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抗B型葡萄球菌肠毒素高亲和力单链抗体的制备 被引量:1
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作者 孙元杰 李永明 +5 位作者 张葵 魏玉英 宋朝君 周幸春 金伯泉 杨琨 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期403-406,共4页
目的构建针对B型葡萄球菌肠毒素(SEB)的特异性单链抗体(scFv),并进行纯化和鉴定。方法设计抗SEB高亲和力单克隆抗体(mAb)FMU-SEB-No.2重链和轻链可变区基因片段VH和VL的引物,利用RT-PCR技术,从本室制备的抗SEBmAb FMU-SEB-No.2杂交瘤细... 目的构建针对B型葡萄球菌肠毒素(SEB)的特异性单链抗体(scFv),并进行纯化和鉴定。方法设计抗SEB高亲和力单克隆抗体(mAb)FMU-SEB-No.2重链和轻链可变区基因片段VH和VL的引物,利用RT-PCR技术,从本室制备的抗SEBmAb FMU-SEB-No.2杂交瘤细胞株中扩增出VH和VL基因片段;然后通过在轻链引物上设计linker序列,重叠引物延伸法(SOE)将VH和VL基因拼接成scFv基因片段,并将其克隆入原核表达载体PGEX4T-1中;转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,融合蛋白经谷胱甘肽亲和层吸柱纯化。采用SDS-PAGE,Western blot,ELISA等方法对其表达水平和特异性进行分析。结果成功从1株抗SEB mAb FMU-SEB-No.2杂交瘤细胞株中扩增出VH和VL可变区基因,并通过linker序列将其拼接成scFv片段,大小约750 bp,编码250个氨基酸。PCR、酶切鉴定和测序结果表明表达载体构建成功。转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导后,以可溶形式表达相对分子质量(Mr)约54 000的融合蛋白。经谷胱甘肽亲和层析法纯化融合蛋白,可获得纯度达90%以上的scFv,ELISA和Western blot法检测结果表明,可溶性scFv与抗原SEB有较强的结合活性。结论成功构建并表达出抗SEB的特异性单链抗体。 展开更多
关键词 B型葡萄球菌肠毒素 重链和轻链可变区基因 单链抗体 原核表达 ELISA WESTERN BLOT
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抗SEB单克隆抗体可变区基因克隆及单链抗体的基因构建和表达 被引量:1
2
作者 孙元杰 李永明 +6 位作者 刘志佳 张葵 魏玉英 宋朝君 周幸春 金伯泉 杨琨 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期69-71,共3页
目的从分泌抗SEB的单克隆抗体(FMU-SEB-No.1)杂交瘤细胞中,克隆出FMU-SEB-No.1重链和轻链可变区(VH和VL)基因,构建FMU-SEB-No.1单链抗体(scFv)的原核表达载体,并进行scFv基因的蛋白表达。方法从FMU-SEB-No.1杂交瘤细胞中提取总RNA,采用R... 目的从分泌抗SEB的单克隆抗体(FMU-SEB-No.1)杂交瘤细胞中,克隆出FMU-SEB-No.1重链和轻链可变区(VH和VL)基因,构建FMU-SEB-No.1单链抗体(scFv)的原核表达载体,并进行scFv基因的蛋白表达。方法从FMU-SEB-No.1杂交瘤细胞中提取总RNA,采用RT-PCR扩增出VH和VL基因;通过在引物上设计linker序列,拼接VH和VL为完整FMU-SEB-No.1的scFv基因(FMU-SEB-scFv)。将测序正确的scFv基因克隆入PGEX4T-1载体,转化入E.coli BL21(DE3)进行蛋白表达。通过SDS-PAGE,Western blot法分析其表达水平和特异性,酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定其抗原结合活性。结果测序结果显示,本实验成功克隆出FMU-SEB-No.1重链及轻链可变区基因,并成功构建FMU-SEB-scFv基因,所得的基因全长为750 bp,编码250个氨基酸。SDS-PAGE和Western blot分析表明,PGEX4T1-FMU-SEB-scFv在E.coli BL21(DE3)可表达为Mr约54 000的可溶型scFv/GST融合蛋白。间接ELISA检测结果表明,可溶型scFv/GST融合蛋白与SEB具有较高的抗原结合活性。结论制备并鉴定了针对SEB的基因工程抗体,为开发出针对SEB的治疗性抗体奠定了实验基础。 展开更多
