一株大黄鱼虹彩病毒的分离鉴定及多克隆抗体的制备 被引量：1

1

作者 刘笑茹 郑义华 +5 位作者 赵路品 高娃 祁婧婷 吕利群 胡鲲 姜有声 《水产学杂志》 CAS 2024年第2期39-45,共7页

2021年7月,浙江省象山某养殖场养殖的大黄鱼(Larimichthys crocea)出现类似大黄鱼虹彩病毒引起的疾病。采用鲤上皮瘤细胞培养和病毒主要衣壳蛋白测序分析的方法,从患病的大黄鱼中分离到一株病毒。该病毒接种到鲤上皮瘤细胞(EPC)后出现... 2021年7月,浙江省象山某养殖场养殖的大黄鱼(Larimichthys crocea)出现类似大黄鱼虹彩病毒引起的疾病。采用鲤上皮瘤细胞培养和病毒主要衣壳蛋白测序分析的方法,从患病的大黄鱼中分离到一株病毒。该病毒接种到鲤上皮瘤细胞(EPC)后出现空斑、脱落的细胞病变症状。根据虹彩病毒MCP和ATPase基因保守序列设计特异性引物对病毒组织样本进行PCR扩增,得到分别为1 367 bp和740 bp的目的基因片段。将MCP基因扩增片段测序,经BLAST对比及系统发育树聚类分析,确定该分离的病毒属虹彩病毒科细胞肿大病毒属。通过蔗糖密度梯度离心纯化,用透射电镜观察该病毒粒子呈正六边形,直径为120~150 nm。用纯化病毒作为抗原免疫小鼠获得抗大黄鱼虹彩病毒的多克隆抗体,效价为1∶7 000;通过SDS-PAGE和Western blotting初步确定3个免疫蛋白。本研究为大黄鱼虹彩病毒纯化提供一种新方法,并初步分离出免疫蛋白,为该病毒相关分子生物学研究、蛋白研究以及疫苗制备等提供理论依据。 展开更多

关键词 大黄鱼 虹彩病毒 细胞肿大病毒 分离鉴定 病毒纯化 多克隆抗体

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重组酶聚合酶扩增技术结合侧向流动试纸条快速检测锦鲤疱疹病毒 被引量：5

2

作者 楚馨 冯梓钊 +3 位作者 姜有声 王浩 吕利群 许丹 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期866-873,共8页

为建立一种快速、灵敏并适用于临床检测Ⅲ型鲤疱疹病毒(CyHV-3,KHV)的方法,实验根据KHV SphI-5基因的保守序列片段设计引物及探针,采用重组酶聚合酶扩增技术结合侧流层析试纸条(RPA-LFD)检测KHV。重组酶聚合酶扩增技术(RPA)具恒温扩增... 为建立一种快速、灵敏并适用于临床检测Ⅲ型鲤疱疹病毒(CyHV-3,KHV)的方法,实验根据KHV SphI-5基因的保守序列片段设计引物及探针,采用重组酶聚合酶扩增技术结合侧流层析试纸条(RPA-LFD)检测KHV。重组酶聚合酶扩增技术(RPA)具恒温扩增及高灵敏度特点,简化了设备要求的同时又能做到高效检测病毒,再结合侧向流动试纸条(LFD)将RPA结果快速地可视化,提高了该疾病的检测效率。结果表明,在38℃的最适反应温度下,采用RPA-AGE技术仅需10min便可检测出病原的目标片段,结合LFD方法仅需5min便可将RPA结果通过试纸条可视化呈现。研究研发的KHV RPA-LFD检测方法简单、快捷,可为实验条件有限的养殖场快速诊断需求提供技术支撑。 展开更多

关键词 快速检测 重组酶聚合酶扩增技术 侧向流动试纸条 锦鲤疱疹病毒

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对虾白斑综合征病毒囊膜蛋白VP19的单克隆抗体制备及其定位 被引量：8

3

作者 姜有声 战文斌 +1 位作者 程顺峰 王世表 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期69-74,共6页

