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马铃薯晚疫病菌RxLR效应因子RD24基因克隆及其PVX表达载体构建与鉴定 被引量:1
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作者 孙少慧 张静华 +6 位作者 杨帅 高云飞 闵凡祥 马纪 吕典秋 金光辉 王晓丹 《中国农学通报》 2019年第5期144-149,共6页
马铃薯晚疫病病原菌致病疫霉菌(Phytophthora infestans)在侵入寄主细胞的同时分泌效应因子(Effector),该类蛋白在晚疫病致病过程中发挥着关键作用,是抑制植物免疫的重要因素。PITG_RD24是马铃薯晚疫病菌位于细胞核核的一个重要效应因... 马铃薯晚疫病病原菌致病疫霉菌(Phytophthora infestans)在侵入寄主细胞的同时分泌效应因子(Effector),该类蛋白在晚疫病致病过程中发挥着关键作用,是抑制植物免疫的重要因素。PITG_RD24是马铃薯晚疫病菌位于细胞核核的一个重要效应因子。为了快速鉴定效应因子RD24在马铃薯中瞬时表达的状况及抗性情况,构建效应子RD24的PVX表达载体是十分必要的。本研究利用PCR、酶切、分子克隆等生物学技术,将RD24片段连接插入至PVX (pGR106)载体中,然后用热击法将连接产物转化至大肠杆菌DH10B感受态细胞中。通过PCR筛选、质粒提取、测序比对,结果表明成功获得含有目的表达载体pGR106·RD24的质粒,可为下一步筛选马铃薯广谱抗病基因研究提供必备载体。 展开更多
关键词 载体构建 基因克隆 效应因子 植物病毒表达载体
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行距对马铃薯农艺性状及产量的影响 被引量:5
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作者 高幼华 金光辉 +3 位作者 刘喜才 尤晗 李雅南 孙少慧 《黑龙江八一农垦大学学报》 2016年第5期14-18,共5页
试验采用随机区组试验设计,大垄双行,整薯播种。在同一密度下对不同行距间的各指标进行比较及单因素方差分析。旨在为马铃薯生产和机械化作业提供理论依据。结果表明:在12株·m^(-2)和9株·m^(-2)的种植密度下,主茎数、结薯数... 试验采用随机区组试验设计,大垄双行,整薯播种。在同一密度下对不同行距间的各指标进行比较及单因素方差分析。旨在为马铃薯生产和机械化作业提供理论依据。结果表明:在12株·m^(-2)和9株·m^(-2)的种植密度下,主茎数、结薯数、产量都是随行距的增加而呈现递减的变化趋势;在7.2株·m^(-2)的种植密度下,主茎数、结薯数、产量是随行距的增加而呈现"增-减-增"的变化趋势;同一密度下,淀粉含量随行距增加变化不明显,大部分维持在15%~16%之间。总体来看,同一密度下不同行距间对主茎数、结薯数、产量及淀粉含量的影响均差异不显著。 展开更多
关键词 马铃薯 行距 农艺性状 产量
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融资模式内在效率分析与我国融资效率的选择
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作者 张峰 孙少慧 《山东煤炭科技》 2007年第B06期184-184,186,共2页
从保持距离型融资模式与关系型融资模式的内在效率分析,两者都具有经济合理性;从世界融资模式的发展趋势来看,两者有相互融合的趋势;由于我国的特殊情况,现阶段企业的融资应采取过渡模式,即间接融资为主并逐渐减少,直接融资为辅... 从保持距离型融资模式与关系型融资模式的内在效率分析,两者都具有经济合理性;从世界融资模式的发展趋势来看,两者有相互融合的趋势;由于我国的特殊情况,现阶段企业的融资应采取过渡模式,即间接融资为主并逐渐减少,直接融资为辅并大力发展的过渡模式;目标模式应符合世界融资模式的趋势,是融两种融资方式于一体的有中国特色的融资模式。 展开更多
关键词 融资模式 影响因素 风险分析
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水分胁迫及复水对不同耐旱性玉米生理特性的影响 被引量:36
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作者 刘承 李佐同 +15 位作者 杨克军 徐晶宇 王玉凤 赵长江 张翼飞 李竹 孙少慧 富士江 赵莹 谷英楠 付健 方永江 刘瑀 张发明 马丽峰 石新新 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期702-708,共7页