关键词 SEB 抗体可变区 单链抗体 蛋白表达 酶联免疫吸附法
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ABCB1基因C3435T多态性与儿童急性淋巴细胞白血病发病情况的相关性 被引量:1
3
作者 孙元杰 牛银萍 关红梅 《实用癌症杂志》 2021年第8期1242-1244,1248,共4页
目的探讨ABCB1基因(多药耐药基因)C3435T多态性与儿童急性淋巴细胞白血病发病情况的相关性。方法选取60例急性淋巴细胞白血病患儿作为研究对象,依照中国抗癌协会小儿专业委员会急性淋巴细胞白血病2015方案(CCCG.ALL.2015)的危险度分级标... 目的探讨ABCB1基因(多药耐药基因)C3435T多态性与儿童急性淋巴细胞白血病发病情况的相关性。方法选取60例急性淋巴细胞白血病患儿作为研究对象,依照中国抗癌协会小儿专业委员会急性淋巴细胞白血病2015方案(CCCG.ALL.2015)的危险度分级标准,将患儿分为低危组(n=25)和中高危组(n=35)。采集患儿的骨髓液1.5 ml提取DNA,应用DNA测序技术检测ATP结合盒式蛋白B1基因3435位点多态性,并分析ABCB1基因C3435T多态性与儿童急性淋巴细胞白血病发病情况的相关性。结果2组患儿ABCB1基因C3435T位点中CT、CC点位对比无明显差异(P>0.05),TT点位对比差异显著(P<0.05)。不同点位ABCB1基因C3435T的急性淋巴细胞白血病患儿生存情况对比无明显差异(P>0.05)。60例急性淋巴细胞白血病患儿ABCB1基因多态性不同点位患儿的性别、年龄、血小板减少患儿、中性粒细胞减少患儿对比均无明显差异(P>0.05),ABCB1基因多态性不同点患儿的血红蛋白减少情况对比差异显著(P>0.05)。儿童急性淋巴细胞白血病发病情况与血小板、血红蛋白、中性粒细胞、C3435T等位基因、危险度均有明显关系(P<0.05)。结论ABCBl基因C3435T多态性与儿童ALL可能存在着一定关系,具有一定的参考价值。 展开更多
关键词 ABCB1基因 C3435T多态性 急性淋巴细胞白血病 儿童 发病情况
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截短型肿瘤抗原BAP31 DNA疫苗的构建及免疫效果分析
4
作者 孙元杰 宋朝君 +4 位作者 魏玉英 张贇 金伯泉 杨安钢 杨琨 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第14期1253-1256,共4页
目的:通过LAMP分子的靶向作用,增强截短型BAP31肿瘤抗原(BAP31)的MHC-II提呈,激活更多的特异性CD4+T细胞,最终辅助增加CTL细胞的杀伤活性及特异性抗体产生.方法:构建重组质粒P-△AP31和P-L-△AP31,同时构建重组质粒P-△AP31/EGFP和P-L-... 目的:通过LAMP分子的靶向作用,增强截短型BAP31肿瘤抗原(BAP31)的MHC-II提呈,激活更多的特异性CD4+T细胞,最终辅助增加CTL细胞的杀伤活性及特异性抗体产生.方法:构建重组质粒P-△AP31和P-L-△AP31,同时构建重组质粒P-△AP31/EGFP和P-L-△AP31/EGFP.质粒P-△AP31/EGFP和P-L-△AP31/EGFP瞬时转染Hela细胞,荧光显微镜观察目的蛋白的表达;将重组质粒P-△AP31和P-L-△AP31免疫C57BL/6小鼠,间接ELISA检测免疫小鼠血清中特异性抗体效价;ELISPOT检测免疫脾淋巴细胞分泌细胞因子IFN-γ和IL-4的频率;乳酸脱氢酶释放法检测免疫小鼠特异性CTL反应.结果:经酶切鉴定及序列测定,成功构建截短型肿瘤抗原BAP31的DNA疫苗重组载体;用带EGFP报告基因的重组质粒转染Hela细胞,荧光显微镜观察可见特异性的绿色荧光;ELISA检测免疫小鼠血清,带LAMP组BAP31特异性抗体效价明显高于不带LAMP组(P<0.01),且两者均高于空质粒及正常对照组;ELISPOT检测分泌IFN-γ,IL-4的T细胞频率,带LAMP组明显增高(P<0.01);杀伤试验表明,特异性CTL活性带LAMP组较不带LAMP组显著提高,且均高于对照组(P<0.01).结论:构建的P-△AP31和P-L-△AP31基因疫苗不仅在小鼠体内均可诱导特异性体液和细胞免疫应答,而且P-L-△AP31基因疫苗的免疫效果显著优于P-△AP31,为进一步研制肿瘤治疗性基因疫苗奠定了基础. 展开更多