为了更好地研究对虾白斑综合征病毒(WSSV)蛋白VP19在WSSV感染过程中的作用,利用VP19的单克隆抗体直接对VP19进行了定位。从患白斑综合征的中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)鳃丝中提取WSSV,将提纯的WSSV经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰... 为了更好地研究对虾白斑综合征病毒(WSSV)蛋白VP19在WSSV感染过程中的作用,利用VP19的单克隆抗体直接对VP19进行了定位。从患白斑综合征的中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)鳃丝中提取WSSV,将提纯的WSSV经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,然后洗脱提纯其病毒蛋白VP19并免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞融合,用间接免疫荧光技术(IFAT)和Western-Blot技术筛选出1株阳性杂交瘤细胞,将检测出的阳性杂交瘤细胞经有限稀释法克隆,研制出抗VP19的单抗,再利用免疫胶体金技术对病毒蛋白VP19进行定位,结果显示,胶体金粒子位于WSSV病毒的囊膜上,说明病毒蛋白VP19位于WSSV囊膜上。 展开更多

关键词 对虾白斑综合征病毒 VP19 单克隆抗体 定位

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一种改进的对虾白斑综合征病毒提纯方法 被引量：5

4

作者 姜有声 战文斌 +1 位作者 程顺峰 王世表 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期372-375,共4页

对虾白斑综合征病毒（WSSV）的囊膜蛋白在提纯的过程中易脱落，用传统的密度梯度离心方法不易获得完整的病毒粒子，对传统的蔗糖密度梯度离心方法加以改进后，可以获得大量完整的病毒粒子。用患白斑综合征病毒病的中国对虾鳃制备WSSV粗... 对虾白斑综合征病毒（WSSV）的囊膜蛋白在提纯的过程中易脱落，用传统的密度梯度离心方法不易获得完整的病毒粒子，对传统的蔗糖密度梯度离心方法加以改进后，可以获得大量完整的病毒粒子。用患白斑综合征病毒病的中国对虾鳃制备WSSV粗提液，感染螯虾（Cambarus proclarkii），选取25％的蔗糖溶液用作病虾鳃的匀浆液，然后经蔗糖密度梯度离心，分取各带负染后电镜观察，大量完整的病毒位于46％-52％蔗糖梯度之间，病毒粒子末端带有很长的尾；而病毒裸露的核衣壳位于40％～46％蔗糖梯度之间；在57％～62％之间观察到较多完整病毒粒子和少量细菌。实验结果表明改进的病毒提纯方法较好，可得到大量完整的带囊膜的病毒颗粒。 展开更多

关键词 白斑综合征病毒 病毒提纯 完整病毒

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白斑综合征病毒的体外增殖研究 被引量：2

5

作者 姜有声 邢婧 +1 位作者 王世表 战文斌 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第B12期93-96,共4页

用10-1～10-6浓度白斑综合征病毒(WSSV)梯度稀释液感染原代培养的中国对虾血细胞，利用相差显微镜连续5d定时观察了血细胞的死亡情况；用10-3浓度病毒液感染培养的血细胞不同时间和10-1～10-8浓度病毒液感染培养的血细胞10d，通过WSSV... 用10-1～10-6浓度白斑综合征病毒(WSSV)梯度稀释液感染原代培养的中国对虾血细胞，利用相差显微镜连续5d定时观察了血细胞的死亡情况；用10-3浓度病毒液感染培养的血细胞不同时间和10-1～10-8浓度病毒液感染培养的血细胞10d，通过WSSV的混合单抗和过氧化物酶(HRP)联二抗进行免疫吸附检测被感染血细胞内的病毒。结果显示，10-1～10-2浓度病毒液感染的血细胞明显缩小，有死亡现象，可见细胞碎片，细胞数目逐渐减少，细胞碎片聚集成堆；10-3～10-4浓度的病毒液感染的血细胞明显缩小，细胞聚集成堆，但无明显死亡，较10-2浓度病毒液感染的血细胞出现细胞病变时间明显延长；10-5～10-6浓度病毒液感染的血细胞在5d内无明显的细胞病变。血细胞在接种10-3浓度病毒液后，细胞内病毒量在第7d达到最大值。10-1～10-8浓度的病毒液感染血细胞10d后，被感染细胞内的病毒量增加。 展开更多