以抗旱性强的‘郑单958’和抗旱性弱的‘吉单522’为材料,采用聚乙二醇(PEG-6000)模拟水分胁迫方法,研究了水分胁迫及复水对不同抗性玉米苗期相关生理特性的影响。结果表明,在水分胁迫及复水条件下,‘郑单958’和‘吉单522’的叶片净光... 以抗旱性强的‘郑单958’和抗旱性弱的‘吉单522’为材料,采用聚乙二醇(PEG-6000)模拟水分胁迫方法,研究了水分胁迫及复水对不同抗性玉米苗期相关生理特性的影响。结果表明,在水分胁迫及复水条件下,‘郑单958’和‘吉单522’的叶片净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)、胞间CO2浓度(Ci)、叶绿素含量和相对含水量(RW C)均呈先下降后上升趋势,除‘吉单522’的Ci和叶绿素含量分别在胁迫后2 d和复水后1 d达到最低值外,其余各指标均在胁迫后3 d达到最低值,且‘吉单522’下降幅度更大,复水后恢复缓慢,但是在胁迫过程中‘郑单958’和‘吉单522’的RWC差异不显著。相对电导率,丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性,可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸含量在水分胁迫及复水条件下呈先升高后下降趋势,并在胁迫后3 d达到最大值,其中‘吉单522’的相对电导率和MDA含量上升幅度大于‘郑单958’,其余各指标‘郑单958’的增加幅度均高于‘吉单522’。‘郑单958’在水分胁迫时受到的伤害程度要小于‘吉单522’,在复水过程中‘郑单958’具有良好的恢复能力。 展开更多
关键词 玉米 水分胁迫 复水 生理特性
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俄罗斯马铃薯种质资源遗传多样性的SSR分析 被引量:7
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作者 吴立萍 吕典秋 +4 位作者 姜丽丽 孙少慧 闵凡祥 金光辉 魏琪 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期4047-4053,共7页
俄罗斯马铃薯种质资源具有综合抗性强的特点。尤其适合东北三省及内蒙古东部地区种植。为了丰富中国马铃薯品种改良的基因资源,本试验选取54份俄罗斯血缘的马铃薯品种,利用SSR分子标记技术对其遗传多样性进行分析,从DNA分子水平上明确... 俄罗斯马铃薯种质资源具有综合抗性强的特点。尤其适合东北三省及内蒙古东部地区种植。为了丰富中国马铃薯品种改良的基因资源,本试验选取54份俄罗斯血缘的马铃薯品种,利用SSR分子标记技术对其遗传多样性进行分析,从DNA分子水平上明确各品种间的遗传差异。本试验从50对SSR引物中筛选出14对多态性好,目的条带清晰的引物,对供试的54份品种进行PCR扩增,共扩增出229个多态性条带,多态性条带百分率到达92.7%。扩增片段在100~1 500 bp。其中引物STM0030可以将供试的54个品种全部区分开。遗传相似性系数的变幅为0.52~0.99,平均为0.68。经聚类分析,在遗传相似性系数0.756处,将供试品种分为10类,从分子水平上揭示了各供试品种间的亲缘关系。 展开更多
关键词 俄罗斯 马铃薯 SSR标记 遗传多样性 聚类分析
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不同钾水平对油炸型马铃薯产量和品质的影响 被引量:7
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作者 姜丽丽 孙少慧 +1 位作者 张桂芝 金光辉 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第17期5860-5866,共7页
为明确施钾对油炸型马铃薯产量和品质的影响,本研究以油炸型马铃薯品种抗疫白为供试材料,设计5个施钾水平(0, 60 kg/hm^2, 120 kg/hm^2, 240 kg/hm^2, 360 kg/hm^2),在2016年和2017年进行田间试验。结果表明:随着施钾量的增加,抗疫白产... 为明确施钾对油炸型马铃薯产量和品质的影响,本研究以油炸型马铃薯品种抗疫白为供试材料,设计5个施钾水平(0, 60 kg/hm^2, 120 kg/hm^2, 240 kg/hm^2, 360 kg/hm^2),在2016年和2017年进行田间试验。结果表明:随着施钾量的增加,抗疫白产量及有效产量呈现先增加后降低的趋势,低钾对抗疫白增产不显著。当施钾量为240 kg/hm^2时,抗疫白产量最高,施钾量与马铃薯产量的关系用二次函数拟合效果良好;当施钾量为201.5g/hm^2时,抗疫白达到理论产量最大值4.491×10~4kg/hm^2。干物质含量、还原糖含量、蔗糖含量和炸条颜色指数均为油炸型马铃薯品质的重要指标。当施钾120 kg/hm^2时,干物质含量最高,与其它钾处理差异显著;当施钾量为240 kg/hm^2时,还原糖含量、蔗糖含量、炸条颜色指数均达到最低。施钾量与各项品质指标二次函数拟合效果均良好。综合以上结果,当施钾量为240 kg/hm^2时,抗疫白可达到增产提质的效果。本研究旨为马铃薯钾肥的合理施用提供参考依据。 展开更多