关键词 BAP31分子 LAMP分子 疫苗 DNA 酶联免疫斑点试验
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儿童巨细胞病毒感染性疾病的诊断与防治研究 被引量:1
5
作者 孙元杰 《中国社区医师》 2016年第2期75-75,77,共2页
目的:探讨儿童巨细胞病毒感染性疾病的诊断与治疗方法。方法:56例患儿作为研究对象,行病原学检测,均给予更昔洛韦注射液进行治疗。结果:39例患儿治愈出院,治愈率69.64%,16例病情明显好转,好转率28.57%,1例治疗无效,无效率1.79%。结论:... 目的:探讨儿童巨细胞病毒感染性疾病的诊断与治疗方法。方法:56例患儿作为研究对象,行病原学检测,均给予更昔洛韦注射液进行治疗。结果:39例患儿治愈出院,治愈率69.64%,16例病情明显好转,好转率28.57%,1例治疗无效,无效率1.79%。结论:加强对患儿的临床诊断和防治工作,能提高患儿的临床治疗效果和生活质量。 展开更多
关键词 儿童 巨细胞病毒 感染性疾病 诊断 治疗
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更昔洛韦治疗婴幼儿巨细胞病毒感染的临床观察 被引量:1
6
作者 孙元杰 《中国社区医师》 2016年第3期42-42,44,共2页
目的:观察更昔洛韦治疗婴幼儿巨细胞病毒感染的临床效果。方法:将80例巨细胞病毒感染患儿分为两组,对照组给予利巴韦林注射液治疗,试验组给予更昔洛韦注射液治疗。结果:经过治疗后,试验组治疗总有效率97.5%,明显好于对照组的80.0%,试验... 目的:观察更昔洛韦治疗婴幼儿巨细胞病毒感染的临床效果。方法:将80例巨细胞病毒感染患儿分为两组,对照组给予利巴韦林注射液治疗,试验组给予更昔洛韦注射液治疗。结果:经过治疗后,试验组治疗总有效率97.5%,明显好于对照组的80.0%,试验组不良反应发生率5%,明显低于对照组的15%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:应用更昔洛韦注射液治疗婴幼儿巨细胞病毒感染,不仅可以有效改善患儿的各项临床指标,而且还能降低不良反应的发生率。 展开更多
关键词 更昔洛韦 婴幼儿 巨细胞病毒感染
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美罗培南联合头部亚低温治疗对化脓性脑膜炎患儿预后及血清和脑脊液中降钙素原、降钙素基因相关肽和C-反应蛋白水平的影响 被引量:22
7
作者 牛银萍 杜学丽 +2 位作者 郭淼 孙元杰 王喆 《新乡医学院学报》 CAS 2019年第2期151-154,共4页
目的探讨美罗培南联合头部亚低温治疗对化脓性脑膜炎患儿预后及血清和脑脊液中降钙素原(PCT)、降钙素基因相关肽(CGRP)、C-反应蛋白(CRP)水平的影响。方法选择2015年1月至2017年4月南阳市第二人民医院收治的94例化脓性脑膜炎患儿为研究... 目的探讨美罗培南联合头部亚低温治疗对化脓性脑膜炎患儿预后及血清和脑脊液中降钙素原(PCT)、降钙素基因相关肽(CGRP)、C-反应蛋白(CRP)水平的影响。方法选择2015年1月至2017年4月南阳市第二人民医院收治的94例化脓性脑膜炎患儿为研究对象,根据治疗方法将患儿分为观察组和对照组,每组47例。2组患儿均给予维持水电解质酸碱平衡、退热、镇静、免疫增强、降颅压等对症支持治疗;在此基础上,对照组患儿给予美罗培南治疗,观察组患儿给予美罗培南联合头部亚低温治疗。治疗结束后,采用Glasgow结局量表评分对2组患儿的预后进行评估;于治疗前及治疗后采集2组患儿外周静脉血和脑脊液,分别采用免疫荧光法、放射免疫分析法、速率散射比浊法检测血清和脑脊液中PCT、CGRP、CRP水平。结果观察组和对照组患儿预后良好率分别为95. 74%(45/47)、80. 85%(38/47),观察组患儿预后良好率高于对照组(χ~2=4. 375,P <0. 05)。2组患儿治疗前血清及脑脊液中PCT、CGRP、CRP水平比较差异无统计学意义(P> 0. 05); 2组患儿治疗后血清及脑脊液中PCT、CGRP、CRP水平显著低于治疗前(P <0. 05);治疗后,观察组患儿血清及脑脊液中PCT、CGRP、CRP水平显著低于对照组(P <0. 05)。结论美罗培南联合亚低温治疗可显著降低化脓性脑膜炎患儿血清及脑脊液中CGRP、PCT、CRP水平,减轻炎症反应,增强感染控制效果,改善患儿预后。 展开更多