关键词 中国对虾 血细胞 培养 白斑综合征病毒 感染:增殖

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鲤疱疹病毒2型不同分离株的基因组比较分析

6

作者 周怡 赵路品 +1 位作者 刘笑茹 姜有声 《水产养殖》 CAS 2023年第6期20-27,共8页

从流行病学和病原学方面简述了鲤疱疹病毒2型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2),对感染CyHV-2的金鱼、鲫的状态进行了比较。通过GenBank数据库查找,显示CyHV-2完整基因序列有7株,虽然这7株的基因组具有很高的同源性,但是不同的分离株在... 从流行病学和病原学方面简述了鲤疱疹病毒2型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2),对感染CyHV-2的金鱼、鲫的状态进行了比较。通过GenBank数据库查找,显示CyHV-2完整基因序列有7株,虽然这7株的基因组具有很高的同源性,但是不同的分离株在其基因组中包含很多突变、插入、缺失和重排。CyHV-2基因组约含150个ORF,其中部分ORF的功能在病毒感染过程中起重要作用。CyHV-2是一种具有高度传染性的病原体,主要感染金鱼、鲫及其变种,严重危害金鱼和异育银鲫养殖业发展。指出,应以CyHV-2的基因组序列为基础,加强对CyHV-2的基因功能以及宿主对CyHV-2的免疫反应等基础研究,以获得更有效地预防、控制和治疗方法,遏制其病毒的传播扩散。 展开更多

关键词 鲤疱疹病毒2型 基因组学 蛋白功能

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西伯利亚鲟致病性嗜水气单胞菌外膜蛋白及其抗原性分析 被引量：2

7

作者 姜有声 杨倩 +3 位作者 李圆圆 杨先乐 吕利群 邱军强 《生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第3期31-33,47,共4页

采用十二烷基肌氨酸钠(Sarkosyl)法提取西伯利亚鲟嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)外膜蛋白,电泳显示所提取的主要外膜蛋白分子量为26～120 kDa;为比较该菌株与气单胞菌菌属其他细菌外膜蛋白组分及抗原性异同,以致病性豚鼠气单胞菌(... 采用十二烷基肌氨酸钠(Sarkosyl)法提取西伯利亚鲟嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)外膜蛋白,电泳显示所提取的主要外膜蛋白分子量为26～120 kDa;为比较该菌株与气单胞菌菌属其他细菌外膜蛋白组分及抗原性异同,以致病性豚鼠气单胞菌(A.caviae)、温和气单胞菌(A.sobria)和无致病力的嗜水气单胞菌为对照,电泳图谱显示4种气单胞菌外膜蛋白的分子量主要集中在26～120 kDa之间;利用抗西伯利亚鲟嗜水气单胞菌血清的免疫印迹试验表明该菌株外膜蛋白中分子量为75 kDa、52 kDa、43 kDa、40 kDa、34 kDa、28 kDa的蛋白条带呈现阳性反应,其他3种气单胞菌外膜蛋白中均有与该抗血清反应的条带,且分子量为28 kDa、34 kDa的反应条带为4株菌共有;43 kDa与75 kDa反应条带为部分菌株共有。为进一步筛选和研究致病性气单胞菌的共同保护抗原提供参考。 展开更多

关键词 西伯利亚鲟嗜水气单胞菌 外膜蛋白 抗原性

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水生动物免疫学实验的教学与实践 被引量：1

8

作者 姜有声 许丹 +3 位作者 张也 宋增福 张庆华 吕利群 《教育教学论坛》 2019年第20期269-271,共3页

实验教学是对理论知识的理解深化,是探索实验科学理论的基本方法。本文从水生动物免疫学实验教学的课程内容、方法和手段、考核方法等方面总结了水产动物免疫学实验的课程探索及教学中的一些具体情况,初步探讨了水产动物免疫学实验教学... 实验教学是对理论知识的理解深化,是探索实验科学理论的基本方法。本文从水生动物免疫学实验教学的课程内容、方法和手段、考核方法等方面总结了水产动物免疫学实验的课程探索及教学中的一些具体情况,初步探讨了水产动物免疫学实验教学内容改革的措施及其教学方法的改进,提出了进一步改革水产动物免疫学实验教学的方向。 展开更多