关键词 油炸型 马铃薯(Solanum tuberosum) 钾水平 产量 品质
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黑龙江省马铃薯叶斑类病害Alternaria属病原组成和分布 被引量:5
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作者 李雅南 Sayed Rashad Ali Shah +8 位作者 孙少慧 白艳菊 吕典秋 姜丽丽 闵凡祥 高云飞 马纪 王晓丹 金光辉 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期1077-1083,共7页
生产上常见的马铃薯叶斑类病害主要包括马铃薯早疫病、黑点病和黑斑病等,均导致马铃薯植株叶片枯死、严重时侵染块茎,造成减产。马铃薯早疫病、黑点病和黑斑病的病原分别为茄链格孢菌(Alternaria solani)、链格孢菌(Alternaria alterna... 生产上常见的马铃薯叶斑类病害主要包括马铃薯早疫病、黑点病和黑斑病等,均导致马铃薯植株叶片枯死、严重时侵染块茎,造成减产。马铃薯早疫病、黑点病和黑斑病的病原分别为茄链格孢菌(Alternaria solani)、链格孢菌(Alternaria alternata)和细极链格孢菌(Alternaria tenuissima),是Alternaria属的三个不同种。本研究旨在针对Alternaria属这三个病原建立一套PCR快速分子鉴定技术,同时结合传统生物学鉴定方法,调查分析黑龙江省马铃薯叶斑类病害Alternaria属病原的小种组成和发生分布情况。结果表明:利用通用引物H3-1a/H3-1b对感染Alternaria病原菌的马铃薯植株病样进行PCR扩增,在489 bp、440 bp和546 bp处出现条带,经测序比对分析,三处目的条带分别鉴定为茄链格孢菌(Alternaria solani)、链格孢菌(Alternaria alternata)和细极链格孢菌(Alternaria tenuissima)。对2015年采集自黑龙江省马铃薯主产区的55个植株叶斑类病样进行生物学和PCR鉴定,结果显示大部分病样为Alternaria属多个小种混合侵染,主要是A.tenuissima、A.alternata和A.solani,这三种病原所占被测病样总数百分比分别为71%、45%和33%,A.tenuissima为优势小种。本研究结果将为准确检测马铃薯植株叶斑类病原菌提供技术支持,为生产上有的放矢防控马铃薯叶斑类病害提供帮助。 展开更多
关键词 马铃薯叶斑类病害 Alternaria属 PCR鉴定
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多抗马铃薯病毒及类病毒的amiRNA双元表达载体的构建及遗传转化
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作者 牟芮 刘尚武 +7 位作者 姜丽丽 万书明 王绍鹏 孙少慧 李雅南 吴立萍 金光辉 吕典秋 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期1320-1326,共7页
马铃薯病毒及类病毒病害严重影响了中国马铃薯的生产。为了培育抗病毒及类病毒的马铃薯新材料,本研究采用人工miRNA(artificial microRNA,amiRNA)策略,以马铃薯X病毒(potato virus X,PVX)与马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)编码沉默抑制... 马铃薯病毒及类病毒病害严重影响了中国马铃薯的生产。为了培育抗病毒及类病毒的马铃薯新材料,本研究采用人工miRNA(artificial microRNA,amiRNA)策略,以马铃薯X病毒(potato virus X,PVX)与马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)编码沉默抑制子P25蛋白和HC-pro蛋白的基因为靶标,利用5'RACE技术对P25基因、HC-Pro基因潜在的剪切热点进行预测。再采用overlapping PCR技术,以拟南芥mi R159a前体为骨架,设计特异性引物,构建分别靶向P25和HC-Pro基因的amiRNA表达载体。同时构建靶向马铃薯内源基因Virp1的amiRNA表达载体,将构建完成的三个amiRNA表达载体串联获得amiRNAs三联体,分别转入根癌农杆菌菌株EHA105,并用农杆菌介导法转化马铃薯品种克新13。经PCR鉴定,结果表明,目的基因片段已成功转入马铃薯中。 展开更多
关键词 马铃薯 基因沉默 联合多抗 马铃薯病毒 amiRNA 遗传转化
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