关键词 化脓性脑膜炎 美罗培南 亚低温治疗 降钙素原 降钙素基因相关肽 C-反应蛋白
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国际汉坦病毒研究进展——第9届肾综合征出血热、汉坦病毒肺综合征及汉坦病毒国际会议概况 被引量:4
8
作者 姜东伯 孙元杰 +2 位作者 董忱 杜军英 杨琨 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期I0001-I0003,共3页
汉坦病毒所导致的肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)是威胁我国公众健康的严重问题。据我国疾控中心的监测数据显示,2006—2011年间共有64250例确诊感染HFRS病例,其中死亡762人,死亡率达1.18%,发病... 汉坦病毒所导致的肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)是威胁我国公众健康的严重问题。据我国疾控中心的监测数据显示,2006—2011年间共有64250例确诊感染HFRS病例,其中死亡762人,死亡率达1.18%,发病率和死亡率在2010年后持续上升。疫情最严重的8个省分别是黑龙江、陕西、山东、吉林、辽宁、浙江、湖南和河北,其患病人数覆盖总数的80.2%。患病多发生于春季和秋冬交替时,年龄多集中在15~60岁之间,男性患者数量是女性患者的3倍以上,农民罹患风险最严重。黑线姬鼠和褐家鼠分别是我国汉坦病毒主要的野生宿主和社区宿主。 展开更多
关键词 汉坦病毒肺综合征 肾综合征出血热 会议概况 国际 数据显示 FEVER 死亡率 公众健康
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自身免疫性脑炎患者外周血Tfh细胞的检测及其临床意义 被引量:8
9
作者 刘婷婷 杜芳 +4 位作者 孙元杰 杨毅宁 代文 赵钢 杨琨 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1678-1681,共4页
目的:研究滤泡辅助性T细胞(Tfh)在自身免疫性脑炎(AE)患者外周血中的百分比及临床意义。方法:(1)采用自身免疫性脑炎相关抗体检测阳性的患者脑脊液与大鼠脑组织冰冻切片共孵育并进行免疫荧光染色,观察结果;(2)收集血清和/或脑脊液(CSF)... 目的:研究滤泡辅助性T细胞(Tfh)在自身免疫性脑炎(AE)患者外周血中的百分比及临床意义。方法:(1)采用自身免疫性脑炎相关抗体检测阳性的患者脑脊液与大鼠脑组织冰冻切片共孵育并进行免疫荧光染色,观察结果;(2)收集血清和/或脑脊液(CSF)检查自身免疫性脑炎相关抗体阳性的患者17例(其中,3例为抗LGI1抗体阳性患者,3例为抗GABAR抗体阳性患者,10例为抗NMDAR抗体阳性患者,1例为抗NMDAR抗体、抗GABAR抗体及抗AMPA2抗体合并阳性患者),收集外周血样本共计21例次:未治疗组6例次,治疗组15例次(其中,治疗后缓解组8例次,治疗后未缓解组7例次),健康对照者(对照组)外周血15例。采用流式细胞术(FCM)检测外周血单个核细胞(PBMC)中CD3+CD4+CXCR5+PD1+(即Tfh细胞)的比例,并分析Tfh细胞比例与患者疾病恢复程度的相关性。结果:(1)自身免疫性脑炎相关抗体检测阳性患者脑脊液与大鼠脑组织冰冻切片共孵育免疫荧光染色结果呈现明显阳性反应;(2)流式细胞术检测结果显示未治疗组患者外周血Tfh比例明显高于对照组(P<0.001),且治疗未缓解组患者Tfh比例高于治疗缓解组(P<0.05),而治疗缓解组患者Tfh比例与对照组比较,差异无统计学意义(P=0.107)。结论:自身免疫性脑炎患者外周血Tfh比例升高可能与疾病的发生发展相关。 展开更多
关键词 自身免疫性脑炎 滤泡辅助性T细胞 自身抗体
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以肿瘤抗原BAP31为靶点的基因疫苗构建及其诱导小鼠免疫反应的研究 被引量:3
10