关键词 水生动物免疫学实验 课程内容 教学方法 课程探索 教学改革

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西伯利亚鲟嗜水气单胞菌与其它3株气单胞菌间的免疫交叉反应

9

作者 姜有声 杨倩 +2 位作者 杨先乐 吕利群 邱军强 《生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第1期30-32,共3页

采用间接免疫荧光技术分析了西伯利亚鲟细菌性败血症致病菌嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophlia)X1菌株、豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)XL2-T菌株、致病性温和气单胞菌(Aeromonas sobria)W1菌株与无致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydro... 采用间接免疫荧光技术分析了西伯利亚鲟细菌性败血症致病菌嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophlia)X1菌株、豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)XL2-T菌株、致病性温和气单胞菌(Aeromonas sobria)W1菌株与无致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophlia)M3菌株等水产养殖主要病原菌与抗血清之间的免疫交叉反应。结果显示具有致病性的同属菌株X1菌株、XL2-T菌株、W1菌株交叉反应程度较大,说明这3株菌表面存在较多相同抗原决定簇。而无致病性菌株M3与其他3株致病性菌株免疫交叉反应程度较小。 展开更多

关键词 嗜水气单胞菌 豚鼠气单胞菌 温和气单胞菌 抗血清 免疫交叉

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水生动物免疫学课程的建设与实践

10

作者 姜有声 宋增福 +3 位作者 许丹 张也 张庆华 吕利群 《安徽农业科学》 CAS 2018年第20期220-221,225,共3页

水生动物免疫学是水生动物医学专业的基础必修课程。分析了水生动物免疫学课程建设的必要性,从教学目标、教学基本要求、教学方法等方面阐述了该课程的建设内容,并分析了教学效果。

关键词 水生动物免疫学 课程建设 课程内容 教学效果

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环丙沙星单克隆抗体的制备及其免疫学特性分析 被引量：6

11

作者 胡鲲 黄宣运 +2 位作者 姜有声 方伟 杨先乐 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期538-543,共6页

目的:制备环丙沙星单克隆抗体,并分析其免疫学特性,为建立环丙沙星残留的免疫学检测方法服务。方法:用人工抗原环丙沙星-小牛血清白蛋白偶联物免疫BALB/c小鼠,产生预期免疫应答后,将小鼠脾细胞与瘤细胞融合,经初筛、复筛和再克隆,筛选得... 目的:制备环丙沙星单克隆抗体,并分析其免疫学特性,为建立环丙沙星残留的免疫学检测方法服务。方法:用人工抗原环丙沙星-小牛血清白蛋白偶联物免疫BALB/c小鼠,产生预期免疫应答后,将小鼠脾细胞与瘤细胞融合,经初筛、复筛和再克隆,筛选得到1C9、3F6、6H2、6A7、6G11和8F56株分泌环丙沙星单克隆抗体的杂交瘤细胞。对单克隆抗体的亚型、纯度、亲和力、灵敏度及特异性等免疫学特性进行鉴定和分析。结果:1C9、3F6和6A7的抗体亚型为IgG2a;6H2和8F5的抗体亚型为IgG1;6G11的抗体亚型为IgG3。SDS-PAGE电泳结果显示单抗蛋白重链分子量约为50kD,轻链分子量约为25kD。6株细胞产生的单抗均具有良好的特异性和灵敏度。其中,细胞株1C9细胞培养上清和腹水效价分别为1∶6.4×102和1∶5.6×105,亲和力常数可达2.85×109L/mol,IC50值可达245.86ng/ml,最低检测限为45.25ng/ml,对氧氟沙星、双氟沙星、沙拉沙星、左氧氟沙星、孔雀石绿、氯霉素、呋喃西林等药物几乎不存在交叉反应,与恩诺沙星存在交叉反应,交叉反应率为84.6%。结论:本方法制备的环丙沙星单克隆抗体具有较好的亲和力和特异性,可用于环丙沙星残留免疫学检测。 展开更多

