建成功。 展开更多

关键词 新城疫病毒 融合PCR mcDNA F、HN蛋白 共表达 转染

原文传递

基于长江学者团队的动物医学创新人才接力培养模式的建立与实践

11

作者 王春凤 姜延龙 +3 位作者 杨桂连 杨文涛 胡静涛 叶丽萍 《中国畜牧兽医文摘》 2018年第4期252-252,共1页

现代社会的高速发展显著增加了大规模传染性疫病暴发风险,如最近几年出现的中东呼吸综合征病毒、埃博拉病毒及塞卡病毒等,对人类社会公共安全造成了极大危害。在这种大背景下,高等农业院校在动物医学专业人才培养方面应积极的做出应对... 现代社会的高速发展显著增加了大规模传染性疫病暴发风险,如最近几年出现的中东呼吸综合征病毒、埃博拉病毒及塞卡病毒等,对人类社会公共安全造成了极大危害。在这种大背景下,高等农业院校在动物医学专业人才培养方面应积极的做出应对。传统的动物医学人才培养相比其他专业而言耗时更久,探索新型高级动物医学人才培养模式十分必要。 展开更多

关键词 人才培养模式 动物医学 创新人才 长江学者 呼吸综合征病毒 社会公共安全 专业人才培养 接力

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肠道菌群与B细胞发育的相互调节作用 被引量：6

12

作者 陈毅秋 石春卫 +2 位作者 姜延龙 叶丽萍 王春凤 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期140-143,共4页

动物肠道是一个栖息着大量菌群、开放的生态系统,这些肠道菌群与宿主之间建立了稳定的互利共生关系,维持肠道内的动态平衡。黏膜免疫学的发展揭示了在正常生理状态下肠道菌群可以促进宿主免疫系统的发育，

关键词 肠道菌群 B细胞 宿主免疫系统 细胞发育 黏膜免疫 免疫球蛋白 互利共生 正常生理状态 孤立淋巴滤泡 拟杆菌

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组成型表达FnBPA的植物乳杆菌的构建及免疫初步评价

13

作者 周明 张涛 +4 位作者 谈阳 桑紫璇 黄群涛 王春凤 姜延龙 《兽医导刊》 2018年第10期210-213,共4页

为了构建侵入型乳酸菌,将来源于金黄色葡萄球菌的侵入型蛋白FnBPA基因插入乳酸菌-大肠杆菌穿梭表达载体pOri23中,构建pOri23-FnBPA质粒,并通过电转化的方法将其电转到植物乳杆菌NC8中,通过Western-blot检测FnBPA蛋白的表达情况.结果表... 为了构建侵入型乳酸菌,将来源于金黄色葡萄球菌的侵入型蛋白FnBPA基因插入乳酸菌-大肠杆菌穿梭表达载体pOri23中,构建pOri23-FnBPA质粒,并通过电转化的方法将其电转到植物乳杆菌NC8中,通过Western-blot检测FnBPA蛋白的表达情况.结果表明目的蛋白FnBPA在组成型启动子Pori23作用下成功表达于NC8细菌表面.重组菌免疫Balb/c小鼠后,以流式细胞术检测了脾脏中树突状细胞数量,发现该重组菌可显著增加脾脏中CD11c＋树突状细胞数量,为后期乳酸菌侵袭细胞试验奠定了基础. 展开更多

关键词 植物乳杆菌 FnBPA 组成型表达

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表面展示共表达HA-DCpep蛋白乳酸菌的构建

14

作者 杨锐 曾飞雪 +2 位作者 高航 龚佳豪 姜延龙 《兽医导刊》 2018年第8期212-214,共3页

为了构建HA-DCpep融合基因重组乳酸菌并检测其表达产物的反应原性,本实验采用pGe-HA2质粒为模板,以PCR方法将HA基因DCpep融合,将得到的融合产物进行双酶切,与pSIP409-pgsA’XbaI和HindIII双酶切产物链接,得到质粒pSIP409-pgsA’-HA-DCp... 为了构建HA-DCpep融合基因重组乳酸菌并检测其表达产物的反应原性,本实验采用pGe-HA2质粒为模板,以PCR方法将HA基因DCpep融合,将得到的融合产物进行双酶切,与pSIP409-pgsA’XbaI和HindIII双酶切产物链接,得到质粒pSIP409-pgsA’-HA-DCpep,再经过电转使其到植物乳杆菌NC8中,经Western-blot检测目的蛋白表达情况.结果：构建的NC8-pSIP-409-pgsA’-HA2-DCpep重组蛋白表达成功,而且具有反应原性,为禽流感病毒口服疫苗的研制奠定基础. 展开更多