作者 宋朝君 孙元杰 +5 位作者 魏玉英 张赟 欧阳清 陈琨 金伯泉 杨琨 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期547-549,552,共4页
目的:构建重组表达载体P-BAP31和P-L-BAP31基因疫苗并接种小鼠,评价其诱导的体液和细胞免疫应答。方法:利用分子克隆技术,构建重组质粒P-BAP31和P-L-BAP31,同时构建P-BAP31/EGFP和P-L-BAP31/EGFP重组质粒,并将其以脂质体瞬时转染HeLa细... 目的:构建重组表达载体P-BAP31和P-L-BAP31基因疫苗并接种小鼠,评价其诱导的体液和细胞免疫应答。方法:利用分子克隆技术,构建重组质粒P-BAP31和P-L-BAP31,同时构建P-BAP31/EGFP和P-L-BAP31/EGFP重组质粒,并将其以脂质体瞬时转染HeLa细胞,通过荧光显微镜观察目的蛋白的表达;将重组质粒P-BAP31和P-L-BAP31免疫C57BL/6小鼠,采用间接ELISA检测免疫小鼠血清中特异性抗体效价;通过酶联免疫斑点实验(ELISPOT)检测免疫脾细胞在受到BAP31抗原刺激后产生IFN-γ和IL-4细胞因子的频率;通过乳酸脱氢酶(LDH释放)试验检测小鼠特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的应答。结果:酶切及测序结果表明,成功构建了针对BAP31肿瘤抗原的P-BAP31和P-L-BAP31基因疫苗。通过荧光显微镜观察重组质粒转染的HeLa细胞,可见EGFP报告基因表达的绿色荧光。ELISA检测免疫小鼠血清中特异性抗体效价发现,带LAMP组明显高于不带LAMP组(P<0.05),且两者均高于空质粒(P-LAMP)及正常对照(N)组(P<0.01)。ELISPOT检测脾细胞分泌细胞因子IFN-γ和IL-4的频率,带LAMP组与其他组相比显著提高(P<0.01)。LDH释放试验显示,带LAMP组的特异性CTL活性高于不带LAMP组,且均高于对照组(P<0.01)。结论:构建了针对肿瘤抗原BAP31的全长基因疫苗,以其免疫C57BL/6小鼠可诱导特异性体液和细胞免疫反应,其中,P-L-BAP31基因疫苗各项免疫反应均优于P-BAP31。 展开更多
关键词 BAP31分子 LAMP分子 基因疫苗 ELISPOT
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布地奈德与地塞米松对急性喉炎患儿炎症反应及免疫功能的影响 被引量:8
11
作者 牛银萍 郭淼 +2 位作者 孙培卓 王喆 孙元杰 《中国合理用药探索》 CAS 2019年第3期105-107,共3页
目的:分别探讨布地奈德与地塞米松对急性喉炎患儿炎症反应及免疫功能的改善效果。方法:回顾性分析2015年6月—2018年5月我院收治的116例急性喉炎患儿的临床资料,依据临床用药方案的不同分为两组,各58例。对照组采用地塞米松(0.25~0.5 m... 目的:分别探讨布地奈德与地塞米松对急性喉炎患儿炎症反应及免疫功能的改善效果。方法:回顾性分析2015年6月—2018年5月我院收治的116例急性喉炎患儿的临床资料,依据临床用药方案的不同分为两组,各58例。对照组采用地塞米松(0.25~0.5 mg/kg,qd)治疗,观察组采用布地奈德(2 mL,tid)治疗,比较两组炎症因子[C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、肿瘤坏死因子-(tumor necrosis factor,TNF)-α、白细胞介素(interleukin,IL)]-6水平、免疫功能及症状消失时间。结果:治疗3 d后,观察组CRP、TNF-α、IL-6水平均低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);治疗前后两组CD3+、CD4^+、CD8^+值比较,差异无统计学意义(P> 0.05);观察组哮鸣音、犬吠样咳嗽、声嘶以及呼吸困难消失时间均短于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论:与地塞米松比较,布地奈德雾化吸入治疗小儿急性喉炎,可有效缓解炎症反应,缩短临床症状消失时间,且不会对免疫功能产生明显影响。 展开更多
关键词 急性喉炎 布地奈德 地塞米松 炎症反应 免疫功能
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螺旋揉搓式豌豆脱皮机设计 被引量:4
12