关键词 环丙沙星 单克隆抗体 亚型 亲和力 交叉反应

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氯霉素人工抗原的合成与鉴定 被引量：7

12

作者 方伟 胡鲲 +2 位作者 姜有声 黄宣运 杨先乐 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期334-338,共5页

采用重氮化法和碳二亚胺(EDC)法合成了氯霉素人工抗原。经紫外光谱法、电泳鉴定表明偶联成功;采用三硝基苯磺酸法测得载体蛋白-εNH3+残基利用率分别为31.02%、22.27%,偶联物的结合比为18.9、13.6;制备的抗原分别免疫小白鼠获得多克隆抗... 采用重氮化法和碳二亚胺(EDC)法合成了氯霉素人工抗原。经紫外光谱法、电泳鉴定表明偶联成功;采用三硝基苯磺酸法测得载体蛋白-εNH3+残基利用率分别为31.02%、22.27%,偶联物的结合比为18.9、13.6;制备的抗原分别免疫小白鼠获得多克隆抗体,血清效价可达10-6以上。经比较,碳二亚胺法更适于氯霉素人工抗原的制备。 展开更多

关键词 氯霉素 人工抗原 合成 鉴定

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环丙沙星单克隆抗体的制备及鉴定 被引量：6

13

作者 杨先乐 黄宣运 +3 位作者 胡鲲 方伟 王炼 姜有声 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第12期16-20,共5页

通过改进的碳二亚胺法制备环丙沙星-牛血清白蛋白偶联物(CIP-BSA),用紫外扫描、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法鉴定偶联物。利用制备的CIP-BSA偶联物作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术制备环丙沙星单克隆抗体,... 通过改进的碳二亚胺法制备环丙沙星-牛血清白蛋白偶联物(CIP-BSA),用紫外扫描、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法鉴定偶联物。利用制备的CIP-BSA偶联物作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术制备环丙沙星单克隆抗体,并对其效价、亲和力和特异性进行鉴定。结果表明:CIP-BSA的偶联比为30:1。经间接酶联免疫吸附(ELISA)法筛选,共筛出两株敏感、特异的杂交瘤细胞(JY-1、JY-2)。这两株细胞的腹水经纯化后的抗体效价分别为5.12×106、2.56×106,亲和力常数分别为2.88×109、2.46×109L/mol,两抗体均为IgG1a,取亲和力高的JY-1进行竞争抑制测定,IC50值可以达到9.83ng/mL。该单抗仅与恩诺沙星存在交叉反应,交叉反应率为95%。通过验证得到的JY-1细胞株分泌的单克隆抗体可用于水产品中环丙沙星残留的快速检测。 展开更多

关键词 环丙沙星 半抗原 抗体 免疫

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一株草鱼呼肠孤病毒检测用单克隆抗体的制备及其特性 被引量：4

14

作者 杨倩 曹海鹏 +2 位作者 和永杏 姜有声 吕利群 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期240-241,共2页

草鱼出血病是由草鱼呼肠孤病毒（Grass CrapReovirus,GCRV）引起的病毒性疾病,传染性强,对草鱼的致死率极高,是危害我国水产养殖业最严重的疾病之一[1]。因此,采用快速有效的手段检测草鱼呼肠孤病毒对诊断草鱼出血病具有重要的意义。

关键词 呼肠孤病毒 病毒检测 单克隆抗体 草鱼 病毒性疾病 制备 出血病 传染性

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鲤疱疹病毒Ⅱ型对异育银鲫背鳍细胞的显微形态与免疫基因表达水平的影响 被引量：3

15

作者 夏思瑶 王浩 +4 位作者 Patorida Podok 许丹 姜有声 吕利群 佐野元彦 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1915-1922,共8页