关键词 HA-Dcpep NC8-pSIP-409-pgsA’-HA2-DCpep HA2 植物乳杆菌 新功能型乳酸菌 禽流感疫苗

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基因工程乳酸菌作为活载体表达外源蛋白及疾病防治研究进展 被引量：3

15

作者 刘琼 陈宏亮 +1 位作者 姜延龙 王春凤 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第6期76-80,共5页

乳酸菌是一类可以发酵碳水化合物产生乳酸的兼性厌氧菌总称,包括乳球菌、乳杆菌、链球菌、片球菌和双歧杆菌等,美国食品和药品监督管理局(FDA)将许多乳酸菌定义为“食品级”微生物,极少数如化脓性链球菌,肺炎链球菌是致病菌。乳酸菌可... 乳酸菌是一类可以发酵碳水化合物产生乳酸的兼性厌氧菌总称,包括乳球菌、乳杆菌、链球菌、片球菌和双歧杆菌等,美国食品和药品监督管理局(FDA)将许多乳酸菌定义为“食品级”微生物,极少数如化脓性链球菌,肺炎链球菌是致病菌。乳酸菌可以调节肠道菌群组成从而维持肠道稳态,提高免疫力;还可竞争型地占位,定殖在肠道表面诱导黏膜液以及肠道上皮细胞抗菌肽(AMP)的产生[1]. 展开更多

关键词 乳酸菌 基因工程 肠道上皮细胞 活载体 肺炎链球菌 药品监督管理局 防治 疾病

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产肠毒素大肠杆菌K88ac-STa-LTB嵌合抗原多克隆抗体制备及植物乳杆菌表面表达研究

16

作者 刘琼 刘永仕 +3 位作者 尚晓敏 李桂玲 姜延龙 王春凤 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第1期13-17,25,175,共7页

为了研究植物乳杆菌(Lactobacillus,plantarum,L.plantarum)表面表达黏附素-肠毒素(K88ac—STa—LTB)嵌合抗原的可行性,试验利用原核表达载体pET28a表达纯化此嵌合抗原,蛋白复性后免疫Babl/c小鼠制备多克隆抗体,以制备的多克隆抗体作为... 为了研究植物乳杆菌(Lactobacillus,plantarum,L.plantarum)表面表达黏附素-肠毒素(K88ac—STa—LTB)嵌合抗原的可行性,试验利用原核表达载体pET28a表达纯化此嵌合抗原,蛋白复性后免疫Babl/c小鼠制备多克隆抗体,以制备的多克隆抗体作为一抗,采用Westem-blot、流式细胞术及间接免疫荧光试验研究此嵌合抗原在植物乳杆菌表面表达情况。结果表明:K88ac—STa—LTB嵌合抗原在大肠杆菌中以包涵体形式表达,纯化并复性的重组蛋白大小约为32.5 ku,制备的抗体效价为121b。重组菌株NC8-pLP1261-8576表达的K88ac-STa-LTB嵌合抗原经Western-blot分析,能被鼠抗LTB单克隆抗体及自制的鼠抗K88ac-STa-LTB多克隆抗体识别,流式细胞术及荧光显微镜观察证明此嵌合抗原在菌体表面表达。 展开更多

关键词 植物乳杆菌 产肠毒素大肠杆菌 黏附素-肠毒素嵌合抗原 多克隆抗体 表面表达

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建筑设计中绿色建筑技术优化结合分析 被引量：3

17

作者 姜延龙 《住宅与房地产》 2019年第18期70-70,共1页

文章从绿色建筑技术的功能出发,研究绿色建筑技术对建筑设计的优化作用,着力完善建筑设计工作体系,把绿色建筑技术与建筑设计充分结合,从而达到提高建筑整体设计质量,满足建筑实用功能的目标。