作者 孙传祝 王相友 +4 位作者 张志杉 潘光杰 薛立桥 孙元杰 李猛 《农机化研究》 北大核心 2013年第2期94-97,共4页
针对豆类淀粉行业急需对粉碎之前的豌豆进行脱皮这一现状,设计了一种螺旋揉搓式豌豆脱皮机。该脱皮机总体上采用行星结构,在滚筒带动筒内豌豆低速回转的同时,由驱动装置通过行星架驱动揉搓辊对豌豆进行揉搓。在计算功率、确定转速等总... 针对豆类淀粉行业急需对粉碎之前的豌豆进行脱皮这一现状,设计了一种螺旋揉搓式豌豆脱皮机。该脱皮机总体上采用行星结构,在滚筒带动筒内豌豆低速回转的同时,由驱动装置通过行星架驱动揉搓辊对豌豆进行揉搓。在计算功率、确定转速等总体设计的基础上,对滚筒结构及各种轴等主要零部件进行了结构设计计算及分析。设计后的脱皮机揉搓辊在随着行星架公转的同时,还绕着行星轴做旋转方向与公转方向相同的自转,增强了对豌豆的揉搓效果;相邻行星轴上的揉搓辊构成一条螺旋线,揉搓辊在对豌豆进行揉搓脱皮的同时还能将其轴向推移,以实现物料的轴向输送。 展开更多
关键词 豌豆 脱皮机 螺旋揉搓 行星结构
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一种面向决策的企业商务智能系统研究 被引量:5
13
作者 汪传雷 刘兰凤 孙元杰 《计算机技术与发展》 2007年第8期8-10,36,共4页
随着市场竞争的加剧,商务智能及商务智能系统在支持企业决策方面的作用越来越大。在介绍商务智能及商务智能系统的基础上,着重探讨了一种面向决策的企业商务智能系统的业务处理层、数据仓库层、信息共享层的业务层次架构,分析系统的报... 随着市场竞争的加剧,商务智能及商务智能系统在支持企业决策方面的作用越来越大。在介绍商务智能及商务智能系统的基础上,着重探讨了一种面向决策的企业商务智能系统的业务处理层、数据仓库层、信息共享层的业务层次架构,分析系统的报表引擎、数据存储、数据整理、数据源等技术支撑架构和报表展现、报表管理、报表设计、数据存储、数据源等系统流程体系,详细介绍系统具有的报表单元管理、维度管理、数据管理、报表设计、报表展现、报表权限管理等系统功能,并给出一个电信运营商的应用例子。 展开更多
关键词 商务智能 信息系统 数据仓库 联机分析处理 数据挖掘
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卵运铁蛋白夹心ELISA方法的建立及初步应用 被引量:1
14
作者 李琦 张春梅 +6 位作者 孙元杰 徐竹蔚 董芸 田莹 李娜 宋朝君 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期874-875,共2页
鸡蛋营养丰富,是人类一种重要的蛋白质来源。另一方面鸡蛋又是引发过敏反应最常见的食物之一。鸡蛋中的过敏原主要存在于蛋清中,包括卵清蛋白(ovalbumin,OVA)、卵类黏蛋白(ovomucoid,OVM)、卵运铁蛋白(ovotransferrin,OVT)和卵溶... 鸡蛋营养丰富,是人类一种重要的蛋白质来源。另一方面鸡蛋又是引发过敏反应最常见的食物之一。鸡蛋中的过敏原主要存在于蛋清中,包括卵清蛋白(ovalbumin,OVA)、卵类黏蛋白(ovomucoid,OVM)、卵运铁蛋白(ovotransferrin,OVT)和卵溶菌酶(lyso-zyme,LYS)。其中OVT约占蛋清蛋白的12%左右[1]。目前世界各国的流感疫苗是利用病毒株在鸡胚尿囊腔中培养后,经过灭活处理, 展开更多
关键词 卵运铁蛋白 ELISA 单克隆抗体 流感疫苗
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实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠脾脏和肝脏中NKT细胞调变的研究 被引量:1
15
作者 欧阳清 陈琨 +6 位作者 王曦 张春梅 郭俊 魏玉英 孙元杰 徐竹蔚 杨琨 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期894-896,共3页