为研究鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cy HV-2)体外感染复制特征以及异育银鲫抗病毒免疫应答反应。本实验采用组织块培养法建立了异育银鲫背鳍细胞的原代培养体系。结果显示,在10 d左右可观察到组织块迁移分离出新的单层细胞,3周左右细胞可覆盖底部面... 为研究鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cy HV-2)体外感染复制特征以及异育银鲫抗病毒免疫应答反应。本实验采用组织块培养法建立了异育银鲫背鳍细胞的原代培养体系。结果显示,在10 d左右可观察到组织块迁移分离出新的单层细胞,3周左右细胞可覆盖底部面积为25cm2培养瓶的底部;经Cy HV-2悬液感染离体培养的原代细胞,3 d后病毒滴度增殖至106拷贝/m L;在病毒感染6 d后出现典型的细胞病变效应;Cy HV-2感染原代细胞后,分析前期通过鱼体水平实验鉴定出的与该病毒感染相关的免疫基因:PNP5a、MPO、MHCⅠ、LYZ-C、IL-11、ITLN、PNP5a和DUSP,Real-time Rt-PCR结果显示大部分基因在细胞水平均有显著性的上调,与鱼体水平实验结果一致。本研究建立了原代培养的异育银鲫背鳍细胞,用于构建体外感染Cy HV-2病毒的细胞模型,为深入研究Cy HV-2的感染复制规律及其与宿主的相互作用关系,以及细胞水平筛选抗病毒药物实验奠定了基础。 展开更多

关键词 异育银鲫 鲤疱疹病毒Ⅱ型 背鳍细胞 原代培养 Real time Rt-PCR

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牙鲆秦皇岛弧菌HQ010712-1外膜蛋白及其抗原性分析 被引量：6

16

作者 程顺峰 邓灯 +1 位作者 张毅 姜有声 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1272-1277,共6页

采用十二烷基肌氨酸钠(Sarkosyl)和苯甲基磺酰氟(PMSF)2种方法提取秦皇岛弧菌HQ010712-1(Vibrio qinhuangdaora sp.nov.)外膜蛋白,结果显示Sarkosyl法提取效果较好,且所提取的主要外膜蛋白分子量为102kD、45kD、39kD、36kD、30kD、28kD... 采用十二烷基肌氨酸钠(Sarkosyl)和苯甲基磺酰氟(PMSF)2种方法提取秦皇岛弧菌HQ010712-1(Vibrio qinhuangdaora sp.nov.)外膜蛋白,结果显示Sarkosyl法提取效果较好,且所提取的主要外膜蛋白分子量为102kD、45kD、39kD、36kD、30kD、28kD、24kD、22kD;为比较该菌株与弧菌属其他细菌外膜蛋白组分及抗原性异同,以鳗弧菌(Vibrio anguillarum)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、溶藻胶弧菌(Vibrio alginolyticus)为对照,电泳图谱显示4种弧菌外膜蛋白的分子量主要集中在22～48kD之间;利用抗秦皇岛弧菌HQ010712-1血清的免疫印迹表明菌株HQ010712-1外膜蛋白中分子量为45kD、36kD的蛋白条带呈现阳性反应,其他3种弧菌外膜蛋白中均有与该抗血清反应的条带,且分子量为36kD的反应带为菌株HQ010712-1、副溶血弧菌、溶藻胶弧菌共有。本研究旨在为进一步筛选和研究致病性弧菌的共同保护性抗原提供参考。 展开更多

关键词 秦皇岛弧菌 外膜蛋白 抗原性

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水生动物病原微生物学思政案例——汤飞凡和沙眼衣原体 被引量：39

17

作者 张庆华 宋增福 +2 位作者 张旭杰 姜有声 郭婧 《教育教学论坛》 2018年第30期70-72,共3页

为了有效发挥课堂育人主渠道作用,提升水产类高校学生的医学背景知识及人文素养,设计了水生动物病原微生物学的原核微生物的形态、构造和功能部分中"汤飞凡和沙眼衣原体"的思政案例,让学生充分认识我国邮票上唯一的微生物学... 为了有效发挥课堂育人主渠道作用,提升水产类高校学生的医学背景知识及人文素养,设计了水生动物病原微生物学的原核微生物的形态、构造和功能部分中"汤飞凡和沙眼衣原体"的思政案例,让学生充分认识我国邮票上唯一的微生物学家——汤飞凡发现沙眼衣原体对世界医学的重大贡献。该案例的实施,充分激发了学生的课程学习兴趣,增加了民族自豪感和自信心,取得了良好的教学效果。 展开更多