关键词 绿色建筑技术 建筑设计 优化结合

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论住宅建筑设计中的公共空间设计 被引量：2

18

作者 姜延龙 《住宅与房地产》 2019年第5期33-33,共1页

居民是城市居住区的主体,居住区的设计和建设从根本上来讲,是为了在最大程度上满足居民的物质和精神生活需要。在住宅建筑设计过程中,要以满足居民的心理需求和行为需求为基础,高度关注公共空间的设计内容,使住宅建筑设计充分满足可持... 居民是城市居住区的主体,居住区的设计和建设从根本上来讲,是为了在最大程度上满足居民的物质和精神生活需要。在住宅建筑设计过程中,要以满足居民的心理需求和行为需求为基础,高度关注公共空间的设计内容,使住宅建筑设计充分满足可持续发展的内在需求。基于此,文章分析了住宅建筑设计中的公共空间设计相关内容。 展开更多

关键词 住宅建筑 公共空间 设计

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表达结核分枝杆菌ESAT-6-Ag85A基因的侵入型乳酸菌免疫特性研究 被引量：4

19

作者 刘晶 张赞 +3 位作者 刘洋 杨桂连 姜延龙 王春凤 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期10-14,共5页

目的:研究表达ESAT-6-Ag85A(ES85A)融合基因的侵入型乳酸菌对小鼠体内免疫特性的影响。方法:将真核表达载体p Valac与ES85A连接构建真核表达质粒,并将其分别电转到重组乳酸菌NC8-pSIP-409和NC8-pSIP-409-FnBPA感受态中,构建双质粒的乳酸... 目的:研究表达ESAT-6-Ag85A(ES85A)融合基因的侵入型乳酸菌对小鼠体内免疫特性的影响。方法:将真核表达载体p Valac与ES85A连接构建真核表达质粒,并将其分别电转到重组乳酸菌NC8-pSIP-409和NC8-pSIP-409-FnBPA感受态中,构建双质粒的乳酸菌p Valac-ES85A/409和p Valac-ES85A/Fn BPA。将其免疫BALB/c小鼠,检测表达ES85A的侵入型乳酸菌对小鼠树突状细胞(DCs)亚群CD80和CD83的影响以及血清中细胞因子的表达水平。结果:Western blot和免疫荧光证明ES85A蛋白成功表达;与空载体组相比,在小鼠免疫表达ES85A的侵入型乳酸菌后,小鼠脾细胞中CD11^+CD80^+(P<0. 001)和CD11^+CD83^+(P<0. 01)以及血清中细胞因子IL-4(P<0. 05)的表达都有所增加。结论:表达ES85A的侵入型乳酸菌能促进小鼠体内DCs的分化和成熟以及提高血清中细胞因子IL-4的表达,为后期研制抗结核分枝杆菌的DNA疫苗制剂奠定了基础。 展开更多

关键词 ES85A 细胞转染 FnBPA 树突状细胞

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锚定表达猪IFN-λ3重组植物乳杆菌的构建及其抗PEDV效果的检测 被引量：2

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作者 刘永仕 刘琼 +5 位作者 赵唯 黄海斌 石春卫 姜延龙 杨桂连 王春凤 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期345-350,共6页

为构建锚定表达猪IFN-λ3的重组植物乳杆菌(L.plantarum),并验证其抗病毒活性,本研究将猪IFN-λ3基因插入大肠杆菌-乳酸菌穿梭锚定表达载体pSIP-409-pgsA'中构建重组质粒pSIP-409-pgsA'-IFN-λ3,将其电转化至植物乳杆菌NC8中获... 为构建锚定表达猪IFN-λ3的重组植物乳杆菌(L.plantarum),并验证其抗病毒活性,本研究将猪IFN-λ3基因插入大肠杆菌-乳酸菌穿梭锚定表达载体pSIP-409-pgsA'中构建重组质粒pSIP-409-pgsA'-IFN-λ3,将其电转化至植物乳杆菌NC8中获得重组pSIP-409-pgsA'-IFN-λ3/L.plantarum。经清酒乳杆菌素(SPPIP)诱导后用His标签单克隆抗体经westernblot、间接免疫荧光检测目的蛋白的锚定表达情况。结果显示,猪IFN-λ3在重组植物乳杆菌表面锚定表达。利用重组菌刺激细胞后通过荧光定量PCR测定IPEC-J2/PEDV系统中猪流行性腹泻病毒(PEDV)载量,并检测该重组菌刺激细胞后干扰素刺激基因(ISGs)的相对转录水平。结果显示,该重组菌能够显著抑制PEDV在IPEC-J2中的复制,并能诱导细胞中ISGs(OASL、IFITMs)的高转录水平,具有抗病毒作用。本研究为PEDV的预防和治疗提供可行方案。 展开更多

关键词 猪IFN-λ3 重组植物乳杆菌 锚定表达 抗病毒

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