目的:观察NKT细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠脾脏和肝脏中所占百分比的变化特点,探讨NKT细胞在EAE模型中的免疫调节作用。方法:以MOG35-5521肽诱导C57BL/6小鼠建立EAE模型并进行临床评分。于发病高峰期处死小鼠,分离脾脏和肝... 目的:观察NKT细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠脾脏和肝脏中所占百分比的变化特点,探讨NKT细胞在EAE模型中的免疫调节作用。方法:以MOG35-5521肽诱导C57BL/6小鼠建立EAE模型并进行临床评分。于发病高峰期处死小鼠,分离脾脏和肝脏淋巴细胞,采用免疫荧光染色和流式细胞术(FCM)分析,观察EAE小鼠与正常小鼠脾脏和肝脏中NKT细胞在全部淋巴细胞中所占百分率的变化。结果:在EAE小鼠不同器官中,NKT细胞占淋巴细胞的百分率均较正常小鼠减少。脾脏NKT细胞百分率(%)从正常组2.22±0.14下降到EAE模型组1.94±0.07(P<0.05),肝脏NKT细胞百分率(%)从正常组5.52±2.17下降到2.67±1.41(P<0.05)。结论:NKT细胞在EAE模型C57BL/6小鼠脾脏和肝脏中增殖受抑,提示EAE发病可能通过对NKT细胞数量的调节进而影响其对免疫应答的调节。 展开更多
关键词 NKT细胞 EAE 免疫调节
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Mn掺杂的ZnS纳米棒的制备及其高分子发光薄膜研究 被引量:1
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作者 孙元杰 程泉勇 +1 位作者 刘学清 刘继延 《广东化工》 CAS 2017年第6期7-8,2,共3页
本文利用溶剂热法制备了Mn掺杂的ZnS纳米线。探讨了Mn的掺杂量(5%,10%,15%)对ZnS纳米棒的尺寸、结构以及发光性能的影响,并且将所得到的纳米棒应用于聚合物环氧树脂(EP)中,制备了具有发光效应的高分子/纳米棒薄膜。X射线衍射(XRD)、扫... 本文利用溶剂热法制备了Mn掺杂的ZnS纳米线。探讨了Mn的掺杂量(5%,10%,15%)对ZnS纳米棒的尺寸、结构以及发光性能的影响,并且将所得到的纳米棒应用于聚合物环氧树脂(EP)中,制备了具有发光效应的高分子/纳米棒薄膜。X射线衍射(XRD)、扫描电镜(SEM)、能量色散光谱(EDS)进行纳米棒的形貌和组成进行了分析。荧光分析ZnS:Mn以及EP/ZnS:Mn发光性质。将ZnS:Mn纳米棒分散到环氧树脂中,在同一激发波长391 nm下,分散在EP/ZnS:Mn比ZnS:Mn纳米棒的荧光强度低,且发射波长发声蓝移。 展开更多
关键词 溶剂热法 纳米棒 高分子薄膜
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砂滤料高效清洗剂TS—198的研制与开发
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作者 孙元杰 周伟生 +1 位作者 郑书忠 霍爱群 《工业水处理》 CAS CSCD 2000年第5期37-38,共2页
作者介绍了一种专门适用于处理含石墨及油污的过滤器砂滤料的清洗剂TS— 1 98。,它既能去除油污 ,又能对砂滤料上所吸附的石墨具有剥离作用。试验表明 ,TS— 1 98对于附着在砂滤料上的石墨及油污清洗效果 ,其综合性能超过美国DREW公司... 作者介绍了一种专门适用于处理含石墨及油污的过滤器砂滤料的清洗剂TS— 1 98。,它既能去除油污 ,又能对砂滤料上所吸附的石墨具有剥离作用。试验表明 ,TS— 1 98对于附着在砂滤料上的石墨及油污清洗效果 ,其综合性能超过美国DREW公司清洗剂D— 2 6。 展开更多
关键词 砂滤料 清洗剂 粘附 反洗 TS-198 水处理 过滤器
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截短型BAP31/GST基因重组质粒的构建及融合蛋白的表达、纯化和鉴定
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作者 李海涛 宋朝君 +7 位作者 孙元杰 魏玉英 李永明 刘飞 刘志佳 张葵 金伯泉 杨琨 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期1-4,共4页