关键词 水生动物病原微生物学 思政案例 汤飞凡 沙眼衣原体

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氯霉素单克隆抗体的研制及其特性分析 被引量：1

18

作者 方伟 姜有声 +2 位作者 黄宣运 胡鲲 杨先乐 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期90-94,共5页

为了研制氯霉素单克隆抗体,建立氯霉素的简便有效的检测方法。采用碳二亚胺(EDC)方法制备氯霉素免疫抗原和包被抗原,经SDS-PAGE凝胶电泳,三硝基苯磺酸(TNBS)法鉴定表明偶联成功。采用制备的抗原CAP-HS-BSA((CAP-HS,氯霉素琥珀酸酯;BSA,... 为了研制氯霉素单克隆抗体,建立氯霉素的简便有效的检测方法。采用碳二亚胺(EDC)方法制备氯霉素免疫抗原和包被抗原,经SDS-PAGE凝胶电泳,三硝基苯磺酸(TNBS)法鉴定表明偶联成功。采用制备的抗原CAP-HS-BSA((CAP-HS,氯霉素琥珀酸酯;BSA,牛血清白蛋白)免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术获得了2株抗氯霉素的杂交瘤细胞株,细胞株体外传代和冻存复苏后抗体分泌稳定。经体内诱生法产生腹水,ELISA检测纯化腹水的效价为1∶106。抗体的亲和常数分别为:1.13×1010L/mol,1.41×1010L/mol。ELISA检测显示这2株单克隆抗体与氯霉素琥珀酸交叉反应率为300%,与其他抗生素及结构类似物的交叉反应小,表明该单抗可满足建立免疫学检测方法的需要和开发应用的要求。 展开更多

关键词 氯霉素 单克隆抗体 检测

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“水生动物病原微生物学”实验的教学与实践 被引量：2

19

作者 张庆华 宋增福 +5 位作者 郭婧 邱军强 姜有声 张也 吕利群 杨先乐 《实验科学与技术》 2016年第6期130-133,245,共5页

为了提升水生动物病原微生物学实验课程的教学效果,深化教学改革与实践,该文以上海海洋大学水产与生命学院2012级和2013级水生动物医学专业(方向)的本科生为实施对象,从教学理念、方法和手段、实验内容、考核方法、资源配置及效果分析... 为了提升水生动物病原微生物学实验课程的教学效果,深化教学改革与实践,该文以上海海洋大学水产与生命学院2012级和2013级水生动物医学专业(方向)的本科生为实施对象,从教学理念、方法和手段、实验内容、考核方法、资源配置及效果分析等方面总结了为期两年的课程探索与改革成果。实践表明,形成的互动式实验课堂,提升了学生的核心专业技能,顺应了创新和创业潮流,取得了良好的效果,对进一步深化此类课程的教学改革具有重要启发意义。 展开更多

关键词 水生动物病原微生物学实验 水生动物医学 教学理念 教学改革

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《水生动物病原微生物学》的课程建设与实践 被引量：1

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作者 张庆华 宋增福 +5 位作者 郭婧 邱军强 姜有声 张也 吕利群 杨先乐 《上海农业科技》 2016年第3期10-12,共3页

《水生动物病原微生物学》是教育部2013年设立的新专业——"水生动物医学"的专业基础必修课之一,经两年的建设与实践,该课程取得了较好的教学效果。为给国内其他高等院校的相关课程建设提供参考,从《水生动物病原微生物学》... 《水生动物病原微生物学》是教育部2013年设立的新专业——"水生动物医学"的专业基础必修课之一,经两年的建设与实践,该课程取得了较好的教学效果。为给国内其他高等院校的相关课程建设提供参考,从《水生动物病原微生物学》课程建设的必要性、教学理念、课程内容及教学效果分析等方面阐述了该课程的建设思路和构想。 展开更多

关键词 水生动物病原微生物学 课程建设必要性 教学理念 课程内容 效果分析

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