目的构建编码截短型肿瘤抗原BAP31(△BAP31)与GST融合基因的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并对融合蛋白(△BAP31/GST)进行纯化和初步鉴定。方法 PCR扩增编码△BAP31的基因片段,上下游分别引入EcoR I及Xho I酶切位点,亚克隆至含有GST标... 目的构建编码截短型肿瘤抗原BAP31(△BAP31)与GST融合基因的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并对融合蛋白(△BAP31/GST)进行纯化和初步鉴定。方法 PCR扩增编码△BAP31的基因片段,上下游分别引入EcoR I及Xho I酶切位点,亚克隆至含有GST标签的原核表达载体pGEX4T-1中,构建重组表达载体pGEX4T1-△BAP31,将该载体转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达△BAP31/GST,用GST亲和层析分离纯化原核表达的△BAP31/GST,表达产物分别用SDS-PAGE和West-ern blot进行鉴定。结果重组质粒经限制性内切酶EcoR I和Xho I双酶切鉴定和IPTG诱导表达△BAP31/GST的SDS-PAGE分析表明,表达产物的相对分子质量为40 000,与理论值相符,并主要以可溶性蛋白形式存在;经过对融合蛋白表达条件的优化,在IPTG浓度为1 mmol/L,诱导6 h目的蛋白表达量最高;灰度扫描分析发现,融合蛋白表达量占菌体蛋白总量的70.6%,纯化产物的纯度最高可达94.5%,Western blot证实该△BAP31/GST可与抗GST单克隆抗体(mAb)发生特异性结合反应,分子量为△BAP31与GST分子量之和,提示为融合蛋白。结论成功构建了编码△BAP31基因原核表达载体pGEX4T1-△BAP31,利用大肠杆菌表达系统和GST亲和层析,获得了较高纯度的△BAP31/GST融合蛋白,为进一步研究肿瘤抗原BAP31的功能及开发以BAP31作为靶点的肿瘤疫苗提供了试验基础。 展开更多
关键词 截短型BAP31(△BAP31) GST 融合蛋白 蛋白表达 纯化
原文传递
VEGFR2 D3.4/GST融合蛋白在大肠杆菌的表达、纯化及鉴定
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作者 魏玉英 宋朝君 +4 位作者 孙元杰 龚玖瑜 金伯泉 杨安钢 杨琨 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期870-872,874,共4页
目的:构建人血管内皮细胞生长因子II型受体(VEGFR2)胞膜外区第三及第四个免疫球蛋白样结构域与GST融合蛋白VEGFR2 D3.4/GST基因的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化该融合蛋白。方法:由公司合成VEG-FR2胞膜外区第三、第四免疫球蛋白... 目的:构建人血管内皮细胞生长因子II型受体(VEGFR2)胞膜外区第三及第四个免疫球蛋白样结构域与GST融合蛋白VEGFR2 D3.4/GST基因的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化该融合蛋白。方法:由公司合成VEG-FR2胞膜外区第三、第四免疫球蛋白样结构域氨基酸的编码序列,克隆入原核表达载体pGEX-4T1中GST标签的下游,构建重组表达载体pGEX4T-VEGFR2 D3.4,将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达VEGFR2 D3.4/GST融合蛋白,经不同浓度尿素洗脱纯化后,表达产物用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果:SDS-PAGE分析表明,表达产物的相对分子质量(Mr)为46 000,与理论值相符,主要以包含体形式存在;灰度扫描分析融合蛋白的表达量占菌体蛋白总量的38.6%,纯化产物纯度最高为87.1%,Western blot证实该蛋白为VEGFR2 D3.4/GST融合蛋白。结论:利用大肠杆菌表达系统,获得了较高纯度的包含体形式VEGFR2 D3.4/GST融合蛋白。 展开更多
关键词 VEGFR2 GST 融合蛋白 原核表达 纯化
原文传递
粮食企业应多渠道筹措资金归还简易建仓贷款
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作者 孙元杰 《武汉金融》 北大核心 2003年第11期55-55,共1页
关键词 粮食企业 筹资渠道 中国 还贷资金 财政补贴
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